Práctica 7 PDF

 

BIOQUIMICA GENERAL-PRÁCTICA PRÁCTICA

EV LU CI CIÓN ÓN DE L

Ing. LIZVE VILCAPOMA URETA

MIL S

 

COMPETENCIAS •

Evalúa la actividad de la enzima amilasa analizada, mediante la nfvoarrmaaccaió paurn a lile lev bn o enbieolqluaíbm oircaat,orio procedimiento previamente descrito tanto de carácter sinté sin tétic tico o co como mo an analí alític tico. o.

 

FUNDAMENTO •

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La amil amilasa asa es u un n grupo grupo de ttre ress enzimas: alfa-amilasa, beta-amilasa almidón almidó n fosfor fosforilasa ilasa,, las cuale cualess rompen distintos enlaces de la mole mo lecu cula la de almi almido don n de degr grad adan ando dola la hasta has ta el niv nivel el disac disacari arido do malto maltosa sa (glucosa + glucosa). Luego Lue go,, la mal maltos tosa a pu puede ede ser degradada por enzima maltasa hasta el nivel delaglucosa, la cual entra entr a al proceso proceso respir respirato atorio rio para para la obt obtenci encion on de ener energi gia. a.

 

Donde se encuentra la amilasa •

La amilasa se puede encontrar en diversos tejidos vegetales y en gran can cantidad tidad enalmidó semi semillas, llas, yumulad a que degra deg rada da el alm idón n acumu acya lado oya trav través és de la respi respirraci ación ón se obtien obtiene e

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la energía energía neces necesaria aria (A (ATP) TP) para para los proceso pro cesoss metabólic metabólicos os durant durante e el desarr des arroll ollo o del em ón has hasta tahojita que la la plánt plántula ula forme for meembri susbrión primeras primer as hojitas s y pueda foto sintetizar formando su propia fuente de azucare azucares. s.

 

Forma de realizar germinados •

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En el malteado, el grano de cereal germina e involucra tres pasos: remojo, germinación y horneado. Durante la remojo, se agrega agua a los granos que activan las enzi zim mas as.. La remo re moci ción ón con onv ven enci cion onal al to toma ma 11-2 2 dí días as.. Después de 1-2 días, los granos de cebada han alcanzado un contenido de agua de 40-45%. En este punto, la cebada se elimina del agua de remojo y comienza la germinación que va de 2 a 3 días. Durante la germinación se forman o activan varias enzimas, que más adel ad elan antte en el pr proc oces eso o de ma mace cerrac aciión son ese esenci nciale ales. s.

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Semillas Semill as de qu quinu inua a ger germin minada adass de 36 horas son las que presentan mayor valorr de activid valo actividad ad espec específica ífica.. El remojo es 12-14 horas y luego se separa del agua y se coloca en un material que permita el germinado La actividad enzimática se iincrementa ncrementa significa signi ficativ tivament amente e a las 36-48 horas horas de germinación con 95% de confiabilidad. De cada uno de llos os tie tiempos mpos de germinació germi nación n la temper temperatur atura a optima de germinado es de 37°C

 

Amilasa salival •

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Digestión: La masticación del alimento facilita la penetración de la amilasa en el bolo La al digestión salival del almidón después de que laalimenticio. comida llega estómago. El ácido gástricocontinúa en el estómago inactiva la α-amilasa, pero como el bolo tarda en desintegrarse en el estómago, la digestión salival puede continuar dentro de él durante media hora. Cuando el ácido ha penetrado completamente en el alimento, la enzima se inactiva. La α-amilasa funciona mejor a un pH ligeramente básico. El almidón en el pan puede ser digerido hasta en un 75% por la α-amilasa salival antes de que la enzima sea inactivada por el ácido en el estómago.

 

IMPLIC IMPL IC CI CION ONE ES BIOM BIOMÉD ÉDIC IC S O BIOTECNOLÓGIC S •

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La amilasa se utiliza para el diagnóstico en enfermedades, como la pancreatitis. Esto se consigue midiendo el nivel de amilasa en sangre. La causa de que estos niveles sean elevados puede ser: Que las células productoras de la enzima en el páncreas estén dañadas. Que haya una deficiencia renal.

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Que hayasalival. glándula una inflamación de una En un laboratorio clínico, se puede averiguar de dónde procede este aumento de nivel de la amilasa.

 

Amilasa en la producción de pan •

La amilasa se utiliza en la producción de pan, rompiendo el almidón de la harina en azúcares simples de los cuales cual es se pu pued ede e al alim imen enta tarr la le lev vad adur ura, a, convirtiéndolos en productos de la fe ferm rmen enta taci ción ón alco alcohó hóli lica ca.. Es Este te pr proc oces eso o da mayor sabor al pan. En el grano del trig trigo o, las las cé céllulas ulas tien tienen en am amil ilas asas as,, pe perro éstas tardan mucho en liberar azú zúccares a partir de almidón. Por ello, la fer erme ment ntac ació ión n se re real aliz iza a le lent ntam amen entte y, al añadirle rle amilasa, este proces eso o se ace ac eler lera. Per ermi mitten el en endu durrec ecim imie ien nto del pan y de la tortilla.

 

En la industria cervecera •

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Las amilasas de origen bacteriano y fúngico se utilizan para generar dextrinas que se emplean en  jarabes espe pessande tes es,cerveza , para oobtconfituras, ener maltoysapara de la fabricación de medicamentos para trastorno tras tornoss dige digestiv stivos. os. Las amilasas α y β son importantes en la fabricación de cerveza y licor, ya que dan lugar a la maltosa para la tfe arm mbeiénntaclaiónprodaulcocihóónlicdae. mAadlteom saásy, dext de xtri rina na pe perm rmit ite e un una a ma mayo yorr ab abso sorc rció ión n del agua y, por ello, se utilizan amil am ilas asas as en la pr prod oduc ucci ción ón de ce cere real ales es..

 

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III. III.MA MATE TERI RIAL ALES ES Y ME METO TODO DOS S

 3.1. Materiales

Tubos ubos de en ensa sayo yo,, Gradillas, Pipetas, Beakers, Baño Ba ño mari maria, a, Mortero, Almidon, Lugol, HCl 1 N N,, Mate Ma teri rial al veg veget etal al:: semi semill lla a de ce ceba bada da en germinacion.

 

METODOLOGIA •

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Pesar 10 g de semillas semillas germinadas, molerlas y adicionar 100 ml de agua destilada, filtrar filtrar,, dejar reposar hast hasta a que se separen dos capas y separe la superior, esta constituye el extracto crudo de amilasa. Tom omar ar 5 tub tubos os de e ensa nsayo yo enu enumer merelo eloss y co coloc locar ar 5 m mll de alm almido idon n al 1 % (sustrato). (sustr ato). Agregue a cada tubo 1 ml de ami amilasa lasa (enzima), tenga tenga cuidado en tornar torn ar el tiem tiempo po desd desde e que emp empieza ieza lla a reac reaccion cion enzim enzima-sus a-sustra trato to,, trat trate e de realiz rea lizar artiempo est esta a ope opera racio cion n ra rapid pidame ament nte e par para acon quecuidado la reacc reaccion emp empiec iece e casi mismo en todos los tubos. Agite yion deje reposar. reposar . al

Finalizad Finali zado o el ti tiemp empo o de reacc reaccion ion pr previ evist sto o par para a cad cada a tub tubo o (0, 5 5,, 10. 15 y 20 minutos) agregue agregue al inst instante ante 2 ml de acid acido o clorhidrico y agite T Tenga enga en cuenta cuen ta que para el tie tiempo mpo cer cero o est esta a oper operació ación n debe ser ca casi si simul simultan tanea ea con la anterior a nterior,, Todas estas operaciones deben rea realizarse lizarse con los tubos de ensayo dentro dentro del medio que proporci proporciona ona la temperatur temperatura a deseada alta (dentro de un vaso de agua agua ca cali lien ente te), ), ba baja ja (den (dentr tro o de u un n vaso vaso de agua agua fria fria)) o a te temp mper erat atur ura a ambiente. Finalment Final mente e agre agregue gue 1 got gota a de Lugo Lugoll a cada tubo y adic adicione ione agu agua a desti destilada lada hasta completar completar 10 ml y observe la gradiente en las distintas temperaturas. temperaturas.

 

CULMINANDO LA PRACTICA •

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 IV.RESULTADOS Y DISCUSIONES

V.CONCLUSIONES VI.CUESTIONARIO .Que tipos de enzimas intervienen en la degradacion de carb ca rboh ohid idrratos atos en la sa saliv liva? a?   b. .Que importancia tienen estas enzimas en el proceso de dige igestion   a.

dell bolo de bolo alim alimen enti tici cio? o? Cuales son los factores que afectan para que una enzima no realice la funcion de catalisis enzimatica?

  c.

 

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