Precipitacion por Metales Pesados
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precipitacion de proteinas...
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Precipitación Precipitación por formación de sales Las proteínas precipitan de sus soluciones por algunos tipos de metales pesados como cloruro de mercurio, nitrato de plata, sulfato de cobre, etc. El ion del metal pesado muy probablemente se combinan con la forma aniónica de la proteína. La proteína en el lado alcalino de su punto isoeléctrico, existe como ion negativo, y asi, al combinarse con el ion del metal o catión formara lo que podríamos llamar “proteinatos, por e!emplo" proteinato de mercurio, proteinato de plata, etc. En cambio, los reactivos llamados “reactivos alcaloidales, alcaloidales, que son ciertos acidos como el pícrico, el fosfotungsico, el t#nnico, el metafosfórico, etc, precipitan la proteína al combinarse el radical acido del reactivo, con la forma cationica de la proteína que predomina en el lado acido de su punto isoeléctrico. $e forma entonces un precipitado que podríamos llamar, por e!emplo" tannato de proteína, fostotungstato de proteína, tricloroacetato de proteína. La mayoría de las globulinas animales se precipitan con sulfato de amino a %&' se saturación. Las alb(minas se precipitan precipitan con soluciones de sulfato de amonio al )&&' de saturación. Esto nos da la oportunidad de separar las alb(minas de las globulinas. *e +ec+o la precipitación por salación es aun m#s na, ya que dentro del grupo de las globulinas se puede llegar a una separación por fraccionamiento de proteínas, son solo variar la concentración de sulfato de amonio. Precipitaciónisoeléctrica -na manera muy sencilla sen cilla de precipitar a las proteínas es a!ustar el p se su solución a su punto isoeléctrico. $e forma entonces un precipitado reversible, reversible, que se disolver# tanto de lado alcalino como del lado #cido de punto isoeléctrico. En el punto isoeléctrico de la proteína, la carga neta es cero, favoreciéndose entonces a la precipitación, precipitación, por ser ese el punto de menor solubilidad en el agua.
Por otro lado la precipitación con metales nos dio positivos con las sales de mercurio, plata y plomo pues al haber iones positivos y negativos que interactúen con las moléculas de agua, se pierde la interacción proteína-agua, por lo que la proteína precipita, sin embargo las sales de bario y sodio no precipitaron a la proteína estas las solubilizaron, pues se presentó el fenómeno de “salting in ya que ahora hay una interacción entre la proteína y los iones de la sal, la interacción con el agua es mas fuerte! "n la determinación del punto isoeléctrico de la insulina, solo se observó precipitación en el tubo #, como ya sabemos el punto isoeléctrico es el p$ en el cual la carga neta es % y adem&s a este p$ la proteína tiene menor solubilidad por lo que precipita, dicho lo anterior, en el tubo # hay un p$ de '!#(), por lo que este ser& el punto isoeléctrico de la insulina, pues a este p$ precipito!
En la precipitación de las proteínas por metales pesados sólo se reali/ó el experimento con laalb(mina ya que teóricamente para las dem#s proteínas también debería de dar positivo ya quelas proteínas cuando se encuentran en solución a p superiores a su punto isoeléctrico son capacesde reaccionar con diferentes metales pesadosformando los correspondientes proteinadosinsolubles, como se observó en la peptonaformando así el peptonato de erro
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