Técnicas de Bandeo

 

Cariotipo

El análisis cromosómico ha proporcionado un conocimiento básico de los cambios genéticos responsables de las cromosomopatías y, en el caso del cáncer, de los procesos que suceden durante la transformación maligna de las células tumorales. En las cromosomopatías estos estudios han sido esenciales en su correcto diagnóstico, y su detección precoz en el líquido amniótico forma parte de la clínica habitual. Durante las últimas décadas se han descrito un elevado número de alteraciones cromosómicas recurrentes frecuentemente asociadas con subtipos tumorales particulares. Además, estas aberraciones citogenéticas han contribuido a establecer en muchos casos el pronóstico de la enfermedad y en algunos incluso indicar tratamientos específicos. CROMOSOMAS Y CARIOTIPO: Son las estructuras en que se organiza la cromatina nuclear y que tienen una expresión dinámica en las distintas fases del ciclo celular. Cada cromosoma contiene una molécula de ADN lineal asociado a distintas proteínas y el contenido de genes es variable, aunque está en relación con su tamaño. El Cariotipo es la disposición ordenada de los cromosomas de una célula. Se mantiene inalterable en todas las células de un individuo, así como en los individuos de una misma especie Concepto: Consiste en someter a los cromosomas a desnaturalizaciones, a digestión enzimática o a ambos, seguido de una tinción con colorante específico para ADN. Esto hace que los cromosomas se tiñan con una serie de bandas claras y oscuras. Las técnicas de bandeamiento permiten hacer un adecuado análisis de cada uno de los cromosomas, individualizándolos y permitiendo su análisis e identificación adecuados. CLASIFICACION DE BANDEO CROMOSOMICO

Los bandeos morfológicos: Se obtienen basándose en técnicas inherentes a la heterogeneidad de la cromatina. Existe en ellos una relación con proteínas (histónicas y no histónicas) e interacciones ADN. Los bandeos dinámicos: Se obtienen basándose en: técnicas que implican la incorporación de una base análoga, bromo- desoxiuridina (BrdU), en el ADN durante la fase S del ciclo celular. Parte de un cromosoma, que es claramente distinguible de los segmentos adyacentes, por aparecer más clara o más oscura con una o más técnicas de bandeo. Define regiones longitudinales longitudinale s en el cromosoma de acuerdo a su composición de cromatina. Las técnicas de bandeo ponen en evidencia un patrón básico de organización del cromosoma. Las técnicas de bandeo varían desde una simple tinción hasta las que necesitan pretratamiento complicados antes de la tinción BANDA CROMOSOMICA   BANDEO Q El nombre de bandeo Q proviene del hecho de que utiliza mostaza de quinacrina para teñir cromosomas. Fue el primer método de bandeo, descubierto por Caspersson en 1968. Detecta regiones fluorescentes con alto predominio de A-T y regiones opacas con predominio de G-C.  Aplicaciones:  Aplicacio nes: Diferenciación Diferenciación cromosómica cromosómica de rutina. Investigación Investigación de polimorfismos cromosómicos. Identificación especifica del cromosoma Y. Pruebas

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de paternidad. Para conocer el origen parental de trastornos debido a alteraciones de cromosomas Tinción con Mostaza de Quinacrina Bandeo Q:

  BANDEO G El bandeo G se denomina de este modo debido al colorante que se emplea, Giemsa, desarrollado por Gustav Giemsa (1948). Este bandeo se da por una respuesta diferencial de los cromosomas al ser pretratados con Tripsina antes de ser coloreados con Giemsa. Corresponden a: 1) Genes de replicación tardía ricas en AT (oscuras) 2) Genes de replicación temprana ricas en GC (claras)  Aplicaciones:  Aplicacio nes: Corroborar Corroborar alteraciones alteraciones cromosómicas cromosómicas previstas por el cuadro clínico. Identificación de cromosomas o regiones cromosómicas implicadas en rearreglos evidentes con tinción homogénea. Detectar aberraciones estructurales que podrían pasar desapercibidas con la técnica de tinción homogénea.

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Hacer correlaciones fenotipo-cariotipo y delinear nuevos síndromes cromosómicos. Localización y mapeo de genes en cromosomas y bandas específicas. Es utilizada como referencia de la diferenciación longitudinal de los cromosomas en todo el mundo. Es el bandeo más importante

 

 

 

Bandas C: La técnica de Banda C fue descubierta por casualidad y originado en un experimento en donde ADN satélite marcado en ratón fue hibridizado in situ (Arrighi y Hsu 1971) Esta técnica produce una tinción oscura selectiva con el Giemsa sobre la heterocromatina constitutiva. A diferencia de las técnicas anteriores, esta técnica colorea zonas específicas del cromosoma ricas en heterocromatina. Aplicaciones: Marcadores genéticos poblacionales. Para determinar el origen de trisomías de cromosomas polimórficos. Realización de pruebas de paternidad. En no disyunciones de cromosomas acrocéntricos. Para visualizar roturas cercanas a la región centromérica o translocaciones que implican inactivación por efecto de posición contigua a esta región.

  BANDEO R El metodo inicial fue propuesto por Sehested y resulta especialemnte adecuado para mamiferos. Tinción con Giemsa previo tratamiento con calor. El bandeo R es el reverso del bandeo G (Lejeune 1971)   BANDEO T. Las bandas T son las R que se tiñeron de manera más intensa. Identifica un subgrupo de bandas R que estan concentradas sobre todo en los telómeros (Dutrillax 1973).   BANDEO NOR CONCEPTO Identifica en los cromosomas las regiones llamadas Organizadores Nucleolares (NOR), que forman y mantienen el nucléolo en la interface. (Matsui y Sasaki) 1973. Su coloración es debido a la afinidad con el Nitrato de Plata.  APLICACIONES  APLICAC IONES Para determinar determinar con precisión precisión puntos de rotura en rearreglos rearreglos que implican cromosomas acrocéntricos. Para el estudio de la actividad de los genes ribosomales tanto en condiciones normales como en presencia de mutágenos o en diferentes tipos y estadios de la diferenciación celular.

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Técnicas de bandeo cromosómicos