Práctica 2. Carbohidratos

 

Laboratorio De Bioquímica II 

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Práctica No. 2 “Carbohidratos” “Carbohidratos”  Universidad Autónoma de Ciudad Juárez – Instituto de Ciencias Biomédicas Licenciatura en Química – Laboratorio de Bioquímica II Gabriela Guadalupe González González

OBJETIVO: Analizar las propiedades características de los carbohidratos, derivadas de su estructura, realizando algunas reacciones generales de identificación.

Los carbohidratos son derivados aldehícos o cetónicos de los alcoholes polihídricos que se derivan en:

Los carbohidratos se encuentran ampliamente

a) Los monosacáridos son aquellos carbohidratos incapaces de hidrolizarse en carbohidratos más simples. Pueden subdividirse en triosas, tetrosas, pentosas, hexosas o heptosas según la cantidad de átomos de carbono y como aldosas o cetosas por la presencia del grupo aldehíco

distribuidos vegetales y animales; realizany importantes en funciones estructurales metabólicas. La glucosa se sintetiza a partir del dióxido de carbono y el agua por medio de la fotosíntesis en los vegetales, y se almacena en forma de almidón, o bien se utiliza para sintetizar celulosa de la estructura vegetal. Los animales sintetizan carbohidratos a partir del glicerol de los lípidos y de los aminoácidos, pero la mayor parte de los carbohidratos animales deriva en última instancia de los vegetales. La glucosa es el carbohidrato más importante; la mayor parte de los carbohidratos

o del grupo cetona. son productos de b) Los disacáridos condensación de dos unidades de monosacáridos. Ejemplo la maltosa y la sacarosa. c) Los oligosacáridos son productos de condensación de 2 a 10 monosacáridos, la maltotriosa es un ejemplo. d) Los polisacáridos son productos de condensación de más de 10 monosacáridos, por ejemplo los almidones y las dextrinas, y pueden ser polímeros lineales o ramificados. Algunas veces, los

de la dieta se absorbe al torrente sanguíneo como glucosa; otros azucares se convierten en glucosa en el hígado. La glucosa es el combustible metabólico mas importante de los mamíferos, y un combustible universal para el feto. Es el precursor en la síntesis de todos los otros carbohidratos en el cuerpo, incluidos el glucógeno para almacenamiento, la ribosa y la desoxirribosa en los ácidos nucleicos, y la galactosa en la lactosa dela leche, en glucolípidos, y en combinación con las proteínas en las glucoproteínas y los proteoglucanos [1].

polisacáridos se clasifican en hoxasanos o pentosanos, lo cual depende de la identidad de los monosacáridos constituyentes [2].

INTRODUCCIÓN:

Gabriela Guadalupe González González

Existen diversas técnicas que nos permiten poder identificar los carbohidratos, utilizando ácidos que deshidratan las hexosas formando distintos derivados, tales son los casos de las reacciones de Molish, Seliwanoff, Fehling, y Lugol.

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Laboratorio De Bioquímica II  MATERIALES Y MÉTODOS:  Reacción de Fehling: En un tubo de ensayo se coloco 1 mL de lactosa, en otro tubo 1 mL de glucosa, en otro tubo 1 mL de sacarosa, en otro 1 mL de fructosa y en otro tubo 1 mL almidón, a cada tubo se le agregó 0.5 mL de

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media quedo color azul y en la fase inferior color rojo, la fructosa (Imagen 1  – tubo 4) tomo un color rojo y el almidón (Imagen 1  – tubo 5) quedo en color oscuro.

reactivo de Fehling A y 0.5 mL de reactivo de Fehling B, se mezclaron y se colocaron en baño a ebullición durante 5 min, se anotaron los resultados.

Reacción de Molish: En otros 5 tubos de ensayo se colocaron los carbohidratos como se indico en el procedimiento anterior. Posteriormente a cada tubo se le agrego 3 gotas de reactivo de Molish y 0.5 mL de H2SO4 añadiéndolo cuidadosamente por las paredes de los tubos se mezclaron y se observaron los resultados.

Reacción de Seliwanoff: Teniendo otros 5 tubos con la misma cantidad de los mismos carbohidratos, se les agrego 5 mL de reactivo de Seliwanoff, se mezclaron y se colocaron en baño a ebullición por 1 min. Se observaron los resultados.

Reacción de Lugol: En otros 5 tubos de ensayo, a cada carbohidrato se le agrego 3 gotal de lugol, se calentaron en baño a ebullición por 2 seg y s observaron los

Imagen 1. Virajes de color en prueba de Fehling. Lactosa, sacarosa, glucosa, fructosa y almidón.

En la prueba de Molish, en la glucosa se formo una fase de color violeta en la parte superior (Imagen 2  – tubo 1), en la lactosa (Imagen 2  – tubo 2) se formaron dos fases y se formo un anillo color violeta, en el almidón (Imagen 2  –  tubo 3) se formo un precipitado en el fondo y se formo una fase color morado oscuro, en la sacarosa (Imagen 2  – tubo 4) se formaron dos fases color morado oscuro, y en la fructosa (Imagen 2  – tubo 5) se formo un anillo color violáceo.

resultados.

RESULTADOS:  Una vez realizados los procedimientos anteriores obtuvimos lo siguiente: En la prueba de Fehling pudimos observar que el carbohidrato lactosa (Imagen 1 - tubo1) dos fases la superior de color azul y fase inferior de color roja, para la sacarosa (Imagen 1 - tubo 2) se formaron dos fases oscuras, en la glucosa (Imagen 1 - tubo 3) se formaron dos tres fases, en la superior tomo un color rojo, en la fase Gabriela Guadalupe González González

Imagen 2. Prueba de Molish. Glucosa, lactosa, almidón, sacarosa y fructosa. | 91325

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Laboratorio De Bioquímica II  Para la prueba de Seliwanoff la fructosa y la sacarosa (Imagen 3  – tubos 1 y 2) tomaron un color ligeramente rojo, los demás carbohidratos no presentaron ningún viraje de color.

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la sacarosa, en los carbohidratos glucosa, lactosa, fructosa y almidón si fue posible ver formación de fases color rojo, lo cual significa que estos carbohidratos tienen poder reductor, en donde estos se oxidan dando lugar a la reducción del sulfato de sobre, el cual al oxidarse forma óxido de cobre de color rojizo. En cuanto a la sacarosa es un disacárido que no tiene poder reductor, es por eso que no viro a color rojo

Imagen 3. Reacción de Seliwanoff. Fructosa, sacarosa, glucosa, lactosa y almidón.

En la prueba del lugol, el único tubo que presento viraje de color fue en el tubo que contenía almidón (Imagen 4  – tubo 4) el cual tomo un color violeta.

La reacción de Molish está basada en la formación de furfural o derivados de éste a partir de los carbohidratos, que se condensan con el alfa-naftol, dando un producto violeta es por eso que en todos nuestros carbohidratos se formaron fases de color violeta, unas mas densas que otras, ya que todos los sacáridos pueden ser degradados o hidrolizados hasta transformarlos en las unidades de monosacáridos que los constituyen. La hidrólisis de los carbohidratos aunándole el poder reductor. La hidrólisis del almidón produce azúcares de peso molecular cada vez menor hasta convertirse íntegramente en monosacáridos es por eso que tomo un color morado intenso. La prueba de Seliwanoff es una reacción para diferenciar cetosas de aldosas, aunque ambas dan la reacción positiva produciendo un viraje de color en donde las cetosas producen un

Imagen 4. Reacción de Lugol. Lactosa, glucosa, sacarosa, almidón y fructosa.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN: La reacción de Fehling está basada en la acción reductora que tienen los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos a excepción de Gabriela Guadalupe González González

cambio rápido de acolor rojo yrosa, las aldosas lentamente viran un color el HCl deshidrata a las cetosas y forma hidroximetil furfural, posteriormente la cetosa reacciona con el resorcinol provocando que este cambie a color rojo. En nuestros tubos se pudo observar que la fructosa cambio rápidamente a color ligeramente rojo ya que estas se deshidratan rápidamente, lo mismo pasó con la sacarosa que es un disacárido formado por una unidad de glucosa y otra de fructosa, en donde el HCl hace que se hidrolice y libere a la fructosa. Los otros carbohidratos no cambiaron de color ya que son carbohidratos aldehícos, el motivo por el cual no cambiaron de color es | 91325

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que no se dejo el tiempo suficiente para que se llevara a cabo la reacción. Finalmente en la prueba del lugol solo se pudo observar que el almidón fue el único carbohidrato que cambio de color, es sabido que el lugol es una disolución de yodo molecular (I2) y yoduro potásico (KI) en agua destilada. La coloración producida se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón.  El yodo es atrapado por los polisacáridos y dependiendo de la estructura de éstos da una coloración característica; si el polisacárido es lineal se obtendrá una coloración azul pero si es ramificada la coloración obtenida va del púrpura al rojo. No es por tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, de todas las muestras la única que era polisacárido era el almidón es por ello que fue el único que cambio de color. Todos los monosacáridos y disacáridos son reductores a excepción de la sacarosa. Las reacciones antes realizadas nos permiten identificar las propiedades de los carbohidratos así como su identificación.

BIBLIOGRAFÍA: 1. Murray Robert K, Mayes Peter A., “Bioquímica Ilustrada (Harper)”, Editorial Manual Moderno, 16va Edición, México, 2004. 2. Nelson David L., Cox Michael, “Lehninger  Principios de Bioquímica”, Editorial Omega, 4ta. Edicion, Madrid, 2005

Gabriela Guadalupe González González

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