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OBSERVACIÓN Y TINCIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS
PRESENTADO POR: NANCY FONSECA
DOCENTE: RODIAN FONSECA
UNIVERSIDAD DEL ATLANTICO FACULTAD QUIMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE BIOLOGIA I SEMESTRE BARRANQUILLA / ATLANTICO ABRIL- 2014
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RESUMEN
En el siguiente informe detallaremos cómo observamos algunas de las características de las bacterias y otros microorganismos desarrolladas en medio de cultivo, y la manera en que se utilizaron los distintos métodos de tinción y coloración para la observación de estos a través del microscopio.
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INTRODUCCION
La célula es la unidad anatómica y funcional de los seres vivos, por lo que todos los seres vivos están constituidos por ella. Existen Exi sten organismos unicelulares, formados por una sola célula, como las bacterias y otros seres, llamados pluricelulares, que contienen millones de células, como los seres humanos. Hay muchos tipos de células de diversas formas y tamaños. Hay dos grandes grupos de células:
Procariotas, cuya característica más importante es la carencia de un núcleo definido. Eucariotas, animales y vegetales. Éstas tienen núcleo definido. En este laboratorio analizaremos las células procariotas en especial las bacterias y sus tinciones, su forma y características más importantes.
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MATERIALES
Cultivos de micoorganismos realizados con anterioridad Un vaso de kumis Azul de metileno Portaobjetos Beaker Mechero Asa de inoculación punta redonda
MÉTODOS 1. Preparación de frotis bacteriano en el portaobjeto. Se escoge un portaobjeto limpio, libre de material graso. Se calienta cuidadosamente pasándolo pasándolo 3 veces por la llama del mechero, se prueba la temperatura tocando la parte inferior del portaobjeto con la parte inferior de la muñeca, debe estar caliente pero tolerable. Cuando el portaobjeto este frio se coloca sobre él una gota de agua limpia, utilizando un asa de punta redonda previamente esterilizado, se coge una pequeña cantidad de de cultivo con microorganismos y se extiende hasta que que se forme un frotis delgado luego se pone a secar al aire hasta que se forme una película seca sobre el portaobjeto.
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1.2.
Fijación del frotis bacteriano al portaobjeto.
Se pasa rápidamente tres o cuatros veces el portaobjeto sobre la llama, con el lado del frotis hacia arriba y dejar enfriar el portaobjeto a temperatura ambiente. 1.3.
Tinción del frotis bacteriano. Azul de metileno Se sumerge el portaobjeto en un vaso de agua limpia, luego se cubre con gotas de azul de metileno, se deja actuar de 15 a 20 segundos, al final se escurre el exceso de colorante. Se sumerge varias veces el portaobjeto repitiendo la misma operación dejando escurrir el exceso de agua.
2. Se toma una pequeña muestra de yogurt y se deposita en el portaobjeto agregándole una gota de agua y se mueve hasta obtener una solución uniforme extendida en el portaobjeto. Se deja cesar colocándola al fuego, se le agrega alcohol y se deja actuar, luego se le agrega azul de metileno, se sumerge en agua y se coloca a secar al aire.
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RESULTADOS
Cultivo de bacterias (escherichia coli) 10x
40x
Tiene formas de espirilos (espiral)
Bacterias en yogurt:
10x
40x
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CONCLUSIONES
Durante este experimento pudimos observar las diferentes formas que tienen las bacterias. La mayoría de los l os enterococos, estreptococos, y demás grupos o género microbianos son algunos patógenos y no patógenos, de estos se pueden preparar fermentaciones, que mediante un largo proceso, llegan a ser elaboradas en productos comestibles, garantizando la mayor seguridad al consumir ese producto fermentado.
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PREGUNTAS
1. ¿Por qué debe usarse coloraciones para observar a los microorganismos? Porque son transparentes y necesitamos la ayuda de coloraciones para poder detectarlos y de esa manera poder determinar que microorganismo tenemos, sin son Gram + o Gram – Gram – y y demás. 2. ¿para qué se usa la coloración de azul de metileno? Se una para darle coloración c oloración a aquellos microorganismos que son traslucidos al ser observados en el microscopio, de esa manera podemos observar la estructura que conforman esa célula. 3. ¿según Gram cómo se dividen las bacterias? Se clasifican según su forma y agrupación: Gram negativas y Gram positivas - Cocos: esféricas - Espirilos: espiral - Bacilos: bastón 4. ¿Por qué se debe enfriar el asa antes de usarla? Porque si tomamos la muestra con el asa recién esterilizada al calor, se carbonizaran las bacterias de la muestra y no se observaran correctamente.
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porque te ayuda a diferenciar aparte la de morfología, las características de la pared celular del microorganismo de retener o no el colorante y así aparte de decir si es coco o bacilo, simplemente se puede decir ahora que es un coco Gram positivo o un bacilo Gram negativo. 7. ¿Qué tipos de colorantes se utilizan para los hongos? Acetocarmin o carmín acéticopara Lyophyllum calocybe tephrocybe se tiñen de rojo negruzco. Fushina, reactivo de melzer. Yoduro potásico 1,5g Yodo 0,5g Yoduro potásico 8. ¿Cuál es la diferencia de cápsula y capa mucosa en las bacterias? La cápsula es una capa rígida organizada en matriz impermeable que excluye colorantes como la tinta china, en cambio la capa de material extracelular que se deforma con facilidad, es incapaz de excluir partículas y no tiene un límite definido, se denomina capa mucosa o glucocalix. Ambas se pueden detectar con métodos como la tinción negativa negativa o la tinción tinción de burri.
9. ¿cómo se llama el método para visualizar capsulas? Capsula endoscópica.
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12. ¿Qué es un antibiótico de amplio espectro? Son de amplio espectro cuando tienen acción sobre un número importante de agentes infecciosos, especialmente de las bacterias; es decir que atacan a bacterias Gram positivas ya sean bacilos, aerobios, anaerobios etc.
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BIBLIOGRAFIA CIENCIAS BIOLÓGICAS" - http://hnncbiol.blogspot.com
www.biologia.edu.ar/bacterias/micro4.htmm www.bio-nica.info/biblioteca/BacteriasEnfermedades.pdf
http://www.danival.org/600%20microbio/6000notasmicro/tincion/tincion_gramn eg.html
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