Métodos analíticos para la determinación de bisfenol A en los alimentos

Métodos analíticos para la determinación de bisfenol A en los alimentos Ana Ballesteros Gómez, Soledad Rubio ∗, Dolores Pérez-Bendito Departamento de química analítica, Facultad de Ciencias, Campus de Rabanales, Edificio Anexo Marie Curie, 14171 Córdoba, España

abtracto Alimentos constituyen la ruta principal para la exposición humana a bisfenol A (BPA), uno de mayor volumen productos químicos producen en todo el mundo. Las propiedades estrogénicas de BPA, su utilización amplia dispersión y el reciente extensa literatura que describe los efectos BPA de dosis bajas en animales, han expresado su preocupación acerca de su posibles efectos adversos sobre la salud humana. Una evaluación de riesgo de salud confiable de BPA se basa fundamentalmente en su identificación inequívoca y cuantificación precisa en los alimentos y el objetivo de la presente revisión esdan una descripción de los métodos analíticos divulgado hasta ahora para la determinación de BPA en estas matrices.Se pone énfasis en las estrategias principales para el tratamiento de la muestra, que consiste en generalmente de varios pasos laboriosos y lentos para alcanzar la necesaria sensibilidad y selectividad. Separación, identificación y cuantificación de BPA es hoy confiablemente hecha con masa espectrometría métodos, es decir, líquido chromatography –mass espectrometría (LC –MS) y chromatography –mass de gas espectrometría (GC –MS) y, por tanto, la atención principal se dedica a estas técnicas, pero otros métodos LC juntada a la fluorescencia o detección electroquímica, métodos así como inmunoquímicos inmunoquímicos son también cubierto. Se discuten los desarrollos futuros esperados y recientes © 2008 Elsevier B. V. Todos los derechos reservados.

Introducción Bisfenol A (BPA), propano 2,2-bis(4-hydroxyphenyl), es uno de los químicos de volumen más altos en el mundo [1,2]. Demanda global de BPA se prevé un crecimiento de 3,9 millones de toneladas en 2006 a sobre 5 millones de toneladas en 2010 [3].Muchos países en todo el mundo tienen una capacidad de producción grande de BPA, especialmente Alemania, la Países Bajos, Estados Unidos y Japón. Capacidad BPA en Europa occidental fue Estimado en 830 millones de toneladas en el año 2000 [4], grewby 4%/year de 2000-2006 y se ha previsto crecer por 2%/year en el período 2006 – 2010 [3]. El principal mercado de BPA es la producción de policarbonato con la segunda salida ser resinas epoxi. Otros usos incluyen ignífugos, resinas de poliéster insaturado y resinas de poliacrilato, polieterimida y polisulfona [5,6]. A gran variedad de alimentos en contacto contac to con materiales destacan entre sus usos, deriva principalmente de policarbonatos (bebé biberones, vajilla,

fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas del río [ 8- 10], 20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire [ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana [6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea (UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7]. La generalizada La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y 0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de Los estudios. La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100 .000 Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un gran número de recientes Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Tanto la genómica y la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta, Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este Una amplia literatura sobre nuevos efectos a bajas dosis de BPA ha Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la reglamentación Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Evaluación ha sido muy recomendable [ 20]. Actualmente, el Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión -

fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas del río [ 8- 10], 20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire [ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana [6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea (UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7]. La generalizada La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y 0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de Los estudios. La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100 .000 Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un gran número de recientes Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Tanto la genómica y la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta, Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este Una amplia literatura sobre nuevos efectos a bajas dosis de BPA ha Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la reglamentación Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Evaluación ha sido muy recomendable [ 20]. Actualmente, el Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión -

Fija determinando (NOAEL) de 5mg/kg. Por otro lado, un Límite de migración específica (LME) de BPA de plástico contacto con alimentos Materiales de 600 ng g de 1 fue establecido por la Comisión de la UE en 2004 [ 25]. Debido al alto volumen, amplia dispersión utilice y endocrino Interrumpiendo y propiedades tóxicas de BPA, es un claro candidato a ser Incluido en la lista de sustancias que están sujetas a autorización en el Nueva política de productos químicos autorizados por la Unión Europea, REACH (Registro, Evaluación, Autorización y Restricción de Sustancias Químicas, que figura en el Anexo XIV) [ 26]. Por lo tanto, hay necesidad de investigación(newmethods) y de la revisión 2. Fuentes y la eliminación de contaminación de fondo BPA es inherentemente ubicuo en el medio ambiente. Fondo contaminación de BPA se produce a niveles de L−1 ng y surge principalmente de solventes, columnas SPE, cristalería, artículos de plástico y otros reactivos y herramientas de laboratorio. En general, tratados térmicamente cristalería (4 h en 400 C) y se utilizan materiales de lavado con solvente como una precaución medida para evitar la contaminación de fondo [28]. ◦

Se han encontrado concentraciones de BPA en 0.02gL−1 en

Agua Milli-Q usando métodos altamente sensibles (cuantificación instrumental límite de 5 pg) [29]. La contaminación se presentó desde el plásticos usados en el sistema de purificación purificació n y fue quitado por filtrado el agua a través de una membrana hidrofóbica (disco Empore). Otros autores, sin embargo, no encontró contaminación BPA cuando se analizados calidad ultra-alta diferente aguas, como agua Pestanal de Riedel de Haën o los obtenidos de un Elgastast y un sistema de Millipore Milli-Q, Milli -Q, aunque en estos experimentos los límite de cuantificación instrumental fue de alrededor de 10 ng [32]. Cartuchos SPE (e.g. Oasis HLB de aguas y Bond Elut certificar de Varian) se ha sabido para causar contaminación de BPA en concentraciones de alrededor de 0.04gL−1 *31+. La contaminación fue

efectivamente removido por prelavado los cartuchos que por lo menos 15mL de metanol y probablemente se deriva no de la absorbente material, sino al proceso de fabricación. Carga de la muestra SPE puede introducir la fuerte contaminación de BPA cuando jeringas de vidrio se utilizan, causada principalmente por el adhesivo utilizado para fijar la aguja [30,32]. Utilizando una bomba peristáltica con tubos de vinilo, la contaminación de BPA llegó a ser insignificante aunque la contaminación fue importante para los dos derivados BPA (es decir, 4-terc-butylbenzoic ácido, BBA y 4-tert-butilfenol, t-BP). Contaminación de la muestra de la SPE carga puede eliminarse casi totalmente mediante la sustitución de la tubos de vinilo con Viton de DuPont [32]. 3. Tratamiento de muestra Hay una amplia variedad de alimentos que contienen BPA incluyendo fresco y conservas muestras sólidas y líquidas (Fig. 1). Determinación de

BPA en estas matrices a menudo requiere la preparación de la muestra amplia antes del análisis instrumental. Los pasos habituales en alimentos preparación de la muestra incluyen pretratamiento, extracción, clean-up, concentración y a veces derivatización y constituyen el cuello de botella en el actual análisis de alimentos (Fig. 1). Las muestras sólidas son generalmente primero homogeneizada mientras que los líquidos que se filtran o centrifugado. Tratamientos especiales pueden ser requeridos dependiendo de sobre la composición de la matriz; por ejemplo las bebidas carbonatadas son desgasificada [16,33], muestras con alto contenido en proteínas pueden requerir su eliminación por los tejidos de peces y precipitación son triturados y liofilizado antes de homogeneización. Conservas que contienen ambos porciones de líquidos y sólidas son generalmente filtradas y tratadas por separado. Extracción por solventes y SPE son las técnicas más usadas para el aislamiento de BPA de sólidos y líquidos muestras, respectivamente, principalmente debido a su simplicidad y amplia aplicabilidad. Otros técnicas (p. ej., MAE, PLE, MSPDE, SPME, SBSE, CF. Fig. 1), aunque apenas usados hasta ahora, puede mejorar la extracción de BPA en términos de tamaños de muestra, automatización y consumo co nsumo de disolventes. Los extractos que contienen BPA suelen ser sometidos a extensa clean-up y en Esta extracción líquido-líquido de respeto y SPE son preferidas. Concentración de BPA por evaporación del solvente del extracto final es un paso inevitable debido a su baja concentración en alimentos (cf. Tabla 2). En general, suele ser la combinación de diferentes técnicas inevitable y métodos se convierten en dependientes de frequentlymatrix. Sólo los métodos para estudiar la migración de BPA de unusedcommercial latas por extracción con simulación de alimentos líquidos son más simples [37]. Cuadro 3 da algunos ejemplos representativos de los procedimientos de tratamiento de muestra para el análisis de que contienen BPA alimentos. A continuación, las principales técnicas utilizadas para la extracción y limpieza se discuten detalladamente. generalmente preferido para la extracción de alimentos sólidos [16,17,39,40,42,44,46] Aunque otros como acetona [41], [39,47] de metanol y etanol [43] también puede extraer BPAefficiently. Alimentos líquidos son extraídos c on acetato de etilo [45], [48] de cloroformo o diclorometano [33]. Como un la regla general, extracciones extracc iones repetidas son generalmente necesarias para el aislamiento total de BPA. Típico consumo de disolventes en general, incluyendo extracciones repetidas y lavado, es entre 40 y 300mL. Extracción veces oscilan de 10min a 120min utilizando agitación o sonicación para favorecer la partición de equilibrio. Sodio anhidro sulfato con frecuencia se agrega a la muestra antes de [40,41] o después de la extracción [16,17] para separar trazas de agua en la capa orgánica. La importancia de controlar la enzimática degradación de BPA durante la extracción de muestras como fruta fresca y verduras se ha destacado puesto que conduce a las recuperaciones pobres

[41]. Degradación puede prevenirse mediante la adición de 0.1N ácido clorhídrico para el solvente de extracción solvente [41]. Debido a la selectividad limitada de extracciones de base solvente hay una necesidad de limpiar extensa antes de análisis instrumental. Eliminación de lípidos del extracto es esencial para las muestras de origen animal (pescado, carne, etc.) dado que pueden reducir significativamente el rendimiento analítico de LC y GC. Afecta material lipídico la superficie activa de la inmóvil fase en LC y degrada el poder de resolución de la columna. En GC/MS, los lípidos se acumulan en el fuente de puerto, la columna y el ion de inyección. Eliminación de grasa se hace principalmente por extracción líquido-líquido con n-heptano [16], 2,2,4-trimetilpentano [17] y [39,40,46] n-hexano o congelando los lípidos en el extracto en −24 C durante 40 minutos, seguido de filtración [38]. El uso de SPE para Clean-up de los extractos que contienen BPA es inevitable en la mayoría procedimientos de tratamiento de ofsample [38, 40 –44, 46].Después de eso, la evaporación de elutes, reconstitución con disolvente orgánico y filtración (0.20 –0.5 m) completa el tratamiento de la muestra. Aunque general las recuperaciones de estos procedimientos son generalmente muy por encima de 75%, bajo recuperaciones (( 1%) no afectó la determinación de BPA desde eficientemente fueron separados por el sistema LC. En general, las muestras de alimentos deben tratarse en cierta medida con el fin de hacerlos compatibles con cromatografía de inmunoafinidad. Withwater de dilución es esencial desde solventes orgánicos Fig.2. Cromatogramas obtenidos para solución a BPA (10 ngmL−1), (b)

vino muestra sujeta a limpiar por extracción en fase sólida (C18 cartucho) y (c) la misma muestra de vino limpiado-para arriba por cromatografía de inmunoafinidad [79]. causar desnaturalización irreversible de anticuerpos. Alimentos líquidos como bebidas y vinos son desgasificados y diluyeron 1:1 con phosphatebuffered salino (PBS) (pH 7) para permitir la Unión de BPA immunosorbent. Alimentos sólidos como frutas, verduras, estofado, sopa y pescado se extrae con acetonitrilo, extraido hacia atrás con n-hexano para eliminar los lípidos en matrices grasos, filtrado y diluido (1:10) withwater antes de limpiar con ISs.Compared C18-basado SPE, IAC fue superior en la eliminación de interferencias de matriz de alimentos que se muestra en la figura 2 para muestras de vino limpiado-para arriba con C18 y IAC. Recuperaciones de BPA con IAC fuertemente dependen de la matriz alimentaria. Así, algunos de los valores obtainedwere: 53% en guisantes, 75% en duraznos [77], 27% en goulash, 103% en un refresco de limón [78] y de 74%

al 81% en vinos [79]. Valores RSD para estas muestras fueron entre 1 y el 21%. Las recuperaciones de variables y bajas obtenidas para IAC fueron explicó sobre la base de la naturaleza dependiente de la matriz de la anterior disolventes de extracción de BPA y la influencia de coextraen componentes de la matriz de las interacciones BPA –antibody. 3.2.2.3. Molecularmente impresos polímeros (MIPs). Molecularmente polímeros impresos (MIPs) son polímeros sintéticos que molecular

capacidad de reconocimiento para un parámetro de destino [81]. MIPs ofrecen algunos ventajas sobre la ISs como estabilidad frente a los solventes orgánicos, ácidos fuertes y bases y calefacción. Además, permiten mayores volúmenes de muestra y reutilización y su síntesis es más fácil puesto que no son dependientes en la producción de anticuerpos. En la actualidad un número de enfoques se han utilizado para preparar BPA impreso polímeros, que han sido aplicados a la determinación [82 –85] y eliminación [86] de BPA y otros contaminantes de estrógeno fenólicos en aguas ambientales. Nuevas arquitecturas para desarrollar BPA-MIPs, como híbrido molecularmente impresos membranas [86], molecularmente impreso de microesferas Poliétersulfona (PES) [87] o un híbrido RAM-MIP [88] se han descrito en la literatura. En menor medida se han propuesto aplicaciones alimentarias de MIPs (revisado en [89]) aunque es una zona emergente con prometedor desarrollos. A lo mejor de nuestro conocimiento, sólo una aplicación ha sido desarrollado para la extracción basadas en MIP de BPA de alimentos [90]. Un acercamiento combinatorio fue utilizado para simplificar la optimización procedimiento. Ácido metacrílico (MAA) y 4-vinylpyridine (4-VP) fueron evaluados como monómeros funcionales, glicol de etileno Dimetacrilato (EDMA) y trimethylolpropane trimethacrylate (TRIM) como cross-linkers y metanol, acetonitrilo y tolueno como solventes. El iniciador utilizado fue 2,2-azobis methylbutyronitrile (AIMN) y la plantilla era de BPA. Isótopos estables etiquetados compuestos como el BPA-d16 [88] y análogos de la estructura como p-tertbutylphenol [84], también han sido utilizados como plantillas en otro enfoques para evitar indeseables plantilla salida fromMIP y la consiguiente llevar sobre efectos. Los componentes óptimos seleccionados fueron 4-VP (4 mmol) y recorte (12 mmol), que proporcionan una mayor grado de reticulación, AIMN (0.88 mmol) y tolueno (150 mL), que proporciona menor fijación no específica. La limpieza basadas en MIP / método de extracción/concentración permitida la determinación de BPA (recuperación del 78%; RSD 10%, n = 3), libre de co-extractives, en el fase acuosa filtrada de conservas.

3.3. Menos comunes técnicas de extracción Técnicas de extracción por sorción sobre miniaturizada como fase sólida Microextracción en (SPME) y revuelva la barra extracción por sorción sobre (SBSE) han la capacidad de mejorar el aislamiento y la limpieza de contaminantes de los alimentos en términos de consumo de disolventes, automatización y muestra manejo reducción, sin embargo su aplicación a la extracción de BPA fromfood es todavía limitada hasta la fecha. Asimismo, la matriz dispersión de la fase sólida (MSPD), que tiene el potencial de simplificar la extracción de muestras sólidas, se ha aplicado también apenas para la extracción de BPA de alimentos. A continuación, estas aplicaciones son

comentó destacando sus principales ventajas e inconvenientes. 3.3.1. Microextracción en fase sólida (SPME) El dispositivo SPME consiste en una fibra de sílice fundido recubierta con un fase estacionaria apropiada conectada a una microjeringa modificado. La extracción puede realizarse mediante la suspensión de la fibra en la la fase de vapor sobre la muestra líquida (headspace (HS)-SPME) o por dirigir la inmersión en la muestra, (DI)-SPME, siendo la desorción llevado a cabo térmicamente, exponiendo la fibra en el puerto de inyección de un cromatógrafo de gases, o químicamente, cuando acompañada de LC [91]. HS-SPME seguido por GC –MS es ideal para la extracción de compuestos volátiles de los alimentos (revisados en [92]) desde el analito las determinaciones son prácticamente libres de interferencias, pero ninguna aplicación relaciona con BPA en los alimentos se han desarrollado hasta ahora. DI-SPME seguido por GC –MS se ha aplicado a la determinación de BPA en simulantes de alimentos acuosa [93] y agua de los envases plásticos y vajilla [94]. DI-SPME también se ha propuesto antes LC –FL para la investigación rápida de BPA en conservas, sólo analizar la fase acuosa de la can [95]. Diferentes fases estacionarias con la capacidad para soportar temperaturas altas del inyector (polidimetilsiloxano, PDMS; carboxen/PDMS; PDMS/divinilbenceno, DVB; Carbowax CW/DVB y polyacrylate, PA) evaluaron la la extracción de BPA por DI-SPME –GC [93,94]. La capa PA dio las mejores recuperaciones en base a su polaridad similar al BPA. Entre los materiales de revestimiento probados para extracción de BPA por DI-SPME –LC, las fibras más polares dieron los mejores resultados. Recuperaciones fueron 6% para PDMS-DVB, 7% para PA, 58% de PDMS y 90% para CW, así que el último fue seleccionado como óptima. El efecto de la fuerza iónica en Las recuperaciones BPA fue significativa y los tres métodos incluyen el adición de sal, es decir, 7,5% (w/w) [93,95] y 15,4% (w/w) [94]. Absorción máxima se produjo en pH neutro [93,95] y la absorción proceso se llevó a cabo a temperatura ambiente [95] o en SSP.schintzii C [93,94]. ◦

Los tres métodos fueron lo suficientemente sensibles para la detección o evaluación de la migración de BPA (límites de cuantificación fueron 3.8mgL−1

[95] y 0.01 –0.02mgL−1 *93,94+), pero también presentaron graves inconvenientes. Así, la automatización de SPME con LC –FL a través de la interfaz de Supelcowas no da resultado, siendo el off-line modo más eficiente que el uno automatizado en términos de sensibilidad y resolución de pico [95]. Este hecho fue explicado sobre la base el mayor factor de concentración en el modo off-line ( ∼67) y la introducción más lenta de los analitos en el sistema de la LC en el modo dinámico, resultando en picos más amplios [95]. De hecho, Eisert y Pawliszyn [96] más tarde desarrolló la técnica SPME en tubo, que utiliza un capilar revestido de la pared interna como la extractionmedium

y es más conveniente para la automatización de la LC. Tubo SPE ha sido con éxito aplicado a la extracción de BPA y otros estrógenos de aguas ambientales [97,98], pero no en alimentos muestras todavía. Otros el punto débil del método SPME –LC –FL fue la reproducibilidad (RSD fue 22% para 100mgL−1 de BPA). Con respecto a la determinación

de BPA por SPME –GC –MS, la variabilidad fue alta entre serie (promedio RSD∼10 –13%) y en consecuencia una calibración para cada uno serie de análisis se recomienda [93,94]. Por otro lado a pesar de sólo simulantes acuosos o agua potable fueron analizados, las recuperaciones bajas resultante del efecto de los componentes de la matriz (7 –65%) [94,95], hizo aconsejable el uso de la adición estándar método para la cuantificación de BPA. Se relacionaron con las recuperaciones bajas competitividad entre BPAand el matrixcomponents para el enlace a la limitada cantidad de fase estacionaria, que condujo al analito desplazamiento [94]. A nuestro conocimiento ningún estudio relacionado con el uso de SPME para extracción de BPA de matrices más complejas de alimentos ha se ha divulgado hasta ahora. De hecho, el uso de DI-SPME en matrices de alimentos Si necesita limpiar exhaustiva para garantizar la reproducibilidad y la robustez de las fibras, que pueden ser afectados por adsorción de proteínas u obstruida por las partículas, del mismo modo que puede ocurrir en el Análisis de BPA en otras matrices complejas como plasma humano

3.3.2. Extracción absorbentes (SBSE) barra agitadora SBSE utiliza una barra de agitación en un tubo de vidrio sellado que está cubierto con polidimetilsiloxano (PDMS) para extraer solutos [100]. En comparación para SPME, una mayor cantidad de fase estacionaria (50 –250 veces superior) es usadas y por lo tanto mejores recuperaciones, sensibilidades andsample capacidad se consiguen. Como en SPME, puede estar inmerso la barra agitadora en el líquido de la muestra o puede realizarse en el espacio anterior el líquido o el sólido muestra para determinar volátiles y semi-volatiles (extracción por sorción sobre headspace, HSSE). Extracción de los analitos de la barra se logra mediante desorción térmica de GC o elución con una Solvente de la LC. La técnica se desarrolló inicialmente para la extracción de compuestos orgánicos de muestras acuosas, pero hoy una variedad de aplicaciones en el medio ambiente, alimentación y áreas biomédicas han se ha divulgado (ha comentado el en [101]). PDMS es disponible en el mercado único de la capa, la aplicación de SBSE para compuestos polares y semipolar requiere Derivatización. Por lo tanto, la extracción de BPA de agua [102 –104] se ha llevado a por derivatización de BPA con anhídrido acético, inmersión de la barra en la desorción de solución y termalAnálisis GC –MS. De esta manera, las LODs para BPA fueron en la gama 0.6 –2 ng L−1. A pesar de SBSE nuevo recubrimientos son necesarios para ampliar el alcance de SBSE, sólo unos cuantos se han divulgado

hasta el momento. Cabe destacar los twisters de la doble fase (corto Tubos PDMS cerrados en ambos extremos con imanes, con un interior cavidad que está repleto de adsorbente de carbón activado), que se propusieron mejorar las recuperaciones de compuestos polares [105 ] y dos materiales selectivos, es decir, un polímero molecularmente impreso (MIP) para la extracción de monocrotofos [106] y una restringida acceso a medios (RAM) para la extracción de cafeína y relacionadas con metabolitos [107]. En este sentido, basada en una novela capa SBSE en polidimetilsiloxano ha sido /-ciclodextrina (PDMS /-CD) recientemente desarrollado y aplicado a la extracción de BPA (y otros compuestos estrogénicos) de agua ambiental, agua potable y lixiviados de vajilla de una sola vez, antes de la determinación por LC –FL [108]. La capa de PDMS/CD fue preparada por un sol –gel técnica, whichprovideddirect químico de la papelería fase al substrato de cristal y dio lugar a una mayor estabilidad en comparación con a la técnica de deposición física empleada con frecuencia para capa. La introducción de la ciclodextrina permitió aumentar la recuperación de compuestos polares debido al alto número de funcional grupos hidroxilo de la molécula -CD y la selectividad proporcionados por su capacidad de reconocimiento molecular. La extracción fue realizado por inmersión de la barra de agitación en la muestra (5 mL) 40 min (condiciones de no equilibrio) a temperatura ambiente. Desorción de BPA se realizó con 100 litros de metanol durante 2 min bajo agitación ultrasónica (cociente del volumen de la muestra sobre el volumen del extracto de 50). PDMS /-CD revestido revolver bar proporcionada mejor selectividad y sensibilidad para compuestos polares que una barra de agitación recubiertas de PDMS y un CD de PDMS – recubierto de fibra. El menor rendimiento de método para SPME fue atribuida al menor volumen de fase estacionaria y la introducción de una etapa tercero competitiva en la agitación paso, es decir, el teflón recubierto barra magnética. El LDD de BPA fue 8ngL−1, con recuperaciones entre 86 y 116% y RSD en la gama 0.7 –10.7%. 3.3.3. Dispersión de fase sólida matriz (MSPD) MSPDwas reportada por primera vez en 1989 [109] y iswell adecuado para el extracción de alimentos sólidas, semisólidas o altamente viscosos y biológicas matrices (revisados en [110.111]). La muestra se mezcla con un absorbente como C18 enlazada sílice, sulfato de sodio o diatomeas tierra, seguida de lavado con un pequeño volumen de disolvente o embalaje el dispersante material absorbente en una mini-column SPE antes de elución. MSPD es simple y versátil y ofrece la posibilidad de de realizar la extracción y la limpieza en un solo paso [112.113] esta dando como resultado un acortamiento drástico de tiempos de análisis y solvente consumo. MSDP se ha divulgado recientemente para la extracción simultánea

de BPA, nonilfenol y Octilfenol de huevos y la leche [114] antes de la determinación de la LC/MS/MS. Se mezclaron las muestras (1 g) con 1 g de polvo de C18 sólo durante 5 minutos, embalado y eluido con 10mL de etanol. Este agente dispersante dio mejores recuperaciones de BPA que el negro de carbón grafito (GCB) debido a la fuerte adsorción de BPA GCB. El eluyente se evaporó a sequedad y la residuewas se redisuelve en diclorometano/hexano y sujeto a

Tabla 4 Análisis basado en la LC para la determinación de BPA en los alimentos mues tra

Otros analitos que BPA

Cerea 4-nles Nonylph enol

ls

prepara Columna ción de de LC la muestr a (pasos principa les)

-

 – PLE –

SPE

XTerra MS C18, 100 mm × 2. 1mm, 3,5 m (Sistema de aguas).

LC parámetr os

Fase móvil: Amonio de 0,0025 M tampón de formiato (pH 3.1, ajustado con fórmico ácido) /  metanol con gradiente elución, 0.2mLmi n−1, Inj:

50 L

Detector parámetr os gama lineal,

método LOD o LOQ recupera ciones (R)

Refere ncia

(-) De ESI-MS: capilar Voltaje: 3.0 kV, cono Voltaje: 40 V, fuente temperat ura: 120

LR: 0.08 –

Carabi asMartín ez et al [32]

◦C,

desolvati on temperat ura: 250 ◦C,

desolvati on de gas (N2): 410Lh−1,

gas de cono (N2): 50 L h−1

4-tertbutilfenol

además postcolu mna de una base fuerte [1, 8 -

0.8gg−1

(adición estándar ), LOD: 43 ng g−1;

R: 81 – 104% (PLE recupera ciones)

Fruta sy verdu ras

Cons ervas para masc otas

2, 4Diclorofe nol 2,4,5 Triclorof enol Pentaclo rofenol ácido 4tercButylben zoic -

-

Cons Señal ervas de grasa, acuos a de medio s ácido s.

Diazabici clo (5,4,0) undec-7es], 10Lmin−

1

-

-

-

SE – SPE

simetría escudo RP18, 150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m con un protector columna, 10 mm × 2. 1mm Identifica ción, 3,5 m (Millipore ) E –SPE Simetría (total escudo conteni RP18 do) 150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m (Millipore Corporac ión, Milford, MA, ESTADO S UNIDOS) . SPE Nucleosi (lixiviaci l C18, ón de 250 mm latas x 4 mm vacías) de SE – diámetro SPE interior, 5m (Hichrom Limited,

Fase móvil: agua/ace tonitrilo (60: 40, v/v); 1.2mLmi

FL: 275/300 nm

FL: 275/300 nm

n−1, Inj:

Kang y Kondo

ngmL−1;

LOD:

(agua), 3 ng g−1

(pet alimento s); R: 95 %

1, Inj: 50L.

0.4mLmi

LR: 50 – 1000 2ngmL−1

◦C, 1mLmin−

25 ◦C,

LOD:

; R: 82 –101 %

50L.

Fase móvil: agua/ace tonitrilo con gradiente elución,

ngmL−1;

Kang et al [41]

1.3ngg−1

n−1; INJ:

Fase móvil: agua/ace tonitrilo (60: 40, v/v), 40

LR: 10 – 1000

FL: 235/317n m

LR: 200 – 2000 ngmL−1;

LOD: 4.5 –7.9 ng g−1; R: 87 – 105% (alimento

Sol et al [46]

Berkshire 10L. , Reino Unido).

BADGE-H2O

s simulado r)

BADGE2H2O BADGE-H2OHCl BADGE-HCl BADGE-2HCl

Agua miner al

pButylphe nol

-

LLE

Inertsil ODS-2, 150 mm × 4. 6mm I.D., 5m (GL Ciencias, Tokio).

Fase móvil: agua/ace tonitrilo (40: 60) que contiene 0.2 % H3PO4; 40◦C; 1mLmin−

1; INJ: 10L.

ED, culombio métrico detecció n con una doble célula analítica de electrodo

p-tertbutilfenol pHexylph enol p-tertOctilfeno l pNonylph enol pHeptylph enol Nonilfen ol Pesca 4-Tercdo Octilfeno l

LOD:

Toko'o ya et R(Mean): al. 63 % 5.7gL−1;

E1: 400mV (vs Pd) E2: 650mV (vs Pd) protector celular: 700mV (vs PD))

BPAd16

MAESPE

150Mm × Fase 2,1 mm móvil: D. I. agua/met anol con gradiente elución, 0.4mLmi n−1, Inj:

no especific ado.

APCI (-)MS: capilar voltaje 3 kV, corona corriente: 40A, voltaje de fragment or: 100V, secado de flujo de gas 5Lmin−1,

nebulizac ión 60 psi, presión

ORY 20.7 – 10044 ngmL−1,

LOD: 0.1 ngmL−1

(agua), 50 ng g−1

(pez); R: 49 –79 % (recuper ación absoluta, pescado)

Peder sen y Lindho lst [50]

de gas vapourisi ng temperat ura 280 ◦C

Carne Octilfeno l

4-nNonylp henol

PLESPE

C18 de simetría, 150 mm × 2. 1mm de diámetro interno 3, 5. m

Fase móvil: agua (0.1 % amoníac o) /  metanol con gradiente elución, 0.2mLmi n−1, Inj:

Agua y soda bebid as

Nonilfen ol Octilfeno l

4-nNonylp henol

SPE

simetría C18, 150 mm × 2. 1mm de diámetro interno 3, 5 μ m.

Nonilfen ol

10  L. Fase móvil: agua (0.1 % amoníac o) /  metanol con gradiente elución, 40 ◦C,

0.2mLmi

-) De ESIMS/MS: capilar Voltaje: 3.5 kV, cono Voltaje: 70 V, fuente temperat ura: 100

Bisfeno Fl

 –

cuantifi cación de SPE: CAPCE LL PAK C18, 150 mm × 4.6 diámetr o interno 5 m) (Tokio Shiseid o Co., Japón).

Fase móvil: agua/ace tonitrilo (70: 30, v/v); 1.2mLmi n−1; INJ:

10L. FL: 275/300 nm LR: 25 –500; LOD:

2ngg−1;

R: 93.9 – 116.4 % Inoue et al [62] Confirma ción: CAPCEL L PAK MG C18

ngmL−1;

LOD: 0.3

Shao et al [28]

ng g−1;

R: 92 –97 %

◦C

(-) De ESIMS/MS capilar Voltaje: 3.5 kV; desolvati on temperat ura: 350 ◦C

n−1, Inj: 10 μ L.

Miel

LR: 1 – 500

(-) De FL: ESI-MS: 275/300 capilar nm Voltaje: 3.5 kV; voltaje de fragment or: 140V, 220 V;

LR: 1 – 500 ngmL−1;

LOD: 0,01 ng

Shao et al [60]

L−1

(agua potable), 0,6 ng L−1

(soda bebida); R: 82 –97 % LR: 25 – 500; LOD: 2ngg−1;

R: 93.9 – 116.4 %

noue et al [62]

(250 mm × 2 m m, 5m (Shiseido Co. Tokio, Japón) Fase móvil: agua (0.01 acético ácido) /  acetonitril o con gradiente elución; 0.3mLmi n−1; INJ: 5μL.

Leche -

BPAd16

SPE

SPE LiChrosp her 100 RP-18, 250 mm x 4 mm de diámetro interior, 5μm

Fase móvil: agua/met anol (30: 70, v/v) 0.9mLmi n−1, Inj: 10μ L

(-) De ESI-MS: capilar Voltaje: 3.5 kV, cono Voltaje: 70 V, fuente temperat ura: 500 ◦C

LR: 5 – 700 ngmL−1;

LOD: 0,7

Marag ou et al [65]

ngmL−1;

R: 52% (absoluta recupera ción), 101% (recuper ación relativa)

Porci ón acuos a de conse rvas alime ntos Abreviaturas: PLE, extracción con líquido a presi ón; SPE, extracción en fase sólida; Inyección, volumen de inyección, ESI, extracción por solvente SE, de ionización electrospray; FL, detección de fluorescencia; DIVISA, bisfenol A diglicidil éter; LLE, extracción líquido-líquido; ED, detección electroquímica; MAE, extracción asistida por microondas; APCI, presión atmosférica ionización química; BFDGE, bisfenol F diglicidil éter; SPME, solid-phase microextracción en, RAM, materia de acceso restringido

Inicio SPE con aminopropil para eliminar la fracción lipídica de las muestras. Significa recuperaciones de BPA se extendieron de 8 2% a 91% y el RSD media los valores de los huevos y la leche fueron 6% y 4%, respectivamente. 4. Separación y detección La determinación de BPA en los productos alimenticios exige el uso de alta

técnicas sensibles y selectivas debido a los niveles de seguimiento en el cual es frecuentemente encontrado (véase tabla 2) y la complejidad de matrices de alimentos. Aunque el SML establecidas por la Comisión Europea es relativamente alta (600ngg−1), los efectos informados de dosis bajas de BPA ha dado lugar 

para el desarrollo de métodos analíticos con LODs bajo bastante para evaluar la exposición humana a estos niveles. La determinación de BPA en los alimentos es principalmente realizado por LC/FL, LC/MS y GC/MS. Cromatografía líquida ofrece la ventaja de la simplicidad sobre GC para que derivatización paso es necesario, mientras que proporciona el último resolución máxima más alta. Otras técnicas como LC –electrochemical detección (LC –ED) e inmunoensayos han sido utilizados en menor medida. Información detallada sobre cromatografía y detección condiciones para la determinación de BPA se resume en los cuadros 4 y 5. 4.1. Liquid chromatography LC de BPA se realiza generalmente en columnas de fase inversa C18. Fases móviles varían según el detector juntado a LC.Agua y acetonitrilo son los solventes más comunes del binarios cuando fluorescencia la detección es whilewater usado y metanol se prefieren para ESI-MS y APCI-Sra. elución condiciones dependen altamente de los analitos determinar junto con matrices de BPA y de alimentos. Por lo tanto, es frecuentes para determinar BPA con otros fenoles, disruptores endocrinos y empaquetado de fromfood de los migrantes (véase tabla 4) y en este caso gradiente elución se realiza siempre. Tiempos de funcionamiento oscilan entre 15 (por ejemplo [32]) y 40 minutos (e.g. [60]) dependiendo del número de determinado de contaminantes y la composición de la matriz. Suele ser LC realizado a temperatura ambiente pero temperaturas hasta 40 ◦C son a veces se recomienda [por ejemplo, 32 y 60] para reducir el tiempo de análisis y aumentar la reproducibilidad. 4.1.1. Detección de fluorescencia BPA muestra fluorescencia nativa con emisión y excitación longitudes de onda en 275 y 305 nm, respectivamente, que mantener constante en los solventes utilizados con más frecuencia en fases móviles de LC, es decir, agua, acetonitrilo y metanol. La intensidad de fluorescencia de BPA es, sin embargo, mucho mayor en los medios orgánicos (véase Fig. 3) y así la sensibilidad en LC será dependiente de la fase móvil composición. Límites de cuantificación instrumental típica para BPA por Detección de LC –Fluorescence están en la gama 5 –50 ngmL−1. La técnica es adecuada para la determinación de BPA en matrices de muy diferentes alimentos como bebidas, vinos, alimentos para mascotas, miel, frutas, verduras, goulash y pescado. Preparación de muestras normalmente incluye limpiar usando SPE basadas en solvente no selectivo [41,44,46,62], columnas de inmunoafinidad [77 –79] o extracción de SPME [95] seguido de evaporación de solvente. Límites de detección típico de BPA en los alimentos usando la detección de fluorescencia están en la gama 0.1 –2 g−1 ng ngmL−1 y 1 -5. La identificación de BPA en la muestra se basa sólo en retención veces, así que la posibilidad de interferencias de otros fluorescentes migrantes de alimentos de recubrimientos puede, por ejemplo bisfenol A diglicidil éter (Insignia), bisfenol F diglicidil éter (BFDGE) o novolacs Glicidil éteres (NOGE) [115.116], se debe considerar siempre puesto que puede producir falsos positivos. De hecho, la confirmación mediante LC/MS después de

a veces ha sido la cuantificación por la detección de LC –fluorescence empleado [62].

Figura 3. Espectros de fluorescencia (nm de longitud de onda 275 de excitación, paso de banda espectral de Raja 20 nm) de bisfenol A (1) agua, acetonitrilo (2) y metanol (3). Concentraciones de BPA: (1) 25mgL−1 y (2 y 3) (1mgL−1).

4.1.2. Detección electroquímica Detección electroquímica (ED) de BPA se basa en el pozo conocido electroactivity de los grupos fenólicos presentes en el molécula (véase tabla 1). LC –ED se ha utilizado para la determinación de BPA en fluidos biológicos [31, 116 –119] y agua [29, 45]. Inoue et al [31] en comparación con los límites de detección instrumental obtenidos para BPA con LC acoplados a electroquímicos, FL, detectores de UV [31]. El detector electroquímico (Coul matriz modelo 6210, ESA, USA) consistió en cuatro células, trabajando en los siguientes potenciales; 350, 430, 570 y 650mV y proporciona un método LOD de 0,5 pg, quefue 3000 y 200 veces más bajos que los obtenidos withUV y detectores de FL utilizando el mismo volumen de inyección (50L). Similares sensibilidad de masa (por ejemplo LOD de 57 g para un volumen de muestra inyectado de 10 L [45]) ha sido obtenido por diferentes autores [29,30]. El pH y contenido de electrolito de la fase móvil influyen en la electrontransfer constantes de velocidad, por lo que deben optimizarse para sensibilidad getMaximum. Elución isocrática recomienda [31,45], de lo contrario veces equilibrio bastante grande será requeridos para las mediciones, Esto es una desventaja principal de la disfunción eréctil. LC –ed también se ha utilizado para el análisis de BPA en los alimentos simuladores (agua, agua acidulada y agua: etanol) usando un detector electroquímico caseros [36]. Un químicamente modificado electrodo (CME) fue preparado por un electrodo de carbón vidrioso de la capa con una película de éster dimetílico Ni protoporfirina IX según la procedurepreviously describedby thesameauthors [120]. TheCME fue diseñado especialmente para evitar el aumento en el fondo corriente causada por el alto potencial requerido para la oxidación

de los compuestos fenólicos en carbón vidrioso, que en el caso de BPA conduce a una sensibilidad disminuida. La f ase móvil consistió en de metanol: agua (60: 40) que contiene 10 KNO3 y 0,25 mM H2SO4 como electrolitos y el método LOD era pg 4 después de un paso de la concentración. A pesar de la probada idoneidad de ED para la determinación de BPA en agua potable y alimentos a base de agua simuladores, LC –ED no ha sido aplicado a los alimentos comunes de complejo matrices todavía. 4.1.3. LC –MS El uso de espectrometría de masas puede reducir el tratamiento de la muestra y incluso puede permitir la "extracción" de un analito en la detección etapa de un método de selección de iones específicos o transiciones. Sin embargo, preparación de la muestra buena sigue siendo necesario en los métodos de LC –MS (véase el cuadro 4) puesto que determina la presencia de componentes de la matriz Tabla 5 Análisis de GC para la determinación de BPA en los alimentos

Muestra

Otros analitos que BPA

Verduras frutas, pescado sopas y salsas, Conservas de carnes, espagueti y al horno habas, alimentos infantiles, bebidas

---

pescado

4tercbutilf  enol 4-nbutilfenol 4Pentylph enol 4-nhexilfeno l 4-tercoctilfenol 4-nheptilfen ol nonilfeno l 4octilfenol

I.S.

BP  A-

Prepa ración de la muest ra (paso s princi pales) SE o LLE

Derivatiza tion

Anhídrido acético

d 14

Columna GC

tempe Parámet ros de ratura MS progra ma y inyecci ón

Rango lineal, LOD o LOQ, recuperaci ones (R)

Destina dos a

BPA

LOQ: 10

Thomson et

diacetyl:

ng g−1

al. [17

I.S.: m/z 

LR: 0.5 – 50 ng

Gyong et al.

224

g 1;

[38]

LOD: 0.41 ng

derivate

g 1; R :

BPA: m/z 

105 – 120%.

30m×0.25m

1min, rampa en ◦C 3

TBDMS

m

minuto−

470

DB-5MS, 30m×0.25m m

120 ◦C

2min, rampa en

m/z 

228,

m/z 

213.

10 ◦C minuto−

(muestras 1% de materia grasa); R: 42 –112%.

Referen cia

1a

280 ◦C.

INJ: splitless BP  Ad 16

SE – SPE

MTBSTFA, 100 L a el eluyente SPE seco (75 ◦C,

30min)

I.D., 0.25 _ m (J&W, Folsom, CA, USA). DB-5MS,

Destina dos a 100 ◦C

441,

−

m/z 

I.D., 0.25 _ m

1 a 200

I.S.: m/z 

(J&W,

◦C,

452,

Folsom, CA, USA)

durante 1 minuto, rampa en ◦Cmin−

1 20 a

280 ◦C,

destina dos a 5 minutos

470

m/z 

−

bebidas

--

BP

LLE

 Ad 14

cido trifluoroacéti co anhídrido, 200L añadido a la SPE eluyente (30 min, a temperatura ambiente)

HP-5 Trace  Analysis, 25m×0.2mm I.D., 0.33 um

Inj: División relación 1:10 Destina dos a 100 ◦C

1min, rampa en

25 ◦C minuto−

1a

(O-BIS trifluoro acetyl) derivado s de BPA: m/z 405, m/z 420

LR:

Varelis and

0.01 – 

Balafas [33]

50 _ gmL 1; −

LOD: 1ngg 1; −

R :

18 – 97%

150 ◦C,

rampa en

(60 ◦C, 5

5 ◦C minuto−

minutos quitar Derivatizació n reactivo en exceso)

1 a 210 ◦C,

rampa en 25 ◦C minuto−

1a

280 ◦C,

Infant formula

Daidzein Genistei n

La genisteín a

Cri se no d1

SE – SPE

BSTFA:TM CS: DTE (1000:10:2, v/v/w), 100L ha añadido a la eluyente SPE seco

30m×0.25m

destina dos a mín. 2,5 Inj: splitless Destina dos a

m

100 ◦C

DB-5MS,

2min, rampa en

10 ◦C minuto−

1a ◦C 250, se apresur óa

(80 ◦C,

30min)

5 ◦C minuto−

I.S.: m/z  416,

m/z 

434

Obis(Trim ethylsilyl ) derivado s de BPA: m/z 372 y m/z 357

LR: 0.01 – 50 _ g

Kuo and

mL 1; LOD:

Ding [43]

−

1ngg 1; −

R :

18 – 97%

R :

74 – 97%

1 a 300 ◦C,

Agua de mar y mariscos

4-tercbutilfenol 4-nButylphe no 4Pentylph enol 4-nhexilfeno l 4-tercoctilfenol 4-n-

BP

LLE – 

 A-

SPE

d 14

(agua de mar)

MAESPE (marisc os)

BSTFA, 100L, a SPE evaporada efluente (60

I.D., 0.25 _ m

◦C,

30m×0.25m

30 min)

m

(J&W, Folsom, CA, USA) DB-5MS,

I.D., 0.5 _ m (J&W, Folsom, CA, USA)

Manten ga pulsado durante 5 minutos Inj: 1L, splitless Inyecci ón: 1L

I.S.: m/z  284 and m/z 

269

Obis(Trim ethylsilyl) derivado s de BPA: m/z 357

(sweater), 92 – 111% (seafood) LOD: 6.30 ng L

1

−

(water), 1.35 ng g

1

−

(seafood)

Basheer et al. [51]

heptilfen ol 4nonilfeno l 2,4diclorofe nol pentaclor ofenol

Simulador de alimentos

BADGE

I.S.: m/z  416

--

SPME

--

HP-5 MS,

BPA: m/z 

200 C ◦

m/z 

LR: 0.01 –

Salafranca

8gg−1

et al. [93]

30m×0.25m

held for 

213,

m,

2min,

228

0.25 _ m

ramped at

(agua destilada), 0.02 –

10

10gg−1

Cmin

◦

1 to

−

270 C, ◦

hold 15 min

(agua con el 3 % ácido acético), 0.02 – 3GG−1

(agua con 10% de etanol) LOD: 0.1 ng g−1

(agua destilada), 1ngg−1

(agua con ácido acético al 3%), 2ngg−1

(agua con 10% de etanol) R

Simulador de alimentos

---

ODB-5MS, 80 C held LR: Chang et al. BSTFA:TM 30m 0.25m for 2 min, bis(trimeth 0.001 [94] CS (99:1,  _  m ramped at ylsilyl) 100 g L 1 v/v), 7 L 20 derivate of  LOD:0.4 ng (usando el  _ m m/z  I.D., 0.5 Cmin 1 to BPA: L 1 vapor de la R : 13.8% 280 C, 372, m/z  Derivatizaci (J&W, Folsom, CA, hold 1 min 357 ón USA) reactivos en el espacio libre en el fibra) (65 ◦C, 30 s) Abreviaturas: SE, extracción por solventes; LLE, extracción líquido-líquido; MTBSTFA, N, N-methyl-(tertbutyldimethylsilyl) Bistrimetilsililtrifluoroacetamida; TBDMS, tert-Butildimetilsililo; BSTFA, N-O-bis(trimethylsilyl) Bistrimetilsililtrifluoroacetamida; TMCS, trimetilclorosilano, DTE, 1, 4-dithioerythritol; MAE, extracción asistida por microondas; SPME; Microextracción en fase sólida; INSIGNIA, bisfenol A diglicidil éter.

--

SPME

◦

×

 – 

−

◦

−

−

◦

que afectan la eficiencia de ionización y el ruido de fondo y en consecuencia límites de detección y cuantificación. Además, limpio extractos son las preferidas para extender la vida de la columna y pasar menos tiempo en el mantenimiento del instrumento. De todos modos, LC –MS BPA métodos basados en ofrecer mayor confianza en la identificación de LC –FL y LC –EC. En comparación con GC –MS, el paso de derivatización desperdiciadora de tiempo de

BPA no es necesaria. El análisis LC –MS de BPA se realiza exclusivamente mediante presión atmosférica ionización interfaces, es decir, electrospray ionización (ESI) y presión atmosférica ionización química (APCI), ambos en negativo modo. ESI es más frecuente que APCI porque generalmente proporciona mayor sensibilidad (véase cuadro 4). Así, los límites de cuantificación instrumental para BPA de 5 [65] y ngmL−1 20.7 [53] se han divulgado con ESI( -) y APCI(-), respectivamente. En ambos estudios, un tetrapolar del masa analyzerwas usado y el volumen de muestra inyectado fue 10 L. usando ESI(-) y un triple cuadrupolo analizador de masa que disminuyó el LOQ instrumental hasta 1ngmL−1 (inyección de volumen de muestra: 10 L) [28,60,73]. A nuestro

conocimiento, instrumentos de trampa de iones no han sido utilizados para el análisis de BPA en alimentos muestras sin embargo, aunque el análisis de BPA en muestras ambientales utilizando MS de trampa de iones ESI(-) tenía por lo menos seis timesmore sensible que APCI [121], desde la fragmentación de la molécula deprotonated (ion de cuantificación) por pérdida de CH3 • se produjo

en APCI incluso bajo condiciones de temperatura suave. La respuesta en ESI-MS para BPA es fuertemente dependiente de la composición de la fase móvil [60,65]. Así, se ha compuesto por fases móviles de methanol –water dio mayor respuesta para soluciones estándar de BPA que consisten en acetonitrile –water debido a la baja punto de ebullición de los primeros, que favorecieron la desolvation de las gotitas de electrospray [65]. La respuesta en acetonitrile –water aumentó en 3-4 bajo la adición de modificadores como 0.5% [122] y 0.01% de amoníaco o 0.01% ácido acético [65]. Contrario a estos estudios, la presencia de aditivos inmethanol –water fases móviles se ha sabido para disminuir la respuesta de BPA. Así, aditivos básicos, que fueron agregadas para promover deprotonation de BPA, dio lugar a la supresión de la fuerte ionización [121.123], y la adición de amoníaco (0,01% en agua) o ácido acético (0,01% en agua) disminuyó la señal por 1.5 - y tres veces para soluciones de BPAstandard y con leche, respectivamente [65].Sin embargo, en algunos casos la efecto contrario se ha divulgado, por ejemplo la adición de amoníaco 0.1% metanol: agua aumentaron la respuesta para BPA [60]. http://www.spanishdict.com/

Mayoría de MS los métodos para BPA incluye la adición de un interno estándar (I.S.) para superar las pérdidas de preparación de muestra y matriz efectos (supresión o mejora de la señal), que conducen a recuperaciones absoluta del método baja. Las normas internas más usadas han sido 4-nonylphenol (cuando también se determinaron los alquilfenoles), BPA-d16 deuterados e isótopo etiquetados 13C 12-BPA. El se destacó la importancia de utilizar un I.S. por Maragou et al [65], que superó las pérdidas ocasionadas por la supresión de la señal (alrededor de 20%) y los generados durante la preparación de la muestra (Estimado que sería alrededor del 28%), usando el estándar interno BPA-d16. En esto cierto, la recuperación relativa media del método fue 101% (media recuperación absoluta del 52%) [65]. Independientemente del tipo de fuente de ionización y analizador, el

ión más abundante en el BPA espectro de masas y por lo tanto utiliza para efectos de cuantificación, era [M−H] − m/z 227. El espectro de masas

obtenidos con instrumentos de cuadrupolo también contenidos el fragmento ionsm/z 211 y 212, formado por la pérdida adicional de oxígeno, − [M−H−O] y amethyl radical, [M−H−CH3] •−, respectivamente. Con fases móviles de acetonitrile –0.01%NH3 en elagua, un ión con

m/z 113was detectado en el espectro de BPAmass, quefue relacionadas a la pérdida de dos protones ácidos [M−2H] 2−. El [M−H−CH3] •− m/z 212 fue el más prominente ion de producto obtenido por LC –MS/MS,

así que fue utilizada para la confirmación y/o cuantificación de BPA en todas los métodos citados (véase el cuadro 4). Otros fragmentos de relativa menor espectro de trampa de iones de reportedintheMS2 de abundancewere, a saber, la Ion [M−H−C6H5OH] − m/z 133, resultante de la ruptura de la Grupo hydroxybenzyl y el ion [M−H−C9H10O] − m/z 93, formado

por la pérdida de hidroxifenil propilo. Por otra parte, los iones más abundantes en el espectro de masas del estándar interno más comunes, BPA-d16 (244 masa molecular), fue [(M−D2 H2) −H] − m/z 241 en vez de [M−D] − m/z 242, debido

el intercambio de hidrógeno deuterio en el hidroxilo grupos cuando BPA-d16 fue disuelta en un medio protiques, que condujo a su inmediata transformación en BPA-d14 (peso molecular 242) [124]. El Espectro MS/MS de BPA-d16 demostró como base máxima el ion del fragmento ATM/z 223, quefue atribuida a la pérdida de la radical CD3 y un segundo fragmento atm/z 142 relacionados con la pérdida de un grupo fenol-d4  junto con un átomo de deuterio derivado de un grupo de CD3 [125]. Aplicaciones de LC –ESI (-)-MS a la determinación de BPA incluyen cereales [32] y leche [65], mientras que ha sido LC –MS/MS utilizados para el análisis de agua y bebidas de soda [60], [28] de la carne y leche y huevos [114], después de la extracción con PLE [32,28], SPE [60] y MSDP [114]. Límites de detección del método fueron en las gamas 0.7 –43 ng g−1 y 0.001–0.3 ng g−1 para la de tección de MS y MS/MS, respectivamente. Por otra parte, tienen dos métodos usando APCI(-) ha desarrollado para la determinación de BPA. La primera de ellas utiliza MAE para extracción de BPA de pescado, seguido por el análisis LC –MS [50]. El segundo determina BPA en la leche materna basada en un sistema on-line de –tandem MS SPE (RAM) [73]. LODswere en la gama 0.1 –50 ng g−1. 4.2. GC –MS GC –MS proporciona mayor resolución y detección inferior límites que LC –MS para la determinación de BPA en los alimentos, aunque la la necesidad de un paso de derivatización hace el trabajo de GC-basedmethods intensivo e introduce nuevas fuentes de errores, principalmente debido a la contaminación. Por otro lado, ya que la presencia de lípidos puede reducir considerablemente el rendimiento analítico de GC [126.127] clean-up extenso es necesario para los alimentos grasos, como los peces [39]. Como Métodos de la LC/MS, el uso de un patrón interno es común, siendo deuterados BPA-d16 y BPA-d14 los sustitutos m ás usadas. GC –MS con ionización del electrón impacto (IE) ha sido ampliamente utilizado para la confirmación de BPA en análisis de alimentos [15,36,39,66,128]. No derivatización de BPA se requiere para esta aplicación. La IE espectro de masas y la vía normal de la fragmentación de BPA

representado en las figuras 4a y 5. El pico de la base de este espectro corresponde a la pérdida de un grupo metilo ([C14H13O2], m/z 213) de el ión molecular ([C15H16O2] •, m/z 228). Esto puede ser racionalizado

en cuanto a la estabilización de la resonancia de la resultante tert-bencílica Carbocatión (cf. fragmento 3, Fig. 5). Una alternativa menor fragmentación vía implica la pérdida de uno de los grupos de aril de la ión molecular para dar un Carbocatión tert-bencílica ([C9H8O], m/z 135, fragmento 4, Fig. 5) y la consiguiente pérdida de metano para dar un ion de fragmento en m/z 119 (fragmento 5, Fig. 5). Cuantificación de BPA por GC –MS requiere la derivatización de analito con el fin de mejorar su separación y detección. El inserción de un paso de derivatización conduce a picos más agudos para BPA en consecuencia, mejor separación de otros analitos y coextracted componentes de la matriz, además de una mayor sensibilidad (sub nivel de g−1 ng) [37]. Silanización y acetilación han sido en gran medid a la procedimientos más utilizados de derivatización, que generalmente se llevan a cabo agregando 100 –200L del reactivo correspondiente al secado Extracto y permitiendo la mezcla reposar durante 30 a 60 minutos con el temperatura ambiente o en 65 –80 ◦C. Silanización de los hidrógenos activos de BPA se realiza principalmente mediante N-O-bis(trimethylsilyl) bistrimetilsililtrifluoroacetamida (BSTFA) containing1% de trimetilclorosilano (TMCS) [37,43,51,94]. La adición de TMCS favorece la formación de un derivado de la única, puesto que la reacción A. Ballesteros Gómez et al. / J. Chromatogr. UN 1216 (2009) 449 –469

Fig.4. Espectrométricos de impacto electrónico (a) bisfenol A, derivado de O-bis(trifluoroacetyl) (b) BPA, derivado de O-bis(trimethylsilyl) (c) BPA [33] y [47].

de BSTFA con analitos contar con grupos hidroxilo diferentes, tales como BPA, puede generar varios derivados, reduciendo así la sensibilidad y selectividad del análisis [43,128,129]. El espectro de masas de IE y el patrón de fragmentación del derivado BPA formado [(Obis) trimetilsilil)] fue similar a los de BPA (cf. Fig. 4C). La base Pico correspondió a la pérdida de un grupo metilo ([C20H29Si2O2], 357 m/z) de ión molecular ([C21H32Si2O2], m/z 372), que también estuvo presente en el espectro [43,94]. Cuantificación de BPA es

figura 5

Fig.5. Vías de fragmentación de impacto electrónico de bisfenol A y sus derivados Obis(trimethylsilyl) y O-bis(trifluoroacetyl) [33]

habitualmente se lleva a cabo en uno (m/z 357) [94] o dos (m/z 357 y 372) [43] las masas de este derivado. Silanización de BPA también se lleva a cabo ut ilizando N, N-methyl (trimetilsilil) bistrimetilsililtrifluoroacetamida (MSTFA) y N, N-methyl (tert-Butildimetilsililo) bistrimetilsililtrifluoroacetamida (MTBSTFA) [38]. Ambos Reactivos suministrados derivados BPA con iones de diagnósticos para el Caracterización de sus identidades en los espectros de masas. La característica iones para el trimetilsilil (TMS) y tert-Butildimetilsililo (BDMS) Derivados BPA fueron [M−15], en m/z 357 y 441, respectivamente.

Estos iones, whichappearedas base picos en los espectros de masas, puede utilizarse como iones de cuantificación de BPA en el modo de GC –MS SIM. Los iones moleculares para TMS (m/z 372) y derivados BDMS (m/z 456) se utilizaron para la confirmación de BPA. Ninguna diferencia en la reacción rendimientos y respuestas se encontró entre ellos, pero dio TBDMS mayor estabilidad de almacenamiento (era estable después de 8 días mientras el TMS derivado redujo a 60% debido a la hidrólisis en este momento). Además fue más largo que el tiempo de retención para derivado TBDMS para TMS (min 41 y 37, respectivamente, bajo las condiciones experimentales se refiere en [38]), que dio lugar a la mejor separación de el anterior eluidos interferencias. Acetilación de los grupos hidroxilo de BPA con anhídrido acético [16,17] o anhídrido de ácido trifluoroacético [33] es otro procedimiento frecuente para obtener derivados BPA para GC –MS. Fig. 4b incluye el espectro de masas el derivado de la O-bis(trifluoroacetyl) y la fragmentación patrón. Como de costumbre, el pico de base en el espectro correspondió a el ion del fragmento [M−15] (m/z 405) formado por el ion molecular 

(m/z 420) por la pérdida de un grupo metilo. Se comprobó que el O-bis(trifluoroacetyl) derivado del BPAwas más sensible que la derivado de trimetilsilil correspondiente, que era una consecuencia

de la masa molecular mayor de la antigua y la monoisotopic naturaleza del flúor [33]. La mayor masa molecular condujo a más favorable relación señal a ruido y la naturaleza de monoisotopic de flúor impidió la reducción en la intensidad del ion que resulta de la distribución de la corriente entre los iones de isotopomeric, como él se produce para el silicio. Derivatización del estándar interno (p. ej. BPA-d14) ha sido encontrado esencial para mantener su pureza isotópico durante cromatográfico separación en una columna capilar de Sílice fundida [33], puesto que se degrada debido al intercambio de deuteron –proton (2H –H) en el porción aromática de la molécula. Este fenómeno ocurre también en otros fenoles monodeuterated [130] y se ha atribuido el intercambio electrófila aromática de átomos de deuterio con átomos de hidrógeno activo situado en la superficie interna de la columna [131]. En este sentido, aunque el derivado TMS de BPAdeuterated derivados reduce la pérdida de pureza isotópica, el uso de O-bis(trifluoroacetyl) derivado es preferido para evitar 2H –H intercambio en la columna, ya que su estabilidad es mayor [33] y en Además, como se ha citado para BPA, su masa molecular superior y la naturaleza monoisotopic de flúor hace este derivado más sensible. GC –MS es la técnica más sensible para la determinación de BPA en los alimentos. Stuart et al [132] en comparación con los instrumentales LODs para BPA obtenidos por diferentes técnicas, los valores que 0.8 ng para GC –MS sin derivatización, 0,004 ng para GC –MS con metil derivados (0.5Mmethanolic solución de phenyltrimethylammonium hidróxido), 1.6 ng para LC –UV (275 nm) y 1.0 ng para LC/ESI (-)-MS. Un menor LOD instrumental (0.51 pg) ha divulgado mediante el uso de un acetilo derivados [133]. Por otra parte, límites de detección del método estaban generalmente en la gamas 0.4 –2 ng g−1 y 0.4 –6.3 ng L−1. 4.3. Inmunoquímicos métodos Métodos inmunoquímicos han sido ampliamente utilizados en los alimentos Análisis para la detección y cuantificación de proteínas, enzimas, vitaminas y otras sustancias que ocurren naturalmente (revisados en

134]). Se han utilizado para la determinación de contaminantes de los alimentos como microorganismos, toxinas bacterianas, micotoxinas, pesticidas, hormonas anabólicas y medicamentos veterinarios (revisados en [134.135]). Inmunoensayos son fáciles de realizar, dar buena sensibilidad y especificidad y requieren ni personal calificado ni equipo costoso. La aplicación de técnicas inmunoquímicas para la determinación de BPA en los alimentos es bastante reciente [136 –140]. Hasta ahora, la las determinaciones se han centrado en el análisis de alimentos líquidos, principalmente simuladores de leche, agua y alimentos, utilizando policlonal mamíferos [136] y los anticuerpos [137] pollo en enzima ligado del inmunosorbente ensayos (ELISA). Los límites de detección osci lan entre 0,05 ngmL−1 a 500ngmL−1, principalmente según el inmunógeno y el tipo

de anticuerpos producen. Como una pequeña molécula, BPA no es capaz de iniciar una respuesta inmune, sí mismo y debe ser conjugado con un

proteína para formar un antígeno completo. En consecuencia, la producción de anticuerpos para BPA ha involucrado el accesorio de la proteína albúmina sérica bovina (BSA) para el analito derivatizado o a un análogo estructural (por ejemplo [ácido valeriánico de 4, 4-bis(4-hydroxyphenyl), BHPVA]) con el fin de evitar la pérdida de parte de las características estructurales de BPA [138.139]. Kuruto et al. propuso el uso de un kit de ELISA disponible comercialmente (kit EcoAssay BPA suministrado por Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd., Tokio, Japón) para la determinación de BPA en el calostro humano [140]. Este kit fue capaz de detectar Conjugado glucurónido BPA, así como libre de BPA. La preparación de la muestra (1 mL) implicó la incorporación de acetonitrilo (3 mL) y la centrifugación posterior para el retiro de la proteína. El sobrenadante se evaporó a sequedad, reconstituido con 1mL de fosfato y sujeto a SPE (Oasis HLB). La recuperación media de muestras inoculadas fue 102±19.0% y el límite de detección del método ngmL−1 0,3. Se aplicó la misma meto dología para la determinación de BPA en suero materno y líquido amniótico [141]. 5. Conclusiones La determinación de BPA en los alimentos es un requisito para apoyar cumplimiento de la legislación y evaluar el riesgo de exposición humana a dosis bajas BPA. En la actualidad, la detección de LC –fluorescence es aún con frecuencia utiliza y da resultados cuantitativos satisfactorios, pero LC –MS y GC –MS son cada vez más atractivo porque ofrecen más selectivo y, por tanto, métodos más confiables. Identificación adecuada de BPA es hecho generalmente por GC –MS o LC-triple instrumentos de cuadrupolo. Preparación de la muestra todavía constituye el llave de paso para la determinación de BPA en los alimentos y es el origen de los principales inconvenientes en las metodologías disponibles, independientemente de su aplicabilidad al BPA como único analito o a una gran cantidad de contaminantes (p. ej. BPA junto con otros fenoles, endocrinos o migrantes de acondicionamiento de los alimentos). Extracción por solventes y SPE son por ahora la mayoría utiliza técnicas de extracción para ambos aislamiento de BPA y la limpieza de los componentes de la matriz. Técnicas como la SPME y SBSE, que ofrece ventajas en términos de consumo de disolventes, tamaño de la muestra y la facilidad de automatización tienen que superar algunos graves inconvenientes antes de ser adecuado para la determinación de BPA en los alimentos. Otras alternativas como MSPD, excelente en específico aspectos, no han alcanzado la utilización extensa todavía. Hay dos aspectos fundamentales en los procedimientos de preparación de la muestra desarrollado, que son más bien general en contaminantes de los alimentos Análisis, a saber, la baja selectividad de disolventes y la exhaustiva purificación necesaria para aislar el analito de componentes de la matriz. Como regla general, se requiere que repetidas extracciones de solventes aislar completamente BPAfromfood matrices que involucra el uso de grandes volúmenes de disolvente orgánico que posteriormente tiene que ser evaporada para la concentración más tratamiento o analito. Por ello los tratamientos respectivos muestra laboriosos y lentos. En este sentido, las estrategias alternativas que proporcionan alta extracción eficiencia para BPA debe simplificar el tratamiento de la muestra.

Purificación de las muestras se torna esencial porque componentes de la matriz constituyen la principal fuente de errores en la determinación de BPA en los alimentos. Los efectos observados son dependientes de la muestra y reducir considerablemente la precisión de la cuantificación en todas las técnicas. Por otro lado, la purificación de las muestras también se requiere para satisfactoria systemperformance de termchromatographic de largo durante el Análisis de una serie de muestras. Son en gran medida la técnica más utilizada para la purificación de las muestras, aunque las proteínas y los lípidos deben ser previamente eliminar para evitar la obstrucción de la absorbente. El uso de selectiva Sorbentes como carneros, immunosorbents y MIPs deben aumentar rendimiento de muestra y precisión ya que tienen el potencial de hacer aislamiento de analito y limpiar en un solo paso y para proporcionar limpiador extractos, pero su uso es un bien escaso y emergentes todavía. En nuestra opinión, fluorimétrico y métodos de espectrometría de masa seguirá desempeñando un papel predominante en el futuro para el análisis de BPA en los alimentos, aunque más adecuado tratamiento de la muestra estrategias debe ser desarrollado tomake estas metodologías más confiable y ampliamente aplicables. La investigación debe centrarse también en barato y los métodos de cribado rápido que son consistentes y robustos. En esto respeto, métodos de ELISA, aunque todavía un área emergente en BPAcontaining Análisis de alimentos, debe ser un enfoque conveniente. Tabla 5 Mues Otros analitos tra que BPA

Verd --uras fruta s, pesc ado sopa sy salsa s, Cons ervas de carne s, espa

I.S.

Prepa ración de la muest ra (pasos princi pales)

BPA SE o -d 14 LLE

Derivati zation

Column a GC

tempe ratura

Parámetr os de MS

Rango lineal, LOD o LOQ, recuper aciones (R)

Refer encia

BPA diacetyl: m/ z

LOQ: 10

Thom son et

progra ma y inyecci ón Anhídri do acético

DB5MS, 30m×0. 25mm

Destin ados a 120 ◦C 2min, rampa en 10 ◦C minut o−1 a

280 ◦C. INJ: splitles s

228, m/z 213.

ng g−1

(muestr as 1% de materia grasa); R: 42 – 112%.

al. [17

gueti y al horn o haba s, alime ntos infan tiles, bebi das pesc ado

4tercbutil fenol 4-nbutilfen ol 4Pentylp henol 4-nhexilfen ol 4-tercoctilfen ol 4-nheptilfe nol nonilfen ol 4octilfen ol

BPA SE – -d 16 SPE

MTBSTF A, 100 L a el eluyent e SPE seco (75 ◦C, 30min)

I.D., 0.25_m (J&W, Folsom, CA, USA). DB5MS, 30m×0. 25mm I.D., 0.25_m (J&W, Folsom, CA, USA)

Destin ados a 100 ◦C 1min, rampa en ◦C 3 minut

I.S.: m/z 224

o−1 a

470

200 ◦C, durant e1 minut o, rampa en ◦Cmin −1 20

a 280 ◦C, destin ados a 5 minut os Inj: Divisió n relació n 1:10

TBDMS derivate BPA: m/z 441, m/z

I.S.: m/z 452, m/z 470

LR: 0.5 – 50 ng g−1;

Gyon g et al.

LOD: 0.41 ng g−1; R:

[38]

105 – 120%.

bebi das

--

BPA LLE -d 14

Ácido trifluoro acético anhídrid o, 200L añadido a la SPE eluyent e (30 min, a temper atura ambient e) (60 ◦C, 5 minutos quitar Derivati zación reactivo en exceso)

HP-5 Trace Analysi s, 25m×0. 2mm I.D., 0.33um

Destin ados a 100 ◦C 1min, rampa en 25 ◦C minut

(O-BIS trifluoroa cetyl) derivado s de BPA: m/z 405, m/z 420

LR: 0.01 – 50_gmL −1; LOD: 1ngg−1; R:

Vareli s and Balaf  as [33]

o−1 a

18 –97%

150 ◦C, rampa en 5 ◦C minut o−1 a

210 ◦C, rampa en 25 ◦C minut o−1 a

280 ◦C, destin ados a mín. 2,5 Inj: splitles s Infan t form ula

Daidzein Genistei n La genisteí  na

Cris eno -d1

SE – SPE

BSTFA:T MCS: DTE (1000:1 0:2, v/v/w), 100L ha añadido a la eluyent e SPE seco (80 ◦C,

DB5MS, 30m×0. 25mm

Destin ados a 100 ◦C 2min, rampa en 10 ◦C minut o−1 a

◦C

250, se apresu

I.S.: m/z 416, m/z 434

LR: 0.01 – 50_g

Obis(Trime thylsilyl) derivado s de BPA: m/z 372 y m/z 357

mL−1; LOD: 1ngg−1; R:

18 – 97%

Kuo and Ding [43]

ró a 5 ◦C minut

30min)

o−1 a

300 ◦C, Mante nga pulsad o durant e5 minut os Inj: 1L, splitles s Agua de mar y maris cos

4-tercbutilfen ol 4-nButylph eno 4Pentylp henol 4-nhexilfen ol 4-tercoctilfen ol 4-nheptilfe nol 4nonilfen ol 2,4diclorof 

BPA LLE – -d 14 SPE (agua de mar) MAESPE (maris cos)

BSTFA, 100L, a SPE evapora da efluente (60 ◦C, 30 min)

I.D., 0.25_m (J&W, Folsom, CA, USA) DB5MS, 30m×0. 25mm I.D., 0.5_m (J&W, Folsom, CA, USA)

Inyecci ón: 1L

I.S.: m/z 284 and m/ z 269 Obis(Trime thylsilyl) derivado s de BPA: m/z 357 I.S.: m/z 416

R:

74 – 97% (sweate r), 92 – 111% (seafoo d) LOD: 6.30 ng L −1 (water), 1.35 ng g−1 (seafoo d)

Bash eer et al. [51]

enol pentaclo rofenol Simul ador de alime ntos

BADGE

--

SPME

--

HP-5 MS, 30m×0. 25mm, 0.25_m

200 ◦C held for 2min, rampe d at 10 ◦Cmin −1 to 270 ◦C, hold 15 min

BPA: m/z 213, m/z 228

LR: 0.01 – 8gg−1

(agua destilad a), 0.02 – 10gg−1

(agua con el 3 % ácido acético) , 0.02 – 3GG−1

(agua con 10% de etanol) LOD: 0.1 ng g−1

(agua destilad a), 1ngg−1

(agua con ácido acético al 3%), 2ngg−1

(agua con 10% de etanol) R

Salafr anca et al. [93]

Simul ador de alime ntos

muest ra

Cereal es

---

Otros analitos que BPA

4-nNonylphe nol

--

SPME

BSTFA:T MCS (99:1, v/v), 7 L (usando el vapor de la Derivati zación reactivo s en el espacio libre en el fibra) (65 ◦C, 30 s)

l prepara Columna s ción de de LC la muestr a (pasos princip ales)

-  – PLE – SPE

XTerra MS C18, 100 mm × 2. 1mm, 3,5 m (Sistema de aguas).

DB5MS, 30m×0. 25mm

80 C held for 2 min, ◦

rampe d at I.D., 0.5_m (J&W, Folsom, CA, USA)

20 Cmin −1 to ◦

O-

LR:

bis(trime thylsilyl) derivate of BPA: m/ z 372, m/z 357

0.001 – 100_gL− 1

Chan g et al. [94]

LOD:0.4 ng L−1 R:

13.8%

280 C, hold 1 min ◦

LC parámetro s

Fase móvil: Amonio de 0,0025 M tampón de formiato (pH 3.1, ajustado con fórmico ácido) / metanol

Detector parámetro s gama lineal,

método LOD o LOQ 

(-) De ESIMS: capilar Voltaje: 3.0 kV, cono Voltaje: 40 V, fuente temperatu ra: 120 ◦C, desolvatio n temperatu

LR: 0.08 –

Refere ncia

recuperaci ones (R)

0.8gg−1

(adición estándar), LOD: 43 ng g−1; R:

81 –104% (PLE recuperaci ones)

Carabi asMartín ez et al [32]

con gradiente elución, 0.2mLmin−

ra: 250 ◦C, desolvatio n de gas (N2):

1, Inj: 50 L

410Lh−1,

gas de cono (N2): 50 L h−1

4-tertbutilfenol

además postcolum na de una base fuerte [1, 8 Diazabicicl o(5,4,0) undec-7es], 10Lmin−1

2, 4Diclorofen ol 2,4,5 Triclorofe nol Pentaclor ofenol ácido 4tercButylbenz oic Frutas y verdur

-

SE –SPE

simetría escudo RP18,

Fase móvil: FL: agua/aceto 275/300 nitrilo nm

LR: 10 – 1000 ngmL−1;

Kang et al [41]

as

Conse rvas para masco tas

Conse rvas de grasa, acuos a de medio s ácidos .

-

Señal

-

-

E –SPE (total conteni do)

SPE (lixiviac ión de latas vacías) SE –SPE

150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m con un protecto r columna, 10 mm × 2. 1mm Identific ación, 3,5 m (Millipor e)

(60: 40, v/v);

LOD:

1.2mLmin−

R: 82 –101 %

Simetría escudo RP18 150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m (Millipor e Corporac ión, Milford, MA, ESTADOS UNIDOS) .

Fase móvil: FL: agua/aceto 275/300 nitrilo nm (60: 40, v/v), 40 ◦C,

LR: 50 – 1000

1mLmin−1,

(agua), 3 ng g−1 (pet alimentos ); R: 95 %

Nucleosi l C18, 250 mm x 4 mm de diámetro interior, 5m (Hichrom Limited,

Fase móvil: FL: agua/aceto 235/317n nitrilo con m gradiente elución, 25 ◦C,

LR: 200 – 2000

0.4mLmin−

87 –105% (alimento s simulador

1; INJ: 50L.

Inj: 50L.

1, Inj: 10L.

1.3ngg−1;

Kang y Kondo

ngmL−1;

LOD: 2ngmL−1

ngmL−1;

LOD: 4.5 – 7.9 ng g−1; R:

Sol et al [46]

Berkshir e, Reino Unido).

)

BADGEH2O BADGE2H2O BADGEH2O-HCl BADGEHCl BADGE2HCl Agua miner al

pButylphen ol

-

LLE

Inertsil ODS-2, 150 mm × 4. 6mm I.D., 5m (GL Ciencias, Tokio).

Fase móvil: agua/aceto nitrilo (40: 60) que contiene 0.2 % H3PO4; 40◦C; 1mLmin−1;

ED, culombio métrico detección con una doble célula analítica de electrodo

LOD: 5.7gL−1;

R(Mean): 63 %

INJ: 10L. p-tertbutilfenol pHexylphe nol

p-tertOctilfenol p-

E1: 400mV (vs Pd)

E2: 650mV (vs Pd) protector

Toko'o ya et al.