Reações Gerais de Aminoácidos

 Aminoácidos

α

1

Classificação de aminoácidos •

 Alifáticos, apolares;

•

 Aromáticos;

•

Polares não carregados;

•

Polares carregados positivamente;

•

Polares carregados negativamente.

2

 Alifáticos

3

 Aromáticos

4

Polares não carregados

5

Polares carregados positivamente

6

Polares carregados negativamente

7

Ligação peptídica

8

Objetivo  Identificar

os tipos de aminoácidos presentes na solução problema 02, a partir de testes qualitativos.

9

Reações da Ninidrina (Alifáticos)

10

Metodologia •

•

•

•

2,0 mL de solução de cada amostra a 1% (água, glicina, Leucina, solução problema)  10 gotas de reagente de ninidrina (ninidrina 1% em álcool)   banho de água fervente por aproximadamente 3 minutos  Observação da cor.

11

12

Amostras

Coloração ou precipitado

Coloração ou precipitado após aquecimento

1% água 1% glicina 1% leucina 1% triptofano 1% solução problema

Incolor Violeta Amarelo Amarelo

Incolor violeta intenso vinho amarelo fraco

amarelo intenso

vinho

13

Reações Xantoproteica (Aromáticos)

14

Metodologia •

0,5mL de cada amostra a 1% (água, glicina, fenilalanina, triptofano e solução problema respectivamente);

•

0,5mL de ácido nítrico concentrado;

•

Banho de gelo;

•

2,0mL da solução saturada de NaOH (12N)

•

 Observação da Cor.

15

Coloração ou

Amostras

Coloração

Coloração ou Coloração ou ou precipitado precipitado precipitado precipitado Adição de Adição de ácido nítrico Banho de gelo Banho de NaOH gelo

1% água

Incolor 

Incolor 

Incolor 

incolor 

1% glicina

Incolor 

Incolor 

Incolor 

incolor 

1% fenilalanina

Incolor 

Incolor 

Incolor 

incolor 

1% triptofano

laranja.

Laranja

Castanho

castanho

Solução problema

Incolor 

Incolor 

Incolor 

incolor  16

Reações de Folin-Ciocalteau (Aromáticos)

17

Metodologia •

0,5mL da amostra em um tubo de ensaio de cada amostra a 1%(água, glicina, fenilalanina, tirosina, triptofano e solução problema respectivamente);

•

0,5 mL de reagente-Folin;

•

0,5mL de solução saturada de carbonato de sódio;

•

Observação da cor.

18

 Amostras

Coloração ou precipitado Reagente de Folin

Coloração ou precipitado Carbonato de sódio

1% água

amarelo*

Incolor 

1% glicina

amarelo*

Incolor 

amarelo*

Incolor 

verde claro

 Azul

Verde

azul escuro

amarelo*

Incolor 

1% fenilalanina 1% tirosina 1% triptofano Solução problema

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Reações com acetato de chumbo (Enxofre)

20

Metodologia •

0,5mL de cada amostra a 1% (água, glicina, cisteína, metionina, solução problema);

•

 2ml de solução 40% de hidróxido de sódio;

•

5 gotas de acetato de chumbo 10%;

•

Observação da cor;

•

Banho de água fervente;

•

Observação da cor.

21

Coloração ou  Amostras

Coloração ou precipitado

precipitado  Aquecimento

1% água

incolor *

Incolor 

1% glicina

incolor *

Incolor 

1% cisteína

incolor *

Incolor 

1% metionina

incolor *

Incolor 

Solução problema

incolor *

Incolor  22

23

Reações com fosfotungstato (Básicos)

24

Metodologia •

2,0 mL de cada amostra a 1% (água, glicina, histidina, solução problema respectivamente);

•

2,0 mL de ácido fosfotungístico 20%.

25

Amostras 1% água 1% glicina 1% histidina 1% ac. Glutâmico Solução problema

Coloração ou precipitado incolor incolor branco/leitoso incolor incolor 26

Conclusão

27

Teste

Resultado

Reação da Ninidrina

A amostra pode ter algum aminoácido que contenha grupo

amino

livre,

sem

poder

predizer

qual

aminoácido, exceto o triptofano. Pela comparação das cores a solução problema há possibilidade da Leucina estar presente. Reação Xantoproteica

A análise do teste possibilitou a exclusão do triptofano. Porém não pode-se excluir a presença de fenilalalinina.

Reação de Folin-Ciocalteau

O teste evidenciou a ausência de tirosina e triptofano.

Reação com Acetato de Chumbo

O teste foi inconclusivo, pois mesmo os aminoácidos que

possuem

enxofre

na

sua

estrutura

não

responderam positivamente. Reação com Fosfotungstato

Na realização do teste não foi possível determinar a presença de histidina na solução problema. 28

Tirosina Triptofano Histidina

Glicina

Solução Problema Fenilalanina Metionina Cisteína Ác. Glutâmico

29