Tecnicas Basicas

 Técnicas  T écnicas básicas de Biología Molecular

 Técnicas

que se utilizan para caracterizar caracteriz ar,, aislar aislar y manipular los ácidos nucleicos celulares 1.

METODOS BASADOS EN LA MANIPUL METODOS MANIPULACION ACION ENZIMA ENZIMATI TICA CA DE LOS ACIDOS NUCLEICOS • Enzimas asociadas a la manipulación de ADN • Técnicas de manipulación de genes y organismos (clonación, transgénesis)

2.

METODOS BASADOS EN HIBRIDAC METODOS HIBRIDACION ION DE ACID ACIDOS OS NUCLEICO NUCLEICOS S • Hibridación en soportes solidos (Blots) • Hibridación masiva (microarrays)

3.

METODOS BASADOS EN LA METODOS LA SINTESIS Y AMPL AMPLIFICACIO IFICACION N DE ACID ACIDOS OS NUCLEICOS •  Amplificación de ADN ADN por Reacción en cadena de la Polimerasa Polimerasa (PCR) • Secuenciación de ADN ( Secuenciación Sanger y Secuenciación Masiva)

ENZIMAS UTILIZADAS EN BIOLOGIA MOLECULAR MODIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS

SINTESIS DE ACIDOS NUCLEICOS

• Nucleasas  – Enzimas de Restricción  – DNAsas  – RNAsas • • ADN OtrasLigasas enzimas  – Polinucleótido

kinasa  – fosfatasa alcalina

• ADN Polimerasas  –  T  Taq aq Polimerasa Polimerasa  – Klenow (Pol I) •  T  Transcriptasas ranscriptasas

Reversas • RNA Polimerasas

ENZIMAS DE RESTRICCION •  Las

enzimas de restricción clivan el ADN cuando reconocen

secuencias cortas especícas (palíndromes), produciendo fragmentos de ADN de diferente diferentes s longitudes.

Reconocimiento y corte de EcoRI

Eco RI RI