Partes del microscopio óptico y sus funciones (1)

Partes del microscopio óptico y sus funciones Ocular:: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen 1 * Ocular formada en los objetivos. Objetivo:: lente situada cerca del revolver. 2 * Objetivo revolver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite ver a través de los oculares  * Condensador:  lente que concentra los rayos luminosos sobre luminosos sobre la preparaci!n.

Diafragma:: regula la cantidad de lu# que llega al condensador. " * Diafragma condensador. Foco:: dirige los rayos luminosos %acia el condensador. $ * Foco & * Tubo: es una c'mara oscura unida al bra#o mediante una cremallera. ( * Revólver: )s un sistema que agarra los objetivos, y que rota para utili#ar un objetivo u otro  * Tornillos macro y micrométrico:  +on tornillos de enfoque, mueven la platina %acia arriba y %acia abajo. )l macrométrico lo %ace de forma r'pida y el micrométrico de forma lenta. levan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. - * Platina: )s una plataforma %ori#ontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparaci!n, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminaci!n situada por debajo. os pin#as sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de despla#amiento permite mover la  preparaci!n de delante %acia atr's atr's o de i#quierda a derec%a y viceversa. viceversa. 1/ * ase: )s la parte inferior del microscopio que permite el sostén del mismo. 0arte mec'nica 

+istema de soporte o estativo

o

0ie

o

3ra#o

o

4ubo

o

0latina 

o

5icroscopios 4odos los fabricantes de 5icroscopios 5icroscopios 4odos 666.medicale 666.medi cale7po. 7po.es es)nlaces )nlaces patrocinados 8evolver 



+istema de ajuste

o

4ornillo macrométrico macrométr ico

o

4ornillo micrométrico micromét rico

0arte !ptica 

9uente de iluminaci!n



Condensador Condensador y diafragma



entes oculares :1/7 y 127; y objetivos :"7, 1/7, "/7 y 1//7;.

* P!" +irve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. )n los microscopios antiguos tenía forma de %erradura o de trípode pero en la actualidad suele ser una plataforma rectangular. rectangular. )n él se integra la fuente luminosa. * R#$O )s una columna perpendicular al pie. 0uede ser arqueado o vertical y une al  pie con el tubo. * T%O )s una c'mara oscura unida al bra#o mediante una cremallera. 4iene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el e7tremo superior. superior. * P&#T!'#  )s una plataforma %ori#ontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparaci!n, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminaci!n situada por debajo. os pin#as sirven para retener el portaobjetos sobre la  platina y un sistema sistema de cremallera guiado guiado por dos tornillos de de despla#amiento despla#amiento permite mover la preparaci!n de delante %acia atr's o de i#quierda a derec%a y viceversa. )n la  parte posterior de uno uno de los laterales laterales se encuentra un nonius que permite permite fijar las coordenadas de cualquier campo !ptico< de esta forma se puede acudir a el cuando interesa. * R"(O&("R  )s un sistema que coge los objetivos, y que rueda para utili#ar un objetivo u otro. * TOR'!&&O) *#CRO + *!CRO*,TR!CO  +on tornillos de enfoque, mueven la  platina %acia arriba y %acia abajo. abajo. )l macrométrico lo %ace %ace de forma r'pida y el micrométrico de forma lenta. levan incorporado un mando de bloqueo que fija la  platina a una determinada determinada altura. * F%"'T" D" !&%*!'#C!-'  +e trata de una l'mpara %al!gena de intensidad graduable. )sta situada en el pie del microscopio. +e enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie e7terna puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visuali#aci!n. * CO'D"')#DOR + D!#FR#.*# )l condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su funci!n es la de concentrar la lu# generada por la fuente de iluminaci!n %acia la preparaci!n. )n el interior del condensador e7iste un diafragma :iris; cuya funci!n es limitar el %a# de rayos que atraviesa el sistema de lentes

eliminando los rayos demasiado desviados :regula la cantidad de lu# y ajusta la Apertura =umérica;. * OC%&#R") )st'n colocados en la parte superior del tubo. +e denominan así,  porque est'n muy cercanos al ojo. +u funci!n es la de captar y ampliar la imagen formada en en los objetivos. )n los modernos microscopios %ay dos oculares /microscopios binoculares0  que est'n unidos mediante un mecanismo que permite ajustar la distancia interpupilar. )n general los mas utili#ados son los de 1/> : producen un aumento de 1/ veces ;. * O1"T!(O)  )st'n colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pie#a met'lica, denominada revolver, que permite cambiarlos f'cilmente. ?eneran una imagen real, invertida y aumentada. os mas frecuentes son los de ", 1/, "/, y 1// aumentos. )ste @ltimo se llama de inmersi!n ya que para su utili#aci!n se necesita utili#ar aceite de cedro sobre la preparaci!n. )n la superficie de cada objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el n@mero de aumentos :rojo ">, amarillo 1/>, a#ul "/> y blanco 1//>;.

"l *icroscopio óptico compuesto P#RT") D" %' *!CRO)COP!O -PT!CO



)istema óptico CBA8 ente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo. 3)4DE ente situada cerca de la preparaci!n. Amplía la imagen de ésta. C=)=+A8 ente que concentra los rayos luminosos sobre la  preparaci!n. DA98A?5A 8egula la cantidad de lu# que entra en el condensador. 9C irige los rayos luminosos %acia el condensador. )istema mec2nico +084) 5antiene la parte !ptica. 4iene dos partes el pie o base y el  bra#o. 0A4D=A ugar donde se deposita la preparaci!n. o

o

o

o o



o

o

o

o

o

CA3)FA Contiene los sistemas de lentes oculares. 0uede ser monocular, binocular, G.. 8)EHE)8 Contiene los sistemas de lentes objetivos. 0ermite, al girar, cambiar los objetivos. 48=D+ ) )=9IB) 5acrométrico que apro7ima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.

*#'"1O + %)O D"& *!CRO)COP!O -PT!CO 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posici!n de empleo y bajar la platina completamente. +i el microscopio se recogi! correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones. 2. Colocar la preparaci!n sobre la platina sujet'ndola con las pin#as met'licas. . Comen#ar la observaci!n con el objetivo de "7 :ya est' en posici!n; o colocar el de 1/ aumentos :1/7; si la preparaci!n es de bacterias. ". 0ara reali#ar el enfoque a. Acercar al m'7imo la lente del objetivo a la preparaci!n, empleando el tornillo macrométrico. )sto debe %acerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la  preparaci!n pudiéndose daJar alguno de ellos o ambos.  b. 5irando, a%ora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparaci!n con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico %asta obtener un enfoque fino. 2. 0asar al siguiente objetivo. a imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. +i al cambiar de objetivo se perdi! por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operaci!n desde el paso . )l objetivo de "/7 enfoca a muy poca distancia de la preparaci!n y por ello es f'cil que ocurran dos tipos de percances incrustarlo en la preparaci!n si se descuidan las precauciones anteriores y manc%arlo con aceite de inmersi!n si se observa una preparaci!n que ya se enfoc! con el objetivo de inmersi!n. . )mpleo del objetivo de inmersi!n a. 3ajar totalmente la platina.  b. +ubir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de lu# que nos indica la #ona que se va a visuali#ar y donde %abr' que ec%ar el aceite. c. ?irar el rev!lver %acia el objetivo de inmersi!n dej'ndolo a medio camino entre éste y el de 7"/. d. Colocar una gota mínima de aceite de inmersi!n sobre el círculo de lu#. e. 4erminar de girar suavemente el rev!lver %asta la posici!n del objetivo de inmersi!n. f. 5irando directamente al objetivo, subir la platina lentamente %asta que la lente toca la gota de aceite. )n ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. g. )nfocar cuidadosamente con el micrométrico. a distancia de trabajo entre el objetivo de inmersi!n y la preparaci!n es mínima, aun menor que con el de "/7 por lo que el riesgo de accidente es muy grande.

%. Bna ve# se %aya puesto aceite de inmersi!n sobre la preparaci!n, ya no se puede volver a usar el objetivo "/7 sobre esa #ona, pues se manc%aría de aceite. 0or tanto, si desea enfocar otro campo, %ay que bajar la platina y repetir la operaci!n desde el paso . i. Bna ve# finali#ada la observaci!n de la preparaci!n se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el rev!lver. )n este momento ya se puede retirar la preparaci!n de la platina. =unca se debe retirar con el objetivo de inmersi!n en posici!n de observaci!n.  j. impiar el objetivo de inmersi!n con cuidado empleando un papel especial para !ptica. Comprobar también que el objetivo "/7 est'  perfectamente limpio.

*#'T"'!*!"'TO + PR"C#%C!O'") 1. Al finali#ar el trabajo, %ay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en  posici!n de observaci!n, asegurarse de que la parte mec'nica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2. Cuando no se est' utili#ando el microscopio, %ay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daJen las lentes. +i no se va a usar de forma  prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del  polvo. . =unca %ay que tocar las lentes con las manos. +i se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de !ptica. ". =o dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est' utili#ando el microscopio. $. espués de utili#ar el objetivo de inmersi!n, %ay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con paJuelos especiales para !ptica o con papel de filtro :menos recomendable;. )n cualquier caso se pasar' el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. +i el aceite %a llegado a secarse y pegarse en el objetivo, %ay que limpiarlo con una me#cla de alco%olacetona :(; o 7ilol. =o %ay que abusar de este tipo de limpie#a, porque si se aplican estos disolventes en e7ceso se pueden daJar las lentes y su sujeci!n. &. =o for#ar nunca los tornillos giratorios del microscopio :macrométrico, micrométrico, platina, rev!lver y condensador;. (. )l cambio de objetivo se %ace girando el rev!lver y dirigiendo siempre la mirada a la preparaci!n para prevenir el roce de la lente con la muestra. =o cambiar nunca de objetivo agarr'ndolo por el tubo del mismo ni %acerlo mientras se est' observando a través del ocular. . 5antener seca y limpia la platina del microscopio. +i se derrama sobre ella alg@n líquido, secarlo con un paJo. +i se manc%a de aceite, limpiarla con un  paJo %umedecido en 7ilol. -. )s conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finali#ar la sesi!n  pr'ctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisi!n general de los mismos. 3 Principales normas de cuidado y utili4ación del microscopio óptico )l microscopio es un instrumento de precisi!n que debe tratarse con cuidado y debe manejarse correctamente para evitar errores, cansancio y pérdida de tiempo. 4enga en cuenta las siguientes consideraciones

1. ebe mantenerse en un lugar estable. )l observador debe colocarse de espaldas a los focos de lu#, prefiriéndose la luminosidad amortiguada, lejos de las ventanas y sobre una mesa negra para eliminar luces par'sitas y evitar una fatiga innecesaria. 2. ebe colocarse lejos del e7tremo del mes!n, para evitar que se vuelque. a mayoría de los desperfectos se producen por golpes. . )l microscopio se transporta verticalmente, sujeto por la empuJadura con una mano y  por la base con la palma de la otra. )l transporte incorrecto puede descansar todo el  peso sobre el control de enfoque micrométrico, erosionando sus muescas. ". ebe estar cubierto mientras no se usa y no debe sac'rsele el ocular. )l polvo desgasta los componentes y se deposita en las lentes. $. =o deben tocarse los lentes oculares, objetivos ni condensador con los dedos. as manc%as de grasa y sudor los dada. &. as lentes deben soplarse enérgicamente con una pera de goma, no deben limpiarse con un paJo seco :las partículas de polvo pueden rayarlas;, ni soplando con la boca :una  película líquida es muy difícil de eliminar;, ni con los dedos. +i queda polvo debe emplearse papel especial o pincel que se carga electrost'ticamente acerc'ndolo a una ampolleta encendida, lo cual permite recoger las partículas. (. 0ara observar %ay que sentarse c!modo, en posici!n descansada. as malas  posiciones causan cansancio y dolores musculares. . ebe observarse con ambos ojos abiertos. Al estar un ojo cerrado prolongadamente, la contracci!n muscular y la presi!n sobre el globo ocular causan cansancio y a veces dolor ocular o de cabe#a. -. ebe mirarse a través del microscopio, no KenK el microscopio. +i el observador mira como si la imagen estuviese junto al ojo, la vista se cansa innecesariamente y puede  producirse dolor ocular. 1/. ebe %aber una distancia adecuada entre el ojo y el ocular. Acérquese desde algunos centímetros poco a poco %asta observar el campo visual grande y definido. 11. 4oda observaci!n comien#a con lupa y pasa ordenadamente a mayores aumentos. )sto facilita centrar y enfocar, da un campo visual inicial amplio que proporciona visi!n de conjunto, facilita la interpretaci!n y permite ubicar f'cil y r'pidamente las estructuras. a #ona de la preparaci!n que desea observarse debe quedar en el centro del campo antes de pasar al siguiente aumento. 12. )l condensador est' regulado cuando se encuentra en su posici!n m's alta o un poco m's bajo. 0ara aumentar el contraste no conviene descenderlo e7cesivamente ni cerrar el diafragma, es preferible regular la iluminaci!n con el control desli#able. 1. =o debe colocarse ni retirarse una preparaci!n estando el objetivo mayor o el objetivo a inmersi!n en posici!n de trabajo, porque pueden rayarse las lentes frontales.

1". os movimientos de los mandos de enfoque deben ser lentos y suaves. )l control macrométrico se acciona con precauci!n para no c%ocar el objetivo con la preparaci!n, lo cual estropea la lente frontal del objetivo y rompe la preparaci!n. =o debe utili#arse el control macrométrico con inmersi!n. )l control micrométrico debe mantenerse en  posici!n central y accionarse un poco %acia un lado u otro. +e llega al e7tremo de su recorrido y se insiste, se pueden romper sus muescas, lo cual obligarla a cambiarlo. 1$. a preparaciones se colocan con el cubreobjetos %acia arriba. +i la preparaci!n est' al revés, al tratar de enfocar c%oca el objetivo con la preparaci!n y se daJa. Antes de colocar la preparaci!n sobre la platina compruebe la posici!n del cubreobjetos con la uJa. 1&. +i la preparaci!n carece de cubreobjetos no debe observarse con un objetivo mayor a 1/>, de lo contrario el objetivo puede c%ocar con la preparaci!n y se puede rayar. 1(. =o debe colocarse aceite de inmersi!n sobre objetivos secos :lupa, menor, mayor; ni utili#arse el objetivo a inmersi!n como objetivo seco, porque se puede rayar. 1. 0ara sacar de los lentes el aceite de inmersi!n debe utili#arse un paJo %umedecido ligeramente con éter o 7ilol, no debe usarse alco%ol, que disuelve el ad%esivo de las lentes, ni algod!n, que deja fibrillas pegadas al vidrio dificultando la visi!n. 1-. =o deben derramarse líquidos sobre el microscopio, si esto sucediera accidentalmente debe secarse de inmediato. =o debe manejarse el microscopio con los dedos %@medos. 2/. =o debe dejarse el microscopio junto a un mec%ero encendido, por ra#ones obvias. 21. )l microscopio no debe estar encendido mientras no se usa, debe evitarse así su calentamiento e7cesivo. 8ecuerde adem's que su ampolleta es de alto costo y tiene una vida @til limitada. 22. as lentes est'n montadas en forma muy precisa, s!lo se deben limpiar e7ternamente, sin desmontarlas. +!lo un técnico especiali#ado puede %acerlo para una limpie#a completa. 2. =o se debe invertir ni ladear el microscopio sin quitar previamente el ocular, que entra por desli#amiento. 2". Cada ve# que el microscopio se deja de usar debe guardarse en forma adecuada a; ubicaci!n lejos del borde del mes!n, b; l'mpara apagada, c; cable de la l'mpara desenc%ufado, d; platina limpia y ubicada al tope superior, e; objetivo lupa en posici!n de trabajo, f; carro en posici!n central, g; condensador en su posici!n m's alta, %; diafragma abierto.

53 Partes del microscopio óptico os microscopios !pticos constan de dos tipos de componentes, la parte mec'nica y la  parte !ptica. A los componentes b'sicos se agregan accesorios opcionales.

A; Componentes mec'nicos :K5onturaK; 0ie#as fijas, que sirven como soporte para el sistema !ptico :estativo;, y pie#as m!viles, que intervienen en la ubicaci!n adecuada de la preparaci!n :enfoque y centrado;. 1. 3ase o 0ie pie#a %ori#ontal maci#a, de forma variable, pesada, situada en la parte inferior del microscopio, al que sirve de apoyo y da estabilidad. ?eneralmente lleva asociada la fuente luminosa. 2. )mpuJadura o 3ra#o pie#a vertical m's o menos curva que se une al tubo, a la  platina y a la base. +irve para tomar al microscopio durante su traslado y lleva los controles de enfoque. )n algunos modelos corresponde a dos pie#as independientes el  bra#o, en la parte superior, y la columna, inferior, que se unen mediante una c%arnela, articulaci!n que permite inclinar al microscopio en mayor o menor grado y adaptarlo a la altura de la vista. . Cabe#al pie#a %ueca, típicamente cilíndrica :cuando es así se le denomina KtuboK; en la que se insertan los tubos portaoculares y el portaobjetivos. A través del cabe#al se observa la imagen microsc!pica, sirviendo para sostener a los componentes !pticos y mantenerlos a la distancia correcta. 0uede ser monocular o binocular. )n los modelos  binoculares cada montura de los tubos portaoculares est' rodeada por anillos que  permiten ajustar la longitud del tubo, y los tubos portaoculares pueden despla#arse %ori#ontalmente, lo que permite graduar su distancia. ". 0ortaobjetivos m@ltiple :rev!lver; pie#a giratoria que sostiene a los tubos  portaobjetivos de diferente aumento. +e despla#a %ori#ontalmente para colocar en  posici!n de observaci!n a cualquiera de ellos. $. 0latina lisa o fija pie#a plana %ori#ontal ubicada entre el objetivo y el condensador, con un orificio central circular que permite el paso de los rayos luminosos provenientes del condensador, y sobre el cual se coloca la preparaci!n para ser observada. &. 0latina mec'nica o m!vil :Carro; dispositivo acoplado a la platina lisa que sujeta al  portaobjetos y permite su despla#amiento. )s un sistema de piJones que act@an sobre cremalleras ubicadas perpendicularmente entre sí, produciendo despla#amiento %ori#ontal en sentido lateral y anteroposterior, lo cual permite ubicar y fijar la #ona de la  preparaci!n que desea observarse. lleva incorporadas dos pin#as que entran a presi!n y sujetan la preparaci!n y escalas graduadas para medir sus despla#amientos. (. +ubplatina Conjunto de pie#as situadas bajo la platina y que soportan al aparato de iluminaci!n. +u composici!n varía seg@n el modelo, pero en general consiste en un aro que sostiene al condensador, el que se mueve de arribaabajo mediante un tornillo, y también contiene anillos portafiltros, que alojan cristales que mantienen la lu# adecuada constante, y un diafragmairis, que regula la entrada de la lu# y se controla con una  palanca lateral, lo que permite obtener distintos tamaJos del cono luminoso que entra en el condensador. . Controles de enfoque dos o cuatro botones ubicados en la empuJadura o columna que despla#an a la platina fija o al cabe#al, seg@n el modelo, lo cual permite enfocar con  precisi!n. Corresponden a uno o dos botones macrométricos, o de enfoque apro7imado, y uno o dos botones micrométricos, de enfoque fino. os botones o mandos

macrométricos son m's grandes y de avance r'pido, sirven para buscar r'pidamente un  punto apro7imado al del enfoque. +i %ay dos botones macrométricos se enfrentan a ambos lados del bra#o y est'n sincroni#ados, basta mover a uno de ellos. os botones o mandos micrométricos producen movimientos lentos y permiten obtener un enfoque e7acto. +i son dos, también est'n sincroni#ados. )n algunos modelos de microscopios e7iste un solo bot!n que cumple funciones de macrométrico y micrométrico a igual velocidad de giro el movimiento de la platina es m's r'pido cuanto m's lejos se %alla la  preparaci!n del plano de enfoque. 3; Componentes !pticos :K4ren !pticoK; 0ie#as implicadas en la formaci!n de la imagen. Dncluye tres sistemas de lentes que funcionan arm!nicamente entre sí y una fuente de iluminaci!n. 1. Condensador +istema de lentes convergentes de gran abertura que concentra la lu# visible y la proyecta uniformemente sobre una muestra de tejido convenientemente  preparada. +e encuentra montado en un arma#!n met'lico sujeto a la parte inferior de la  platina fija y puede subirse y bajarse a voluntad accionando un control ubicado lateralmente. 2. +istema de objetivos Complejo sistema de lentes :a veces %asta 1/; ubicados  pr!7imos al objeto, que act@a como una sola lente convergente que recoge las longitudes %eterocrom'ticas de la lu# visible, entregando mayores aumentos que los del ocular y produciendo inversi!n de la imagen. os objetivos participan en la primera etapa de ampliaci!n producen una imagen ampliada del objeto y la proyectan sobre un  plano ubicado en el interior del cabe#al. Cada objetivo, ubicado en el interior de un tubo :tubo portaobjetivo;, puede estar formado por una lente o por un complejo sistema de lentes convergentes. os modelos actuales presentan tres o cuatro objetivos ubicados en sendos tubos, cuya longitud se relaciona con su  poder  de aumento. )7isten objetivos en seco y de inmersi!n. os objetivos en seco :KlupaK, Kaumento menorK, Kaumento mayorK; se utili#an dejando aire entre ellos y la preparaci!n, en cambio el objetivo de inmersi!n se emplea colocando una gota de líquido :Kaceite de inmersi!nK;, cuyo índice de refracci!n es superior al del aire. . +istema ocular 9ormado por dos lentes planoconve7as centradas y empotradas en un tubo met'lico m's o menos corto :tubo portaocular;, al que se acerca el ojo del observador, en cuya retina proyecta la segunda imagen aumentada. a lente superior se denomina propiamente lente ocular y la inferior lente de campo o frontal. entes adicionales corrigen las aberraciones crom'ticas y esféricas. os oculares son intercambiables y pueden tener diferentes aumentos. 0ermiten observar varias veces m's amplificada la imagen que forma el objetivo. ". 9uente luminosa Antiguamente era un espejo, en la actualidad se utili#a muc%o m's una l'mpara con filamento de tungsteno incandescente enrollado, de & a 12 E, montada sobre un portal'mparas especial ubicado en la base del microscopio. a intensidad luminosa se regula en forma continua girando un bot!n o moviendo una palanca de control desli#ante. C; Accesorios

+e fabrican accesorios opcionales para colocar en los modelos modernos de microscopios compuestos, los que pueden colocarse temporalmente en los microscopios compuestos para desarrollar funciones especiales, otorg'ndole mayor fle7ibilidad al aparato. )ntre ellos se cuentan accesorios para la observaci!n simult'nea de dos  personas, condensadores de campo obscuro, obturador central para campo obscuro, accesorio de polari#aci!n, iluminador vertical, ocular graduado, accesorios para dibujo, accesorios para fotomicrografía.

63 Problemas frecuentes en el manejo del microscopio efectos de Dluminaci!n a; Campo obscuro, sin imagen. Causas probables l; 9alta de lu#. Correcci!n Accione el interruptor, enc%ufe el cable, verifique si %ay energía eléctrica o si la l'mpara esta quemada. 2; bjetivo fuera de lugar. Correcci!n ?ire el objetivo a su posici!n de enfoque.  b; Campo ovalado, iluminado parcialmente. Causa probable bjetivo fuera de lugar. Correcci!n ?ire el objetivo a su posici!n de enfoque. c; Dmagen muy obscura. Causas probables l; iafragma cerrado. Correcci!n esplace la palanca lateral del diafragma. 2; Condensador muy bajo. Correcci!n Accione el control que sube el condensador. ; Condensador defectuoso. Correcci!n Avise para que lo repare un técnico. d; Dmagen muy clara. Causas probables l; iafragma muy abierto. Correcci!n esplace la palanca lateral del diafragma. 2; Condensador muy alto. Correcci!n Accione el control que baja el condensador. efectos de )nfoque a; 9alta de imagen. Causas probables l; 0reparaci!n mal centrada. Correcci!n Accione los controles del carro. 2; 0reparaci!n mal enfocada. Correcci!n Accione el mando macrométrico.  b; Dmagen borrosa. Causas probables l; 0reparaci!n mal enfocada. Correcci!n Accione el mando micrométrico. 2; 0reparaci!n al revés. Correcci!n Coloque la preparaci!n %acia arriba. ; +uciedad en la preparaci!n, ocular u objetivo. Correcci!n ímpielos. Dm'genes e7traJas a; 5anc%as o enturbiamientos irregulares, que se despla#an al mover la preparaci!n. Causa probable +uciedad en el cubreobjetos. Correcci!n impie la preparaci!n.  b; 5anc%as o enturbiamientos irregulares que se despla#an al mover el ocular. Causa  probable +uciedades en el ocular. Correcci!n impie la lente ocular. c; 5anc%as o enturbiamientos que desaparecen al cambiar el objetivo. Causa probable objetivo sucio o con aceite. Correcci!n impie el objetivo.

d; 5anc%as o enturbiamientos que no se despla#an ni desaparecen al mover el ocular, objetivo o preparaci!n. Causa probable +uciedad en la lente superior del condensador. Correcci!n impie el condensador. e; íneas finas brillantes. Causa probable 8ayaduras en las lentes o tri#aduras en la  preparaci!n. Correcci!n e cuenta al profesor. f; tras alteraciones de la imagen :espacios blancos, espacios finos y rectos, grumos intensamente tenidos, bandas obscuras, círculos con bordes obscuros, etc.;. Causa  probable defectos en las preparaciones :retracci!n del tejido, muescas en el cuc%illo del micr!tomo, fijador o colorante precipitado, tejido plegado, burbujas de aire, etc.;. Correcci!n )7amine un sector de la preparaci!n no alterado o solicite otra preparaci!n.

PR7CT!C# D" !O&O.8# '9  ;"l *icroscopio< L L  Introducción L Objetivos L  Recursos L  Procedimientos L  Marco Teórico L Observaciones en la Práctica L  Autoevaluación

L !ntroducción “OBSERVA!O "O IVISIB"E# $racias al Microsco%io &%tico es %osible conocer lo más %e'ue(o del mundo 'ue nos rodea)# esde el descubrimiento del 5icroscopio por parte de Facarías ansen, la ciencia,  particularmente la biol!gica, %a venido década tras década aportando nuevos conocimientos, desde la observaci!n de la célula y su descubrimiento, el de las  bacterias, %asta la situaci!n actual con la visuali#aci!n de la ultraestructura celular. M nosotros en nuestra formaci!n como entes promotores y forjadores de salud, es de gran importancia el conocimiento y desarrollo de destre#as en este instrumento, que en un futuro no muy lejano, ser' un medio au7iliar de la carrera. L Objetivos



8econocer al microscopio y sus elementos.



Ddentificar los diferentes tipos de microscopios.



Aprender la forma de manejo y el cuidado de un microscopio.



Asimilar la técnica adecuada para el enfoque.

L Recursos Numanos 

?rupo de estudiantes



Ayudante de c'tedra

5ateriales 

5icroscopio +imple de u#



aminas cubreobjetos y portaobjetos



bjetos para la observaci!n :0apel cuadriculado, Cabello;

L Procedimientos 





)7posici!n te!rica brevemente se %ablar' y abordara temas como los objetivos de la pr'ctica, materiales necesarios, los procedimientos, definici!n del microscopio, %istoria, estructura, manejo y cuidado, recomendaciones. 8econocimiento del 5icroscopio y sus elementos con la colaboraci!n del ayudante de c'tedra. Eisuali#aci!n de objetos e identificaci!n de la técnica correcta para enfocarlos. )l papel cuadriculado y el cabello los colocamos en portaobjetos, cubrimos con el cubreobjetos y observamos con los objetivos de "7, 1/7 y "/7.

L *arco Teórico

Definición )timol!gicamente microscopio viene del griego KmiOroK P pequeJo y KscopeQK P mirar  :para mirar cosas pequeJas; )n definitiva un microscopio es Rcualquier instrumento que se utili#a para obtener una imagen aumentada de objetos min@sculos o detalles muy pequeJos de los mismos.S )n su af'n de llegan siempre m's lejos en la investigaci!n de la naturale#a, de lo que los límites de sus !rganos sensoriales le imponen, el %ombre %a construido m@ltiples instrumentos que le %an permitido acceder allí donde los sentidos no podían penetrar.

Así como el telescopio abri! a la %umanidad las puertas de lo infinitamente grande, el microscopio %i#o posible conocer los mundos de dimensiones ínfimas, entre ellos la célula, base de la vida. +e contaban así las bases de las modernas ciencias biol!gicas que %asta bien entrada la edad moderna se %abían fundado en las observaciones directas. )l tipo m's com@n de microscopio y el primero que se invent! es el microscopio !ptico. +e trata de un instrumento !ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracci!n. a ciencia que investiga los objetos pequeJos utili#ando este instrumento se llama microscopía.

=istoria a curiosidad innata al %ombre %a %ec%o que este %aya intentado saber m's acerca de los objetos m's lejanos, pero también de los m's pr!7imos< desde la antigTedad se conoce algunos datos de observaciones %ec%as por diversas personas, sobre la propiedad de ciertos materiales :los vidrios; de modificar la imagen de lo que observamos, pero yéndonos a datos precisos, este es un resumen con fec%as y nombres de %ec%os importantes relacionados con el microscopio

"structura )l microscopio !ptico com@n est' conformado por dos sistemas 



)l sistema mec'nico est' constituido por una serie de pie#as en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque. )l sistema !ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que  produce el aumento de las im'genes que se observan a través de ellas.

 "a %arte mecánica del Microsco%io a parte mec'nica del microscopio comprende el pie, el cabe#al, el rev!lver, la platina, el tornillo micrométrico y el tornillo micrométrico. )stos elementos sostienen la parte !ptica y de iluminaci!n, adem's permite los despla#amientos necesarios para el enfoque del objeto. 





 El %ie# Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de M o bien es rectangular  El cabe*al o tubo ó%tico# 4iene forma cilíndrica y est' ennegrecido internamente  para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la lu#. )n su e7tremidad superior se colocan los oculares.  El revólver# )s una pie#a giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el rev!lver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posici!n de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piJ!n que lo fija.









 "a columna+ llamada también asa o bra#o, es una pie#a colocada en la parte  posterior del aparato. +ostiene el tubo en su porci!n superior y por el e7tremo inferior se adapta al pie.  "a %latina# )s una pie#a met'lica plana en la que se coloca la preparaci!n u objeto que se va a observar. 0resenta un orificio en el eje !ptico del tubo que  permite el paso de los rayos luminosos a la preparaci!n. a platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inm!vil< en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.  El tornillo macrom,trico# ?irando este tornillo, asciende o desciende el tubo !ptico o la platina del microscopio, desli#'ndose en sentido vertical gracias a una cremallera. )stos movimientos largos permiten el enfoque r'pido de la  preparaci!n.  El tornillo microm,trico# 5ediante el movimiento casi imperceptible que  produce al desli#ar el tubo o la platina, se logra el enfoque e7acto y nítido de la  preparaci!n. leva acoplado un tambor graduado en divisiones de /,//1 mm que se utili#a para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Sistema &%tico )l sistema !ptico es el encargado de reproducir y aumentar las im'genes mediante el conjunto de lentes que lo componen. )st' formado por los lentes oculares, los objetivos, la fuente de lu#, el condensador y el diafragma. 

 "os oculares# os oculares est'n constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. os oculares generalmente m's utili#ados son los de >, 1>, 12.$>, 1$>. a > se utili#a para e7presar en forma abreviada los aumentos.













 "os objetivos# os objetivos producen aumento de las im'genes de los objetos y organismos y, por tanto, se %allan cerca de la preparaci!n que se e7amina. os objetivos utili#ados corrientemente son de dos tipos objetivos secos y objetivos de inmersi!n. +e disponen en una pie#a giratoria denominada rev!lver. os objetivos secos se utili#an sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparaci!n. )n la cara e7terna llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. )l n@mero de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. os aumentos de los objetivos secos m's frecuentemente utili#ados son &>, 1>, 2/>, "$> y &/>. )l objetivo de inmersi!n est' compuesto por un complicado sistema de lentes. 0ara observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparaci!n, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. ?eneralmente, estos objetivos son de 1//> y se distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su e7tremo inferior.  "a -uente de "u*. Iue puede ser natural :a través de un espejo; o artificial :una l'mpara conectado a una fuente de energía eléctrica;. /ondensador# )l condensador est' formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparaci!n. )l condensador se %alla debajo de la platina. )l condensador puede desli#arse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente.  !ia0ra1ma# ?eneralmente, el condensador est' provisto de un diafragma o iris, que regula su abertura y controla la calidad de lu# que debe pasar a través del condensador.

Tipos de *icroscopios a b@squeda de im'genes de mejor calidad y contraste, %a llevado al descubrimiento de nuevas y mejoradas clases de microscopios. as principales clases de microscopios se resumen en el siguiente cuadro os microscopios !pticos utili#an la propiedad de los lentes de aumentar la imagen de los objetos y de esa manera visuali#arlos con el uso de la lu# visible :espectro de lu#;. os microscopios !pticos especiales en cambio utili#an otros tipos de lu# o modificaciones a la lu# visible para obtener im'genes que de otra manera no se pueden visuali#ar. )l microscopio electr!nico dej! a un lado la utili#aci!n de fotones :partículas que componen la lu#; y de los lentes, y pas! al uso de electrones para la visuali#aci!n y campos magnéticos que %acen las veces de lentes obteniéndose así im'genes de mejor calidad y de un mayor aumento.

Propiedades del *icroscopio  Poder se%arador# 4ambién llamado a veces poder de resoluci!n, es una cualidad del microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos puntos pr!7imos que  pueden verse separados. )l ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro. )n el microscopio !ptico, el poder separador m'7imo conseguido es de /,2 décimas de micra, y en el microscopio electr!nico, el poder separador llega %asta 1/ 'ngstrom.  Poder de de0inición# +e refiere a la nitide# de las im'genes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. )sta propiedad depende de la calidad y de la correcci!n de las aberraciones de las lentes utili#adas.  Poder de aumento# )n términos generales se define como la relaci!n entre el di'metro aparente de la imagen y el di'metro o longitud del objeto.

*anejo y "nfo>ue )n forma sistem'tica se debe seguir el siguiente modelo para un adecuado manejo y la técnica del enfoque 









)ncender la fuente de lu# o colocarlo en un lugar iluminado en el caso de microscopio con fuente natural. Colocar el objetivo de menor aumento en posici!n de empleo y bajar la platina completamente. +i el microscopio se recogi! correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones. Colocar la preparaci!n sobre la platina sujet'ndola con las pin#as met'licas. Comen#ar la observaci!n con el objetivo de "7 :ya est' en posici!n; o colocar el de 1/ aumentos :1/7; si la preparaci!n es de bacterias. 0ara reali#ar el enfoque o

o





Acercar al m'7imo la lente del objetivo a la preparaci!n, empleando el tornillo macrométrico. )sto debe %acerse mirando directamente y no a través del ocular. 5irando, a%ora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparaci!n con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico %asta obtener un enfoque fino.

Al pasar al siguiente objetivo la imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. )mpleo del objetivo de inmersi!n o

3ajar totalmente la platina.

o

o

o

o

o

o

+ubir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de lu# que nos indica la #ona que se va a visuali#ar y donde %abr' que ec%ar el aceite. ?irar el rev!lver %acia el objetivo de inmersi!n dej'ndolo a medio camino entre éste y el de "/>. Colocar una gota mínima de aceite de inmersi!n sobre el círculo de lu#. 4erminar de girar suavemente el rev!lver %asta la posici!n del objetivo de inmersi!n. 5irando directamente al objetivo, subir la platina lentamente %asta que la lente toca la gota de aceite. )nfocar cuidadosamente con el micrométrico.

Recomendaciones 





















evantar y transportar el microscopio por el bra#o. )s conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesi!n pr'ctica. Cuando no se est' utili#ando el microscopio, %ay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daJen las lentes.  =unca %ay que tocar las lentes con las manos.  =o dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est' utili#ando el microscopio. Al finali#ar el trabajo, %ay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en  posici!n de observaci!n. a cantidad de lu# que ingresa por el condensador va %a depender del objetivo que estemos utili#ando, a mayor aumento mayor cantidad de lu#. espués de utili#ar el objetivo de inmersi!n, %ay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con paJuelos especiales para !ptica o con papel de filtro :menos recomendable;. )n nuestro caso podemos %acer uso de paJuelos que no dejen  pelusa.  =o for#ar nunca los tornillos giratorios del microscopio. )l cambio de objetivo se %ace girando el rev!lver y dirigiendo siempre la mirada a la preparaci!n para prevenir el roce de la lente con la muestra. 5antener seca y limpia la platina del microscopio.

L Observaciones de la Pr2ctica L 0onga el nombre de cada una de las partes del 5icroscopio Hptico Compuesto

L ?rafique lo observado en el microscopio L #utoevaluación L +on componentes del sistema mec'nico del microscopio. )7cepto L )l tubo !ptico. L )l bra#o. L a platina. L )l diafragma. L os tornillos macro y micrométrico. L 4odos. L =inguno. L +obre el manejo y cuidado del microscopio. +eJale lo correcto L +e debe levantar y transportar el microscopio por el bra#o. L )s conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesi!n pr'ctica. L =unca %ay que tocar las lentes con las manos.

L =o dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est' utili#ando el microscopio. L 4odos. L =inguno. L +eJale 2 diferencias entre el microscopio !ptico y el microscopio electr!nico  UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU  L VIué entiende por poder de definici!n del microscopioW  UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUU  L VC!mo e7plica usted observar la imagen impresa en el papel milimetrado : X ; de modo inverso en el microscopioW  UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU   UUUUUUUU  "7 "7 1/7 1/7 "/7 "/7 bjeto UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU  bjeto UUUUUUUUUUUUUUUUUUUUU 

 Microsco%ios ó%ticos o

microscopio simple

o

microscopio compuesto

 Microsco%ios ó%ticos es%eciales o

microscopio de lu# ultravioleta

o

microscopio en campo oscuro

o

microscopio de fase

 Microsco%ios electrónicos o

microscopio electr!nico de transmisi!n

o

microscopio electr!nico de barrido

Tornillo  Micrométrico Tornillo  Micrométrico Oculares  Interruptor   Pie  Platina  Brazo Tubo óptico Objetivos Fuente de Luz   Revolver  Condensador   ia!ra"ma

















1&/ Facarías ansen construye un microscopio con dos lentes convergentes. 1&&$ NooOe utili#a un microscopio compuesto para estudiar cortes de corc%o y describe los pequeJos poros en forma de caja a los que él llam! KcélulasK. 0ublica su libro 5icrograp%ia 1&(" eeu6en%oeO informa su descubrimiento de proto#oarios. bservar'  bacterias por primera ve# - aJos después. 1 +c%leiden y +c%6ann proponen la teoría de la célula y declaran que la célula nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales. 1(& Abbé anali#a los efectos de la difracci!n en la formaci!n de la imagen en el microscopio y muestra c!mo perfeccionar el diseJo del microscopio. 11 8et#ius describe gran n@mero de tejidos animales con un detalle que no %a sido superado por ning@n otro microscopista de lu#. )n las siguientes dos décadas él, Cajal y otros %ist!logos desarrollan nuevos métodos de tinci!n y  ponen los fundamentos de la anatomía microsc!pica. 12 Yoc% usa tinte de anilina para teJir microorganismos e identifica las  bacterias que causan la tuberculosis y el c!lera. )n las siguientes dos décadas, otros bacteri!logos, como Ylebs y 0asteur identificar'n a los agentes causativos de muc%as otras enfermedades e7aminando preparaciones teJidas bajo el microscopio. 1-( )rnst 8usOa y 5a7 Ynoll, físicos alemanes, construyen el primer microscopio electr!nico.