Relacion de Frentes

 

Rf > Análisis cualitativo Las diferentes sustancias de la solución aplicada, son arrastradas con velocidades diferentes, formándose zonas de sustancias; producidas por procesos de adsorción, reparto, intercambio iónico o por combinación. Después de que el frente del eluyente ha recorrido un trayecto suficiente se saca la placa de la cámara y se seca. Comprobación: 1. 2. 3.

Sustancias coloreadas: Se pueden ver inmediatamente Algunas co combinaciones mbinaciones fluorescen o absorben en la luz UV. Se hacen visibles asperjándolas con reactivos de comprobación  comprobación  

Medida de velocidad de desplazamiento de cualquier combinación en un eluyente determinado:

  =

distancia de la sustancia de origen distancia del frente del eluyente al origen

 

Recomendaciones a causa de las variaciones del valor R F  F : a) Hacer desplazar en el mismo cromatograma al lado de la mezcla desconocidas una sustancia de comparación conocida comparación  conocida (colorante); si con eluyentes distintos se obtiene siempre la misma mancha única se trata probablemente de la misma combinación. b) Darse arbitrariamente el valor de 1 al R F de una sustancia de referencia que se cromatografía

  =

I. II.

distancia de la sustancia de origen distancia de la sustancia X al origen

 

Rst (=Valor normalizado) Rx > Rf

Valoración cualitativa: 1. 2. 3. 4.

Sobre el cromatograma terminado se puntea el contorno de la mancha con un lapiz afilado. Se marcan los centros. Se mide su distancia a la línea de origen Se realiza el cociente entre las distancias

Eluyentes: Para tener resultados reproducibles se deben utilizar disolventes muy puros, fabricados especialmente para la cromatografía, en general se procura emplear eluyentes sencillos, de uno o dos componentes. Cuando se trata de sustancias desconocidas lo mejor es emplear en primer lugar como eluyentes benceno o cloroformo. Si las sustancias se quedan durante la cromatografía cerca del origen > eluyente más fuerte. Si el desplazamiento es demasiado deprisa empleamos un eluyente más débil.

 

Métodos de comprobación: Para combinaciones no reconocibles por un color característico se emplean métodos especiales de comprobación. Comprobación #2 Visibles por adsorción o fluorescencia Hay placas que contienen contienen un indicador de Fluorescencia : F254 ó F366. El número que aparece como subíndice nos indica la longitud de onda de excitación del indicador utilizado. Lampara UV de onda corta: Longitud de onda 100-280,315 nm Lampara UV de onda larga: Longitud de onda 315-400 nm Indicadores fluorescentes son los derivados derivados del pireno. Al elaborar placas se adiciona 1/3 o ¼ de mg por cada g de silicagel. Se secan las placas a 110 °C y se deja 5 min al aire. Lampara UV de onda larga 365 nm Comprobación #3 Muchas combinaciones no presentan color propio, ni adsorción UV. Tiene que hacerse visibles con reactivos de comprobación especial que se aplican con un pulverizador sobre la capa. Vainillina, Acido fosfomolibdico, permangamanoto potasico>Moja>calienta a 110°C 10 min Capa inorgánica: Reactivos> H2SO4 concentrado, H2SO4-HNO3 Coloración en frio o calentando entre 100 y 300°C Capa orgánica: Reactivos> Vapor de yodo o aspersión de solución de yodo Coloración almidona al 1% Reproducibilidad de valores Rf  A. Calidad de adsorbentes: Tamaño medio de los gránulos de los adsorbentes B. Grado de actividad de la capa, humedad del aire: Humedad relativa para ello se han construido cámaras climáticas C. Espesor de la capa: Entre 0.2 y 0.3 mm la influencia del espesor de la capa es despreciable, capas gruesas de >0.5 mm variaciones en los Rf. La capa debe ser constante. D. Calidad del eluyente E. Saturación de la cámara separadora: Si lla a atmosfera no está saturada el eluyente se evapora. F.