Práctica No. 4.- Observación de La Cromatina Sexual. Natalio.

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERRERO UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS Av. Lázaro Cárdenas S/N. Ciudad Universitaria. Chilpancingo, Gro. C.P. 39090. Tel 01 747 47 2 55 03 y 01 747 47 1 93 10 ext: 4526

PLAN EDUCATIVO: QUÍMICO BIÓLOGO PARASITÓLOGO Genética Dr. Napoleón Navarro Tito Reporte de práctica No. 3

Observación de la cromatina sexual

Integrantes: Díaz Santos Julio Cesar Gatica Bello José Hernández Catalán Manuel Meza Sánchez Rafael Vázquez Cruz Natalio Alvares Morales Alfonso

Grupo: 604 turno vespertino

Chilpancingo, Guerrero., a 05 de Junio del año 2015 Observación de la cromatina sexual Página 1 de 8

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Unidad de aprendizaje: Genética, Plan 2012

Introducción: El sexo de un individuo está determinado genéticamente y depende directamente del componente cromosómico, de los cromosomas llamados sexuales. En el ser humano el sexo femenino está dado por el complemento 46, XX y el masculino por 46, XY. En los individuos del sexo femenino uno de los cromosomas X se inactiva para compensar la cantidad de genes en relación al sexo masculino. Este cromosoma inactivo puede verse en algunas células en interfase como una masa de heterocromatina adherida a la membrana nuclear y a la que se ha denominado corpúsculo de Barr o cromatina sexual. Para su observación se utilizan principalmente células de descamación de la mucosa bucal. En los leucocitos polimorfonucleares este cromosoma inactivo se observa en forma de palillo de tambor que emerge de uno de los lóbulos del núcleo. Esta observación se hace en frotis de sangre periférica. En individuos que presentan alteraciones en el número de cromosomas X, la cantidad presente de cromatinas X estará en relación con este número. Existen individuos con fenotipo femenino sin corpúsculo de Barr en sus células (síndrome de Turner, 45, X0) e individuos con fenotipo masculino y con cromatina sexual (síndrome de Klinefelter, 47, XXY) Estos individuos presentan aberraciones numéricas en los cromosomas sexuales. Objetivo: Al concluir esta práctica, el alumno:  Conocerá las diferencias existentes entre células somáticas masculinas y femeninas.  Identificará corpúsculos de Barr y palillos de tambor en células femeninas. Material         

Abatelenguas Lanceta Alcohol Algodón Portaobjetos Cubreobjetos Acetorceína al 2% Colorante de Wright Agua desionizada

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Equipo: 

Microscopio óptico

Técnica: Observación de corpúsculos de Barr en epitelio bucal. 1. Enjuagarse la boca repetidas veces con agua y raspar la mucosa interna de la mejilla con un abatelenguas. Eliminar el primer raspado con un algodón y repetir la operación. 2. Hacer un frotis del segundo raspado sobre un portaobjetos y dejarlo secar al aire. Añadir una o dos gotas de acetocarmín o acetoorceína. Colocar un cubreobjetos y eliminar el exceso de colorante. 3. Observar a 10X hasta encontrar un campo donde se localicen células. Observar después a inmersión para identificar el corpúsculo de Barr el cual se aprecia como una mancha oscura adherida a la membrana nuclear, y que no desaparece al mover el tornillo micrométrico del microscopio.

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En la imagen se observa claramente los corpúsculos de BAAR los cuales son la expresión del cromosoma inactivo X de la mujer (ya que como ya sabemos la mujer tiene 2 cromosomas sexuales XX uno activo y uno inactivo), mientras que en el hombre no se observó ninguno ya que este sujeto no presenta cromosoma X inactivo y por lo tanto solo contiene sus respectivos cromosoma sexuales XY. En las células epiteliales de la mucosa bucal, el corpúsculo de Barr esta adherido en la membrana interna del núcleo; en las células de la mujer. Ambas muestras fueron observadas con el objetivo 100x.

Observación de palillos de tambor en leucocitos polimorfonucleares.

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1. Para obtener una muestra adecuada de sangre capilar es recomendable calentar la yema de los dedos con fricción ligera, limpiar con alcohol, dejar secar y picar una sola vez con una lanceta firme y rápidamente. No presionar el dedo para sacar la sangre, ésta debe fluir libremente. 2. Eliminar la primera gota y depositar la siguiente en un portaobjetos y extenderla sobre el mismo con ayuda de otro portaobjetos (hacer un frotis por extensión). 3. Secar al aire la preparación y añadir una o dos gotas de colorante de Wright. Teñir durante cinco minutos sin dejar secar el colorante y eliminar después de éste. Lavar con agua y dejar secar al aire. 4. Observar al microscopio primero con el objetivo de 10X para localizar a los leucocitos polimorfonucleares y después a inmersión para identificar a los palillos de tambor.

Se observó el corpúsculo de Barr en forma de palillos de tambor en los núcleos polimorfonucleares de los leucocitos de la sangre de la mujer (humano). En las células masculinas no hubo presencia del corpúsculo de Barr. Ambas muestras fueron observadas con el objetivo 100x

DISCUSIÓN

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En base a los resultados obtenidos. Se analizaron dos muestras de la mucosa bucal, un hombre y una mujer. Se observaron tanto en un hombre como en 2 mujeres la presencia o ausencia de los corpúsculos de Barr en los cuales en el hombre como normalmente debe ser no se observaron estos corpúsculos debido a que no posee el cromosoma “X” inactivo o en su defecto no posee un cromosoma X adicional por lo que se podría decir que es un sujeto XY normal ya que si poseyera un cromosoma X adicional (si se hubiesen observado en el sujeto corpúsculos de barr), presentaría el síndrome de Klinefelter (47 XXY) lo cual indica a individuos con fenotipo masculino y con cromatina "X, pero en este caso no fue así. En las mujeres si se observaron estos corpúsculos lo cual expresa la inactivación de uno de sus cromosomas X ya que la cromatina X o corpúsculo de Baar es un cromosoma inactivo que puede verse en algunas células en

interfase

como

una

masa

de

heterocromatina

adherida

a

la

membrana nuclear y se observa como un pequeño punto adicional. Además en la muestra de sangre periférica de una mujer se observó el palillo de tambor sin embargo en la muestra masculina no lo presento. CONCLUSIÓN Al término de la práctica se logró identificar los corpúsculos de Barr en las células de la mucosa bucal y el palillo de tambor en leucocitos polimorfonúcleares, ambas muestras fueron de una mujer. Sin embargo es las muestras del hombre no hubo presencia. El corpúsculo de Barr es el cromosomas X inactivo que se condensa y se observa apartado del resto del material genético, y se tiñe más fuertemente por que esta más condensado que el resto del material genético. Se obtuvieron sin problemas las muestras de sangre y epitelio bucal que fueron usadas para la práctica. Tanto las laminillas de epitelio bucal como las de frotis sanguíneo se prepararon exitosamente.

Cuestionario: Página 6 de 8

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Explique en qué consiste la Hipótesis de Lyon.  1.- En las células somáticas de los mamíferos hembra, sólo un cromosoma X es activo para la transcripción. El otro cromosoma X es heterocromático e inactivo, y aparece en células en interfase como cromatina sexual: el corpúsculo de Barr.  2.- La inactivación se produce al principio de la vida embrionaria, comienza poco después de la fecundación, pero no se completa en la masa celular interna, que formará el embrión, hasta alrededor del final de la primera semana de desarrollo. En esa etapa del desarrollo se está produciendo la implantación placentaria, y la diferenciación del trofoblasto en citotrofoblasto y sin citiotrofoblasto, mientras que el epiblasto, que quizá sólo contiene unas 100 células, está preparado para iniciar la gastrulación y la formación del embrión propiamentedicho.  3.- En cualquier célula somática femenina, el X inactivo puede ser el paterno o el materno (Xp o Xm). Es completamente aleatorio cuál del par se inactiva. No obstante, cuando un cromosoma X se ha inactivado en una célula, todas las células descendientes de ella tienen el mismo X inactivo. En otras palabras, la inactivación es determinada al azar, pero una vez se ha producido la decisión es permanente. ¿Cuál es la importancia de determinar el número de cromatinas sexuales en un individuo? Las cromatinas sexuales son masas condensadas de cromatina, se encuentran en el núcleo de las células somáticas de las hembras debido a un cromosoma X inactivo. En base al número de cromatinas sexuales, nos indicará que sujeto es, si femenino o masculino, además nos permite identificar síndromes tales como: el síndrome de Klinefelter, Síndrome de Paraneoplásicos, Síndrome de Stickler entre otros. En qué otro tipo de células pueden identificarse los corpúsculos de Barr?  En células nerviosas.  Células epiteliales  Leucocitos polimorfonuclares Bibliografía: Página 7 de 8

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 Nogués R. M. Sexo, Cerebro y Género: Diferencias y Horizonte deIgualdad. (2003). Fundación Vidal i Barraquer Paidós. España. p.51  Olivia Virgili Rafael. Genética Médica. (2003).Universidad de Barcelona. 3°ed. España. P.161  Kumar V., Abbas A. K., Fausto N. Patología Estructural y Funcional. (2005).Elsevier. 7° ed. España. p. 181.  Eynard A., Valentich M., Rovasio R. (2000)Histología y Embriología del ser Humano. Bases celulares y Moleculares. Ed. Médica Panamericana. 4° ed. Argentina P. 577

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