Obtencion de Preparado Enzimatico Crudo (2)

TEMA:

CINETICA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

CURSO:

biotecnología de los pai

ALUMNO: MEDINA GARCIA SANDRA minchola gutierrez Rosmer edgar VILLANUEVA CHUNQUE YONEL

DOCENTE:

CICLO:

MsC. Guillermo linares lujan

IX

TRUJILLO TRUJILLO – PERÚ

2011

OBTENCION DE PREPARADO ENZIMATICO CRUDO

I.

INTRODUCCIÓN

La tecnología enzimática tiene como objetivo la superación de todos aquellos inconvenientes que parecen retrasar la aplicación de las enzimas en estos procesos a escala industrial, las enzimas son proteínas cuya función biológica es catalizar las reacciones que suceden en las células. Esta área tiene aplicaciones desde tiempos remotos como la fermentación, actualmente en diferentes industrias a diferentes niveles, ya que implica la utilización de sistemas enzimáticos diversos que optimizan el procesamiento en la obtención de detergente, aditivos alimenticios, productos químicos y farmacéuticos. La tecnología enzimática se presenta como alternativa biotecnológica basada en que las industrias desarrollen productos de calidad omogénea, aprovecen óptimamente sus materias primas, aceleres sus procesos de producción, minimicen desperdicios y disminuyan el deterioro del medio ambiente. Las enzimas son catalizadores de origen biológico que parecen cumplir mucos de los requisitos necesarios para impulsar esta nueva industria química. !on catalizadores muy activos en medios acuosos y en condiciones muy suaves de temperatura, presión, p", etc. !on catalizadores muy específicos# pueden modificar un $nico substrato en una mezcla de substratos muy similares e incluso pueden discernir entre dos isómeros de una mezcla racémica de un compuesto quiral, !on catalizadores muy selectivos# pueden modificar un $nico enlace o un $nico grupo funcional en una molécula que tenga varias posiciones modificables. % pesar de esas e&celentes propiedades catalíticas, las enzimas an ido evolucionando a través de los siglos para cumplir mejor las necesidades fisiológicas de los seres vivos y no para ser utilizadas en sistemas químicos industriales. %sí, las enzimas son catalizadores solubles, generalmente muy inestables y que sufren inibiciones por substratos y productos. %demás, las enzimas mucas veces no poseen todas las propiedades ideales 'actividad, selectividad, etc.( cuando queremos que catalicen procesos distintos de los naturales 'por síntesis  en lugar de idrólisis(, sobre substratos no naturales, en condiciones e&perimentales no convencionales 'en disolventes orgánicos no) tó&icos(.

II.

OBJETIVOS

*btener preparados enzimáticos crudos a partir de semillas de abas, de guaba, ígado de pollo, pulpa de papaya.

III.

MATERIALES Y MÉTODOS A.

Material

a. Material Biolói!o !emillas de guaba +ulpa de papaya. "ígado de pollo !emillas de aba.

". Rea!ti#o$ % Sol&!io'e$ +rueba de yodo !olución de -l ./0 1. "-l .2 3

!. Material (e Vi(rio % otro$ 4ea5er de 0 ml 1atraces de 2 ml +ipetas de 2 y 6 ml +ipetas de / y 2 ml 7ubos de ensayo. 1orteros 8radillas -ucillos

(. E)&i*o$ 4alanza analítica Equipo de ba9o maría -entrífuga

B.

Meto(olo+a   !e procedió a triturar cada muestra respectiva en el mortero '6g(, en un medio frio para evitar la desnaturalización de las proteínas al momento de presionar contra la muestra. Luego se adiciono el -L para lograr un medio isotónico parecido a la concentración celular. •

•

•

V.

!eguidamente se procedió a filtrar el medio atravez de una gasa doblada en cuatro. !e centrifugo a 0 rpm por 2 minutos. !eparar el sobrenadante en tubos de ensayos lo cual sería el preparado enzimático crudo.

RESULTADOS

COMPONENTES Sol&!ió' al-i(ó' // **0-l1 A&a (e$tila(a 0-l1. Pre i'!&"ar a 637C *or 38. Pre*ara(o e'9i-:ti!o !r&(o 0-l1 I'!&"ar a 637C *or ;38 ar e' re*o$o 38

T B

P

SEMILLAS

T B

P

PULPA DE

T B

P

MUESTRA

T B

P

SEMILLAS

?i&ra ;. Pr&e"a !&alitati#a (e a!ti#i(a( e'9i-:ti!a e' la$  -&e$tra$ to-a(a$ 0T@ te$tio= P@ *ro"le-a= B@ "la'!o1

?i&ra 2. M&e$tra !&alitati#a (e e'9i-a$ (e $e-illa$ (e &a"a$

?i&ra 6. M&e$tra !&alitati#a (e e'9i-a$ (e *a*a%a 

?i&ra . M&e$tra !&alitati#a (e e'9i-a$ (e ia(o

?i&ra 3. M&e$tra !&alitati#a (e e'9i-a$ (e $e-illa$ (e a"a$.

VI.

DISCUSIONES

En el laboratorio se realizó la e&tracción de enzimas de cuatro fuentes diferentes las cuales producían sus propias enzimas, a9adiendo que para la obtención de enzimas a gran escala, es de gran importancia seleccionar el organismo adecuado y el órgano, tejido o tipo celular apropiado que sea capaz de sintetizar una gran cantidad de la enzima deseada. 3ormalmente se utilizan microorganismos, ya que son una fuente apropiada de la mayoría de las enzimas industriales y son fáciles de manipular y de cultivar en grandes fermentadores industriales. 0Ca$tillo= 2//31

8eneralmente, los organismos sintetizan sus enzimas en peque9as cantidades, por lo que en mucas ocasiones se recurre a utilizar como material de partida organismos mutantes seleccionados por su capacidad de producir en gran cantidad la enzima deseada.0Ca$tillo= 2//31

Las enzimas juegan un papel importante en las reacciones químicas que tiene lugar en los organismos, el identificar y conocer los cambios y los efectos que ejercen los factores e&ternos son aspectos que facilitan el entendimiento en los procesos fisiológicos durante el desarrollo ontogénico. Estos parámetros ayudan a la industria alimentaria para buscar, desarrollar y formular dietas especializadas que optimicen los recursos y resultados en la acuacultura, particularmente en la larvicultura. 0Are'al= 2//21. En el laboratorio se procedió a inactivar enzimas con el "-L, logrando bajar el p" y aumentando los iones ": ayudando a desdoblar las cadenas y cambiando las estructuras. Logrando así desactivar las enzimas ya que a p" bajos se produce una desnaturalización enzimática. 0Mate$= ;551 7oda reacción enzimática dependerá siempre de la temperatura a la que se encuentre, ya que si aumentamos la temperatura aumentara la reacción enzimática asta que cierto punto má&imo sea alcanzado, así el n$mero de moléculas estarían aumentando estando ricas en energía pasando la barrera energética del estado de transición. !i la temperatura es e&cesiva en el medio enzimático, empezara a disminuir la velocidad de reacción ya que estas se estarán desnaturalizando, fue por esto que se tomó siempre el valor de la temperatura y acompa9ando con ielo al momento de triturar las muestras con el mortero para así evitar la desnaturalización de las enzimas. 'Dora'= ;551

VII.

CONCLUSIONES

!e *btuvo los preparados enzimáticos respectivos de ígado de pollo, pulpa de papaya, semillas de aba y guaba.

VIII.

RECOMENDACIONES

7ener cuidado de no triturar las muestras en un medio con temperatura ambiente ya que puede aber una desnaturalización de las proteínas de la muestra al momento de triturar, por ello se procederá a colocar ielo para un mejor trabajo.

7riturar bien las muestras para así obtener mayor solución ante el filtrado.

Lavar bien las pipetas ante el cambio de muestra a pipetear.

I.

BIBLIO,RA?A

-astillo ;odríguez