Perfil Lipidico Nilton

 

PERFIL LIPIDICO 1.  Introducción El perfil lipídico lo constituye la cuantificación analítica de una serie de lípidos que son transportados en la sangre por los diferentes tipos de lipoproteínas plasmáticas. La determinación de estos parámetros es un procedimiento analítico básico para el diagnóstico y seguimiento de enfermedades metabólicas, primarias o secundarias. secun darias. Entre estos parámetros analíticos que se pueden determinar están: Triglicéridos Colesterol total colesterol transportado por las LDL Colesterol transportado por las HDL Colesterol transportado por las VLDL Lípidos totales Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El colesterol de las HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fracción de colesterol que se transporta al hígado para su metabolización y excreción por vía biliar, no se asocia con riesgo de enfermedad.

2.  Determinación del Perfil Lipídico La determinación de las concentraciones de lípidos, lipoproteínas y proteínas relacionadas circulantes permite el diagnóstico, el tratamiento y el seguimiento de las diferentes dislipemias. Triglicéridos Colesterol total colesterol transportado por las LDL Colesterol transportado por las HDL Colesterol transportado por las VLDL Lípidos totales

a.  Condiciones preanalíticas Es necesario estandarizar todas las circunstancias que rodean al análisis para evitar todos los posibles factores que influyen en los niveles de lípidos y lipoproteínas:

   No se deben realizar estudios en pacientes que están enfermos, tienen

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infecciones, embarazadas o han tenido tenido infarto infarto de miocardio, procesos quirúrgicos dentro de los dos meses previos al estudio.   El paciente debe mantener su dieta habitual y el peso por lo menos 2

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semanas antes de la extracción.

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  El paciente no debe realizar ejercicios vigorosos durante 24 hs antes de la

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extracción. Observar estrictamente las 12 horas de ayuno. El paciente debe permanecer sentado durante 5 min. Preferiblemente realizar la determinación en suero. Colesterol total y Colesterol HDL deben analizarse lo antes posible. po sible.

b.  Determinación de Triglicéridos Fundamento del Método: Enzimático colorimétrico Los triglicéridos son hidrolizados por las lipoproteín lipasa, liberando glicerol y ácidos grasos. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa y ATP en presencia de glicerol quinasa para producir glicerol-3-fosfato y ADP. El G3P es convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) glicerolfosfato deshidrogenasa (GOD).

y H2O2  por la

Al final el H2O2 reacciona en presencia presencia de la peroxidasa con 4-aminoantipirina y pclorofenol para dar origen a un compuesto coloreado de color cereza (Quinona) capaz de absorber a 505nm. La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de triglicéridos  presente en la muestra.

Muestra   Suero obtenido libre de hemólisis (para evitar resultados falsamente elevados)     Plasma obtenido con EDTA o heparina.

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El analito es estable durante 3 días entre 2 y 8ºC y 30 días a - 10ºC. La sangre debe ser cogida luego de ayunar de 12 a 14 horas.

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c.  Determinación de Colesterol Total Colesterol total es la suma de todas las fracciones (Co-HDL, Co-LDL, CoVLDL)

Fundamento del Método: enzimático colorimétrico El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado que es capaz de absorber a 505nm. Según la siguiente reacción:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol  presente en la muestra.

Muestra Suero obtenido libre de hemólisis o plasma cogido con heparina. El Colesterol es estable en el plasma o en lo suero por hasta 7 días entre 2 y 8ºC y hasta 5 días entre 15 y 30°C.

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Procedimiento de Medida

Valores referenciales Hasta 200mg/dl

d.  Determinación de Colesterol HDL(directo) Fundamento del Método: Enzimático  Enzimático –   –  Colorimétrico.  Colorimétrico.  El HDL Directo permite una determinación directa sin la  necesidad de precipitación  previa ni tratamiento de la muestra.  Son utilizados reactivos que realizan la dosificación selectiva del  colesterol conectado al HDL. Las superficies de las lipoproteínas  de baja densidad (LDL), muy baja densidad (VLDL) y de los   quilomicrones son estabilizados por la absorción del polianión y no  sufren la acción de las enzimas modificadas presentes en el reactivo.   El HDL, sin embargo, se solubiliza por la acción de un detergente,   permitiendo permitiendo la acción enzimática enz imática sobre el colesterol conectado  a él. De esta forma el colesterol-HDL presente en la muestra origina un compuesto coloreado que es capaz de absorber a 550 nm. La intensidad de la coloración formada es    proporcional a la concentración de colesterol HDL en la muestra.  

Muestra Suero obtenido libre de hemólisis, plasma cogido con heparina. El Colesterol HDL es estable en el suero por hasta 7 días entre 2 y 8ºC.

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e.  Determinación de Colesterol HDL (Reactivo precipitante) Fundamento del Método Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las lipoproteínas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) presencia de fosfotungstato y iones magnesio. Las HDL quedan en el sobrenadante separado por centrifugación, donde se realiza la determinación del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4-AF). Cuyo colesterol se cuantifica espectrofotométricamente a 505nm. 

Muestra: Suero o plasma 

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f.  Determinación de Colesterol LDL (directo) Fundamento del Método: El presente método es un ensayo homogéneo sin precipitación, en dos pasos. En el  primero, se agrega un tensioactivo (Reactivo 1) que solubiliza las partículas lipoproteicas no-LDL. El colesterol liberado es consumido por el colesterol esterasa y el colesterol oxidasa en una reacción sin desarrollo de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo 2) solubiliza las partículas de LDL formándose, por la  presencia de enzimas y un Reactivo cromogénico, un color que es capaz de absorber a 600nm (590-700nm). La intensidad de la coloración formada es  proporcional proporcional a la concentración de LDL colesterol.

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Muestra : suero o plasma  Procedimiento de medida

g.  Determinación de LDL-colesterol de forma indirecta La determinación de esta fracción, también se puede calcular de forma indirecta mediante la fórmula de Friedewald, solo es aplicable si los triglicéridos son ˂ 400mg/dl.

h.  Determinación de VLDL-Co de forma indirecta Para la determinación de colesterol-VLDL, también se realiza indirectamente mediante una fórmula matemática aplicable solo cuando la concentración de triglicéridos sea ˂ 400mg/dl.  400mg/dl.  La primera fórmula básica para crear una estimación VLDL es la siguiente:

La segunda forma de calcular el número n úmero de VLDL es:

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3.  Calculo del índice de Aterogenicidad de Castelli. matemática entre los niveles n iveles El cociente o índice aterogénico es la relación de colesterol total en el organismo y colesterol HDL o lipoproteínas de alta densidad. Valores normales de este índice es menor a 4,5, mientras que a mayor índice aterogénico mayores son las probabilidades de que se forme una placa de ateroma en las arterias y de origen a aterosclerosis.  aterosclerosis. 

4.  Determinación de Lípidos Totales Fundamento del Método Los lípidos insaturados reaccionan con el ácido sulfúrico en caliente con formación de iones carbonio. En una segunda etapa, éstos, en presencia de fosfovainillina dan una coloración rosada. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de lípidos totales presente en la muestra. 

Muestra Suero o plasma. Estabilidad de la muestra: Los lípidos totales son estables 24 h a temperatura ambiente (15-25ºC) o 3 días a 2-8ºC  

Procedimiento de medida

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5.  Valores referenciales del perfil Lipídico Valores referenciales Triglicéridos Colesterol total HDL- Co LDL- Co VLDL-Co

hasta 150 mg/dl

Lípidos Totales: Índice de Aterogenicidad

450 –  450  –  800  800 mg/dl

hasta 200mg/dl 40 - 60 mg/dl hasta 130 mg/dl 2 - 30 mg/dl.

˂ 4,5

6.  Trastornos lipídicos Generalmente denominan trastornos lipídicos a cualquier alteración en los niveles normales de losselípidos en sangre. De forma mayoritaria nos vamos a referir al aumento de los niveles de Colesterol (Hipercolesterolemia) y de Triglicéridos (Hipertriglicidemia), aunque hay otras alteraciones a tener en cuenta como es la disminución del colesterol HDL. La búsqueda activa de pacientes con hiperlipemia está  justificada por su gran importancia como factor de riesgo de enfermedad cardiovascular, ya que es, junto con la hipertensión y el tabaquismo uno de los  principales factores que predisponen a padecer una cardiopatía coronaria.  La hiperlipemia es un estado bioquímico asintomático, aunque puede haber síntomas inespecíficos como dolores abdominales, alteraciones hepáticas. Si perdura en el tiempo está asociado a la aterosclerosis y sus complicaciones. La aterosclerosis es un trastorno común que ocurre cuando en la capa íntima de las arteriolas y arterias se acumulan grasa, colesterol y otras sustancias Estos depósitos

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forman estructuras duras llamadas de placas de ateroma, que con el tiempo van a  producir ateroesclerosis, es decir, un estrechamiento o endurecimiento de las arterias  por depósito de colesterol en sus paredes.  Como precaución se realiza un estudio lipídico a personas con antecedentes antec edentes familiares:

  Enfermedades cardiovasculares

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  Diabetes mellitus

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  Presencia de xantomas o turbidez en suero.

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Los niveles plasmáticos de lípidos están alterados transitoriamente en: embarazo, cirugía, traumatismo, infecciones, stress, adelgazamiento rápido y por consumo de fármacos.

7.  Caso clínico Paciente de 37 años, mujer, no fuma, no es diabética, es hipertensa conocida desde 10 años que trata con enalapril 20 + hidroclorotiazida 12.5 1 comp/día desde hace 4 años, sus antecedentes familiares relata que su madre murió de infarto de miocardio. Acude a consulta y tras expresar sus quejas y molestias habituales, recoge sus análisis semestrales. Examen físico:   Peso=64; talla=1.53. IMC=29.73, Perímetro de cintura=88 cm Análisis de laboratorio:   Glucemia basal: 87 mg/dl   Colesterol total: 293 mg/dl   Triglicéridos: 281 mg/dl   Co-LDL: 205 mg/dl   Co-HDL: 30 mg/dl

¿Existe probabilidad de que esta paciente padezca de enfermedad cardiovascular?

Respuesta: 9,77% la paciente presenta un riesgo alto de padecer enfermedad cardiovascular. Debería reforzar su dieta, recibir tratamiento farmacológico y control cada dos meses del perfil lipídico.

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