Practica No 1
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PRÁCTICA No 1 TEMA: HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA Y ALMIDÓN OBJETIVOS.Objetivo General. Hidrolizar la sacarosa y el almidón Objetivos Específicos.1. Hidrolizar la sacarosa utilizando ácido clorhídrico concentrado 2. Hidrolizar el almidón utilizando ácido clorhídrico concentrado 3. Verificar que se ha realizado la hidrólisis tanto de la sacarosa como del almidón por medio de pruebas específicas TEORÍA CARBOHIDRATOS Los carbohidratos también llamados hidratos de carbono, azúcares o glúcidos, son compuestos complejos formados por C, H y O. Son los almacenadores energéticos de los seres vivos. Por eso se justifica su abundancia en la materia viva, principalmente en las plantas, pues ellas son las que elaboran la mayoría de los hidratos de carbono durante el proceso de fotosíntesis: almidones, glucosa, celulosa (pared celular). Los carbohidratos tienen como fórmula general CnH2nOn y se los define como derivados aldehídicos y cetónicos de alcoholes polihidroxilados. LA SACAROSA FUNDAMENTO.La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling o con el reactivo de Benedict es negativa. Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrólisis se realiza con el licor de Fehling o con el reactivo de Benedict y, si el resultado es positivo, aparecerá un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrólisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis parcial de la sacarosa. POLISACÁRIDOS La hidrólisis ácida de los polisacáridos libera los monosacáridos constituyentes que pueden ser luego ensayados. El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reacción química sino a la adsorción o fijación de yodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Como reactivo se usa una solución denominada
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Ingeniería en Biotecnología Ambiental Dra. M. Sc. Mayra J. Espinoza M.
lugol que contiene yodo y yoduro de potasio. Como los polisacáridos no tienen poder reductor, la reacción de Fehling da negativa. MATERIALES.-
REACTIVOS
- Gradilla - Tubos de ensayo (5) - Vaso de precipitación de 500 mL - Reverbero - Pipeta de 10 mL - Pinza para tubos - Espàtula
- Reactivo de Benedict - Ácido clorhídrico - Carbonato de sodio - Solución de sacarosa - Solución de almidón - Reactivo de Lugol
GRÁFICOS Hidrólisis de la Sacarosa.-
Prueba de yodo para el almidón
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Hidrólisis del almidón
PROCEDIMIENTO.HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA 1. Realice la prueba de Benedict con la solución de sacarosa. 2. A 5 mL de una solución de sacarosa se agrega 5 gotas de HCl concentrado, se calienta durante 5 minutos en un baño de agua hirviendo, se enfría y se agrega carbonato de sodio (sólido), hasta cuando no se produzca más efervescencia. Con esta solución hidrolizada se realiza la prueba de Benedict. Observe y anote los resultados. Prueba de Benedict.- Se agrega 5 gotas de la solución problema a 2 mL del reactivo de Benedict, se mezcla bien, se coloca en un baño de agua hirviente por 5 minutos. Se observa el precipitado de color ladrillo, en caso de existir la presencia de un azúcar reductor. HIDRÓLISIS DE POLISACÁRIDOS 1. Se prepara una solución de almidón. 2. Realice la prueba de Benedict con la solución de almidón. 3. Se coloca en un tubo de ensayo 10 mL de solución de almidón, se añade 10 gotas de HCl concentrado y hierva cuidadosamente. Con una pipeta se remueve unas gotas de la solución cada cinco minutos y se mezcla con una gota de la solución de lugol en una baldosa blanca. Al mismo tiempo se retira 8 gotas de la solución y se coloca en un tubo de ensayo y se neutraliza con carbonato de sodio (sólido) y se agrega 2 mL de la solución de Benedict. Continúe sacando muestras durante 10 minutos, luego se coloca los tubos que contiene la solución de Benedict en un baño de agua hirviendo durante 3 minutos y se deja enfriar. Explique los resultados.
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REACCIONES.Hidrólisis de la sacarosa.-
Hidrólisis del almidón.-
Hidrólisis del almidón CH2OH H
OH OH H
H
H
OH
H
OH OH H
OH OH H
O
O
OH
CH2OH
CH2OH
OH H
H
OH
n
CH2OH
n
H
OH OH H
OH
OH
H
OH OH
D - Glucosa n α – D--Glucopiranosa
RESULTADOS.-
Sustancias Solución de sacarosa Solución de almidón Solución hidrolizada de sacarosa Solución hidrolizada de almidón
Prueba de Benedict
+ = Reacción positiva - = Reacción negativa CUESTIONARIO.1. 2. 3.
Realice la reacción de hidrólisis de la sacarosa. ¿Cuál es el producto resultante? Realice la reacción de hidrólisis del almidón Explique la reacción del almidón con el yodo
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