Practica Distribucion Intracelular de Las Enzimas de Oxido Reduccion (1)

PRACTICA N° 4: DEMOSTRACION DE LA DISTRIBUCION INTRACELULAR DE LAS ENZIMAS DE OXIDO- REDUCCION SISTEMA I: Usando 2,6-diclorofenolindofenol

I. 

PROCEDIMIENTO: 

Colocar en cada no de lo! " #$o! de en!a%o& lo! re!'ec#()o! reac#()o!& de acerdo al !(*(en#e cadro: COMPONENTES +,l B//er /o!/a#o 0.1M& '2 3.4 -5 d(cloro/enol(ndo/enol Scc(na#o de Sod(o 6racc(7n nclear 6racc(7n ,(#ocondr(al 6racc(7n ,(cro!o,al-!ol$le 2o,o*en(8ado #o#al

 

II. 

I 1.0 1.0 0. -

II 0." 1.0 0. 0." -

III 0." 1.0 0. 0." -

I 0 ." 1 .0 0 . 0 ." -

 0." 1.0 0. 0."

Le*o de /or,ado el !(!#e,a& !e ,e8cla % !e de9a en re'o!o a #e,'era#ra a,$(en#e. O$!e O$ !er)a r)arr con!# con!#an an#e #e,e ,en# n#ee % ano# ano#ar ar lo! lo! ca,$( ca,$(o! o! de colo color& r& 'ara 'ara (n#e (n#er' r're# re#ar ar lo! lo! re!l#ado!.

OBSERACIONES: TUBO N° I: En e!#e #$o de en!a% !a%o& !e ence cen#r n#ra la !!# !!#aanc(a $//er& el (nd(cador +-5 -5 d(cloro/enol d(cloro/enol(ndo/en (ndo/enol ol % el !!#ra#o +!cc(na#o +!cc(na#o de !od(o al no encon#rar!e encon#rar!e el co,'le9o co,'le9o en8(,;#(co& no !e 'rodce reacc(7n& %a ?*ado % co,o !e o$#(enen la! /racc(one! cellare! 'or cen#r(/*ac(7n d(/erenc(alF E! n 're'arado ?*ado % cor#ar en /ra*,en#o! 'eo,o*en(8ador 'o##er % a*re*ar !olc(7n de KClO 1"4M. 2acer 're!(7n ,anal con el e,$olo *(rando >ac(a el /ondo. El >o,o*en(8ado e! cen#r(/*ado a 00 re)olc(one! 'or 10 ,(n#o! coloc;ndolo en #$o! de 'ol(e#(leno& 're)(a cal($rac(7n en la $alan8a& !e e,'lea na cen#r(/*a re/r(*erada. El !o$renadan#e! !e'arado 'or n $eaer de "00 ,l El !ed(,en#o con!#(#%e la /racc(7n nclear % !e coloca en n $eaer de 100 ,l. El !o$renadan#e an#er(or e! cen#r(/*ado a 1"00 re)olc(one! 'or 1" ,(n#o! en la cen#r(/*a re#(rada. Se !e'ara el !o$renadan#e en n $eaer& con!#(#%endo la /racc(7n ,(cro!o,al con el c(#o!ol. El !ed(,en#o !e !e'ara en o#ro $eaer % con!#(#%e la /racc(7n ,(#ocondr(al. • • • • •

• • •

•

•

". En