PRACTICA DE MONTAJE PARA LA OBSERVACION MICROSCOPICA DE HONGOS FITOPATÓGENOS.docx

PRACTICA DE MONTAJE PARA LA OBSERVACION OBSERVACION MICROSCOPICA MICROSC OPICA DE HONGOS FITOPATÓGENOS FITOPATÓGENOS INTRODUCCIÓN. Para el diagnóstico diagnóstico y estudio estudio de enfermedades, enfermedades, en la mayoría de los casos es necesario aislar y/o cultivar el patógeno a fin de identificarlo o conocer parte de sus estructuras. Una Una prác prácti tica ca muy muy útil útil es la obse observ rvac ació ión n del del agen agente te caus causal al en prep prepar arac acio ione ness micros microscóp cópicas icas tomada tomadass directa directamen mente te del materia materiall enferm enfermo o o del aislami aislamient ento o del  patógeno. El procedimiento que a continuación se describe fue tomado las muestras de una mandarina enferma, donde utiliamos el m!todo del monta"e para luego levar al microscopio e identificar qu! tipo de patógeno u #ongo está ocasionando el problema en la mencionada fruta.

MONTAJE DE PREPARACIONES. $oloque la muestra del patógeno o estructuras del mismo en estudio en un portaob"etos limpio, sobre una gota de solución de monta"e que debe ser, de preferencia, agua destilada est!ril o un colorante para la tinción de las estructuras fungosas que se desean observ observar ar con mayor mayor contras contraste. te. Entre Entre los colora colorante ntess más comune comuness se encuen encuentra tran n el lactofenol, aul de metileno y la safranina, entre otros.

PASOS PASOS A SEGUIR EN UN LABORATORIO LAB ORATORIO PARA PARA HACER UN MONTA MON TAJE JE 1. %omar la muestra con un estilete de disección o con la punta de una nava"a o cuc#illa de bisturí, raspando ligeramente el te"ido enfermo, tomándolo tanto del cultivo o de la parte afectada de la planta donde este se manifiesta.

2. $olocar cuidadosamente este raspado sobre el portaob"etos dentro de la gota de agua o colorante.

3. $ubrir suavemente con un cubreob"etos con la ayuda de una agu"a procurando que no queden burbu"as de aire.

&i se utilia cinta transparente para #acer preparaciones rápidas no permanentes a partir  de crecimientos en medio de cultivo o en estructuras de las plantas 'frutos, #o"as, tallos(. Este m!todo se recomienda para observar las estructuras en su estado y posición normales 'cadenas de esporas o conidios pegados al conidióforo(, lo cual generalmente es muy difícil de lograr con las preparaciones antes descritas, ya que las estructuras se separan al ser tomadas con el estilete. &e debe tomar un pedao de cinta transparente y, con el lado que tiene el pegamento, tocar ligeramente la muestra o el cultivo de la ca"a Petri o del te"ido enfermo, enseguida colocarlo sobre una gota de agua est!ril en un portaob"etos.

4. %omar un pedao de cinta transparente y, con el lado que tiene el pegamento, tocar ligeramente la muestra.

5. $oloque la cinta con la muestra o estructuras sobre una gota de agua est!ril en un portaob"etos.

6. )i"e la cinta al portaob"etos y retire el e*ceso de agua o colorante.

PRACTICA REALIZADA EN EL LABORATORIO DE FITOPATOLOGÍA

Primeramente se procedió por el respectivo aseo de las mesas del laboratorio para evitar  que #aya residuos de cualquier otro material e*tra+o para evitar que las muestras se contaminen. &e colocó la muestra en la mesa que ya presentaba signo de la enfermedad. onde se utiliaron los siguientes materiales-

MATERIALES        

Estilete Portaob"eto $ubre ob"eto  $inta transparente ec#ero lco#ol ul de metileno Plumón

MATERIAL VEGETAL 

andarina

PROCEDIMIENTO 0uego se procedió a #acer los monta"es primero se realió #aciendo uso de portaob"eto luego realiamos sacando la un porcenta"e de la muestra #aciendo uso de la cinta transparente.

M!"#$% &! &'()% ($%" En el portaob"eto se colocó una gota de aul de metileno una ve puesto este reactivo con la ayuda de un estilete se e*tra"o un porcenta"e de la muestra 'mandarina( y cuidadosamente se colocó sobre la gota de aul de metileno en el portaob"eto. 0uego se pasó con una pintura de u+as por el borde del cubre ob"eto con la finalidad de sellar a la muestra.

M!"#$% &! &*!"# ")#!+,#)%!"% 0a cintra transparente se colocó sobre la muestra 'mandarina( por el lado pegante para e*traer un porcenta"e de material enfermo y este se llevó y se colocó sobre el  portaob"eto tratando de pegarlo de una manera uniforme que no se formen burbu"as de aire en el interior de la cinta.  esta muestra tambi!n se acondiciono con la pintura de u+as para sellarlo que no  presente espacios que puede entrar aire y malograr la muestra. Una ve realiada ambas muestras se identificó con un plumón con respectivo nombre.

BIBLIOGRAFÍA

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