Recuento de Reticulocitos

 

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RECUENTO DE RETICUL RETICULOCITOS OCITOS INTRODUCCION Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros no nucleados que contiene RNA residual. En la secuencia de maduración del eritrocito, éste permanecerá dos días en la médula ósea y un día en al sangre  periférica, al madurar el eritrocito disminuye la cantidad de RNA.

Con el uso del colorante supravital (nuevo azul de metileno) se precipita el RNA ribosómico residual dentro de los reticulocit reticulocitos. os. Se prepara un frotis frotis sanguíneo sanguíneo con la mezcla de sangre sangre anticoagulada anticoagulada y colorante colora nte supravital supravital que se examina al microscopio microscopio con lente de inmersión inmersión en aceite con un ocular de capo restringido.

El número de reticulocitos se expresa como co mo porcentaje del número total de eritrocitos contados. Otras inclusiones del eritrocito (cuerpo de pappenheimer, cuerpos de Howell-jolly y cuerpos de heinz) también se tiñen con el nuevo azul de metileno y deben diferenciar4se de los reticulocitos. Los cuerpos de Heinz se presentan como inclusiones de color verde azul claro situados en al  periferia  peri feria del eritrocito, eritrocito, los cuerpos de Howel Howell-Jol l-Jolly ly suelen ser una o dos inclusiones inclusiones redondas

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com teñidas de color morado oscuro, los cuerpos teñidas cuerpos de pappenheimer pappenheimer son indistingui indistinguibles bles del retículo retículo de los reticulocit reticulocitos. os. Si se sospecha de cuerpos de pappenheimer pappenheimer debe realizarse realizarse una tinción de hierro con azul de Prusia APRA verificar su presencia ya que el retículo no se tiñe con este colorante. Puede Pue de produci producirse rse interp interpret retaci aciones ones errónea erróneass cuando cuando sólo sólo se inform informaa el porcent porcentaje aje de reticu reticuloc locito itoss   prese presente nte en al sangre sangre perifé periféric rica, a, ya que los result resultados ados dependen dependen del número número total total de eritro eritrocit citos os  presentes en al sangre periférica. Si la cifra total de eritrocitos está disminuida, el porcentaje de reticulocitos no reflejan de manera precisa al producción de nuevos eritrocitos por al médula ósea. Puede usarse la cifra de reticulocitos para evitar errores de interpretación debido a las cifra total de eritrocitos y al aumento en al estimulación de la médula ósea. Con el advenimiento de la citometría de flujo y la función cada vez mayor que desempeña en el laboratorio, pueden ahora practicarse conteos automáticos de reticulocitos.

Método: coloración supravital (azul de metileno, azul brillante de cresil, nuevo azul de metileno); citometría de flujo: el contador hematológico ADVIA 120 realiza un análisis bidimensional.

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Muestra: sangre entera recolectada con EDTA. EDTA. Estabilidad: la sangre entera con EDTA es estable a temperatura ambiente hasta 48 hrs y a 4ºC hasta 72 hrs.

VALORES NORM NORMALES ALES PORCENT PORCENTUAL UAL

ABSOLUTOS: 20000-120000 / MM3

Varones

0.5-1.5 %

Mujeres

0.5-2.5 %

Niños.

0.5-4 %

Lactantes

2-5%

•

CCR : 1-2

Los reti Los reticu culo loci cito toss se expre expresa san n co como mo po porc rcen enta taje je re rela lati tivo vo de he hema matí tíes es y/o en va valo lorr ab abso solu luto to.. Se han propuesto varias correcciones para la expresión de los resultados. El Indice de reticulocitos corregidos (IRC) se determina cuando el recuento de hematíes es muy alto o cuando el número de células rojas maduras está disminuido, disminuido, realizando la corrección corrección por hematocrito hematocrito que se requiera. IRC o CCR = recuento de reticulocitos siendo 45 % el valor normal de hematocrito.

(%)

x

hematocrito

/

45

%

El Indice de maduración de reticulocitos (IMR) o Indice de producción reticulocitaria (IPR) es una corrección adicional que considera el estímulo eritrocitario compensador que se produce en caso de anemias intensas. En estos casos el número de reticulocitos en sangre periférica es superior al que corresponde al grado de regeneración eritroblástica, debido a que la anemia provoca un estímulo eritropoyético adicional que facilita una salida precoz de reticulocitos desde la médula a la sangre y un acortamiento de su período de maduración intramedular y un aumento del período de maduración  periférica.

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Este fenómeno conocido como “desviación reticulocitaria” o shift se caracteriza por la presencia de macrocitos policromatófilos. El período de maduración reticulocitario es un factor que se mide en días y está en relación inversa al hematocrito.

Esta corrección consiste en dividir el valor de reticulocitos corregidos por dicho factor dado en días que depende del tiempo de maduración:

Factor = 1.0 Factor = 1.5 Factor = 2.0 Factor = 3.0 si el hematocrito es de

si si si 15%

el el el

hematocrito hematocrito hematocrito

es es es

de de de

45% 35% 25%

Indice de maduración reticulocitario (IMR) = IRC / factor.

Si el índice es mayor o igual de 3 indica aumento de actividad eritropoyética medular (anemias regenerativa), mientras que un IMR menor de 2 indica escasa actividad eritropoyética.

INDICES RETICULOCITARIOS: Los métodos automatizados permiten la determinación de distintos parámetros reticulocitarios. El citómetro de flujo ADVIA 120 mide simultáneamente los índices eritrocitarios y reticulocitarios. Los reticulocitos son teñidos con un colorante de ácidos nucleicos y luego se miden la dispersión y absorción utilizando el canal láser de diodo. Los parámetros obtenidos son: el volumen reticulocitario (MCVr), la concentración corpuscular media de hemoglobina hemoglobina reticulocitari reticulocitariaa (CHCMr) (CHCMr) y el contenido de Hb de los reticulocitos reticulocitos (CHr), siendo este último el más importante. Contenido de hemoglobina de los reticulocitos (CHr): es una medida directa de la hemoglobina (Hb)  presente en los reticulocitos nuevos en sangre periférica. Valores de CHr menores a 26 pg indican una inadecuada disponibilidad de hierro (Fe) para una óptima eritropoyesis. Las principales aplicaciones clínicas de CHr son las siguientes:

· Identificación temprana de una deficiencia de hierro. La deficiencia de Fe es uno de los déficits nutricionales más comunes y la principal causa de anemia ferropénica en niños y mujeres adultas. Por  consiguiente, es esencial el diagnóstico temprano de la deficiencia de Fe para evitar las complicaciones sistémicas de una anemia ferropénica.

El diagnóstico de deficiencia de Fe se basa en los siguientes indicadores bioquímicos: ferremia,

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com transferr transf errina ina,, satura saturació ción n y ferrit ferritina ina.. Actualm Actualment entee se adicio adicionan: nan: recept receptore oress de tra transf nsferr errina ina sérica sérica circulante y el contenido de hemoglobina reticulocitaria CHr.

El diagnóstico de anemia ferropénica se basa en la presencia de anemia microcítica hipocrómica y eritro eritrocit citos os con altos altos nivele niveless de zinc-p zinc-prot rotopor oporfir firina ina (ZPP) (ZPP) además además de Fe, transf transferr errina ina y ferrit ferritina ina..

Se demostró que CHr y Hb (no así la ferritina) son los únicos parámetros significativos para predecir la deficiencia de Fe y la anemia ferropénica. Además, con cada incremento unitario en el CHr se reducen en 30% y 45% las probabilidades probab ilidades de deficiencia de Fe y ane anemia mia ferropénica respectivamente. · Evaluación del status de Fe sérico en pacientes hemodializados: un valor de CHr menor de 26 pg es una medida precisa del status de Fe en dializados; un valor de CHr menor al contenido de hemoglobina de lo loss erit eritro roci cito toss madur maduros os (C (CH) H) indi indica ca el inic inicio io ag agudo udo de de defi fici cien enci ciaa de Fe Fe;; la CHr CHr re resp spond ondee rápidamente (48 horas) al tratamiento con Fe suministrado su ministrado por vía intravenosa. · Monitoreo de la terapia con eritropoyetina recombinante humana (rHuEPO) en dializados: este test   permite detectar la deficiencia funcional de Fe. Este fenómeno se produce durante la estimulación eritropoyética intensa de terapia con eritropoyetina, en la cual la cantidad de Fe disponible para la eritropoyesis resulta insuficiente, a pesar de tener niveles normales de ferritina y transferrina. · Detección de deficiencia funcional de Fe en pacientes con enfermedad renal terminal. · El CHr se utiliza conjuntamente con el porcentaje de células hipocrómicas (%H) para analizar los niveles funcionales de Fe disponibles para eritropoyesis. Estos valores son más relevantes relevantes que la medición de ferritina, ferritina, cuyos valores pueden estar falsamente falsamente aumentados por procesos inflamatorios. Grado de absorbancia de los reticulocitos: se observa en el histograma de reticulocitos y es una medida de la madurez de los mismos. Los reticulocitos se clasifican en reticulocitos de alta, media o  baja absorción. Los reticulocitos de alta absorción, con un alto contenido de ARN son las células más

inmaduras. Volumen medio reticulocitario (MCVr): es un parámetro que aún tiene escasa utilidad clínica porque es poco estable.

UTILIDAD CLÍNICA: • • •

Evaluación de la función eritropoyética. Diagnóstico diferencial de anemias no regenerativas y formas hiperregenerativas. Monitoreo de la respuesta a terapias en caso de anemias por deficiencia de Fe, cobre, vitamina B12 y B6.

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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• •

•

Monitoreo de eritropoyesis después de transplante de médula ósea en el caso de anemia aplásica. Evaluación de deficiencia funcional de Fe con la determinación d del el índice CHr. Evaluación y clasificación de anemias en base al índice IMR y el recuen recuento to de reticulocitos:

Enfermedad

Recuento de reticulocitos

Anemia aplásica Crisis anémica Anemia no regenerativa Regeneración de MO Deficiencia crónica Deficiencia de Fe Talasemia Mielodisplasia Deficiencia Vit B12 Anemia Hemolítica Hemorragia

 – / N  – / N  N / +  N / + +  N / +

IMR  

-/N  N / +  N / +  N +  N / +  N / +  N / + + +

N: normal

•

+: aumentado •

- : disminuido.

SIGNIFICADO CLINICO El reticulcito es un eritrocito joven inmaduro y sin núcleo que contiene material reticular RNA que se tiñe de color gris azulado. Este retículo se observa en las células nuevas durante uno o dos días antes que la célula alcance su madurez completa.   Normalment Normalmente, e, se observa un pequeño número de estas células en la sangre circu circulante. lante. Para Para que la cuenta de reticulocitos sea importante, debe compararse con la cuenta total de reticulocitos. La cuenta de reticulocitos se utiliza para diagnosticar las anemias producidas por insuficiencia de la médula ósea de las que son causadas po porr hemorragia hemorragia o hemólisis, hemólisis, para vigilar vigilar el tratamiento tratamiento de la médula ósea en al anemia aplástica y para determinar los efectos de las sustancias radiactivas en los individuos que están expuestos a este e ste factor. factor.

LA CUENTA DE RETICULOCITOS RETICU LOCITOS AUMENTADA

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Indica que existe mayor proporción de glóbulos rojos conforme la médula ósea sustituye a las células que se pierden o se destruyen en forma precoz. Si se identifica reticulocitosis, puede haber alguna enfermedad oculta como hemorragia crónica c rónica o hemólisis (anemia de células falciformes y talasemia).

Existe reticulocitosis en: A. Ane Anemia mia he hemol molíti ítica ca::

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Inmu Inmuno noló lógi gica ca Problemas Problemas primarios primarios de la la membrana membrana eritrocitar eritrocitaria ia Hemoglobinopa Hemoglobinopatía tía y anemia de células células ffalcif alciformes ormes Defici Deficienc encia ia de enzim enzimas as eritr eritroci ocitar tarias ias Cont Contac acto to con con tox toxin inas as Traum Traumáti ática ca o microo microorg rgani aniopát opática ica Hipe Hipere resp sple leni nism smo o Pa Parras asiitos tosis

B. C. a)  b)

Tre ress a cuatro cuatro días días de una una hemorrag hemorragia. ia. Después Desp ués del del tratami tratamiento ento de la anem anemia ia La reticulocit reticulocitosis osis se se utiliza utiliza como índice índice de la efectivi efectividad dad del tratami tratamiento ento Después Después de administrar administrar una dosis dosis adecuada de hierro hierro en una anemia por deficienc deficiencia ia de hierro, la elevación de los reticulocitos es mayor al 20 por ciento. c) Se produce produce una elevació elevación n propor proporcio cional nal cuand cuando o la anemia anemia pernici perniciosa osa es tratad tratadaa median mediante te una transfusión o con vitamina B 12.

La cuenta reticulocítica baja significa que la médula ósea no produce suficiente eritrocitos y ocurre en: A. Anemia Anemia por defic deficien iencia cia de hi hierr erro. o. B. Anem Anemia ia plás plásti tica ca C. Anemia Anemia perni pernicios ciosaa no trat tratada ada D. Infe Infecci cción ón crón crónic icaa

E. F. G. H.

Radi Radiot oter erap apia ia Endo En docr crin inop opat atía íass Tumor Tumor en al al médul médulaa ósea ósea Síndr Síndromes omes mielodi mielodispl splási ásicos cos

INTERFERENCIAS: • •

•

Los reticulocitos normalmente aumentan en los lactantes y el embarazo El paciente que ha sido transfundido recientemente tiene una cuenta inferior por  dilución La presencia de cuerpos de Howell-Jolly eleva en forma artificial la cuenta cuando se utiliza el método automatizado.

VARIABLES POR DROGAS:

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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Aumentado: Allopurinol Allopu rinol,, aminopirina, aminopirina, antipirétic antipiréticos, os, antipirina, antipirina, arsen arseniales iales,, aspirina, aspirina, corticotrop corticotropina, ina, plomo, levodopa, metil-dopa, naproxeno, nitrofuranos, penicilina, procainamida, quinidina, sulfonas. Disminuido: Cloramfenicol, clorpropamida, citaralina, datinomicina, metatrexato, rinblastina.

REFERENCIAS: •

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Fisbach,, Talasan Fisbach alasanka, ka, France Frances, s, Manual Manual de pruebas pruebas diagnos diagnostic ticas, as, 5ª Edi Edició ción, n, 1997 1997,, Edi Editor torial ial McGraw Hill-Interamericana, México. Guer Gu erre rero ro,, Garc García ía,, Rafa Rafael el,, Manua Manuall de la labo bora rato tori rio o de hemat hematol ologí ogía, a,199 1997, 7, Univ Univer ersi sida dad d Veracruzana, Xalapa, Ver. McDo Mc Donal nald, d, A. A.,, Geor George, ge, At Atla lass de hemat hematol olog ogía ía,, 4a Rei Reimpr mpresi esión, ón, 2001, 2001, Edit Editori orial al Medica Medica Panamericana, México. McKenczie, B., Shirlyn, Hematología clínica, 2ª Edición, 2000, Editorial El Manual Moderno, México. http://www.farestaie.com.ar/te/bc/338.htm http://www.scribd.com/doc/2151012/etapa-maduracion-del-eritrocito

Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez

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