Universidad Del Valle Tincion Gram

 

UNIVERSIDAD DEL VALLE

NOTA

ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA # 5

TEMA: Tinción GRAM DOCENTE: ANGELA CHACON DIAMANTINO ESTUDIANTE: MENDOZA PEREZ PAULETTE FECHA DE ENTREGA: 14/03/2022

 

1. OBJ OBJETI ETIVOS VOS:: I.

OBJETIV IVO O GENERAL

Realizar de manera adecuadamente el proceso de la tinción GRAM e identifcar las bacterias GRAM positivas y GRAM negativas II. II.

OB OBJE JETI TIVO VOS S ES ESPE PEC CIFIC IFICO OS

 

Realizar el manejo correcto del microscopio microscopio para la observación de las bacterias Dierencias las estructuras de las bacterias

2. MAR MARCO CO TEO TEORIC RICO O

La tinción de Gram es una prueba que detecta bacterias en el lugar donde se sospecha una inección, como la garganta, los pulmones, los genitales o las lesiones en la piel. Las tinciones de Gram también se pueden usar para detectar bacterias en ciertos uidos corporales, como la sangre o la orina. Fue desarrollada por el científco danés Hans Christian Gram en 1884; hoyy en día, ho día, sigu siguee sien siendo do una de la lass tinc tincio ione ness más más ut utililiz izad adas as universalmente debido a lo económico, sencillo y efcaz que resulta. En microbiología clínica resulta de gran utilidad, ya que a partir de muestras clínicas directas provenientes de sitios estériles se puede saber de manera rápida las características de la muestra y hacer una dierencia de los potenciales microorganismos causantes de una inección. Los principios principios de la tinción de Gram están basados en las características de la pared celular de las bacterias, la cual le confere propiedades determinantes a cada microorganismo. microorganismo. La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por una capa fna de peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano. peptidoglicano. I.

Dif Difere erencia ncia en la est estruc ructur tura a de b bact acteri erias as G Gram ram posi posiva vass fr frent ente ea Gram negavas:

Las dos características clave que conducen a las dierentes propiedades de visualización de las especies Gram positivas y Gram negativas son el grosor de la capa de peptidoglicano y la presencia o ausencia de la membrana lipídica externa. Esto se

 

debe a que la estructu estructura ra de la pared aecta la capacidad capacidad de la célula para retener la tinción cristal violeta utilizada en el proced ocediimi mien entto de ti tinc nciión de Gram ram, que luego ego pued edee visualizarse visualizar se con un microscopio óptico. Lass bact La bacter eria iass Gram Gram po posi siti tiva vass tien tienen en una una ca capa pa gr grue uesa sa de peptidoglicano y no tienen una membrana lipídica externa, mientras que las bacterias Gram negativas tienen una capa delgada de peptidoglicano y tienen una membrana lipídica externa. Como las bacterias Gram positivas carecen de una membrana lipí lipídi dica ca exte extern rna, a, cuan cuando do se re refe fere ren n corr correc ecta tame ment ntee a su estru struct ctuura en lugar ugar de las pro ropi pied edaades de tinc tinciión ón,, se denominan monodermos. La membrana lipídica externa que poseen las bacterias Gram negativas signifca que, cuando se hace reerencia a su estructura ísica, ísica, se denominan didermas. Las inecc ineccio iones nes Gram Gram posit positiv ivas as inc incluy luyen en el Staphy Staphyloc lococc occus us aureus resistente a la meticilina (SARM), las inecciones por estreptococos y el shock tóxico Las inecciones Gram negativas incluyen salmonela, neumonía, inecciones del tracto urinario y gonorrea El proesional de la salud necesita tomar una muestra del lugar donde se sospecha que hay una inección o de ciertos uidos corporales. Esto depende del tipo de inección. Los tipos más comunes de tinción de Gram se enumeran a continuació continuación. n. 



Muestra de una herida: El proesional de la salud usa un hisopo especial para tomar una muestra del lugar de la herida Análisis de sangre: El proesional de la salud toma una muestra de sangre de una vena de un brazo Análisis de orina: Usted entrega una muestra de orina estéril en un recipiente siguiendo las instrucciones instrucciones de su proesional de la salud Cultivo de garganta: El proesional de la salud inserta un hisopo especial en la boca para obtener una muestra de la parte trasera de la garganta y las amígdalas

 

Cultivo de esputo: El esputo es la mucosidad espesa que se expulsa de los pulmones al toser. Es dierente de un escupitajo o de la saliva. El médico le pedirá que tosa el esputo en una taza especial, o puede usar un hisopo especial para tomar una muestra de la nariz 3. MA MATE TERI RIAL ALES ES:: MATERIALES

PORTAOBJETOS MECHERO BUNSEN COLORANTES DE GRAM VARILLAS DE TINCIÓN HISOPOS ESTÉRILES BAJALENGUAS ACEITE DE INMERSIÓN ENCENDEDOR 4. EQ EQUI UIPO POS: S: EQUIPOS

Equipo de colorantes para tinción de bacilos Gram +/Incluye: Saranina, Yodo Gram, Violeta de Genciana y Alcohol acetona MICROSCOPIO

5. PRO PROCED CEDIMI IMIENTO ENTO::

Preparación de un rotis bacteriano 1. Lavar Lavar bien bien el el port portaso asobj bjeto etos. s. 2. Con el hisopo hisopo esteriliz esterilizado ado y baja lenguas, lenguas, sacar sacar nuestra nuestra muestra muestra (hicimos muestra aríngea) 3. Después Después el isoto isotopo po ya con con la muestra muestra lo coloc colocamos amos en en el portaobjetos.

 

4. Fijación d dee las bacterias bacterias al vidrio portaobjetos portaobjetos por calor. Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enriar el portaobjetos entre los pases. Pasos de la Tinción Gram 1. Teñir con cristal violeta (1 minuto) 2. Lavar con abundante agua el exceso de colorante. 3. Cubrir con Lugol o solución de yodo (1 minuto) 4. Lavar con agua el exceso de Lugol. 5. Decolorar con alcohol-acetona hasta que la preparación deje de perder color (unos 30 segundos). 6. Lavar con abundante agua para eliminar el resto del disolvente. 7. Teñir con saranina (1 minuto) 8. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste. 9. Secar la preparación. 10. Examinar al microscopio. microscopio. 6. RES RESULT ULTADO ADOS S 7. CON CONCLU CLUSIO SIONES NES 8. BIB BIBLIO LIOGRAF GRAFIA IA

Bibliografía anonimo. (4 de octubre de 2013). medigraphic. Obtenido de medigraphic: fle:///C:/Users/Core %20i3/Downloads/ir141b.pd  Medicina, B. N. (16 de noviembre de 2021). medlineplus. Obtenido de medlineplus: hps://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/ncion-de-gram/ PhD, K. S. (21 de agosto de 2019). Obtenido de hps://www.news-courier.com/immunology/arcles/gram-posive-vs-gram-negave323007