Sediaan Dan Pewarnaan

 

SEDIAAN

DAN

PEWARNAAN MIKROORGANISME OLEH :

KARNELI

 

SEDIAAN 

Sino Si nonim nim : PRE PREPA PARA RAT T



Lokasi : Tempat / objek yang akan dilihat diba di baw wah mikros osko kop p be berrup upaa bah ahaan  pemeriksaan.



Sediaa Sedi aan, n, ya yait itu u sa samp mpel el/k /kul ultu turr ba bakt kter erii ya yang ng dilletakk di kkaan atau dipul ulaaska kan n pa pada da pe perrmu muk kaa aan n objek obj ek gel gelas/ as/sl slid ide, e, yan yang g dap dapat at la langs ngsung ung d ilwarn iharnai t ai dete ngrleb aebih nm rohul skloup atau harus diwa di terl ihikda dahu

 

Fungsi Sediaan

untuk melihat bentuk sel, bentuk bakteri, gerak bakteri, morfologi bakteri dan sifat  bakteri..  bakteri

 

Bakteri bila diperiksa dibawah mikroskop tanpa  perlakuan  TANSPARAN sehingga  sukar mengamati morfologi dan Sifatnya. Pewarnaan dibagi atas 4 macam : 1. Pewarna nan n sederh rhaana 2. Pe Pewa warn rnaaan Dif ifer ereens nsiial a. Pewarnaan Gram’s  b. Pewarnaan Tahan Tahan Asam 3. Pewarnaan Negatif  4. Pewarnaan Khusus a. Pewarnaan Spora  b. Pewarnaan Flagella c. Pewarnaan Granula d. dll

 

Langkah-Langkah pewarnaan : 1. 2. 3. 4.

Menyia Meny iapk pkaan pr preepa para rat/ t/se sedi diaa aan n Fiksasi Pewarnaan Diperiksa dibawah Mikroskop

Pewarnaan kimiawi.memakai  ZAT WARNA, berupa garam-garam CAT ASAM : zat yang berekasi dengan komponen sel yang  bersifat basa, seperti inti. zat warna ini disebut bersifat ASIDOFILIK. ASIDOFILIK. CAT BASA : zat yang berekasi dengan komponen sel yang  bersifat asam, seperti sitoplasma. sitoplasma. zat warna ini disebut bersifat BASoDOFILIK. METAKROMASI : warna yang berbeda dari warna larutan catnya.

 

MACAM-MACAM SEDIAAN 1.

SEDIAAN HIDUP / BASAH YANG TIDAK DIWARNAI (Ex : Gerak bakteri)

2.

SEDIAAN HIDUP / BASAH YANG DI WARNAI (Ex : Melihat sel epithel)

3.

SEDIAAN HIDUP DIMATIKAN DAN DIWARNAI (Ex : Persiapan preparat  pewarnaan sederhana dan differensial)

 

CONTOH CARA PEMBUATAN SEDIAAN HIDUP / BASAH TIDAK DIWARNAI

 

Gambar cara pembuatan preparat basah

 

Gamb mbar ar Pe Pemb mbua uata tan n Te Tete tess Ga Gant ntun ung g Ga

 

HASIL PEMERIKSAAN

SEDIAN HIDUP DIWARNAI

 

Gambaran spesifik morfologi sel sebaiknya memakai memakai  biakan muda (24 jam) jam)  Dipengaruhi afinitasnya 1. Me Meny nyia iapk pkaan Pre Prepa para ratt

 

2. Fiksasi, dapat dilakukan cara : a. Fisik : melewatka melewatkan n diatas nyala api  b. Kimiawi : mencelupkan mencelupkan kedalam methanol c. Khusus : seperti mengunakan larutan Helly pada  pewarnaan khusus. Fungsi Fiksasi : a. membunuh kuman secara cepat  b. melekatkan melekatkan kuman pada objek glas c. membuat sel lebih keras dan kuat d. mencegah otolisis e. merubah daya afinitas cat f. mempertinggi gugus reaktif karboksilb amino  primer..  primer g. mencegah megkerutnya globul protein.

 

3. Pewarnaan a. Sederhana : hanya menggunakan 1 jenis zat warna, melihat morfologi dan warnya mikroorganisme, contoh zat warna Methylene Blue atau Carbol fuchsin.

 b. Differensial : Menampilkan perbedaan/sifat dari sel, dibagi : 1. P. Gram’s : Diperkenalkan oleh Hans Cristian Grams (denmark 1884). Hasilnya Gram Positif warna ungu dan gram negatif warna merah. 2. P. P. BTA BTA : Hasilnya Bakter Bakterii Tahan Tahan Asam bewarna bewa rna merah dan Tidak Tahan Tahan Asama bewarna bewa rna Biru. Bi ru.

 

 Ada 2 metode Pengecatan Pengecatan BTA BTA yang dilakukan, yaitu : 1. Meto Metode de Ze Zeih ihl-N l-Nee eels lsen en,, Penyimpanan sediaan BTA bisa tahan 1 tahun 2. Metode Kinyoun-Gabbet, Penyimpanan sediaan BTA tidak tahan lama

Macam Pewarna Pewarnaan an Gram’ Gram’ss : 1. PG PG.. Huck Huckke kerr Mod Modif ifik ikas asii 2. PG. Origina nall 3. PG PG.. Or Orig igina inall mo modif difik ikas asii 4. Dll

 

Cara kerja Pewarnaan BTA

 

Bentuk bakteri (coccus) :

 

c. Pewarnaan Negatif : Untuk melihat kapsul dari mikroorganisme, memakai zat warna TINTA CINA, latar belakang hitam, contoh kumannya : Streptococcus Str eptococcus pneumoniae, Klebsiella pnuemoniae

d. Pewarnaan Khusus : Untuk melihat bagian tertentu pada mikroorganisme, mikroorgan isme, seperti Granula Contohnya Corynebacterium difteri granula barbest ernst, spora contohnya Basilus contohnya Basilus subtilis, subtilis, flagella contohnya Salmpnella thypi (peritrik)  Alcaligenes faecalis faecalis (ampitrik)  Pseudomonas aeroginosa aeroginosa (lopotrik) Vibrio cholera (monotrik), dll.

 

TUGAS RUMAH, kumpul minggu depan ! Tuliskan masing –  masing – masing masing 5 contoh Bakteri : 1. Gra ram m pos posit itif if co cocccu cus. s. 2. Gr Gram am po posi siti tiff ba basi sill 3. Gra ram m Ne Nega gattif coc occu cuss 4. Gra ram m Ne Nega gattif ba basi sill

 

Botol Reagensia

 

Tetes Oil Immersi sebelum diletakkan di Meja benda

 

Bila Reagen keruh Disaring !

 

Contoh Bakteri

 

Posisi Melihat Mikroskop

 

Mikroskoip Binokuler 

 

Sel Mahkluk Hidup