Apellidos : ………………………..………………. Nombres : ……………………………………………. Fecha : .…../……/2016 Duración: 60 min min
Docente
: Dante Manuel García Jiménez Jiménez
Tipo de práctica: Individual ( ) Grupal (X) (X)
Instrucciones: Realizar la práctica de en el laboratorio.
1. TEMA: Espectrofotometría de absorción
2. CONCEPTOS BASICOS Los métodos espectroscópicos de análisis están basados en la medida de la radiación electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia. El método de absorción se basa en la disminución de la potencia de un haz de radiación electromagnética al interaccionar con una sustancia. Ley de Lambert Beer: Si se considera que se dispone de una fuente de radiación que hace llegar a la muestra un haz de radiación, de longitud de onda previamente seleccionada, cuya potencia es I0 , la muestra de espesor b absorbe una parte de esa radiación incidente, de forma que la potencia del haz disminuye después de atravesar la muestra siendo su nueva potencia I. El cociente entre la potencia de la radiación que sale de la muestra y la de la que incidió sobre ella, se define como transmitancia:
= 0 La transmitancia también puede expresarse en tanto por ciento, multiplicando el cociente anterior por 100. Es más frecuente utilizar el concepto de absorbancia, o densidad óptica, que se define como el logaritmo de la transmitancia cambiado de signo:
= log( log (0) = − lologg De acuerdo con estas expresiones, si la muestra no absorbe radiación, I y lo tanto A=0, y se transmite toda la radiación T=1 (100% de transmitancia).
I0 coinciden,
3. PROPÓSITO/OBJETIVO/ LOGRO: Construir una curva de calibración y calcular la concentración desconocida de una muestra.
por
4. HIPÓTESIS (O CÁLCULOS):
5. NOTAS DE SEGURIDAD: Usar equipo de bioseguridad (guardapolvo, guantes, mascarilla, gorra)
6. PROCEDIMIENTO: a.
Preparación de la solución madre Preparar una solución madre de 80 ppm de KMnO 4 Para ello pesar 0.008 g de KMnO4 y aforar a 100 mL
b.
Preparación de la soluciones estándar Preparar cuatro soluciones estándar de 4, 8, 16 y 40 ppm Para la solución de 4 ppm (estándar 1) tomar 2.5 ml de la solución madre con la pipeta y aforar a 50 ml. Para la solución de 8 ppm (estándar 2) tomar 5 ml de la solución madre con la pipeta y aforar a 50 ml. Para la solución de 16 ppm (estándar 2) tomar 10 ml de la solución madre con la pipeta y aforar a 50 ml. Para la solución de 40 ppm (estándar 2) tomar 25 ml de la solución madre con la pipeta y aforar a 50 ml.
c.
Lectura de la absorbancia
Poner el espectrofotómetro a 525 nm. Verter agua destilada en la celda de análisis (muestra en blanco) Verter 2 ml de estándar 4 ppm en la celda de análisis (muestra estándar 1) Inserte la muestra en blanco en el portaceldas y cierre la puerta del compartimiento de muestras. Oprima 0 ABS/100%T para llevar el blanco a 0 A o 100%T.
est ándar 1 en el portaceldas. La medición Remueva el blanco e inserte la muestra estándar de la muestra aparece en pantalla. Repetir el análisis con los otros estándar.
d.
Construcción de la curva de calibración Con los datos experimentales construya una curva de Concentración (eje X) vs Absorbancia (eje Y) Ajuste la curva a una ecuación lineal
e.
Calculo de la concentración desconocida Mida la absorbancia de la muestra de concentración desconocida similar al procedimiento del ítem c Con la absorbancia de la muestra desconocida determine la concentración de la muestra empleando la curva de calibración.
7. RESULTADOS O PRODUCTOS Comprensión de la espectrofotometría de absorción
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