Test de Tiroglobulina

Thyroglobulin

For use on IMMULITE® 2000 systems

IMMULITE 2000 Thyroglobulin ®

English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers — for the quantitative measurement of thyroglobulin in serum or heparinized plasma, as an aid in monitoring patients who have undergone thyroidectomy. Catalog Number: L2KTY2 (200 tests) Test Code: TG Color: Dark Gray The presence of autoantibodies against thyroglobulin (anti-TG) can interfere with the determination of thyroglobulin in serum. Anti-TG antibodies can be quantitated by using the IMMULITE 2000 Anti-TG Ab kit (L2KTG). When monitoring patients over time, TG values obtained with different methods cannot be used interchangeably due to the differences in methods and reagent specificity. The laboratory should provide the physician with the method identity along with the result. Serial serum TG measurements should be made with the same method.

Summary and Explanation Thyroglobulin (TG) is a heterogeneous iodoglycoprotein which has a molecular mass of approximately 660,000 daltons. Thyroglobulin is normally synthesized in the follicular cells of the thyroid gland, under the influence of thyrotropin, and represents the precursor to thyroxine and 2,12 the other iodothyronines. The expected upper limit of normal for circulating thyroglobulin is approximately 40 to 60 ng/mL, with a median of 5 to 5,11 10 ng/mL. Somewhat higher values are 7,10 and during encountered in newborns the third trimester of pregnancy. Thyroglobulin levels also tend to be elevated in regions of endemic goiter. The major clinical applications for measurement of this prohormone derive 2

from the fact that functioning thyroid tissue appears to be the only source of circulating thyroglobulin. Accordingly, thyroglobulin determinations have been widely used to complement radioiodine scanning and other techniques (such as ultrasound or immunohistochemical staining) as an aid in identifying the presence or absence of functioning thyroid tissue, or an increase in such tissue relative to an individually established baseline. The differential diagnosis of congenital hypothyroidism is a wellestablished context of use for this application of serum thyroglobulin measurement. Congenital Hypothyroidism: Thyroglobulin determinations have been used, sometimes in conjunction with ultrasound and radioiodine scanning, to help clarify the type of thyroid defect in previously diagnosed congenital 3,4,6,7,10,13 Very low or hypothyroidism. undetectable thyroglobulin levels are expected in infants born without thyroid tissue (thyroid agenesis), whereas higher, but widely varying levels are generally encountered in infants with hypoplastic thyroid glands, ectopic thyroid tissue, dyshormonogenic goiter, congenital TBG deficiency or transient hypothyroidism. Other Applications: Thyroglobulin measurements may also be of value in helping to distinguish subacute thyroiditis from thyrotoxicosis caused by covert administration of thyroid hormones. In the latter event, low levels of thyroglobulin are expected due to thyroid hormone 11 suppression of thyrotropin.

Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Thyroglobulin is a solidphase, chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 × 60 minutes.

Specimen Collection EDTA: Should not be used as an anticoagulant. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples.

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Thyroglobulin has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 50 µL serum or heparinized plasma. Storage: 3 days at 2–8°C or 2 months at –20°C.

Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of in accordance with applicable laws.

Thyroglobulin Bead Pack (L2TY12) With barcode. 200 beads, coated with anti-ligand. Stable at 2–8°C until expiration date. L2KTY2: 1 pack Thyroglobulin Reagent Wedge (L2TYA2) With barcode. 11.5 mL of ligand-labeled anti-thyroglobulin murine monoclonal antibody and alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to sheep polyclonal anti-thyroglobulin antibody in buffer, with preservative. Stable at 2–8°C until expiration date. L2KTY2: 1 wedge. Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Thyroglobulin Adjustors (LTYL, LTYH) Two vials (Low and High) of lyophilized thyroglobulin in a nonhuman serum matrix, with preservative. At least 30 minutes before use: Reconstitute each vial with 4.0 mL distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Aliquot and freeze. Stable at –20°C for 2 months after reconstitution. L2KTY2: 1 set.

Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C.

Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader.

Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dL, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing.

Thyroglobulin Sample Diluent (L2TYZ): For the on-board dilution of high samples. 25 mL of concentrated (ready-to-use) thyroglobulin-free nonhuman serum matrix. Storage: 30 days (after opening) at 2–8°C or 6 months (aliquotted) at –20°C.

Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.)

Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 × 100 mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2TYZ: 3 labels

Water: Use distilled or deionized water.

Materials Supplied Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Kit Components Supplied Separately

L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit 3

LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 × 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps LTYCM: Tri-level, nonhuman serumbased control module. Also required Sample transfer pipets, distilled or deionized water, controls.

Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks. Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of thyroglobulin.

Expected Values One hundred and ten serum samples from apparently healthy subjects were tested using the IMMULITE 2000 Thyroglobulin procedure. The results ranged from 0.73 to 84 ng/mL, with a median of 11 ng/mL and a 2.5th and 97.5th percentiles of 1.6 and 59.9 ng/mL, respectively. Thirty serum samples from patients with Hashimoto's disease were tested using IMMULITE 2000 Thyroglobulin. The thyroglobulin values ranged from nondetectable to >300 ng/mL. Five of the 30 samples (17%) showed thyroglobulin levels greater than 55 ng/mL. Another 30 serum samples from patients with Graves' disease were tested using IMMULITE 2000 Thyroglobulin. The thyroglobulin values ranged from nondetectable to >300 ng/mL. Three of the 30 samples (10%) manifested thyroglobulin levels greater than 55 ng/mL. In patients who have undergone thyroidectomy, thyroglobulin concentrations should theoretically approach zero or approximate the sensitivity of the thyroglobulins assay. Any 4

increase in the thyroglobulin level of such patients should be further interpreted in conjunction with other available diagnostic test results and the patient's clinical presentation. Based on the studies of healthy subjects, the IMMULITE 2000 Thyroglobulin's cutoff was determined to be 55 ng/mL. Specimens with thyroglobulin levels greater than 55 ng/mL are considered elevated and require further testing regarding the thyroid status of the patient. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges.

Limitations Because thyroglobulin autoantibodies (TgAb) can interfere with both competitive immunoassays and immunometric assays for thyroglobulin, all patients should be screened for TgAb by a sensitive immunoassay: recovery studies are not adequate for ruling out interference by 14-16 If the laboratory chooses to TgAb. report thyroglobulin results in TgAbpositive sera, each report should include a warning to the physician to interpret the thyroglobulin result with caution, as the presence of TgAb may cause underestimation of the thyroglobulin level 15 as measured by immunometric assays. Thyroglobulin antibodies (TgAb) are present in the majority of patients with Hashimoto's thyroiditis, but also in 5 approximately 5% of healthy individuals. At least 6 weeks should elapse after 131 11 thyroidectomy or I treatment. Some reports have indicated that thyroglobulin levels may remain elevated for several months following successful treatment. In this case, serial determinations assessed relative to a post-treatment baseline established for the patient may still be of value in monitoring. It is important to obtain thyroglobulin 131 measurements before administering I for scanning, since the scan may result in the release of large amounts of thyroglobulin from even a very small number of cells. Likewise, samples for thyroglobulin assay should not be collected prematurely following procedures such as needle biopsy that are likely to cause a transient elevation in the 11 thyroglobulin level. IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Although thyroglobulin measurements are of established value in the differential diagnosis of congenital hypothyroidism, they are not recommended for use in screening for this condition since a wide spectrum of thyroglobulin levels are obtained for this condition. EDTA Plasma has an effect on the measurement of thyroglobulin in the procedure. Immunologically inactive thyroglobulin may not be determined by this assay. In patients receiving thyroid suppression therapy, thyroglobulin may not be reliably detected. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:2733.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings.

Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/mL. Conversion Factor: ng/mL × 1.515 → pmol/L (CRM 457; Molecular mass 660 kDa) Calibration Range: Up to 300 ng/mL (455 pmol/L) Standardized against Certified Reference Material for human thyroglobulin (CRM 457) in terms of the Community Bureau of Reference of the European Commission. Analytical Sensitivity: 0.2 ng/mL (0.3 pmol/L) Functional Sensitivity: 0.9 ng/mL (1.4 pmol/L)

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

High-dose Hook Effect: None up to 500,000 ng/mL. Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See “Precision” table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three thyroglobulin solutions (380, 840 and 1,680 ng/mL) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/L has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of packed red blood cells in concentrations up to 30 µL/mL has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dL has no effect on results, within the precision of the assay. Specificity: The assay is specific for thyroglobulin, with no detectable crossreactivity to alpha-fetoprotein (AFP), FSH, TSH, diiodothyronine (T2), triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4). (See "Specificity" table.) Method Comparison: The assay was compared to a commercially available indirect solid phase enzyme immunometric assay for thyroglobulin (Kit A) on 150 samples from patients with Hashimoto's disease, Graves disease, patients who had undergone thyroidectomy, as well as euthyroid individuals. The thyroglobulin concentrations of these patients covered the entire calibration range of the assay. The data are tabulated in reference to the respective assays' suggested cutoffs. IMMULITE 2000 Thyroglobulin Kit A

Relative Relative >55 ng/mL ≤55 ng/mL Sensitivity Specificity

>50 ng/mL

10

0

≤50 ng/mL

10

130

100%

92.9%

Agreement: 93.3% 95% Confidence Limits for Relative Sensitivity and Specificity, respectively: 69.2% – 100% and 87.3% – 96.5%,

5

Clinical Performance: A clinical study at a university medical center in the midwestern United States included 56 thyroid disease patients (41 females and 15 males, with an age range from 20 to 72 years) who provided from 2 to 6 serial specimens in the course of their treatments that included partial, subtotal or total thyroidectomy, and other medical interventions. The results of this study showed that IMMULITE 2000 Thyroglobulin measurements were consistent with the thyroid disease conditions of these patients.

References 1) Bodlaender P, et al. Sensitive radioimmunological screening test for antithyroglobulin autoantibodies. Clin Chem 1978;24:272-4. 2) Cody V. Thyroglobulin and thyroid hormone synthesis. Endocr Res 1984;10:73-88. 3) Czernichow P, et al. Plasma thyroglobulin measurements help determine the type of thyroid defect in congenital hypothyroidism. J Clin Endocrinol Metab 1983;56242-5. 4) Dammacco F, et al. Serum thyroglobulin and thyroid ultrasound studies in infants with congenital hypothyroidism. J Pediat 1985;106:451-3. 5) Feldt-Rasmussen U. Serum thyroglobulin and thyroglobulin autoantibodies in thyroid diseases. Allergy 1983;38:369-87. 6) Gons MH, et al. Concentration of plasma thyroglobulin and urinary excretion of iodinated material in the diagnosis of thyroid disorders in congenital hypothyroidism. Acta Endocrinol 1983;104:27-34. 7) Ket JL, et al. Serum thyroglobulin levels: physiological decrease in infancy and the absence in athyroidism. J Clin Endocrinol Metab 1981;58:1301-3. 8) Lo Gerfo P, et al. Thyroglobulin in benign and malignant thyroid disease. JAMA 1979;241:923-5. 9) Pacini F, et al. Serum thyroglobulin in thyroid carcinoma and other thyroid disorders. J Endocrinol Invest 1980;3:283-92. 10) Pinchera A, et al. Recent studies on the application of serum thyroglobulin measurement in thyroid disease. In: Eggo M, Burrow GN, editors. Thyroglobulin – the prothyroid hormone. New York: Raven Press, 1985: 307-16. 11) Refetoff S, Lever EG. The value of serum thyroglobulin measurement in clinical practice. JAMA 1983;250:2352-57. 12) Van Herle AJ, Vassart G, Dumont JE. Control of thyroglobulin synthesis and secretion. N Engl J Med 1979;301:239-49 and 307-14. 13) Walfish PG. Thyroid function in pediatrics. In: Hicks J, Boeckx RL, editors. Pediatric clinical chemistry, Philadelphia: W.B. Saunders, 1984: 170-239. 14) Spencer CA, Wang C-C. Thyroglobulin measurement: techniques, clinical benefits, and pitfalls. Endocrinol Metab Clin North Am 1995;24:84163. 15) Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M. Current status and performance goals for 6

serum thyroglobulin assays. Clin Chem 1996;42:164-73. 16) Spencer CA. Recoveries cannot be used to authenticate thyroglobulin (Tg) measurements when sera contain Tg autoantibodies. Clin Chem 1996;42:661-3. 17) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998.

Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs Precision (ng/mL) Within-Run1 3

1

4

5

Total2

Mean

SD

CV

SD

10

0.48

4.8%

0.56 5.6%

CV

2

59

3.5

5.9%

3.6

3

13

0.82

6.3%

0.85 6.5%

6.1%

4

20

1.0

5.0%

2.0

10%

5

279

19

6.8%

20

7.2%

Česky. 1V rámci stanovení, 2Celkem, 3Střední hodnota, 4Směrodatná odchylka, 5Variační koeficient. Ελληνικά. 1Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3Μέσος όρος, 4SD, 5CV. Polski. 1W serii, 2Całość, 3Średnie, 4SD, 5CV.

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Linearity (ng/mL) Dilution 1

2

3

4

1

Recovery (ng/mL) 2

Observed Expected

5

3

4

Solution1

%O/E

16 in 16

63

—

—

8 in 16

31

32

97%

1

Observed2 Expected3 %O/E4

—

27

—

—

A

48

45

107%

4 in 16

15

16

94%

B

66

68

97%

2 in 16

7.3

7.9

92%

C

108

110

98%

1 in 16

3.7

3.9

95%

16 in 16

82

—

—

8 in 16

37

41

90%

B

69

70

99%

4 in 16

19

21

91%

C

109

112

97%

2 in 16

10

10

100%

1 in 16

4.7

5.1

92%

2

3

—

29

—

—

A

48

47

102%

—

121

—

—

A

133

134

99%

16 in 16

96

—

—

B

157

157

100%

8 in 16

44

48

92%

C

192

199

96%

4 in 16

21

24

88%

2 in 16

10

12

83%

1 in 16

5.1

6.0

16 in 16

140

8 in 16 4 in 16

4

—

180

—

—

A

191

190

101%

85%

B

211

213

99%

—

—

C

242

255

95%

70

70

100%

34

35

97%

5

—

188

—

—

A

205

198

104%

2 in 16

17

18

94%

B

211

221

95%

1 in 16

8.3

8.8

94%

C

258

263

98%

Česky. 1Ředění, 2Naměřená, 3Očekávaná, 4% Naměřená / Očekávaná, 516 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3Αναμενόμενη (E), 4% O/E, 516 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2Zmierzone (Z), 3Oczekiwane (O), 4% Z/O, 516 w 16.

Specificity Compound1

Added2 ng/mL

AFP

19,000

ND

ND

FSH

200

0.11

ND

TSH

560

0.09

ND

T2

48,000

ND

ND

T3

10,000

ND

ND

T4

10,000

ND

ND

Apparent % Crossng/mL 3 reactivity4

5

ND: not detectable.

Česky. 1Sloučenina, 2Přidané množství, 3Zjevná koncentrace, 4% Zkřížená reaktivita, 5ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1Μείγμα, 2Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4% Διασταυρ Αντίδραση, 5ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1Składnik, 2Ilość dodana, 3Zmierzone, 4 % reaktywności Krzyżowej, 5Nieoznaczlne.

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Česky. 1Roztok, 2Naměřená, 3Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3Αναμενόμενη (E), 4% O/E. Polski. 1Roztwór, 2Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4% Z/O.

Česky IMMULITE 2000 Tyreoglobulin Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 — ke stanovení koncentrace tyreoglobulinu v séru nebo heparinizované plazmě, jakožto pomůcky k monitorování pacientů, kteří podstoupili tyreidektomie. Katalogové Číslo: L2KTY2 (200 stanovení) Kód Metody: TG Barva: Tmavě Šedá

7

Přítomnost autoprotilátek proti tyreoglobulinu (anti-TG) může rušit stanovení tyreoglobulinu v séru. Množství protilátek anti-TG lze stanovit pomocí metody Anti-TG Ab na analyzátorech IMMULITE 2000 (L2KTG). Pokud jsou pacienti monitorováni v průběhu času, hodnoty TG získané použitím různých metod se kvůli rozdílům v jednotlivých metodách a specificitě reagencií nesmí zaměňovat. Společně s výsledkem posílaným lékaři má laboratoř uvést druh použitého testu. Sériová měření koncentrace TG v séru je třeba provádět stále stejnou metodou.

Shrnutí a vysvětlení Tyreoglobulin (TG) je heterogenní jodoglykoprotein s molekulovou hmotností přibližně 660 000 daltonů. Tyreoglobulin je normálně syntetizován folikulárními buňkami štítné žlázy, syntézu ovlivňuje tyreotropin, a představuje prekurzor 2,12 tyroxinu a ostatních jodotyroninů. Očekávaný horní limit normálních hodnot cirkulujícího tyreoglobulinu je přibližně 40 až 60 ng/ml s mediánem 5 až 5,11 10 ng/ml. U novorozenců a během třetího trimestru jsou tyto hodnoty o něco 7,10 vyšší. Množství tyreoglobulinu rovněž bývá zvýšené v oblastech s výskytem endemické strumy. Hlavní klinické využití stanovení tohoto prohormonu plyne ze skutečnosti, že fungující tyroidní tkáň je zřejmě jediným zdrojem cirkulujícího tyreoglobulinu. Obdobně, stanovení tyreoglobulinu má široké využití jako doplněk snímání s radioaktivním jódem a ostatních technik (jako jsou ultrazvuk nebo imunohistochemické značení), jakožto pomůcka při určení přítomnosti nebo absence funkční tyroidní tkáně, anebo růstu této tkáně vůči individuálně stanoveným základním výchozím hodnotám. Diferenciální diagnóza kongenitálního hypotyroidizmu je dobře známá oblast použití této metody stanovení tyreoglobulinu v séru. Kongenitální hypotyroidizmus: Stanovení tyreoglobulinu se používalo – někdy ve spojení s ultrazvukem a 8

snímáním s radioaktivním jódem – k objasnění typu tyroidní poruchy u předtím stanovené diagnózy kongenitálního 3,4,6,7,10,13 Velmi nízké nebo hypotyroidizmu. nezjistitelné množství tyreoglobulinu lze očekávat u dětí narozených bez tyroidní tkáně (tyroidní ageneze), zatímco vyšší, ale značně kolísavé hladiny jsou obecně pozorovány u dětí s hypoplastickou štítnou žlázou, ektopickou tyroidní tkání, dyshormonogenickou strumou, kongenitálním TBG nedodtatečností nebo přechodným hypotyroidizmem. Další použití: Měření tyreoglobulinu je rovněž cenné při snaze odlišit subakutní tyroiditídu od tyreotoxikózy způsobené skrytým podáváním hormonů štítné žlázy. V posledním uvedeném případě lze nízkou hladinu tyreoglobulinu očekávat z důvodu suprese tyreotropinu hormony 11 štítné žlázy.

Princip stanovení Stanovení Tyreoglobulin IMMULITE 2000 je chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly: 1 × 60 minut.

Odebírání vzorků EDTA: Nepoužívejte jako antikoagulant. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Tyreoglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek.

expirace. L2KTY2: 1 nádobka.

Potřebný objem vzorku: 50 μl séra nebo heparinizované plazmy.

Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie.

Skladování: 3 dny při teplotě 2–8°C nebo 2 měsíce při –20°C.

Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie: Skladujte při teplotě 2–8°C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu.

Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovými kódy. Tyreoglobulin zásobník s kuličkami (L2TY12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených antiligandem. Stabilní při teplotě 2–8°C do expirace. L2KTY2: 1 balení Tyreoglobulin reagencie (L2TYA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml ligandem značené myší monoklonální protilátky proti tyreoglobulinu a alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s ovčí polyklonální protilátkou proti tyreoglobulinu v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2–8°C do IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Tyreoglobulin kalibrátory (LTYL, LTYH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného tyreoglobulinu v nehumánní sérové matrici, s konzervačním prostředkem. Alespoň 30 minut před použitím: Rekonstituujte každou ampulku přidáním 4,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte jemným kroužením nebo překlápěním až do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Rozpipetujte na alikvotní části a zmrazte. Stabilní 2 měsíce při teplotě –20°C. L2KTY2: 1 sada. Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy.

Materiál dodávaný zvlášť Tyreoglobulin diluent vzorků (L2TYZ): Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků. 25 ml koncentrované (připravené k použití) nehumánní sérové matrice bez tyreoglobulinu. Skladování: 30 dní po otevření při teplotě 2–8°C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě –20°C. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku 16 × 100 mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2TYZ: 3 štítky L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT: 250 Testovacích zkumavek na diluent vzorků (16 × 100 mm) L2ZC: 250 Uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků LTYCM: Tříhladinový kontrolní modul na bázi nehumánního séra.

9

Dále potřebujete: Pipetu pro přenos vzorků, destilovanou nebo deionizovanou vodu, kontroly.

Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 2 týdny. Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) tyreoglobulin.

Očekávané hodnoty Vyšetřeno bylo 110 vzorků od zdravých jedinců pomocí metody Tyreoglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000. Výsledky se pohybovaly od 0,73 do 84 ng/ml s mediánem 11 ng/ml. 97,5. percentil byl 59,9 ng/ml a 2,5 percentil byl 1,6 ng/ml. Stanovením Tyreoglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000 bylo otestováno třicet vzorků od pacientů s Hashimotovým syndromem. Množství tyreoglobulinu se pohybovalo od nezjistitelného do >300 ng/ml. U pěti z třiceti vzorků (17%) hladina tyreoglobulinu přesáhla 55 ng/ml. Na analyzátoru IMMULITE 2000 bylo metodou Tyreoglobulin otestováno dalších 30 vzorků od pacientů s Gravesovou nemocí. Koncentrace tyreoglobulinu se pohybovala od nezjistitelného množství do >300 ng/ml. U tří z třiceti vzorků (10%) hladina tyreoglobulinu přesáhla 55 ng/ml. U pacientů, kteří podstoupili tyreidektomii by se koncentrace tyreoglobulinu měla teoreticky blížit nule, nebo se přibližovat citlivosti příslušného tyreoglobulinového testu. Jakékoliv zvýšení množství tyreoglobulinu je rovněž nutné interpretovat ve spojení s výsledky ostatních dostupných diagnostických testů a klinickou prezentací pacienta. Na základě zkoumání zdravých jedinců byla hodnota cut off pro test Tyreoglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000 10

stanovena na 55 ng/ml. Hladina tyreoglobulinu přesahující 55 ng/ml se považuje za zvýšenou a je nutné další vyšetření ohledně stavu štítné žlázy pacienta. Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí.

Omezení Protože autoprotilátky proti tyreoglobulinu (TgAb) můžou interferovat jak s konkurenční imunochemickým, tak i s imunometrickým stanovením tyreoglobulinu, je třeba u všech pacientů provést screening TgAb pomocí některého citlivého imunologického testu. Zkoumání zpětné výtěžnosti není pro vyloučení 14-16 Když interference TgAb postačující. laboratoř oznamuje výsledky množství tyreoglobulinu v séru pozitivního vůči TgAb, musí každá zpráva obsahovat upozornění, aby hodnoty tyreoglobulinu byly interpretovány s obezřetností, protože přítomnost TgAb může vest k příliš nízkému odhadu množství tyreoglobulinu 15 stanoveného imunometrickou reakcí. Autoprotilátky proti tyreoglobulinu (TgAb) má většina pacientů s Hashimotovým syndromem, ale i přibližně 5% zdravé 5 populace. 131

11

Po tyreidektomii nebo jodoterapii by mělo uplynout alespoň šest týdnů. Některé studie udávají, že zvýšená hladina tyreoglobulinu přetrvává i několik měsíců po úspěšné léčbě. V těchto případech může být vhodné sledovat sériově prováděná stanovení tyreoglobulinu s ohledem na poléčebné výchozí hodnoty příslušného pacienta. Měření tyreoglobulinu je nutné udělat ještě 131 před podáním jódu při snímání, protože snímáním se může uvolnit velké množství tyreoglobulinu i z velmi malého počtu buněk. Obdobně, vzorky pro vyšetření tyreoglobulinu se nemají odebírat příliš brzo po zásazích, které můžou způsobit přechodné zvýšení hladiny tyreoglobulinu, 11 jako je např. jehlová biopsie. I když měření tyreoglobulinu má svoji tradiční hodnotu v diferenciální diagnostice kongenitálního hypotyroidizmu, nedoporučuje se jeho použití při screeningu tohoto stavu, protože výsledkem bude široké spektrum množství tyreoglobulinu. IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

EDTA plazma ovlivňuje měření tyreoglobulinu touto metodou. Imunologicky neaktivní tyreoglobulin nemusí být tímto stanovením zjištěn. U pacientů podstupujících tyroidní supresní terapii nemusí být stanovení tyreoglobulinu spolehlivé. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:2733.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy.

Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. Konverzní faktor: ng/ml × 1,515 → pmol/l (CRM 457; molekulovou hmotností 660 kDa) Kalibrační rozsah: Do 300 ng/ml (455 pmol/l). Standardizované vůči Certified Reference Material (Autorizovaný referenční materiál) pro lidský tyreoglobulin (CRM 457) ve smyslu Community Bureau of Reference of the European Commission (Referenčního úřadu Evropské komise).

Linearita: Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce “Linearita“.) Zpětná výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků tyreoglobulinu (380, 840 a 1 680 ng/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce “Zpětná výtěžnost“.) Bilirubin: Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza: Přítomnost červených krvinek oddělených od plazmy v koncentracích do 30 µl/ml nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3 000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Specificita: Stanovení je specifické vůči tyreoglobulinu, bez zjistitelné zkřížené reaktivity vůči alfa-fetoproteinu (AFP), FSH, TSH, dijodotyroninu (T2), trijodotyroninu (T3) a tyroxinu (T4). (Viz tabulka "Specificity".) Srovnání metody: Stanovení bylo porovnáno s komerčně dostupným testem tyreoglobulinu využívajícím nepřímou enzymovou imunochemickou reakci v pevné fázi (Kit A) na 150 vzorcích od pacientů s Hashimotovým syndromem, Gravesovým onemocněním, pacientů, kteří podstoupili tyroidektomii a taky od eutyroidních jedinců. Koncentrace tyreoglobulinu u těchto pacientů pokryla celý kalibrační rozsah tohoto stanovení. V tabulce jsou uvedené výsledky s odkazem na jednotlivé hodnoty cut-off vyplývající ze stanovení. IMMULITE 2000 Tyreoglobulin

Analytická citlivost: 0,2 ng/ml (0,3 pmol/l)

Kit A

Funkční citlivost: 0,9 ng/ml (1,4 pmol/l)

>50 ng/ml

10

0

≤50 ng/ml

10

130

High-dose Hook Effect: Do 500 000 ng/ml žádný. Přesnost: Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka “Přesnost”.) IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

>55 ng/ml

≤55 ng/ml

Relativní Relativní citlivost specificita

100%

92,9%

Shoda: 93,3% 95% Interval spolehlivosti pro relativní citlivost a relativní specificitu, v uvedeném pořadí: 69,2% – 100% a 87,3% – 96,5%,

Klinická interpretace: Klinické studie na univerzitním zdravotním středisku na 11

středozápadě Spojených států se zúčastnilo 56 pacientů s tyroidním onemocněním (41 žen a 15 mužů ve věku 20 až 72 roků). Každý dobrovolník poskytl během své léčby – která zahrnovala parciální, subtotální nebo totální tyreoidektomii a ostatní lékařské zásahy – 2 až 6 vzorků. Výsledky této studie prokázaly, že měření Tyreoglobulin na analyzátorech IMMULITE 2000 bylo konzistentní se stavem onemocnění štítné žlázy u těchto pacientů.

Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003.

Ελληνικά IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 — για την ποσοτική μέτρηση της θυρεοσφαιρίνης στον ορό ή στο ηπαρινισμένο πλάσμα, σαν βοήθεια στην παρακολούθηση των ασθενών που έχουν υποβληθεί σε θυρεοειδεκτομή. Αριθμός καταλόγου: L2KTY2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: TG Χρώμα: Σκούρο γκρι Η παρουσία αυτοαντισωμάτων έναντι της θυρεοσφαιρίνης (anti-TG) μπορεί να επηρεάσει τον καθορισμό της θυρεοσφαιρίνης στον ορό. Τα anti-TG αντισώματα μπορούν να μετρηθούν με το kit IMMULITE 2000 Anti-TG Ab (L2KTG).

12

Όταν παρακολουθούμε ασθενείς μέσα στην διάρκεια του χρόνου, οι τιμές της TG που αποκτώνται με διαφορετικές αναλύσεις δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ’εναλλαγήν, λόγω των διαφορών των αναλυτικών μεθόδων και της ακρίβειας των αντιδραστηρίων. Τα αποτελέσματα που αναφέρονται από το εργαστήριο στο γιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν και το ποια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε.Οι σειριακές μετρήσεις της TG στον ορό πρέπει να γίνονται με την ίδια μέθοδο.

Περίληψη και Επεξήγηση Η θυρεοσφαιρίνη (TG) είναι μια ετερογενής ιωδογλυκοπρωτεΐνη με μοριακή μάζα περίπου 660 000 daltons. Η θυρεοσφαιρίνη συντίθεται κανονικά στα θυλακώδη κύτταρα του θυρεοειδή αδένα, υπό την επίδραση της θυρεοτροπίνης, και εμφανίζεται ως ο πρόδορομος της θυροξίνης και των άλλων 2,12 ιωδοθυρονινών. Το αναμενόμενο ανώτατο κανονικό όριο της κυκλοφορούσας θυρεοσφαιρίνης είναι περίπου 40 με 60 ng/mL, με διάμεση τιμή 5,11 5 με 10 ng/mL. Κάπως μεγαλύτερες 7,10 τιμές συναντώνται σε νεογέννητα και κατά τη διαρκεία του πρώτου τριμήνου της εγκυμοσύνης. Τα επίπεδα της θυρεοσφαιρίνης είναι συνηθως ανεβασμένα σε περιοχές ενδημικής βρογχοκήλης. Οι κυριότερες κλινικές εφαρμογές της μέτρησης αυτής της προορμόνης προκύπτουν από το γεγονός ότι ο λειτουργικός θυρεοειδικός ιστός εμφανίζεται ως η μοναδική πηγή της κυκλοφορούσας θυρεοσφαιρίνης. Ανάλογα, οι προσδιορισμοί της θυρεοσφαιρίνης έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως ως συμπλήρωμα της εξέτασης με ραδιενεργό ιώδιο και των άλλων τεχνικών (όπως η υπερηχογραφία ή η ανοσοϊστοχημική χρώση) σαν βοήθεια στην ταυτοποίηση της παρουσίας ή απουσίας του λειτουργικού θυρεοειδικού ιστού ή της αύξησης της τιμής σε αυτό τον ιστό που σχετίζεται με την ατομικά καθορισμένη βάση (baseline). Η διαφορική διάγνωση του συγγενούς υποθυρεοειδισμού αποτελεί ένα εδραιωμένο πλαίσιο χρήσης για αυτήν την

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

εφαρμογή των μετρήσεων της θυρεοσφαιρίνης στον ορό. Συγγενής υποθυρεοειδισμός: Οι προσδιορισμοί της θυρεοσφαιρίνης έχουν χρησιμοποιηθεί κάποιες φορές σε συνδυασμό με την υπερηχογραφία και την εξέταση με ενεργό ιώδιο, ώστε να διευκρινισθεί ο τύπος της θυρεοειδικής ανωμαλίας στον διαγνωσμένο συγγενή 3,4,6,7,10,13 Πολύ χαμηλά ή υποθυρεοειδισμό. μη ανιχνεύσιμα επίπεδα θυρεοσφαιρίνης αναμένονται σε νήπια που έχουν γεννηθεί χωρίς θυρεοειδικό ιστό (θυρεοειδική αγένεση), ενώ υψηλότερες τιμές συναντώνται συνήθως σε νήπια με υποπλαστικό θυρεοειδικό αδένα, εκτοπικό θυρεοειδικό ιστό, dyshormonogenic βρογχοκήλη, συγγενής TBG ανωμαλία ή παροδικό υποθυρεοειδισμό Άλλες εφαρμογές: Οι μετρήσεις θυρεοσφαιρίνης μπορεί επίσης να είναι σημαντικές σαν βοήθεια στην διαφοροποίηση ανάμεσα στην υποξεία θυρεοειδίτιδα και την θυρεοτοξικότητα που προκαλείται απο την κρυφή χορήγηση θυρεοειδικών ορμονών. Στην τελευταία περίπτωση, αναμένονται χαμηλά επίπεδα θυρεοσφαιρίνης λόγω της καταστολής της θυρεοειδικής ορμόνης της 11 θυρεοτροπίνης.

Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη είναι μια στερεής φάσης, χημειοφωταυγής, ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι Επώασης: 1× 60 λεπτά.

Συλλογή Δείγματος EDTA: Δεν πρέπει να χρησιμοποιείται ως αντιπηκτικό. Συνίσταται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έχει πήξει πλήρως. IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα πρόσθετα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 50 µL ορού ή ηπαρινισμένου πλάσματος. Φύλαξη: 3 ημέρες στους 2–8°C ή 2 μήνες στους –20°C.

Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Διατήρηση στους 2–8°C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dL, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά βούληση, ξεπλύντε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανόν εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε την μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Βλέπε ένθετο) Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό.

Υλικά που Διατίθενται Τα υλικά αποτελούν ένα ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες με ραβδοκώδικα είναι είναι απαραίτητες για την ανάλυση.

13

Συσκευασία σφαιριδίων θυρεοσφαιρίνης (L2TY12) Με barcode. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με άντι-ligand. Σταθερά στους 2–8°C έως την ημερομηνία λήξης. L2KTY2: 1 συσκευασία Δοχείο αντιδραστηρίου θυρεοσφαιρίνης (L2TYA2) Με barcode. 11,5 mL ligand-σημασμένου μονοκλωνικού αντισώματος άντιθυρεοσφαιρίνης ποντικού και αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συνδεδεμένα με πολυκλωνικό αντίσωμα άντιθυρεοσφαιρίνης προβάτου σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2–8°C έως την ημερομηνία λήξης. L2KTY2: 1 δοχείο. Πριν την χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε τον ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές θυρεοσφαιρίνης (LTYL, LTYH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλιμένης θυρεοσφαιρίνηςσε μήτρα μη ανθρώπινου ορού, με συντηρητικό. Τουλάχιστον 30 λεπτά πριν από την χρήση: Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 4,0 mL απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Ανακατέψτε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή μέχρι να το λυοφιλοποημένο υλικό να διαλυθεί πλήρως. Διαχωρίστε και καταψύξτε. Σταθεροί στους –20°C επί 2 μήνες μετά την ανασύσταση. L2KTY2: 1 σετ. Πριν κάνετε κάποια ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή.

Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Αραιωτικό Δείγματος Θυρεοσφαιρίνης (L2TYZ): Για την επι-του-αναλυτή αραίωση υψηλών δειγμάτων. 25 mL συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση) μήτρας μη ανθρώπινου ορού χωρίς θυρεοσφαιρίνη. Φύλαξη: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 14

2–8°C ή 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους –20°C. Ετικέτες με ραβδοκώδικα παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2TYZ: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσης) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16 × 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης του δείγματος LTYCM: Τριών επιπέδων, μονάδα ελέγχου βασισμένη σε μη ανθρώπινο ορό Απαιτούνται επίσης πιππέτες δειγμάτων, απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, έλεγχοι.

Διαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήστη IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, διαλύσεις, ρύθμιση, διαδικασίες εκτέλεσης και ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες. Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή απλά δείγματα τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) θυρεοσφαιρίνης.

Αναμενόμενες τιμές Συλλέχθηκαν εκατόν δέκα δείγματα ορού φαινομενικά υγιών ατόμων και αναλύθηκαν σύμφωνα με την διαδικασία IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη. Τα αποτελέσματα εκυμαίνοντο από 0,73 με 84 ng/mL, με διάμεση τιμή 11 ng/mL και 2,5th και 97,5% εκατοστημόρια της τάξης 1,6 και 59,9 ng/mL αντίστοιχα. Τριάντα δείγματα ορού ασθενών που έπασχαν από την νόσο του Hashimoto αναλύθηκαν με IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη. Οι τιμές της IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

θυρεοσφαιρίνης εκυμαίνοντο από μη ανιχνεύσιμες μέχρι > 300 ng/mL. Πέντε από τα 30 δείγματα (17%) έδειξαν επίπεδα θυρεοσφαιρίνης μεγαλύτερα από 55 ng/mL. Άλλα 30 δείγματα ορού ασθενών που πάσχουν από νόσο του Graves αναλύθηκαν με IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη. Οι τιμές της θυρεοσφαιρίνης εκυμαίνοντο από μη ανιχνεύσιμες μέχρι > 300 ng/mL. Τρία από τα 30 δείγματα (10%) εμφάνισαν επίπεδα θυρεοσφαιρίνης μεγαλύτερα από 55 ng/mL. Σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί σε θυρεοειδεκτομή οι συγκεντρώσεις της θυρεοσφαιρίνης μπορούν θεωρητικά να πλησιάσουν το μηδέν ή να προσεγγίσουν την ευαισθησία της ανάλυσης θυρεοασφαιρίνης. Κάθε αύξηση στο επίπεδο της θυρεοσφαιρίνης αυτών των ασθενών πρέπει να ερμηνεύεται περαιτέρω σε συνδυασμό με αποτελέσματα άλλων διαθέσιμων διαγνωστικών αναλύσεων και με την κλινική παρουσίαση των ασθενών. Βασισμένο σε μελέτη υγιών ασθενών, το cutoff της IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνης προσδιορίστηκε να είναι 55 ng/mL. Δείγματα που εμφανίζουν επίπεδα θυρεοσφαιρίνης μεγαλύτερα από 55 ng/mL θεωρούνται ανεβασμένα και απαιτούν περαιτέρω αναλύσεις που αφορούν στην κατάσταση του θυρεοειδούς. Θεωρείστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς.

Περιορισμοί Επειδή τα αντισώματα της θυρεοσφαιρίνης (TgAb) μπορεί να επηρεάσουν τα αποτελέσματα και των ανταγωνιστικών ανοσοαναλύσεων και των ανοσομετρικών αναλύσεων για θυρεοσφαιρίνη, όλοι οι ασθενείς πρέπει να εξετάζονται για TgAb με μια ευαίσθητη ανοσοανάλυση: μελέτες ανάκτησης δεν είναι επαρκείς για τον αποκλεισμό της πιθανής παρέμβασης των αντισωμάτων 14-16 Εαν το θυρεοασφαιρίνης (TgAb). εργαστήριο επιλέγει να αναφέρει τα αποτελέσματα της θυρεοσφαιρίνης σε TgAb-θετικό ορό, κάθε αναφορά θα πρέπει να περιλαμβάνει μια IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

προειδοποίηση προς τον θεράποντα ιατρό ώστε να ερμηνεύσει το αποτέλεσμα της θυρεοσφαιρίνης με προσοχή αφού η παρουσία των TgAb μπορεί να προκαλέσουν υποτίμηση του επιπέδου θυρεοσφαιρίνης όπως μετρώνται με 15 ανοσομετρικές αναλύσεις. Τα αντισώματα θυρεοσφαιρίνης (TgAb) απαντώνται στην πλειονότητα των ασθενών που πάσχουν από την νόσο Hashimoto (thyroiditis) αλλά επίσης και 5 περίπου σε 5% των υγιών ατόμων. Τουλάχιστον 6 εβδομάδες πρέπει να μεσολαβήσουν ανάμεσα στην 131 11 θυρεοειδεκτομή και την θεραπεία . Κάποιες μελέτες έχουν δείξει ότι τα επίπεδα θυρεοσφαιρίνης μπορεί να παραμείνουν αυξημένα για αρκετούς μήνες μετά από επιτυχή θεραπεία. Σε αυτήν την περίπτωση, μπορεί να είναι ακόμη σημαντική η καταγραφή των σειριακών προσδιορισμών που καθορίστηκαν σε σχέση με την γραμμή βάσης (baseline) που καθιερώθηκε μετά την θεραπεία για τον ασθενή. Είναι σημαντικό να γίνονται οι μετρήσεις θυρεοσφαιρίνης πριν το την εξέταση με 131 ηλεκτρονικά μέσα (scanning) I, επειδή μπορεί η εξέταση (scan) να οδηγήσει στη απελευθέρωση μεγάλων ποσοτήτων θυρεοσφαιρίνης ακόμα και από μια πολύ μικρή ποσότητα κυττάρων. Επί πλέον, τα δείγματα για την ανάλυση της θυρεοσφαιρίνης δεν πρέπει να συλλέγονται πρόωρα ακολουθώντας διαδικασίες όπως η βιοψία με βελόνα που μπορεί να προκαλέσουν μια παροδική αύξηση των επιπέδων της 11 θυρεοσφαιρίνης. Αν και οι μετρήσεις της θυρεοσφαιρίνης είναι αναγνωρισμένης αξίας για την διαφορική διάγνωση του εγγενούς υποθυρεοειδισμού, δεν συνιστώνται για screening αυτής της κατάστασης λόγω του ευρέος φάσματος των επιπέδων θυρεοσφαιρίνης. Το EDTA πλάσμα μπορεί να επηρεάσει την μέτρηση της θυρεοσφαιρίνης σε αυτήν την διαδικασία. Η ανοσολογικά ανενεργή θυρεοσφαιρίνη δεν μπορεί να προσδιοριστεί με αυτήν την ανάλυση. Σε ασθενείς που υποβάλλονται σε θεραπεία καταστολής του θυρεοειδούς, η ανίχνευση της θυρεοσφαιρίνης μπορεί να μην είναι αξιόπιστη. 15

Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:2733.] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ‘ανώμαλο’ αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης· παρόλ’ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα.

Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/mL. Παράγοντας μετατροπής: ng/mL × 1,515 → pmol/L (CRM 457; μοριακή μάζα 660 kDa) Εύρος καμπύλης: Μέχρι 300 ng/mL (455 pmol/L). Τυποποιημένο έναντι του Certified Reference Material για την ανθρώπινη θυρεοσφαιρίνη (CRM 457) σε όρους του Community Bureau of Reference της Ευρωπαϊκής Επιτροπής.

“Linearity” για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα θυρεοσφαιρίνης (380, 840 και 1 680 ng/mL) και αναλύθηκαν (Βλ. Πίνακα “Recovery” για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα). Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/L δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία ερυθρών κυττάρων σε συγκεντρώσεις μέχρι 30 µL/mL δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3 000 mg/dL δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Ειδικότητα: Η ανάλυση παρουσιάζει ειδικότητα για την θυρεοσφαιρίνη,με μη ανιχνεύσιμη διασταυρούμενη αντίδραση με την άλφα-φετοπρωτεΐνη (AFP), FSH, TSH, T2, T3 και T4. (Δες Πίνακα "Specificity".) Σύγκριση της Μεθόδου: Η ανάλυση συγκρίθηκε με μια εμπορικά διαθέσιμη έμμεση ξηρής φάσης ενζυμική ανοσομετρική ανάλυση θυρεοσφαιρίνης (Kit A) σε 150 δείγματα ασθενών που πάσχουν από την νόσο Hashimoto, την νόσο Graves, ασθενών που έχουν υποβληθεί σε θυρεοειδεκτομή, όπως και ευθυρεοειδικών ασθενών. Οι συγκεντρώσεις θυρεοσφαιρίνης αυτών των ασθενών καλύπτουν όλο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης. Τα δεδομένα παρουσιάζονται στον παρακάτω πίνακα αναφορικά με τα αντίστοιχα προτεινόμενα cutoffs της ανάλυσης.

Αναλυτική Ευαισθησία: 0,2 ng/mL (0,3 pmol/L)

IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη Σχετική Σχετική >55 ng/mL ≤55 ng/mL Ευαισθησία Ειδικότητα

Λειτουργική Ευαισθησία: 0,9 ng/mL (1,4 pmol/L)

Kit A >50 ng/mL

10

0

Υψηλή δόση φαινομένου Hook: Καμιά επίδραση μέχρι 500 000 ng/mL.

≤50 ng/mL

10

130

Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο ‘τρεξίματα’ την ημέρα, σε σύνολο 40 ‘τρεξιμάτων’ και 80 επαναλήψεων. (βλ. Πίνακα “Precision”.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις (Βλ. Πίνακα 16

100%

92,9%

Συμφωνία: 93,3% 95% όρια εμπιστοσύνης για την σχετική ευαισθησία και την ειδικότητα αντίστοιχα: 69,2% – 100% και 87,3% – 96,5%,

Κλινική Εκτέλεση: Μια κλινική μελέτη σε ένα πανεπιστημιακό ιατρικό κέντρο στις μεσοδυτικές Ηνωμένες Πολιτείες IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

συμπεριέλαβε δείγματα 56 ασθενών από θυρεοειδική νόσο (41 γυναίκες και 15 άνδρες, με εύρος ηλικιάς από 20 μέχρι 72 ετών) που έδωσαν από 2 μέχρι 6 σειριακά δείγματα κατά την διάρκεια της θεραπείας τους που περιλάμβανε μερική ή ολική θυρεοειδεκτομή, και άλλες ιατρικες επεμβάσεις. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι οι μετρήσεις της θυρεοσφαιρίνης με την IMMULITE 2000 Θυρεοσφαιρίνη είναι σύμφωνες με την θυρεοειδική κατάσταση των ασθενών.

Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003.

Polski IMMULITE 2000 Tyroglobulina Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 — do ilościowego oznaczenia poziomu tyroglobuliny w surowicy lub osoczu heparynowym, przydatny w monitorowaniu pacjentów po tyroidektomii. Numer Katalogowy: L2KTY2 (200 testów) Kod testu: TG Kolor: Ciemnoszary Autoprzeciwciała skierowane przeciw tyroglobulinie (anty-TG) mogą wpływać na oznaczenie tyroglobuliny w surowicy. Przeciwciała anty-TG można oznaczyć ilościowo przy użyciu testu IMMULITE 2000 Anty-TG Ab (L2KTG).

W związku z różnicami w metodach i specyficzności odczynników nie można porównywać ze sobą wyników TG uzyskanych przy użyciu różnych testów u pacjentów długotrwale monitorowanych. Laboratorium powinno wraz z wynikiem dostarczać lekarzowi informacji o metodzie. Seryjne oznaczenia TG w surowicy powinny być wykonywane przy użyciu tej samej metody.

Wprowadzenie Tyroglobulina (TG) jest heterogenną jodoglikoproteiną o ciężarze około 660 000 daltonów. W warunkach fizjologicznych produkowana jest przez pęcherzyki gruczołu tarczycowego pod wpływem tyrotropiny. Jest prekursorem 2,12 tyroksyny i innych jodotyronin. Spodziewany górny zakres wartości tyroglobuliny u zdrowych osób wynosi od około 40 do 60 ng/mL, przy medianie 5 – 5,11 10 ng/mL. Nieznacznie wyższe wartości 7,10 obserwowane są u noworodków i u kobiet w trzecim trymestrze ciąży. Podniesiony poziom tyroglobuliny obserwuje się w regionach endemicznego wola. Kliniczne zastosowanie pomiaru stężenia tego prohormonu wynika głównie z faktu, że funkcjonująca tkanka tarczycy wydaje się być jedynym źródłem krążącej tyroglobuliny. Stąd oznaczanie tyroglobuliny jest szeroko rozpowszechnione jako uzupełnienie badań scyntygraficznych z użyciem izotopu jodu, ultradźwięków i barwienia immunohistochemicznego, stosowanych w określaniu aktywności lub braku aktywności tkanki tarczycy, a także wzrostu aktywności tkanki w stosunku do indywidualnie ustalonej wartości odniesienia. Różnicowa diagnostyka wrodzonej niedoczynności tarczycy jest dziedziną, w której zastosowanie oznaczenia tyroglobuliny w surowicy ma ustaloną pozycję. Wrodzona niedoczynność tarczycy: Oznaczenie poziomu tyroglobuliny używane jest czasami łącznie z badaniem ultrasonograficznym i scyntygraficznym dla ustalenia rodzaju wady tarczycy w zdiagnozowanej już wrodzonej 3,4,6,7,10,13 Bardzo niedoczynności tarczycy. niskich lub nieoznaczalnych poziomów

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

17

tyroglobuliny spodziewać się można u noworodków urodzonych bez gruczołu tarczycowego (agenezja tarczycy), podczas gdy wyższe, choć plasujące się w szerokim zakresie wartości, stężenia hormonu występują zazwyczaj u noworodków z niedorozwiniętym gruczołem tarczycy, ektopową tkanką tarczycy, wolami na tle wadliwej produkcji hormonów, wrodzonym niedoborem TBG lub przejściową niedoczynnością tarczycy. Inne zastosowania: Pomiar stężenia tyroglobuliny może być także pomocny w rozróżnieniu podostrego zapalenia tarczycy od tyreotoksykozy wywołanej ukrytym podawaniem hormonów tarczycy. W tym ostatnim przypadku niskie stężenia tyroglobuliny są skutkiem hamowania wydzielania hormonu tarczycy przez 11 tyrotropinę.

Zasada testu IMMULITE 2000 Tyroglobulina jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym testem fazy stałej. Czas inkubacji: 1 × 60 minut.

Preparatyka próbek Osocze EDTA nie jest materiałem zalecanym dla oznaczenia. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory 18

krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Tyroglobulina nie został określony. Wymagana objętość próbki: 50 µL surowicy lub osocza heparynowego. Przechowywanie materiału: 3 dni w 2–8°C lub 2 miesiące w –20°C.

Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2-8°C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-HIV1/2, HBsAg i przeciwciał antyHCV. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dL. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana.

Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. Tyroglobulina Pojemnik z Kulkami (L2TY12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych antyligandem. Stabilne w 2–8°C do daty ważności. L2KTY2: 1 opakowanie Tyroglobulina Klin Odczynnikowy (L2TYA2) Z kodem kreskowym. 11,5 mL monoklonalnego mysiego przeciwciała anty-tyroglobulina związanego z ligandem oraz alkaliczną fosfatazę (izolowaną z jelita cieląt) sprzęgniętą z poliklonalnym owczym przeciwciałem, w buforze z konserwantem. Stabilne w 2–8°C do daty IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

ważności. L2KTY2: 1 klin. Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelkę komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Tyroglobulina Kalibratory (LTYL, LTYH) Dwie fiolki (niski i wysoki), zawierające liofilizat tyroglobuliny w matrycy surowicy zwierzęcej z konserwantem. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować w 4,0 mL wody destylowanej lub dejonizowanej. Odstawić na 30 minut a następnie mieszać delikatnie przez toczenie lub odwracanie. Po rekonstytucji stabilne 2 miesiące w –20°C (rozpipetować). L2KTY2: 1 zestaw. Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu.

Materiały dostarczane oddzielnie Tyroglobulina Rozcieńczalnik próbek (L2TYZ): Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka 25 mL preparowanej matrycy surowicy zwierzęcej bez tyroglobuliny. Po otwarciu stabilny w 2–8°C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (rozpipetować) w –20°C. Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 x 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2TYZ: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek – 16 × 100 mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik LTYCM: Trzypoziomowy zestaw kontrolny oparty na surowicy zwierzęcej.

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Ponadto niezbędne: pipety pasterowskie, woda destylowana lub dejonizowana, kontrole.

Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w „Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000” poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z „Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000”. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie. Próbki kontrolne: stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie tyroglobuliny.

Oczekiwane wartości Testem IMMULITE 2000 Tyroglobulina przebadano 110 próbek surowicy pochodzących od ewidentnie zdrowych osób. Wyniki mieściły się w zakresie 0,73 do 84 ng/mL, przy medianie 11 ng/mL, środkowe 95% plasowało się pomiędzy 1,6 i 59,9 ng/mL. Testem IMMULITE 2000 Tyroglobulina przebadano również 30 próbek surowicy pochodzących od osób z chorobą Hashimoto. Zakres stężeń tyroglobuliny rozciągał się od wartości nieoznaczalnych do >300 ng/mL. W 5 z 30 próbek (17%) stężenie tyroglobuliny było wyższe niż 55 ng/mL. 30 innych próbek surowicy przebadanych testem IMMULITE 2000 Tyroglobulina pochodziło od osób z chorobą Graves’a. Zakres stężeń tyroglobuliny wahał się od wartości nieoznaczalnych do >300 ng/mL. W 3 z 30 próbek (10%) stężenie tyroglobuliny wynosiło >55 ng/mL. U pacjentów po tyroidektomii stężenie tyroglobuliny powinno teoretycznie wynosić zero lub być w granicach czułości metody. Jakikolwiek wzrost stężenia tyroglobuliny u tych pacjentów powinien być interpretowany w połączeniu z innymi dostępnymi testami diagnostycznymi i z kliniczną oceną pacjenta.

19

W oparciu o badania zdrowych osób przy użyciu testu IMMULITE 2000 Tyroglobulina wyznaczono wartość granicy decyzyjnej na 55 ng/mL. Wyniki powyżej 55 ng/mL należy traktować jako podniesione – wymagają one dalszych badań do oceny stanu czynnościowego tarczycy pacjenta. Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne.

Ograniczenia Ze względu na możliwość wpływu autoprzeciwciał anty-TG na oznaczenia tyroglobuliny, tak w testach kompetycyjnych jak i kanapkowych, u badanych należy wykonać czułym testem również oznaczenie przeciwciał anty-TG, gdyż test odzysku nie jest przydatny dla wykluczania odddziaływania 14-16 Jeśli laboratorium autoprzeciwciał. zdecyduje się wydać wynik oznaczenia tyroglobuliny w surowicy, w której stwierdzono obecność przeciwciał antyTG, powinien on być opatrzony komentarzem ostrzegającym lekarza o potencjalnym wpływie prowadzącym do zaniżenia wyników w testach 15 kanapkowych. Autoprzeciwciała anty-TG są obecne u większości pacjentów z wolem Hashimoto oraz u około 5% 5 zdrowej populacji. Co najmniej 6 tygodni musi upłynąć od 131 tyroidektomii lub podania jodu do 11 oznaczenia tyroglobuliny. Niektóre badania donoszą, że poziom tyroglobuliny może pozostać podniesiony do kilku miesięcy po udanym leczeniu. W takich wypadkach istotne jest wykonywanie kolejnych oznaczeń mających na celu ustalenie poziomu odniesienia po leczeniu, przydatnego w dalszym monitorowaniu. Ważne jest, aby dokonać pomiaru tyroglobuliny przed badaniem scyntygraficznym z zastosowaniem 131 jodu , ponieważ badanie to może spowodować uwalnianie dużych ilości tyroglobuliny nawet z niewielkiej liczby komórek. Próbki do oznaczenia tyroglobuliny nie powinny być także pobierane zbyt wcześnie po takich badaniach jak biopsja igłowa, ponieważ mają one tendencję do czasowego 11 podnoszenia poziomu tyroglobuliny. 20

Pomimo że pomiary stężenia tyroglobuliny mają ustalone znaczenie w różnicowaniu wrodzonej niedoczynności tarczycy, nie są one polecane do badań przesiewowych niedoczynności ze względu na szeroki zakres wartości stężeń tyroglobuliny w tym schorzeniu. Osocze EDTA wywiera wpływ na wynik oznaczenia tyroglobuliny tą metodą. Tyroglobulina nieaktywna immunologicznie nie może być oznaczana tą metodą. U pacjentów poddawanych terapii hamującej tarczycę rzetelne oznaczenie stężenia tyroglobuliny może być niemożliwe. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays – Przeciwciała heterofilne problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami.

Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i wykresach. Wyniki podano w ng/mL. Przelicznik: ng/mL × 1,515 → pmol/L (CRM 457; ciężarze molekularnym 660 kDa) Zakres kalibracji: Do 300 ng/mL (455 pmol/L) IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Standaryzacja wobec certyfikowanego materiału referencyjnego (CRM 457) ludzkiej tyroglobuliny Biura Standaryzacji Wspólnoty Europejskiej. Czułość analityczna: 0,2 ng/mL (0,3 pmol/L) Czułość funkcjonalna: 0,9 ng/mL (1,4 pmol/L) Efekt wysokiej dawki – Hook Effect: Nie występuje do stężenia 500 000 ng/mL. Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz Tabela Precyzji). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (Patrz: Tabela Liniowość). Odzysk:Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami tyroglobuliny o stężeniach, kolejno: 380, 840 i 1 680 ng/mL. (Patrz: Tabela Odzysk). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/L nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność odwirowanych erytrocytów w ilości do 30 µL/mL nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3 000 mg/dL nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Specyficzność: Przeciwciało jest specyficzne w stosunku do tyroglobuliny, bez mierzalnej reakcji krzyżowej z AFP, FSH, TSH, dwujodotyroniną (T2), trójjodotyroniną (T3) i tyroksyną (T4) (patrz: Tabela Specyficzność). Porównanie metod: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu komercyjnego immunoenzymatycznego testu pośredniego do oznaczeń tyroglobuliny opartego na fazie stałej (Kit A) w grupie 150 próbek od osób z chorobą Hashimoto, chorobą Graves’a, pacjentów po tyroidektomii oraz osób z eutyreozą. Wartości stężeń tyroglobuliny u tych badanych pokrywały się całkowicie z zakresem kalibracji testu. Dane

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

przedstawiono w tabeli w odniesieniu do zalecanych wartości decyzyjnych. IMMULITE 2000 Tyroglobulina

Kit A

>55 ng/mL

≤55 ng/mL

>50 ng/mL

10

0

≤50 ng/mL

10

130

Względna Względna czułość specyficzność

100%

92,9%

Zgodność: 93,3% 95% zakres ufności dla względnej czułości i specyficzności, odpowiednio: 69,2% – 100% i 87,3% – 96,5%.

Badania kliniczne: Badania kliniczne w uniwersyteckim ośrodku medycznym w środkowozachodnich Stanach Zjednoczonych objęły 56 osób z chorobami tarczycy (41 kobiet i 15 mężczyzn w wieku od 20 do 72 lat). Uzyskiwano od nich 2 do 6 kolejnych próbek w trakcie leczenia obejmującego częściową, niepełną lub całkowitą tyroidektomię oraz inne procedury medyczne. Wyniki wykazały, że pomiary tyroglobuliny uzyskane przy użyciu testu IMMULITE 2000 Tyroglobulina współgrają ze stanami czynnościowymi tarczycy u tych chorych.

Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE® is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. ©2008 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom

2008-10-14 PIEL2KTY – 1 {17}

21

Changes in this Edition: cc#16311: Created a new package insert (PIEL2KTY – 1 {17}) for use in Eastern Europe (Czech, Greek, Polish). cc#17988: Updated IMMULITE 2000 to IMMULITE 2000 Systems on front cover, and in Intended Use and Procedure sections. cc#18063: Updated Company name to Siemens Healthcare Diagnostics. Added country of origin, website address, trademark and copyright statements, symbol glossary section. Standardized Technical Assistance section, changed the phone number. Removed all occurrences of CDC and CLIA Codes.

Understanding the Symbols Understanding the Symbols

En English

Vysvětlivky symbolů

Cz Česky

Επεξήγηση των συμβόλων

El Ελληνικά

Znaczenie symboli

Pl Polski

The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej

Symbol Definition En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2–8°C) Cz: Teplotní rozsah (2–8°C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2–8°C) Pl: Zakres temperatury (2–8°C) En: Upper limit of temperature (≤ -20°C) Cz: Horní teplotní limit (≤ -20°C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας (≤ -20°C) Pl: Górny zakres temperatury (≤ -20°C) En: Lower limit of temperature (≥2°C) Cz: Spodní teplotní limit (≥2°C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας (≥2°C) Pl: Dolny zakres temperatury (≥2°C) En: Do not freeze (> 0°C) Cz: Nezmrazovat (> 0°C) El: Μην καταψυΧετε (> 0°C) Pl: Nie zamrażać (> 0°C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie

En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE 22

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

Symbol Definition En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym

LOT

En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów

2008-01

En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Harmful Cz: Škodlivé El: Επιβλαβές Pl: Szkodliwy lub drażniący En: Corrosive Cz: Korozivní El: Διαβρωτικό Pl: Żrący

Symbol Definition

TEST UNIT

En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο REAG WEDGE A Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy

REAG WEDGE

REAG WEDGE B REAG WEDGE D

ADJUSTOR

En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator

ADJUSTOR L

En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski

ADJUSTOR H

En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki

ADJUSTOR AB

En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora

DIL

En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek

CONTROL

En: Control Cz: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola

En: Toxic Cz: Toxické El: Τοξικό Pl: Toksyczny En: Dangerous for the environment Cz: Nebezpečné pro životní prostředí El: Επικίνδυνο για το περιβάλλον Pl: Niebezpieczny dla środowiska

BEAD PACK

En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)

En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe

CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3

CONTROL +

En: Positive Control Cz: Pozitivní kontrola El: Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola dodatnia

23

Symbol Definition

CONTROL + L

En: Low Positive Control Cz: Mírně pozitivní kontrola El: Χαμηλός Θετικός Έλεγχος Pl: Kontrola nisko dodatnia

CONTROL –

En: Negative Control Cz: Negativní kontrola El: Αρνητικός Έλεγχος Pl: Kontrola ujemna

CONTROL AB

En: Control Antibody Cz: Protilátka proti kontrole El: Έλεγχος αντισώματος Pl: Przeciwciało Kontrolne

PRE

A

PRE

B

DITHIOTHREITOL

En: Pretreatment Solution Cz: Roztok na úpravu vzorků El: Διάλυμα προεπεξεργασίας Pl: Roztwór do wstępnej preparatyki En: Dithiothreitol Solution Cz: Roztok dithiotreitolu El: Διάλυμα διθειοθρεϊτόλης Pl: Roztwór dithiothreitolu

BORATE-KCN BUF En: Borate-KCN

Buffer Solution Cz: Pufrový roztok boritan-KCN El: Ρυθμιστικό διάλυμα Βορικού-KCN Pl: Bufor boranowocyjankowy

24

IMMULITE 2000 Thyroglobulin (PIEL2KTY-1 {17}, 2008-10-14)