SNI 01-2894-1992

5Nl

Standar Nasional lndonesia

sNl 01 - 2894 - 1992

rcs

'v

Gara uii bahan pengauret makanan dan bahan tambahan Yang dilarang untuk makanan

v

Dewan Standardisasi Nasional - DSN

pendahuluan

, Rancangan standar Industrial Indonesia untuk cara uji makanan/minuman, bahan tambahan ntakanan, cemaran logam dan cemaran mikroba disusun berdasarkan sil rapat pengurus TTSI makanan/minuman beserta instansi departemen kesehatan c.q. pLrsat pengawasan obat & makanan beserta departemen perindustrian c.q. Balai besar industri hasil pertanian. Pembuatan rancanan cara uji ini selain dimaksudkan untuk menyempurnakan standar juga dimakudkan untuk lebih, menyederhanakan dan penghematan di segala bidang, mengingat ada 5l buah sNI makanan/minuman yang direvisi dirurun pada saat yung

Konsep SNI cara uji ini disusun berdasarkan

I 2

A.O.A.C.,

fficial

methods

,rloo.

:

of analysis, lgg4.

Pearson's, chemical analysis of foods, 19g1, g th ed.

-3

Joumal AOAC vol. 69, no. 5, sept/okt. 19g0, Laporan sidang pleno IX panitia kocrek rnakanan indonesia, dep. keseharan, 1983. International commission microbiological speciffcation for foods, (ICMSF) of The lnternational Association of Microbioiogical cosieties 19g0.

4 5 6 7

compendium of Methods for the Microbiological Examination of Food 1976 Standard Methods for Examination or Water and Wastew ater, l975l4th ed APHA ANWA - WPCF.

Daftar isi

Halaman Pendahuluan

i

Daftar isi

I 2

Persiapan contoh Bahan pengawet makanan

2.1 Asam

2.2

benzoat

Sorbat

2.3 Asam propionat natrium propionat

l dan kalsium propionat

2.4 Nitrit 2.5 Nitrat dan nitrit 2.6 Sulfit

3

Bahan tambahan yang dilarang untuk makanan bukan pengawet

7 8

12

l7 25

sNt 01 - 2894 - 1gg2 Cara uji bahan pengawet makanan dan bahan tambahan yang dilarang untuk makanan

I

Persiapan contoh

Pcrsiapan contoh sesuai SNI

0l - ZBgl - 92, cara

Mkaanan dan minuman butir 4.

2 Bahan pengawet makanan 2.1 Asam benzoat ?.1.1

MetodaTitrimetri

Metoda titrasi dengan ekstraksi tanpa pemanasan.

2.I.l.l

Peralatan

Neraca analitik Labu ukur Kertas lakmus Kertas saring Corong pemisah Batang pengaduk Pinggan penguap Eksikator Erlenmeyer

2.1.1.2

Pereaksi

Kloroform CHCL atau dietil eter CF{, COCH3 Asam Klorida (HCI) I : 3 Alkohol 967o Fenolftalin (PP) Pereaksi khusus unt;k persiapan contoh.

2.1.1.3

l)

Persiapan contoh

Cara yang umum

Homogenkan contoh, haluskan bila contoh berupa padatan atau semi padat. pindahkan 150 ml atau 150 g ke dalam labu 500 ml, tambahkan NaCI halus jenuh tehadap air secukupnya, buat alkalis terhadap kerta lakmus dengan larutan NaOH ly7o atau dengan suspensi Ca(oH), (satu bagian ca(oH), disuspensikan dalam riga bagian air). Encerkan sampai tanda batas dengan larutan NaCl jenuh, kocok berulang kali. Biarkan selama lebih kuran 92 jam, kocok berulang kali dan saring. Jika contoh mengandung banyak lemak, bagian yang saringannya terkontaminasi oleh lemak ditambahkan beberapa ml larutan NaoH lo%o ke dalam saringan. Ekstrak dengan eter sebelum dtlaniutkan ke cara

I dari 28

sNl01 -2894-1992 keria. Jika mengandung alkohol, lakukan sperti d. Jika contoh mengandung sejurnlah barlran yang diendapkan oleh larutan NaCI

2)

jonuh, lakukan dengan cara e.

Kecap

Tambahkan 15 g NaCl hah-rs ke dalam 150 g contoh, dan pindahkan ke dalam labu ukur 500 ml, bilas dengan larutan jenuh NaCl 150 ml. Buatlah larutan sedikit alkalis terhadap kertas lakmus dengan menggunakan NaOH l}Vo, encerkan dengan larutan NaCl jenuh sampai tanda batas. Biarkan selama lebih kurang 2 jam, kocok berulang kali. Tekan menggunakan kain kasa dan saring.

3)

Jeli, jam dan marmalades

I-lancrtrkan 150 g contoh di dalam 300 ml larutan NaCl jenuh. Tambahkan l5 g NaCl yang telah dihaluskan. Buat alkalis terhadap kertas lakmus dengan suspensi Ca(oH),. Pindahkan ke labu ukur 500 ml dan encerkan dengan larutan Nacl jenuh, Biarkan selama lebih kr-rrang2 jam, kocok benrlangkali, pusingkan jika perlu dan saring.

4)

Sari apel yang mengandung alkohol dan produk yang sama Buat 150 ml contoh-contoh menjadi alkalis terhadap kertas lakmus dengan NaOH l0% dan uapkan pada penangas air sampai 100 ml. Pindahkan ke dalam labu ukur 250 ml, tambahkan 30 gram NaCl yang telah dihaluskan dan dikocok sampai larr.rt. Encerkan sampai volume semula (250 ml) dengan larutan NaCl jenuh. Biarkan selama lebih kurang2 jam, kocok berulang kali dan saring.

5)

Ikan asin atau ikan yang dikeringkan Cuci 50 g contoh yang telah dihaluskan ke dalam labu ukur 500 ml. Buat sedikit alkalis terhadap kertas lakmus dengan larutan NaOH l}Vo, dan encerkan sampai batas volume dengan H"O. Biarkan selama lebih kurangZ jam, kocok berulang kali dan saring. Pipet sebanyak mungkin bagian saringan yang diukur (300 ml) ke labu ukur 500 nil ketlua dan tambahkan 30 gram NaCl yang telah dihaluskan untuk setiap 100 ml larutan. I(ocok sampai NaCI lamt, encerkan dengan larutan NaCljenuh. I(ocok sarnpai homogen, saring protein/bahan lain yang mengendap.

2.1.L4

-

Cara,Ke{a

Pipet 100-200 nl saringan 2.1.1.3 ke dalam corong pemisah.

Netralkan terhadap kertas lakmus dengan HCI (1: 3) dan tambahkiur 5 ml berlebihan. Untuk ikan asin protein biasanya diendapkan dalam suasana asam, tetapi penyiapan contoh tidak menganggu ekstraksi.

-

Ekstrak hati-hati berturut-tr"rrut menggunakan 70, 50, 40 dan 30 ml CHCI.,. Untuk menghindari emulsi, kocok berulangkali menggunakan gerak putqr. Lapisan kloroform biasanya dapat dipindahkan dengan cepat setelah membiarkannya beberapa menit.

2 darr29

sNl 01 - 2894 _ 1992

-

Jika emuisi terbentuk' pecahkan dengan mengaduk lapisan cHcll dengan batang p*-ngaduk, dengan memindahkan ke dalam corong pemisah yang lain dan Lelakukan ['cngcrcokan I atau 2 kali kocokan yang berlawanan aiah dari ujung corong pemisah yang saru ke ujung yang lain atau dengan memusingkan beberapa menit. - Untuk meningkatkan hasil ekstraksi, hati-hati pisahkan larutan cHcll yang jernih sebanyak mungkin setelah setiap perlakuan ekstraksl, tetapi jangan diambil Lmulsi yang terapat pada lapisan CHCI.. Bila tindakan ini telah dilakukan, CHCI.. yang diekstrak tidak perlu dicuci.

-

Pindahkan hasil ekstraksi CHCI3 yang telah dikumpulkan ke cawan penguap porselen, bilas wadah beberapa kali dengan beberapa ml cHCl, dan uapkan sampai kering pada temperatur kamar dalam aliran udara kering. - Hasil ekstraksi dapat juga dipindahkan dari corong pemisah ke dalam erlenmeyer 300 ml dan bilas corong pemisah 3 kali dengan 5 _10 ml CHCI., .

-

Suling pelan-pelan sekali pada temperaturrendah sampai kira-kira l/4 volume semula. Pindahkan residunya ke pinggan penguap porselen, bilas labu tiga kali dengan 5-10 ml cHCl. dan uapkan sampai kering pada temperatur kamar dalam aliran udara kering.

-

Keringkan residu semalam (atau sampai tidak tercium bau asam asetat biia contohnya kecap) dalam eksikator.

- Larutkan residu asam benzoat dalam 30- 50 ml alkohol, netralkan terhadap pp, tarnbahkan H2 0 kira-kfua l/4 dari volume ini dan I atau 2 tetes pp.

-

Titar dengan NaOH 0,05 N.

Perhitungan

:

I ml 0,05 N NaOH = 0fi072g anhidrida Na benzoat. Catatan

:

Penggunaan kloroform dapat diganti dengan dietil eter.

2'l'2

Metode titrasi dengan melalui ekstraksi memakai alat Perforator (terLrtama

clikhususkan untuk contoh-contoh yang berwarna)

2.1.2.I

a b c d e

Erlenmeyer asah 500 ml Perforator Corong bertangkai panjang Corong pernisah

Buret

2.1.2.2

a b

Peralatan

Pereaksi

Eter Benzena

3 dari 28

sNt 01 - 2894 _ 1gg2

e

Asam asetat glasial, CH3 COOH.

2.1.3.3

Cara kerja

a

Persiapan analisis. Khusus untuk contoh beberapajuice/sari buahbuahan atau sejenisnya, sar.ing terlebih dahulu dengan penyaring membran dan encerkan secukupnya dengan larutan asam sitrat l zo.

b

Persiapan standar

Buat larutan masing-masing 10,69 mg sakarin,4,3g mg asam sorbat dan benzoat dengan larutan asam sitrat rvodaramrabu ukur 50 ml.

6,9r mg asam

c

Encerkan larutan di atas sebanyak 15 kali, 12 kali, l0 kali, g kali, 6 kali dan 4 kali hingga diperoleh konsentrasi yang berbeda untuk keperluan kurva kalibrasi.

d

Buat kurva kalibrasi dengan menyuntikkan t0,ui larutan standar dari setiap konsentrasi yang berbeda.

c l'

SLrntikkan pula larutan contoh yang telah diencerkan.

Kondisi kromatografi

Kolom

u Bundapak CN Waters dan sejenisnya

Eluen Kecepatan alir eluen Detektor Kepekaan Detektor lntegrator kecepatan kertas Panjang gelombang

2.1.4'

1,5 ml/menit

UV dengan bervariasi 0,01

I cm/menit

:

240 nm (untuk benzoat) 254 nm (sorbat)

Benzoat; sorbat dan sulfit metoda spektofotometer

2.1.4.1

a b

Asam asetat 2%olmetanol (95 : 5)

Peralatan.

Spektrometer Labu ukur

2.1.4.2

Pereaksi

a

Larutan p-rosanilin (acid bleached p-rosaniline_ rohn) Timbang I00 p-rosanilin klorida, masukkan ke dalam labu ukur I liter, tarnbah 200 ml Hr 0 dan 160 ml HCI (1 + 1), kemuclian encerkan sampai tanda garis. Biarkan 121am sebelum dipergunakan. I t

I

5 dali 28

i

sNt 01 - 2894 _ 1992 2.1.4.5

Persiapan larutan contoh

a Timbang20 gcuplikan (daging giling) ke dalam gelas piala 200 ml, rambahkan g5 ml H, o, aduk dengan batang pengaduk dan biarkan selama r0 menit fiangan lebih),

b

Enap tuangkan melalui corong yang dilapisi bulu kaca ke dalam gelas piala lainnya. Segera ambil 5 ml alikuot untukpenetapan sulfit. Asumsikan, bahwa volume larutan ekstrak adalah l00 ml (85 ml Hro yang ditambahkan dan 15 mr dari daging).

2.1.4.6 PenetapanSulfit.

a

Pipet 5 ml alikout ke dalam tabung reaksi 200 nm yang mengandung 5,0 ml Natrium tetrakloromerkurat, kocok.

b

Pindahkan l'0 ml larutan yang telah diencerkan tadi ke dalam tabung reaksi 200 nm lainnya, tambahkan 5,0 ml larutan p_ rosaniiin, aduk.

)

c

Tarnbahkan 10,0 ml larutan HCHO aduk dan biarkan 30 menit. Bila terbentuk warna lcmbayung, saring melalui penyaring gelas dan kaca resapannya. I nrl alikout yang diuji mengandung 0,1 gram daging sehingga 0,01 mg sesuai ciengan Na, so',0,017o. Bila warna terlalu pekat, encerkan larutan dari tabung pefiama dengan larutan Na tetrakloromerkurat (l + 1).

2.1.4.7

Penetapan benzoat.

a

Pipet 5 ml alikuot ke dalam labu ukur 50 ml, kemudian lakukan pengerjaan seperti pada persiapan kurva standar benzoat dan sorbat.

b Scan larutan dari 300 sampai 200 nm. Bila terdapat benzoat seperti yang ditunjr-rkkan oleh peak pada 225 nm, hitung jumlahnya dari kurva standar.

'5 nrl alikout mengandung

l

Nir-bcnzoat A.0lVo.

L l..l

ll

gram daging, sehingga 0,1 mg sesu^i crenga'

Pcnetallan sorbat.

Kc'riakan sep-rti penetapan benzoat (2.1.4.7).Bila terdapat sorbat sepertiyang clitr-rnjukkan

rlch pc,k p,da 250 nm, hitung jumrahnya dari kurva siancrar. Sctiap 0.5 ntg sesuai dengan Kalium sorbat 0,005To.

l.l

Sorbat

2.1.1 Lihat

Meroda Kromarografi Cairan Kinergi Tinggi (HPLC).

2.1 .3.

2.2.2

Metoclaspektrofotometer

Lihat No. 2.1.4.

2.3

Asam propionat natrium propionat dan kalsium propionat

7 daLi 28

sNl 01 - 2894 - 1992

2.3.l Peralatatn a Blender b Gas Loquid Chromatografi dilengkapi dengan FID Yanalo G- 2800. 2.3.2

Pereaksi

a

Lairutan standar Asam propionat, Natrium propionat, dan Kalsium propionat. Timbang masing-masing I g asam propionat, Natrium propionat dan kalsium propionat.

larutkan ke dalam 1000 ml air sr"rling.

b c cl

Asam fosfat, Hj PO4.

Natrium sulfat, Na, S0o anhidrat.

Etil

asetat.

2.3.3 Kondisi gas chromatografi a Kolom: 3 mm 0 x 2,0 n kolom

gelas, dipak dengan 5Vo PEG-20 M/Gas Chrom Q

(80- 100 mesh)

b. Suhu : 2.3.4

"injection port" 200'C, kolom 120'C.

Cara kerja.

a b

Timbang seksana 5 g cLrplikan, ntasukkan ke dalam blender.

c d e

Ambil lapisan bagian atasnya.

f g

Suntikan sebanyak 5 ml ke dalam GC.

Tambahkan I ml H. P04, lO g. Na, S0*anhidrat dan 50 ml etil asetat. Blencler canrpuran tersebut selama 5 menit.

Tambahkan lagi 50 ml etil asetat, kemudian blender selama 5 menit.

Ambil lapisan bagian atasnya, dan campurkan dengan lapisan yang pertama, kemudian jadikan volumenya menjadi 100 ml dengan penambahan etil asetat. Hitr-rng kandungan propionat berdasarkan kurva kalibrasi antara 25 sampai

I25luglml .

2.4

Nitrit

2.4.1. Metoda Griess I

2.4.1.1

a b c

Spektrofotometer Penangas air Labu ukur 500 ml, 50 ml.

2.4.1.2

ir

Peralatan

Pereaksi.

Pereaksi Griess.

8 dari 28

sNt 01 -2894 - 1992 Larutkan 0,5 g'asam sulfanilat dalam. l50 ml cH3cooH l5vo v/v.Diclihkan 0,1 g. alfanaptilamin dalam 20 ml H.,o sampai larut oan tuangkan dalam keadaan panas ke dalam ml cHr cooH encer' iampurkan kedua larutai tersebut dan simpan clalam botol .150

kaca berwarna coklat.

b

l-aruran sediaan nitrit. Larutkan l,l g' AgNo, dalam air bebas nitrit, endapkan Ag dengan laurtan Nacl, encerkan sampai I liter, kocok dan biarkan sampai *"ng"iop. Eicerkan 100 ml larutan sediaan menjadi I liter dengan menggunaan air bebas nitrit.

2.4.1.3

Cara kerja.

dar,am geras piara- 50 mr, rambahkan rebih kurang 40 :, I:.|ff"1':f,1T::j:::y*il dipanaskan^,".g;l 80 "c aduk dengan pengaduk kaca, H_ii:,::t:::,jl1liy,::l"l kemudian pindahkan ke daram rabu ukur 500 mi, bilasi g"t";;i";;:# #;;""r1 ur 4116 .i\J

b

Tambahkan air panas ke dalam labu ukur hingga labu ukur berisi lebih kurang 300 ml, simpan di atas penangas air selama 2 jamsambil sekali-kali digoyangkan. c Tambahkan 5 ml.larutan HgCl, jenuh, goyangkan pada suhu kamar, kemudiieu encerkan sampai tanda garis, kocok dan saring.

d Pipet sejumlah larutan hasil penyaringan, masukkan ke dalam labu ukur 50 ml tambahkan 2 ml pereaksi Griess dan encerkan sampai tanda garis. Biarkan selama I jam supaya terbentuk warna. e Masukkan larutan ke daram sel fotometer dan tetapkan resapannya pada panjang gelombang 520 1tm' Tetapkan juga blanko dengan menggunukan air dan peraksi Griess. ltryt larutan standar nitrit ke dalam labu ukur 50 ml dengan jumlah berbeda-beda, 'tambahkan masing-masing 2 ml larutan Griess encerkan dengan air suling seperti pad,a d. Tetapkan resapannya. g

Bandingkan resapan contoh dengan resapan deret standar.

2.4.2

Metoda Griess 2.

2.4.2.1

a b

Peralatan

Spektrofotometer Labu ukur 100 ml.

2.4.2.2

Pereaksi.

a

Larutan Kalium ferosianida Larutkan 106 g. \ Fe(CN)6 .3H2O dalam air, encerkan sampai I liter. b Larutan Seng asetat (CHTCOO)rZn Larutkan 220 g. (CH3COO) ,Zn'2HrOdalam air, tambah 30 rni asam asetat glasial, kemudian encerkan sampai 1 liter.

c

Larutan boraks 57o. Larutkan 50 g. Na, 8407 .l0H2O dalam I liter air.

9 dari 28

sNt01 -2894-1992 d

Larutan sulfanilamida. Larrutkan 2 g, sr-rlfanilamida dalam 800 ml air hangat, dinginkan, saring, kemudian tambahkan 100 ml HCI pekat sambil diaduk terus-menerus dan encerkan sampai I liter dengan air suling.

e

Larutan N- naftilen diamin dihidroklorida.

Larutkan 0,25 g. dengan air suling, encerkan sampai 250 ml dan simpan dalam botol berwarna coklat di lemari es. Perbaharui setiap minggu. f Larutan asam klorida (HCl) Encerkan 445 ml HCI pa. dengan air suling sampai 1 liter. Larutan sediaan Natrium nitrit. Larutkan

I g. tepat NaNO, dalam

air, encerkan menjadi

100 nrl.

Larutan deret standar.

I liter dengan air, kemudian dari larlltan ini encerkan masing-masing 4, l0 dan 20 ml menjadi 100 ml; larutan ini mengandung 2,5 1tg,5,0 1tg dan 10,0 lg NaNO per ml. Encerkan 5 ml larutan sediaan meniadi

2.4.2,3

Cara kerja.

a Tirnbang seksnma lebih kurang l0 g. cuplikan masukkan ke dalam gelas pereaksi 100 ml, basahi dengan 5 ml larutan NarBoOr5To tambah 70 ml air suling panas (suhu air suling tidak lebih rendah dari 70'C). b

Pindahkan dengan bantuan 70 ml air panas ke dalam labu kalibrasi berleher lebar, panaskan di atas penangas air mendidih selama 30 menit sambil digoyang-goyangkan.

c

Biarkan menjadi dingin, kemudian sambil diaduk dengan kuat, tambahkan 2 ml laruran K* Fe(CN),,, 2 ml larutan (CI{., CO0), Zn, kemudian tambahkan air suling sampai mendekar

tanda garis; pH larutan ini harr,rs 8,3, bila perlu tambahkan NaOH lM atar-r HCI 4 M sampai dicapai pH tersebut, impitkan dengan air suling, kocok dan biarkan 30 nrenit.

d e

Pindahkan/tuangkan cairan dengan hati-hati melalui kertas saring berlipat.

Pipet sejumlah saringan dengan volume tertentu (v/v) ke dalam labu ukur 100 nil. Tambahkan kira-kira 60 ml air suling, kemudian tambahkan l0 ml sulfirnilamicla clalanr HCI dan 6 ml HCI biarkan larutan dalam tempat yang gelap selama 3 menit.

f

Encerkan larutan dengan air suling sampai tanda garis, baca resapannya pada panjang gelor-nbang 538 nm dalam sel I cm.

g

Br-rat suatu deret standar dengan menggunakan air dan masing-masing

l0 nrl larutan

standar yang telah diencerkan, kemudian lanjutkan pegerjaan seperti pada butir e ranpa penambahan contoh.

h.

Buat kurva kalibrasi dan baca jumlah NaNO, yang resltpannya sesuai dengan

contoh.

Perhitungan =

200xbxc

--;-

mg/kg

l0 dari 28

sNl 01 - 2894 _ 1992 \\' = h=

bobot cuplikan .iumlah NaNoz yang diperoleh dari pembacaan kurva kalibrasi. jumlah saringan yang dipergunakan untuk penetapan (ml)

2.1.3 Nitrit 2.4.3.1

a b c

Peralatan

Spektrofotometer Penangas air

Labu ukur 500 dan 50 ml.

2.4.3.2

a

(in cured meat)

Pereaksi.

Pereaksi NED

Larutkan0,2g.N-(l-naftil)etilendiamin2HCIdalaml50mlCHjCOOH 15%(v/v),saring bila perlu, dan simpan dalam botol berwarna coklat.

b

Pereaksi sulfanilamid Larutkan 0,5 g. sulfanilamid dalam 150 ml CHj COOH I5Vo saringbila perlu

dalam botol berwarna coklat.

dal

simpan

c

Larutan baku nitrit 1000 1tglmlNaNo2. Larutkan 1,000 gram. NaNordalam air suling. encerkan sampai I liter. d. Larutan baku nitrit 100 pglml

Encerkan 100 rnl larutan baku NaNo2 r000 mg/ml menjadi I liter. e. Larutan baku nitrit 100 pglml Encerkan 10 rnl larutan baku NaNo, 100 mg/ml menjadi

2.4.3.3

I liter

Cara kerja

a

Timbang seksama 5 g. cuplikan masukkan kedalam gelas piala 50 ml, tambahkan lebih kurang 40 ml air bebas nitrit yang telah dipanaskan 80 'C aduk dengan pengaduk kac1, kemudian pindahkan ke dalam labu ukur 500 ml, bilasi gelas piala dengan air panas.

b

Tambahkan air panas ke dalam labu ukur hingga labu ukur terisi lebih kurang 300 ml, simpan di atas penangas air selama 2 jam sambil sekali-kali digoyangkan.

c

Dinginkan sampai suhu kamar, encerkan sampai tanda garis dengan air sr-rling, kocok dan saring.

d

Pipet sejumlah tertentu saringan (diperkirakan 5-50 pg NaNOr), masukkan ke dalam labu ukur 50 ml, tambah 2,5 ml pereaksi sulfanilamid clan goyanglan labu.

e

Setelah 5 menit, tambahkan 2,5 ml pereaksi NED, goyangkan labu, encerkan sampai tanda garis dengan air suling, kocok dan biarkan selama l5 menit sampai timbul warna.

f Masukkan larutan ke dalam sel fotometer dan tetapkan resapannya pada panjang gelombang 540 nm g

Buat larutan blanko dengan menggunakan 45 ml H, O,2,5 ml pereaksi sulfanilamid dan 2,5 ml pereaksi NED.

11 dari 28

sNt 01 - 2894 - 1992

h

Buat lauutan deret standar sebagai berikr-rt : Pipet masing-masing 10,20,30 dan 40 rnl larutan baku nitrit | 1tg/.m& masukkan ke dalam labu ukur 50 ml. tambah 2,5 ml pereaksi surllanilamida, goyangkan labu dan selanjutnya kerjakan seperti e dan f.

2.5

Nitrar dan nitrit

2.5.1

Metoda xylenol (dalam daging)

2.5.I.1

a b c

Alat destilasi Penangas air

Spektrofotometer.

2.5.1

a

Peralatan

.2

Pereaksi

M-xylenol

2.4 - dimetilf-enol.

b

Larutanperakammonium-hidroksida.

Larr"ttkan 5 g. AgrS0o bebas nitrat sampai

titik clidih, pekarkan sampai kurang lebi6 -t0 nrl, dinginkan dan encerkan sampai 100 ml dengan air suling. c Inclikator bromocresol gr.een Larutkan 0,1 g.bromocresol green dalam 1,5 rnl NaOtI 0,1 N dan encerkan prcnjacli 100 ml.

d

Larutan baku nitrat. Larutkan 0,1805 g' KNO, rekristalisasi dalam air, encerkan sampai I liter dengan air suling. atau encerkan 17,85 ml HNO. 0,1 N sampai 1 liter; 10 ml larutan ini mengandung 0,25 mg nitrat N.

e f

Larutan asam fosfatungstat20Vo. Larurtan Kalium permanganat, KMnOo 0,2 N.

2.5.1

.3

Cara kerja.

a

Timbang seksama 5-10 g. cuplikan, aduk-aduk dengan 80 ml air hangat clan panaskan di atas penangas air selama 1 jam sambil diaduk sekali-kali.

b

Pindahkan ke dalam labr-r ukur 100 ml. clinginkan, encerkan dan impitkan sampai tanda garis. cocok dan saring.

c

Pipet 40 ml saringan, masukkan ke dalam labu ukur 50 ml, tambahkan 3 tetes indikator bromocresol green dan beberapa tetes H2 SO4(1 + 10) sampai wiuna berubah menjadi kuning.

d

Oksidasikan nitrit menjadi nitrat dengan penambahan larutan KMnOo 0,2 N tetes demi tetes sambil digoyangkan sampai warna merah muda tetap selama I menit.

e

Tarnbah 1 mi H, SO4 (1 + 10) dan 1 ml asam fosfatungstat}}Vo,encerkan sampai tanda garis, kocok dan saring.

12

dari28

sNt 01 - 2894 _ 1gg2

f

Pipet : sejurnlah saringan yang diperkirakan mengandun g 0,025_0,2-5 mg nirrar N, masukkan ke dalam erlenmeyer 500 ml (bila diperlukal volume saringan > 20 ml, berar saringan sedikit basa, kemudian pekatkan dengan p"ng;opun;.

g

Tambahkan larutanAg-NH4OH secukupnya untuk mengendapkan klorida dan kelebihan

asam fosfotungstat' Tanpapenyaringan, tambahkan

rr, soo {:+1) lebih kurang 3 kali jumlah cairan dalam erlenmeyer. Tutup erlenmeyer, goyungkun, ainginkan sampai kira-kira 35 "c' tambah 0,05 ml (1-2 tetes) m-xylenol, tutul tagi,locok dan biarkan pada suhu 30-40 oc selama 30 menit' (Perubahan warna kunin! menjadi kuning kecoklatan menunjukkan adanya nitrat' Endapan merah terang yang disebabkan tidak sempurnanya menghilangkan asam fosfotungstat mungkin saja tedadi.

h

setelah nitrasi sempurna, tambahkan 150 ml H, o. bilasi tutupnya dan kemudian sulingkan' sebagai penampung' pergunakan 5 ml NaoH lvo danpenyulingan diakhiri bila diperoleh hasil sulingan sebanyak 40-50 ml. Segera matikan aliran air pendingin untuk mencegah masuknya nitroxyrenol yang memadat dalam kondensor.

i

Pindahkan hasil sulingan ke dalam labu r-rkur 100 ml, encerkan sampa.i tanda garis derrgan H2 o dan tetapkan nitrat N dengan nrembandingkan warna dari alikuot dengan kurva kalibrasi yang ditetapkan pada panjang gelombanj450 nm. j siapkan standar warna dari 10 ml larutan standar nitrat dengan menggunakan 0,05 ml m-xylenol dan 30 d H, Se (3 + l).

2.5.2

Nitrat dan nitrit dalam keju.

2.5.2.1 Peralatan.

a

Reduktor modifikasi Jones, Pipa kaca 300 x 10 mm diamter dalam dengan keran dan penampung yang terdiri dari corong 200 ml asah (24/40 stopper)

b c

Labu ukur 50 ml. Spektrofcrtometer.

2.5.2.2

Pereaksi.

a

Larutan buffer ammonia pH 9, 6_9,7 Encerkan 20 mlHCl dengan air dalam labu ukur I liter, aduk, kemudian tambahkan 50 ml NHr OH. inrpitkan sampai tanda garis dan kocok.

b

Larutan Kadmium sulfat, CdSO4 0,14 M Larutkan 37 g' 3 cdso4 '8H, o daram H, o, encerkan sarnpai r liter. c Pereaksi warna

l)

Larutkan 2,10 g. asam surfatnilat dalam 250 ml memanaskannya di atas penangas air.

cH.,cooH r5vo (v/v) dengan cara

2)

Larutkan 0,521 g. l-naftilamin dalam 30 ml Hro dengan cara memanaskannva di atas penangas air.

3)

Dalam keadaan masih panas tuangkan laturan l-naftilamin ke dalam larutan asam

l3 dari 2ft

sNl 01 -2894 - 1992 sulfanilat, aduk dan bila perlu saring, simpan dalam botol gelas berwarna coklat dalanr lemari es.

cl Seng, paniang 10 cm f Larutan seng sulfat, ZnS0. 0,42M. Larutkan 120 g, ZnSOo .7H2O encerkan dalam 1 liter.

g l)

Larutan.baku Kaliumnitrat, KNOr.

Larutan baku pg NO, per ml. Larutkan 1,6308 g. standar primer KNO3 atau yang telah standar primer NaNo, atau yang telah dikeringkan terlebih dahulu selama l jam pada 110'C dalam HrO, encerkan sampai I liter, kocok.

2)

Larutan baku l0 rng NO., per ml. Pipet l0 ml larutan baku l/kg NO.. per ml, masukkan ke dalam labu ukur I liter, encerkan sampai tanda garis dan kocok.

h I)

Larutan baku natriun nitrit, NaNO,

2)

Larr-rtan baku 2 1rg NO, per ml.

Liirutan baku 0,2 kg NO, per ml Larutkan 0,30009. stanclar primer NaNO., atau yang telah dikeringkan terlebih dahulu selama I jam pada 110 "C dalam HrO, encerkan sampai I liter, kocok. Pipet l0 ml larutan baku 0,2 /tg NO2 per ml, masukkan ke dalam labu ukur I liter, encerkan sampai tanda garis dan kocok.

14

dari28

SNI 01

1992

24140 penghubung

diamter luar 12 mm diameter dalam 10 mm

diameter luas 7 mm diameter dalam 1,5 mm

kolom Kadmium g0 -- 100 mm

8-40mm Fritt€d distt Kran teflo

15 dari 28

sNt 01 - 2894 - 1992 2.5.2.3

a,

Persiapan analisis.

Kejr-r sangat keras (kadar air