uv[2]

1



Emisión y transmisión de energía a través del espacio, en forma de partículas u ondas.



Tiene efectos sobre las células dependiendo: Longitud de onda Intensidad Duración



Hay

dos tipos de radiación  Ionizantes (Rayos X, Rayos K y Rayos catódicos)  No ionizantes Luz ultravioleta

2



Longitud

de onda esta comprendida entre los 100400 nm.



Es producida por los rayos solares y produce varios efectos en la salud.



La

luz ultravioleta no posee un gran poder de penetración lo que limita su uso como desinfectante o germicida.

3





Producen

mutaciones y alteraciones letales en los ácidos nucleídos. Los productos más importantes de la acción de la luz UV son dímeros: Á Timina ± Timina Á Timina  Citosina Á Citosina  Citosina que se forman entre pirimidinas

4

 

os dímeros impiden la replicación y la transcripción. Estas alteraciones del DNA resultan letales a menos de que sean reparadas. L

  

Fotorreactivación Reparación por Escisión Mecanismo SOS 5

Empieza por una enzima llamada fotoreacctivante

Reconoce a los dímeros formados por la luz UV

Utiliza la luz visible

Y finalmente una DNA ligasa sella la molécula de DNA

ctúa una DNApol colocando las nuevas bases

A

Rompe los enlaces que unían a las 2 pirimidinas

6

7

articipa una endonucleasa/exonucl easa de reparación P

elimina las bases dañadas junto con algunas bases localizadas a los lados.

Deja un hueco que se llenan con los nucleótidos correctos

Una DNA ligasa los une.

or la DNA pol I

P

8

9

Se activa con respuesta al daño causado al DNA

sí el daño al DNA es reparado dando lugar a mutagénesis.

Inician diversos procesos de reparación

2. se activan los genes de reparación de proteínas uvrA y uvrB

Se realiza sin instrucción de una matriz por lo que provoca errores

1. la RecA proteasa inactiva la proteína LexA q reprime al sistema SOS

A

Una vez q el daño a sido reparado el sistema SOS es desconectado

10

11

12

1. Marcar cada una de las 13 placas de gelosa gelatina de la siguiente manera: SERIE

A

:

SERIE B:

15 segundos

15 segundos

30 segundos

30 segundos

45 segundos

45 segundos

60 segundos

60 segundos

TESTIGO.

90 segundos 120 segundos 210 segundos 300 segundos

13

14

2. Sembrar masivamente Serratia marcesens con un hisopo estéril sobre la superficie de cada una de las placas. 3. Irradiar las placas con LUV a los tiempos indicados.

15

4. Proteger de la luz la serie después de irradiadas.

A

de las placas

5. Incubar la serie A a 28ºC de 24 a 48 hrs. E incubar la serie B en iluminación de 24 a 48 hrs. a 28ºC. Observar la serie cualitativa las colonias presentes en la placa, y buscar las colonias de bacterias mutantes (rosas o blancas). 6. Agregar a cada mutante cloruro de mercurio para observar si presentan actividad proteolítica

16

Serratia marcescens.

Características.

igmento rojo que es fácilmente identificab le cuando crece en un medio sin sangre. P

ctividad roteolític

A

17

Serratia marcescens.

Características

(colonias mutantes) Colonias de color rosa o blanco. Puede

presentar o no actividad proteolítica.

18

19

Tiempo (seg)

o. de Colonias apigmentadas

N

Serie

N

Serie B

A

o. De colonias apigmentadas con actividad proteolítica modificada Serie

Serie B

A

1

2

3

4

1

2

3

4

1

2

3

4

1

2

3

4

0

































15







10



3



5







7



1





30





5

1

2

2

8









2



1

2



45





3

1

8



1









1

1



1



60





4















2

1









90





4







1



120

1















210



2

2





1

2



300

















Tiemp o (seg)

N

o. de Colonias apigmentadas

Serie 5

6

Serie B

A

7

o. De colonias apigmentadas con actividad proteolítica modificada

N

8

5

6

7

Serie 8

5

6

7

Serie B

A

8

5

6

7

8

0

















15



34



12



20



4

30

















45

1

2

1

1



1

1

6

60

1

4

1

1



3

1



90

1



1



120

1



1



210

1







300

2







22

2.

note si aparecieron colonias y cúantas de Escherichia coli en las zonas de las cajas de Szybalski con mayor concentración de antibiótico. A

3. De las colonias seleccionadas resistentes a penicilina, ¿ cúantas fueron resistentes a estreptomicina? 4. De las colonias seleccionadas resistentes a estreptomicina, ¿ cúantas fueron resistentes a penicilina?

23

5.¿Podría considerarse la pérdida de pigmento y de la actividad proteolítica como consecuencia de una mutación? Explique. R= Claro, por que al alterarse la molécula de DNA puede modificas los genes que controlan estas características de la bacteria 6.Comparar los resultados obtenidos en las cajas que fueron incubadas en la obscuridad con los que se obtuvieron en las incubadas sin protección de la luz visible y discutir si se presentó o no el efecto fotorreactivante. R= No se presento tal efecto ya que el numero de colonias y la actividad

24

7. Explique el mecanismo por el cual los dímeros de timina conducen a la producción de mutantes y a la muerte del microorganismo. R= Cando se forman dímeros de timina se distorsiona la forma de la cadena de DNA, en la replicación se puede insertar bases incorrectas dentro de una nueva cadena y se produce mutación. Si esto ocurre sobre una síntesis de una proteína vital la célula muere. 8.¿Qué tipo de mutaciones generan las radiaciones UV? R= Formación de dímeros de pirimidinas que

25

9. Explique en que consiste el sistema SOS de reparación genética. R= Se activa a una respuesta al daño hecho al DNA iniciando diversos procesos de reparación. No obstante el sistema SOS se realiza sin la instrucción de una matriz, lo cual provoca muchos errores y por tanto muchas mutaciones.

26



Thomas D. Brock. Microbiología. Sexta edicion. Pretince Hall Hispanoamericana S.A. Impreso en Mèxico. Pp: 257.



Bernard D. Davis. Tratado de microbiologia. Segunda edicion. Salvat Editores. Impreso en España. Pp: 248251 27