PRÁCTICA mitosis

2013 MITOSIS: INDICE DE FASES

GONDRA RAMOS, MANUEL TEJEDA LAVADO, CINTHIA LABORATORIO BIOLOGIA 13/11/2013

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13 de noviembre de 2013

PRÁCTICA N°8 MITOSIS: Índice de fases

I.- INTRODUCCION El ciclo celular es un proceso que consiste c onsiste en la replicación de material genético y formación de células hijas. Compromete dos etapas: La primera llamada interfase, donde no ocurre división celular propiamente dicha y la segunda de división celular. Dependiendo del tipo de células donde se lleve a cabo, c abo, la división celular toma el nombre de mitosis (si ocurre en células somáticas) o meiosis (si ocurre en células germinales).

La mitosis es un proceso exacto que permite controlar la transmisión de los rasgos de la herencia de un núcleo a otro durante la división celular. Es un mecanismo que genera nuevas células y reemplaza las células dañadas en los organismos multicelulares. multicelulares. La mitosis implica cuatro etapas:

Profase, Metafase, Anafase y Telofase. En las dos primeras ocurre la condensación y ordenamiento de los cromosomas y en las dos últimas se lleva a cabo la distribución de los cromosomas. El resultado final son dos células hijas diploides (2n).

II.-OBJETIVO Reconocer las distintas fases del ciclo celular en células meristemáticas de la raíz de Allium cepa “cebolla”. En este sistema, la población celular está en equilibrio dinámico y los cromosomas son relativamente grandes. Las células presentan un número diploide 2n = 16.

III.- FUNDAMENTO TEÓRICO: La mitosis es el proceso clave de la división celular. En ella, el material genético previamente duplicado se organiza en cromosomas y se reparte equitativamente a las dos células hijas en formación. La raíz de la cebolla es un buen material para observar este proceso, puesto que en el meristemo apical las células se dividen a gran velocidad, lo que aumenta la probabilidad de detectar células en mitosis. Los cromosomas, como la mayoría de los componentes celulares, son invisibles invisibles al

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microscopio si no les aplicamos una tinción específica. La orceína, colorante morado que usaremos en este caso, está compuesta en realidad de dos componentes, que se añaden en momentos diferentes. La orceína A reblandece las membranas celulares y la orceína B completa el proceso de tinción del material cromosómico al adherirse a estas estructuras.

MATERIALES

LA CEBOLLA  Allium cepa, o cebolla, es una planta herbácea bienal (que vive 2 años) de la familia de las amarilidáceas . la cebolla presenta un sistema radicular(proviene de raíz) formado por numerosas raicillas, de color blanquecino, poco profundas, que salen a partir del disco caulinar.

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MARCADOR

EQUIPO DE DISECCION

GANCHO DE MADERA

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MECHERO DE ALCOHOL

ORCEÍNA ACÉTICA

LAMINILLAS

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PIPETA

HOJA DE BISTURI

GRADILLA

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LUNAS DE RELOJ

ACEITE DE INMERSION PROCEDIMIENTO Con 5 días de anticipación a la práctica preparar el cultivo de cebolla de la siguiente manera: En un vaso con agua colocar una cebolla mediana de tal manera que haga contacto la parte terminal de la cebolla con el agua y dejar en lugar semioscuro. El agua del envase debe ser cambiada cada 24 horas.

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Preparación de la muestra:

- Disponer de gran número de raíces de cebolla, haciendo cortes de la parte terminal (aproximadamente de 0.5 cm) y depositar en una luna de reloj.

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Fig.02 - Colorear con orceína acética por 10 minutos.

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- Luego calentar la muestra hasta que emanen vapores blanquecinos por 2 veces consecutivas con intervalos de enfriamiento. Evitar que la muestra se seque.

- Trasladar las raíces a diferentes portaobjetos, separar solo el ápice (parte terminal de la raíz) y agregar una gota de orceína y cubrir con el cubreobjeto.

FIG.5 - Apretar la muestra suavemente a fin de esparcir la muestra de forma homogénea.

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FIG 06

FIG.07 - Secar el exceso de colorante con papel filtro y llevar al microscopio para su observación a diferentes aumentos.

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IV. RESULTADOS Durante la práctica, donde estudiamos células en proceso de mitosis en la raíz de la cebolla hubo dificultades porque dejamos expuesto demasiado tiempo al calor (se quemo) la primera muestra se perdió encontramos todas las fases de replicación anafase, telofase, metafase, profase y diacinesis logrando ver las diferentes formas en la que el núcleo y sus cromosomas se ven en este tipo de proceso celular.

AL MICROSCOPIO ANAFASE IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 01

ANAFASE Mientras se ha ido formando el huso acromático, los cromosomas se han dividido en dos mitades o cromátidas, las dos cromátidas se separan, arrastradas por los filamentos tractores del huso acromático y se dirigen a los dos polos de la célula, convertidos ya en cromosomas hijos.

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TELOFASE IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 02

TELOFASE

Los cromosomas se sitúan en cada polo, las fibras del huso se dispersan por el citoplasma, se inicia la formación de las envolturas nucleares que rodearán a los dos núcleos hijos. Los cromosomas se tornan difusos, pues se empiezan a desenrollar. Aparece un nucleolo en cada polo, se inicia la citocinesis (división del citoplasma por la mitad), se forman dos células hijas.

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METAFASE

En etapa de metafase cada cromosoma se une a dos fibras del huso, provenientes cada una de un polo, y se alinean en el plano ecuatorial, es decir, en el centro de la célula IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 03

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PROFASE La célula parece más esférica y el citoplasma más viscoso. Al comienzo de la profase los cordones de cromatina se enrollan lentamente y se condensan, aparecen los cromosomas. Durante la profase los pares de centríolos empiezan a alejarse el uno del otro, y a medida que éstos se separan aparecen entre ambos pares de centríolos las fibras del huso acromático, consistentes en microtúbulos y otras proteínas. Los nucléolos dejan de ser visibles. La envoltura nuclear se disgrega. Al terminar la profase, los cromosomas se han condensado por completo, los pares de centríolos están en extremos opuestos de la célula. El huso se ha formado por completo.

IMAGEN 04

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS: 

En la mitosis, se llegaban a distinguir un poco los cromosomas tras el proceso de tinción que llevaron a cabo, posteriormente fijando con carmín acético el portaobjetos debido a que se observaban claramente todas las fases de la mitosis.

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Como se describió en los resultados y ya que se pusieron las observaciones e imágenes en orden del ciclo celular se puede observar cómo estas células se encontraban en continua división para su replicación o división celular, cuya finalidad como se observó en las imágenes es el dar origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas.

CONCLUSIÓN 

Durante esta práctica, se estudió e identificaron los principales cambios morfológicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en células meristématicas de raíces de cebolla Allium cepa (cebolla), por su simplicidad de manejo y el gran tamaño de sus células.

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La preparación presentó el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el microscopio. Se observaron células en distintas fases o estados de división celular. Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por el carmín acético en color rosado.

SUGERENCIAS 

Se recomienda realizar bien el procedimiento de tinción ya que es muy importante para lograr observar claramente las diversas fases de la mitosis.

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También se sugiere tener cuidado en el momento de presionar el cubre objetos,  ya que este se puede romper; o en todo caso podemos estropear nuestra muestra de raíz de cebolla

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Usar mascarilla en el momento de realizar la coloración, ya que el acido acético emite olores fuertes.

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Observar de cerca el ciclo completo de la división celular nos permitió explicarnos y corroborar cómo sucede el milagro natural que hace que de una célula se originen otras células. Nos permitió apreciar las diferencias entre el proceso de mitosis en las células somáticas y meiosis en las células germinativas. Todos los seres vivos vivimos en un proceso interno y constante de transformación y regeneración celular, del que no somos testigos ni muy conscientes. Este maravilloso proceso de la naturaleza es lo que nos mantiene vivos y con energía suficiente para dejar nuestra propia huella sobre el planeta.

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CUESTIONARIO 1) ¿Están las células repartidas en forma homogénea en el preparado que usted ha realizado? Explique. Sí, para ello se apretó ligeramente el cubreobjetos a fin de esparcir el contenido de la muestra de forma homogénea.

2) ¿Por qué es esencial que cada célula resultante de la mitosis reciba exactamente la misma cantidad de material nuclear? Ya que la célula madre duplica su material genético en la interfase como resultado de esto la célula queda con mayor número de cromosomas lista para la etapa de la mitosis en la cual la célula madre se divide por medio de la profase metafase anafase y telofase que permite que la célula logre dividirse generando así dos células hijas de exactamente igual número de cromosomas y tamaño.

3) ¿Por qué la mitosis se describe como un proceso de igual transmisión de material nuclear? Explique mediante un esquema utilizando como modelo una célula animal con número diploide 2n=4. Considerar que el par I es metacéntrico y el par II es telocéntrico. Además enfatizar los cambios en: cantidad de ADN, cantidad de cromosomas y cantidad de cromátides hermanas y homologas. 4) ¿Qué técnicas celulares se emplean para la observación del huso acromático y sus cambios durante la mitosis? ¿Qué drogas emplearía para evitar su formación o acelerar su despolimerización? Explique. Drogas que detienen o inhiben la división celular. La colchicina  es un fármaco antimitótico que detiene o inhibe la división celular en metafase o en anafase. Es un compuesto evita la distribución de las cromátidas de un cromosoma durante la mitosis, provocando la poliploidía de la célula filial, ya que aunque no haya separación, sí hubo duplicación previa del material genético. Su efecto se debe a su acción sobre las proteínas citoesqueléticas del huso mitótico denominadas tubulinas. •

Desorganizarse el huso, los cinetocoros de las cromátidas no tienen donde unirse y traccionar, lo cual ocasiona que los cromosomas no se distribuyan normalmente durante la división celular. De este modo, en presencia de colchicina la división celular se interrumpe o bien da origen a células que son inviables debido a su carga cromosómica anómala. FACULTAD DE MEDICINA

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Nocodazol es un anti- neoplásica agente que ejerce su efecto en las células al interferir con la polimerización de microtúbulos. Los microtúbulos son un tipo de fibra que constituye el citoesqueleto, y la red de microtúbulos dinámica tiene varias funciones importantes en la célula, incluyendo el transporte vesicular, formando el huso mitótico y en la citocinesis. •

Varios fármacos, incluyendo vincristina y colcemida son similares a nocodazol en que interfieren con la polimerización de microtúbulos.

5) ¿Qué es el índice interfásico y que es el índice mitótico? Índice mitótico: Número de células por unidad (normalmente 1.000) que sufren mitosis durante un determinado periodo de tiempo. El cociente se utiliza principalmente como estimación de la velocidad del crecimiento tisular.

Índice interfásico: Si preparamos adecuadamente una muestra de tejido y observamos detenidamente a través del microscopio veremos que algunas células están en proceso de mitosis y otras células están en proceso de interface. Al sacar el porcentaje de las células en mitosis y el de las células en interface obtendremos el índice interfásico.

6)

¿Qué es la cariocinesis y qué es la citocinesis?

Cariocinesis: La cariocinesis es la división del núcleo celular con reparto del material nuclear durante la mitosis y meiosis.

Citocinesis: La citocinesis es el proceso de división del citoplasma entre las dos células hijas y que en la mayoría de las células se inicia durante la telofase. En la célula animal ocurre por estrangulamiento iniciando con la formación de anillos en el plano ecuatorial para luego contraerse hasta lograr que la célula progenitora se divida, mientras que en la célula vegetal ocurre a través de la formación de una placa celular que se forma en la placa ecuatorial a partir de vesículas que libera el aparato de Golgi y que posteriormente se fusionan uniéndose a la membrana celular original formando dos membranas celulares que sirven para separar las células hijas. FACULTAD DE MEDICINA

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7) Al comparar los índices mitóticos y de fases de sus compañeros. ¿Qué conclusiones puedo obtener? No pude obtener ninguna conclusión ya que el profesor no explicó nada sobre índice mitótico, debido a que del total de las mesas de trabajo solo se encontraron células en fase mitótica en una sola.

BIBLIOGRAFÍA  

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http://www.rena.edu.ve/cuartaEtapa/Biologia/Tema7.html http://www.infobiologia.net/2011/09/division-celular-mitosis-ycitocinesis.html. http://es.scribd.com/doc/38581055/12/OBSERVACION-DEMITOSIS-EN-RAIZ-DE-CEBOLLA http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20No%2 09.%20MITOSIS.pdf http://farmaciaulat.blogspot.com/p/mitosis-en-meristemasvegetal.html http://labiologiauniboyaca.blogspot.com/2012/05/resultadosmitosis.html

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