Preparación de Medios de Cultivo

 

Preparación de Medios de Cultivo Fundamento

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las necesi necesidad dades es nut nutric ricion ionale ales s varían varían consid considera erable blemen mente. te. Hay mic microo roorga rganis nismos mos muy poco poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer. Los medios de cultivo poseen una serie de componentes: 1.

ndis ndispensab pensables: les: Entre los primeros se inclu incluye ye el agua, nutrientes nutrientes orgánicos orgánicos !"idratos !"idratos de

carbono, aminoácidos, vitaminas, etc# y nutrientes inorgánicos !$, %e, &, 'g, (, etc# ).

*lte *lternati rnativos: vos: susta sustancias ncias isosmoti+ isosmoti+antes antes !&a !&al#, l#, agent agente e solidi-ic solidi-icante ante !agaragar !agaragar#, #, tampones, tampones,

indicador de pH, etc. /urante las prácticas se van a mane0ar medios de cultivo de composición muy variada y de tres tipos di-erentes en cuanto a consistencia: medios sólidos, semisólidos y líquidos. Este ltimo aspecto es importante a la "ora de la preparación de los mismos. *unque los medios arti-iciales o sint2t sin t2tico icos s se pue pueden den pre prepar parar ar a par parti tirr de sus compon component entes es indivi individua duales les,, se pue pueden den adq adquir uirir  ir  comercialm comer cialmente ente como medi medios os des"i des"idrata dratados dos a los que solam solamente ente "ay que a3adir la cantidad cantidad de agua necesaria. El -abricante -abricante indica la composición, la c caducidad, aducidad, y la cantidad que debe pesarse por cada litro a preparar e incluso como debe esterili+arse. Objetivos concretos de la práctica 1.

$rep $reparar arar medi medios os de cultivo como como soporte y -uente de nutrient nutrientes es para el desarrollo desarrollo de los

microorganismos in vitro. ).

'ane0ar los iinstrumentos nstrumentos de us uso o rutinario, a la ve+ que imprescindibles, imprescindibles, en el laboratori laboratorio o de

microbiología. 4. Hacer un prim primer er acercami acercamiento ento a la manipulación manipulación de microorgan microorganismo ismos. s. *dquir *dquirir ir la idea de la importancia del traba0o en condiciones de esterilidad esterilidad y  y las t2cnicas más comunes para reali+arlo.  

 

ada mesa de traba0o se encargará de la preparación de una cantidad su-iciente de un determinado medio de cultivo, para ser utili+ado, en su momento, por todos los alumnos del grupo de prácticas. Las instrucciones a seguir dependerán del nmero de mesa y el medio de cultivo asignado, pero en todos los casos, los pasos son los siguientes:   1. /isolver los componentes del medio en agua destilada. En muc"os casos se parte de un preparado comercial con todos los componentes des"idratados. (iguiendo las instrucciones del -abricante o del pro-esor, a3adir la cantidad de agua adecuada para conseguir la concentración deseada de los mismos. (i el medio contiene un agente solidi-icante !agaragar# "ay que calentar el preparado "asta la ebullición del mismo agitando de ve+ en cuando, para asegurar una completa disolución del agar !medios sólidos y semisólidos#5 para medios líquidos no es necesario calentar, nicamente se agita la me+cla "asta " asta la completa disolución de la misma. ). Esterili+ar la disolución. 6na ve+ disuelto el medio se debe esterili+ar para evitar el crecimiento de contaminantes. /ependiendo de la -orma en que vaya a utili+arse el medio, el procedimiento será di-erente:

a# 'edios sólidos en placa. 7apar el matra+ con tapón de algodón y cubrir con papel de aluminio. 8

 !1)1 # durante 19)8 minutos. 6na ve+ est2ril repartir en placas Llevar a esterili+ar alautoclave al autoclave !1)1 de $etri est2riles y de0ar en reposo para que solidi-ique. b# 'edios líquidos. 6na ve+ disueltos los componentes repartir en tubos a ra+ón de unos ) ml autoclave.. por tubo, tapar con tapón de aluminio y llevar a esterili+ar en autoclave

 

OBJETIVOS El alumno aprenderá: 1. 2. 3. Este vídeo

a ais aisla larr bac bacte teri rias as po porr sie siemb mbra ra en es estr tría ías s a car carac acte teri riza zarr bact bacter eria ias s por por sus sus co colo loni nias as a defi defini nirr expe experi rime ment ntal alme ment nte e un cul culti tivo vo pur puro o de bac bacte teri rias as de la TV de la l a Universi Uni versidad dad de evilla resume ! explica los contenidos de esta práctica

Introducción En la naturaleza" los microor#anismos se encuentran formando poblaciones mixtas con otros tipos de cultivos os mixtos. in embar#o" el microor#anismos. $os cultivos de estas mezclas se llaman por ello cultiv conocimiento decul lostivos microor#anismos se&nic consi#ue mediante el estudio de dio cepasmolecu aisladas" cultiv os pur puros os %o ax estudio molecular larcultivadas laborator labor atorio io en ax&n icos os'. '. En ocas oc asio ione nes s el estu  con ondu duc ce en a el la caracter cara cterizaci( izaci(n n de los micr microor#a oor#anism nismos" os" a)n en poblac poblaciones iones mixtas. in emba embar#o r#o la iden identific tificaci(n aci(n bacteriana ! la caracterizaci(n completa solo es posible tras el aislamiento de la bacteria ! la obtenci(n de cultivos puros. *or ello el primer problema al estudiar una bacteria es su aislamiento del resto de los microor#anismos presentes %enn una muestra patol(#ica" de a#ua" de suelo" de alimentos" etc.'. Una vez +ue se ,a lo#rado el aislamiento es posible obtener la bacteria de inter&s en cult cultivo ivo pur puro o.

 Aislamiento

Es la separaci(n de un determinado microor#anismo del resto de microor#anismos +ue le acompa-an. El m&todo más usual es la siembra por estría  sobre un medio de cultivo s(lido adecuado dispuesto en una placa de petri. *ara ello se toma una pe+ue-a cantidad de muestra con un asa de platino ! se reparte sobre la superficie del medio de cultivo. obre el medio +uedan separadas e inmovilizadas las c&lulas bacterianas. Tras la célula a viableori incuba inc ubaci( ci(n n en con condic dicion iones es ade adecua cuadas das"" cad cada a célul ori#in #ina a una colonia  vis visible ible res result ultado ado de sucesivas divisiones celulares. ada colonia bacteriana tiene unas características determinadas en cuanto a su forma" borde" elevaci(n" tama-o " consistencia" etc.. $os tipos de bacterias presentes en la muestra ori#inal es visible como tipos diferentes de colonias. / partir de colonias separadas suficientemente es posible obtener un cultivo puro de cada uno de los tipos de bacterias presentes en la muestra ori#inal. El &xito del aislamiento" de la separaci(n sobre el medio de cultivo" depende de la superficie sobre la +ue se ,a distribuido la muestra. Es mu! importante realizar el ma!or n)mero de estrías posible. En las primeras estrías aparecerán colonias confluentes o una masa continua de microor#anismos. En las estrías finales deberán aparecer colonias separadas unas de otras. El aislamiento re+uiere un reducido in(culo de partida. $a sucesiva disminuci(n del tama-o de la poblaci(n sobre el asa %por descar#a sobre el medio de cultiv cu ltivo' o' al rec recorr orrer er el me medio dio de cul cultiv tivo" o" deb debe e ase ase#ur #urar ar +ue fin finalm almen ente te al# al#una unas s c&l c&lula ulas s +ue +ueden den suficientemente suficienteme nte separadas %aisladas unas de otras' o tras' sobre la superficie. Criterios para la diferenciación de colonias  El aspecto de las colonias" su coloraci(n" tama-o" etc. permiten diferenciar diferentes bacterias" aun+ue son propiedades #enerales mu! influenciadas por las condiciones de cultivo" por lo +ue a continuaci(n se realiza una descripci(n mu! #eneral. $as colonias pueden ser opacas" translucidas o transparentes. /l#unas producen pi#mentos fluorescentes cuando se iluminan con luz ultravioleta. 0tras aparecen con superficie pulverulenta" otras son lisas" o ru#osas" o poseen anillos conc&ntricos. En ocasiones el olor es tambi&n característico.

Obtención de cultivos puros e trata de obtener el cultivo de un solo tipo microbiano en un medio de cultivo" por eemplo en un tubo inclinado de a#ar nutritivo. *ara ello" se obtiene una pe+ue-a cantidad de masa bacteriana de una colonia separada en el aislamiento. on ella se inocula un nuevo medio de cultivo ,aciendo estrías mu! untas. $a incubaci(n en condiciones adecuadas proporcionará un cultivo puro. *uede repetirse el proceso con cada tipo de colonia. e obtendrá una colecci(n de cultivos puros" separados" de los microor#anismos +ue coexistían en la muestra ori#inal. Es aconseable ,acer un se#undo aislamiento antes de proceder a la obtenci(n del cultivo puro. i todas las colonias de la se#unda placa resultan id&nticas" puede usarse una de ellas para establecer el cultivo puro. 0btenido el cultivo puro es conveniente comprobar su pureza mediante una tinci(n de ram. ram . $os cultivos puros de microor#anismos son mantenidos en el laboratorio por resiembras %pase de un medio de cultivo a otro' sucesivas. Una de las copias puede ser liofilizada para su conservaci(n.

 

PRÁCTICA No. 2 Métodos de cultivo y aislamient aislamiento o de bacterias Objetivos. ue el alumno cono!ca las di"erentes técnicas de aislamiento en medios de cultivo s#lido $ara la obtenci#n de cultivos $uros de bacterias. ue el estudiante $re$are medios de cultivo de uso %eneral& di"erenciales y selectivos $ara el cultivo de di"erentes es$ecies bacteria bacterianas. nas. Introducci#n 'as bacterias deben ser cultivadas en medios de cultivo de laboratorio $ara caracteri!ar su crecimiento& (acer su identi)caci#n y determinar sus actividades metab#licas. metab#licas. *n medio de cultivo es una soluci#n acuosa de di"eren di"erentes tes com$uestos +ue contiene todos los elementos indis$ensables +ue re+uieren los microor%anismos $ara crecer.

,eneralmente las bacterias son inoculadas o introducidas en medios l-+uidos caldos/ o solidi)cados con a%ar $ara su $ro$a%aci#n y0o conservaci#n& as- como $ara estudiar sus caracter-sticas de crecimiento. 1s im$ortante recordar +ue la inoculaci#n de los microor%anismos en los medios de cultivo& siem$re debern reali!arse en !ona asé$tica cerca del mec(ero o en cam$ana de 3ujo laminar/& condiciones +ue limitan la $resencia de microor%anismos indeseables o contaminantes.

'as técnicas de aislamiento& $ermiten la obtenci#n de microor%anismos a $artir de muestras com$lejas suelo& a%ua& alimentos& etc./ en las +ue (ay una %ran diversidad microbiana& as- como $ara com$robar la $ure!a de los cultivos obtenidos. 'os cultivos $uros estn "ormados $or un solo ti$o de microor%anismo4 y son indis$ensables $ara conocer las caracter-sticas mor"ol#%icas& $ro$iedades de tinci#n& actividad bio+u-mica& $ato%enicidad& sensibilidad a antibi#ticos e identi)caci#n de las es$ecies microbianas.

1l aislamiento de cultivos microbianos $uede reali!arse $or métodos de diluci#n& en medios s#lidos $or estr-a en $laca o en medios l-+uidos. 1n el $rimer caso se considera +ue cada célula bacteriana +ue se se$ara dar ori%en a una $oblaci#n +ue "ormar una colonia caracter-stica& caracter-stica& visible a sim$le vista.

 

  'a limitaci#n $rinci$al $rinci$al de estas técnicas de diluci#n& es +ue no es $rctica $ara el aislamiento a $artir de me!clas donde el microor%anismo de interés se encuentra en $e+ue5as cantidades& donde solamente se obtendrn las bacterias dominantes. Para "avorecer el aislamiento de cultivos de baja intensidad& se a$lican métodos de cultivo es$eciales& en los +ue se utili!an medios +ue contienen nutrientes es$eciales& es$eciales& antibi#ticos& altas concentracio concentraciones nes de sales y0o condiciones de $6& lu! o tem$eratura $ara "avorecer el crecimiento de microor%anismo de interés y se conocen como selectivos o de enri+uecimiento. 1n ocasiones se $ueden a%re%ar a los medios de cultivo otros com$onentes como7 san%re& colorantes& indicadores& etc. Para distin%uir es$ecies bacterianas di"erentes $or la "orma en +ue metaboli!an los sustratos +ue se mani)esta $or cambios en la a$ariencia o modi)caci#n del $6 del medio de cultivo. 1stos medios se conocen como medos di"erenciales y son de %ran utilidad $ara la caracteri!aci#n e identi)caci#n de es$ecies bacterianas. Materiales 8 cajas de Petri con A%ar nutritivo 8 cajas de Petri con A%ar de eosina a!ul de metileno 1M9 8 cajas de Petri con A%ar $a$a:de;trosa < Mec(ero < Asa de siembra < Parrilla de a%itaci#n < Autoclave Procedimiento 1l alumno recolectara muestras $ara ver el ti$o de microor%anismos +ue estan $resentes en estas muestras.

 T  Técnica écnica de estr-a estr-a cru!ada a/ 1n la $arte $osterior y e;terior de la caja& dividirla en cuatro

 

cuadrantes. Tomar una muestra con el asa $reviamente 3ameada y "r-a& inocular la muestra (aciendo =:> estr-as sim$les muy juntas de lado a lado borde el $rimer cuadrante de la caja& cerrar la caja ?i%ura =/. b/ ?lamear el asa de inoculaci#n y (acer %irar la caja de Petri un cuarto de vuelta. Abrir nuevamente la caja y en"riar el asa de siembra tocando la su$er)cie del medio lejos de la !ona de estr-as recién (ec(as. c/ Ro!ar con el asa una ve! la su$er)cie del conjunto ori%inal de estr-as y (acer un se%undo %ru$o de estr-as en el se%undo cuadrante como en el caso anterior. d/ Re$etir el $rocedimiento = y > en el tercer cuadrante y al e"ectuar la siembra en el @ltimo cuadrante& no se deber 3amear el asa de siembra y se (ar una estr-a ms abierta sim$le/. iembra de cajas de Petri con medios di"erenciales y selectivos 9. e acuerdo a sus observaciones identi)+ue las es$ecies $resentes en la muestra $roblema.

 

nitrógeno es  es un  un elemento químico, de nmero atómico  atómico ;, símbolo N y que en condiciones normales -orma El nitrógeno un gas gas  diatómico !nitrógeno !nitrógeno diatómico  diatómico o molecular# que constituye del orden del ;antiguamente  >antiguamente se usó tambi2n Az Az como  como símbolo del nitrógeno.

PRI NCI PI O DELMETODO KJELDAHL HL ElMét ododesar r ol l adoporKj el dahlconst adet r eset apas: 1. Di gest i ón:conver si óndelNi t r ógeno( pr oveni ent edel aspr ot eí nas,porej empl o)eni onamoni o. 2. Dest i l aci ón:separ aci ónporar r ast r econvapordelamoní acoypost er i orsol ubi l i zaci ónenunasol uci ónáci dade concent r aci ónconoci da. 3. Val or aci ón:medi ci óndel acant i daddeáci doneut r al i zadoporelamoní acodi suel t o,l oquei ndi cal acant i daddeNi t r ógeno pr esent eenl amuest r ai ni ci al . Deacuer doalor i gendel amu muest r a,at r avésdeunf act orser el aci onal acant i daddeNi t r ógenoencont r adoconel por cent aj edepr ot eí nasquel oor i gi nar on.

1.DI GESTI ÓN

Lamuest r aaanal i zar, cuyocont eni dodepr ot eí nasesdesconoci do,esat acadaporunamezcl adeAci doSul f úr i coalque sel eañadeuname mezcl adeunasal(Sul f at odePot asi oodeSodi o)cont eni endounapequeñapr opor ci óndeun cat al i zador .Enl aact ual i dad,elmásampl i ament eusadoesSul f at odeCobr e,pornosert óxi coyr esul t ari nocuopar ael medi oamb mbi ent e.

Elagr egadodel asalmezcl adaconelcat al i zadorpr ovocaquel at emper at ur adur ant el adi gest i ónseel eveei ncr ement el a vel oci dadder upt ur adel osenl acesmo mol ecul ar es,f aci l i t andol acompl et aconver si óndelNi t r ógenopr ot ei coeni onAmoni o.

Lat écni caconsi st eent oncesencol ocarl amuest r aenelt uboder eacci ón,añadi reláci doj unt oconl amezcl adel asaly elcat al i zador .Sepr ocedeent oncesai ncr ement arl at emper at ur amedi ant el acal ef acci óndi r ect adelt uboquecont i enea t odal amezcl a,hast aal canzarl os370* C;unavezal canzadaesat emper at ur asel amant i enehast al ogr arl acompl et a di gest i óndel amuest r a.

Ent r el osmo model osexi st ent esenelmer cado,l afir maBUCHIdeSui zapr oveedi gest or esi dent i ficadoscomo momo model osK424 yK435queper mi t enl aoper aci ónsi mul t áneade6o12t ubos,medi ant ecal ef acci ónporr adi aci óni nf r ar r oj al ogr andoun cal ent ami ent or ápi dohast aal canzarl at emper at ur amáxi madeoper aci ón.

 

Enelcasodesernecesar i al adi gest i ónsi mul t áneademásmu muest r as,sepodr áopt arporelmodel oK370,que cal ef acci onamedi ant ebl ockdeAl umi mi ni ohast a20t ubos. Est emo model oper mi t eademásl apr ogr amaci óndelpr ocesodecal ef acci ónacont r at ur no,l oqueper mi t i r í acont arconl as muest r asyadi ger i dasenelmome ment odecomenzarl aj or nadal abor al .

Esi mpor t ant edest acarqueenest aet apasehacenecesar i oel i mi narl osgasessul f ur osospr oveni ent esdel adi gest i ónde cadaunodel ost ubos. Par ael l osecr eaunal evecor r i ent edeaspi r aci ónmedi ant evací o,col ect andoysol ubi l i zandol osgasesenunasol uci ón al cal i na,queevi t al acont ami mi naci óndel aat mósf er aenelámb mbi t ol abor al .Tambi énaquípodemo mosr ecur r i raBUCHI ,que nosof r eceunasol uci ónpr áct i ca,medi ant eeldi sol ut ordegasesmo model oB414,queel i mi nat odaposi bl econt ami naci ón.

Elusodel ost ubosdedi gest i ónBUCHIt i enecomovent aj as:sugr uesapar eddevi dr i or esi st ent ealt r abaj oconáci doy ál cal i sconcent r adosycal i ent es,poseeunaj unt aher mét i caenl abocaqueevi t ar ál apér di dadegasesyelangost ami ent o quet i enenevi t asal pi cadur asconl aconsi gui ent epér di dademuest r ayr eact i vos;sudi áme met r ode48mm evi t aquese f or menal t ascol umn mnasdeespuma,si endosuvol ume mende300mladecuadopar al aoper aci ónconmuest r asdebaj a densi dadygr anvol ume men.

Par aunamuest r ade1gr amo mo,esnecesar i oañadi r20mldeÁci doSul f úr i co,9, 500gr amo mosdeSul f at odePot asi oy0, 500 gr amo mosdeSul f at odeCobr e.

Par aest apr opor ci ónl aoper aci ónsepr ol ongadur ant e90mi nut osohast a30mi nut osl uegodequel amezcl adi ger i da hayat oma madounacol or aci ónver deazul ada.

Elcont r oldel at emper at ur aesmu muyi mpor t ant e,yaqueunat emper at ur ai nf er i oral aci t adapr ovocaunadi gest i ón i ncompl et ami ent r asqueunat emp mper at ur amayorpr ovocar ápér di dadecomp mpuest osni t r ogenadosenl acor r i ent edegases quesal endel ost ubos;enamboscasos,l osr esul t adosfinal esdar ánunpor cent aj edepr ot eí nasi nf er i oralr eal .

2.DESTI LACI ON.

Dur ant eest aet apasepr ocedeaef ect uarunar eacci óndedespl azami mi ent of or mandoAmoní acol i br eypost er i or ment ese pr ovocaunaar r ast r econvaporpar apoderr ecoger l ome medi ant eunasol ubi l i zaci ónenunme medi oáci doyval or ar l oenl aet apa s i gui ent e.

 

Luegodelenf r i ami ent odelt ubosal i dodel adi gest i ón,sedi l uyeconaguadei oni zadayseañadeunasol uci óndeHi dr óxi do deSodi oconelpr opósi t odel i ber areli onAmoni opr esent e,convi r t i éndol oenAmoní aco,elquedeber ár ecoger sepor bur buj eodelvapordear r ast r eenunasol uci ónáci dadeconcent r aci ónconoci da.

Exi st endosposi bi l i dadesdemedi oáci dor ecept or:sol uci óndeÁci doBór i coal2% ( oal4%) %)ounasol uci ónval or adade Áci dof uer t emi ner al(Cl or hí dr i cooSul f úr i co) . Enl ama mayor í adel oscasosseopt aporelBór i co,yaqueesme menosr i esgosoelmanej odelmi smo mo,t amp mpocohayr i esgode pér di dasdeAmoní acoycor r espondeal ama mayor í adel osmét odosofici al esdeanál i si s.

BUCHIof r ecedi st i nt osmo model osdedest i l ador es:semi aut omá mát i cos,comol osmo model osK350yK355,enqueelañadi dodel aguayáci dopuedehacer sedemaner ama manualome medi ant ebomb mbadedi af r agma ma,ocomo moelmodel oB324,endondel a dosi ficaci ónsehaceexcl usi vame ment eme medi ant ebomb mbasdedi af r agma,evi t andol ai ncer t i dumbr epr ovocadaporeloper ado enl ame medi ci óndevol úme menesdel í qui dos.

Unavezi ni ci adal adest i l aci ón,l uegode3a5mi nut ossecompl et aelar r ast r eydi sol uci óndelAmoní aco,debi endo pr oceder seal aval or aci ónmedi ant eunat i t ul aci ón.

3.VALORACI ÓN.

Enest aet apasecuant i fical acant i daddeAmoni of or mado,l oqueper mi t emedi rl acant i daddeNi t r ógenopr esent eenl a muest r aor i gi nalyqueasuvez,conoci endoelori gendel amuest r ayat r avésdeunf act orpr omedi o,est abl ecerel por cent aj edepr ot eí nasdelquesepar t i ó.

Lar eacci óndel aval or aci ón,r espondea: ( Ver3r aFór mul a)

Par aef ect uarl at i t ul aci ón,aúncuandoexi st el aposi bi l i daddel aval or aci ónvi sualmedi ant eelusodei ndi cador es áci do/ baseyl anor mat i vanoest abl ecel aobl i gaci óndesuuso,esmu muyr ecomendabl el aval or aci ónpot enci omét r i ca ut i l i zandount i t ul adoraut omát i co,quedet ect ar áelpunt ofinaldeacuer doalpHfinalal canzado. Ent r el asvent aj asdel aval or aci ónpot enci omét r i ca,l adet ecci óndelpunt ofinalesmu muypr eci sa,per mi t i endo

 

i ndependi zar sedel aest i maci ónvi sualdeloper ador ,di smi mi nuyendol adi sper si óndel osr esul t adosyl ai ncer t i dumbr eque pr ovocar í andi st i nt osoper ador esquedebi er anfij arelpunt ofinalmedi ant eelusodei ndi cador esáci do/ base.

Alt enereneli ni ci odel aval or aci ónsól ounadi sol uci óndeáci dobór i coenagua,supH es4, 65.Unavezfinal i zadal a et apadel aDest i l aci ón,elAmoní acosol ubi l i zadopr ovocaqueelpH seamayor ,porl oquesedeber ával or ardosi ficando unáci dodeconcent r aci ónconoci da,porej empl oAci doSul f úr i co0. 5N,hast aal canzarnuevament eelval ori ni ci aldepH 4,65.

BUCHIof r ecel aposi bi l i daddeoper arconelmodel oB370,queesunDESTI LADORconunTI TUL ULADORAUTOM OMATI CO i ncor por ado,porl oqueseuni ficanl aset apasdeDest i l aci ónyVal or aci ón,pr ogr amá mándol opar aqueef ect úeamb mbas oper aci onesdemaner acomb mbi nadayconsecut i va,br i ndandodemaner aaut omá mát i caelr esul t adofinal .

Encasodesernecesar i ounmu muest r eadordebi doal apr esenci adegr ancant i daddemu muest r as,sel epuedeadosarun por t amu muest r asi dent i ficadoporBUCHIcomoB371,queper mi t i r áaut oma mat i zarcompl et ame ment el aset apasdedest i l aci óny val or aci ónhast a20mu muest r as.

Ot r aposi bi l i dadsenci l l asepr esent apar aaquel l osquequi er anopt arporunaval or aci ónmedi ant eunt i t ul adoraut omát i co, eselusodelnuevomo model oDL15pr esent adoporMETTLERpocot i emp mpoat r ás;r obust o,f áci ldemanej arypr epar ado par aval or aci onespot enci omét r i casapunt ofinal ,per mi t i r áobt enerr esul t adospr eci sosqueahor r ar ánt i empoyer r or esen l osr esul t adosfinal esdepr ot eí nasai nf or mar ,conelconsi gui ent eahor r odedi ner o.

CALCULOS %P=(V-VB) .1, 4007.N.100/ m

donde: %P:por cent aj edepr ot eí nasenl amuest r a, V:vol umendeáci doconsumi dodur ant el aval or aci óndel amu muest r a,( mi l i l i t r os)

VB:vol umendeáci doconsumi dodur ant el aval or aci óndelbl anco,( mi l i l i t r os) N:Nor mal i daddeláci dot i t ul ant e M:masadel amu muest r a( gr amo mos)

 

F:Fact ordepr ot eí na,acor dealor i gendel amuest r agel at i na( 5, 55)l eche,( 6, 30) , Car nebovi na( 6, 25) ,pescado( 6, 25) ,acei t eveget al( 5, 40) ,maí z( 6, 25)

Porl aconsi st enci adel osr esul t adosobt eni dosdur ant el os120añost r anscur r i dosdesdesudesar r ol l oi ni ci alporKj el dahl , esquesel aconsi der aal t ame ment er ecomendabl e,at r evi éndonosaaugur arsuusopormuchot i emp mpomásenl ai ndust r i a naci ona

 

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