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MEDIO

VRB

FUNDAMENTO En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales biliares y el cristal cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo intenso.

VRBG

Agar bilis glucosa que contienen cristal violeta y rojo neutro (Agar VRBG).La presencia simultánea de cristal violeta y sales biliares inhiben Gram- bacterias gram positivas. La degradación de la glucosa a ácido se muestra por el color rojo del indicador de pH, rojo neutro.

XLD

Degradación de los carbohidratos presentes en el medio (xilosa, lactosa y sacarosa) genera la producción de ácido haciendo virar el indicador (rojo fenol) de rojo a amarillo. La lisina se incluye para aumentar la diferenciación de los microorganismos pertenecientes al género Salmonella. Como la cantidad de este carbohidrato es limitada, una vez que estos microorganismos lo consumen, comienzan a utilizar la lisina lo cual produce la alcalinización del medio; este hecho se evidencia porque el rojo fenol nuevamente vira a un color rojo. En el caso de los coliformes lisina positiva, para prevenir la alcalización del medio por la utilización de la lisina, se incorpora en el medio un exceso de lactosa y sacarosa. El medio también tiene la capacidad de detectar la producción de H2S, a través del sistema indicador tiosufalto de sodio y citrato férrico amonio. Cuando el microorganismo produce H2S se observan colonias con el centro negro. Los microorganismos no patógenos productores de H2S no descarboxilan la lisina; cuando están presentes estos microorganismos la reacción ácida producida por la

CARACTERISTICAS DE CRECIEMIENT O

Enterobacterias fermentadoras de lactosa: Rojas, de 1 a 2 mm de diámetro, con halo de precipitación rojizo Coliformes: colonias de color rojo púrpura, de 1 a2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.

Las colonias sospechosas de Shigella sobre el agar XLD son transparentes y parecen rojas por el color del medio. Las colonias típicas de la Salmonella son de color rojo con el centro negro debido a la producción de H2S. Mientras que las de E. coli son grandes, amarillas con o sin precipitado de bilis.

utilización de los carbohidratos previene en ennegrecimiento de las colonias. El desoxicolato de sodio es utilizado como un inhibidor de los microorganismos Gram positivos. CHROMOCULT SALMONELLA

PALCAM

Medio de cultivo selectivo y diferencial, que contiene los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. Es diferencial para el desarrollo de Listeria spp, debido a que el producto de hidrólisis de la esculina en presencia de iones Fe3+ forma un compuesto fenólico de color negro. Es selectivo para Listeria spp., por el agregado del Suplemento Selectivo para Palcam Agar Base, debido a que contiene antibióticos que inhiben total o parcialmente el desarrollo de la flora acompañante presente en la muestra y permiten la recuperación de Listeria spp.

Lisas verdosas, con halo negro sobre fondo rojo

BAIRD PARKER

En el medio de cultivo preparado y completo la peptona y el extracto de carne constituyen la fuente de carbono y nitrógeno, el extracto de levadura aporta vitaminas del complejo B, la glicina y el piruvato estimulan el crecimiento de los estafilococos. Este medio de cultivo es selectivo y diferencial debido al telurito de potasio y al cloruro de litio, los cuales inhiben el desarrollo de la flora acompañante. La yema de huevo permite demostrar la actividad lecitinásica. Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro y originan colonias de color grisáceo-negro, y dan reacción sobre la yema de huevo produciendo alrededor de la colonia una zona opaca que a menudo tiene una zona clara mas externa.

Colonias negras con borde incoloro, convexas, rodeadas de una zona opaca, con una zona clara externa.

MacConkey

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

E.coli: Rojas con halo turbio Salmonella: incolora

SALMONELLA SHIGELLA

Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, está dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro.

Salmonella: transparentes, con centro negro Shigella: incoloras

RAMBACH

SPC

los substratos de sustancias alimentarías contenidos en el agar RAMBACH® permiten un buen crecimiento de enterobacteriáceas. El desoxicolato sódico produce una inhibición de la flora acompañante grampositiva. El agar RAMBACH permite diferenciar las Salmonellas claramente de otras bacterias. Esto es posible por la adición de propilenglicol al medio de cultivo. Las Salmonellas forman ácido a partir del propilenglicol y en combinación con el Salmonella: colonias rojas indicador de pH producen colonias rojas características. Para Shigella: amarillentas diferenciar las coliformes de las Salmonellas el medio de E.coli: verde-azuladas cultivo contiene un cromógeno, que indica la presencia de la separación de ß-galactosidasa característica para los coliformes. Los microorganismos coliformes crecen en forma de colonias verde azuladas/violeta azuladas. Otras enterobacteriáceas y bacterias gram-negativos como p. ej. Proteus, Pseudomonas, Shigella, S. typhi, S. paratyphi A, crecen en forma de co lonias incoloras/amarillentas. Medio de crecimiento comúnmente utilizado para evaluar o para monitorizar "total" o viable el crecimiento bacteriano de una muestra. PCA no es un medio selectivo. 0,5% de peptona 0,25% de extracto de levadura 0,1% de glucosa

OGY

FRASSER

1,5% de agar El extracto de levadura por su alto contenido en vitaminas proporciona excelentes condiciones de crecimiento a una amplia variedad de microorganismos. El cloranfenicol inhibe el desarrollo de la flora acompañante. La glucosa es la fuente de energía. El caldo base fraser con el agregado de suplementos es recomendado para el enriquecimiento, aislamiento y cultivo de Listeria monocytogenes a partir de alimentosy especimenes ambientales. Proteosa peptona, hidrolizado enzimático de caseína,extracto de carne, extracto de levadura son nutrientes esenciales para el desarrollo.Cloruro de litio inhibe el desarrollo de ent ero cocos. Todas la s espec ies de Li steria hi drolizan escu lina a escu lit ina que, junto con los ione s férrico s, forman un complejo marrónoscuroanegro.CitratoférricoamónicofavoreceeldesarrollodeL. monocytogenes

RAPPAPORT

Es un medio de cultivo nutritivo que contiene un sistema buffer de fosfatos, alta concentración de sales de magnesio y sodio y la presencia del colorante verde de malaquita (oxalato). El enriquecimiento selectivo de especies de salmonella se debe a la capacidad de estos microorganismos de sobrevivir y multiplicarse a presiones osmóticas relativamente altas (debido a la elevada concentración de cloruro de magnesio en el medio), a pH relativamente bajos, y porque se suprime el efecto tóxico del verde de malaquita hacia las salmonellas debido a la presencia de cloruro de magnesio. La incubación a 41-42 ºC favorece la selectividad hacia las salmonellas.

Caldo LMX

El medio contiene un sustrato cromogénico que detecta la presencia de la enzima B-D-galactosidasa, propia de coliformes to tales, el color del medio cambia de amarillo claro a

fluorocult

Caldo Brilla

Agar SPS

azul verdoso. La presencia de E.coli se confirma en los tubos con cambio de color a azul verdoso y presencia de fluorescencia y producción de indol. Para ello el medio posee un sustrato fluorogénico el 4-metil-umbeliferil B-D-glucoronico (MUG), que detecta la enzima B-D-glucoronidasa, la cual actúa sobre el sustrato y produce 4-metilumbeliferona, la cual emite fluorescencia azul/verde. De igual forma el medio posee triptófano para determinar la producción de i ndol con el reactivo de kovac. En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el ver de brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliforme, la fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas. Contiene Agar peptona como fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales. Extracto de levadura proporciona vitaminas del complejo B, que estimulan el crecimiento de bacterias. Citrato férrico y sulfito de sodio son indicadores de H2S. Clostridios reducir el sulfito a sulfuro, que reacciona con el hierro a partir del citrato férrico para formar un precipitado de sulfuro de hierro negro. Polisorbato 80 es un agente dispersante. Sulfato de polimixina B y sulfadiazina so n inhibidores a organismos distintos de Clostridium spp. Tioglicolato de sodio es un a gente reductor. El agar es el agente solidificante.

Agar EMB

La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.

Agar ENDO

La selectividad del agar Endo se debe a la combinación del sulfito de sodio con fucsina básica, lo cual ocasiona la supresión parcial de los microorganismos grampositivos. Los coliformes fermentan la lactosa, produciendo colonias color rosa oscuro a rojizo con un brillometálico verdoso iridiscente y una coloración similar en el medio. Las colonias de microorganismos que no fermentan la lactosa son incoloras o de color rosa pálido en contraste con el fondo rosa claro del medio.

E.coli: verde con brillo metalico, centro negro azulado Salmonella y Shigella: incoloras

E.coli: Colonias rosa oscuro a rojizo con un brillo verde metálico. Puede ocurrir un marcado enrojecimiento del medio. Salmonella: Colonias incoloras o rosa tenue

Agar Chromocult

Principalmente la interacción de peptonas cuidadosamente seleccionados , además de piruvato , sorbitol y un tampón de fosfato garantiza un rápido crecimiento de colonias , incluso para los coliformes estado subletal . El crecimiento de la flora que acompaña a las bacterias Gram-positivas , así como algunas bacterias de la flora Gramnegativas se inhibe en gran medida por el uso de Tergitol ® 7, que no tiene ningún efecto negativo sobre el crecimiento de las bacterias coliformes . Además , Merck ha desarrollado una nueva combinación de dos sustratos cromogénicos que permiten la detección simultánea de coliformes totales y E. co li . Identificación de coliformes: La enzima característica de los coliformes , ß -D- galactosidasa , se escinde el sustrato Salmon- GAL y dando lugar a un salmón a la coloración roja de las colonias de coliformes . Identificación de E. coli : El sustrato X - glucurónido se utiliza para la identificación de la ß - D - glucuronidasa que es característica de E. coli . E. coli escinde tanto Salmon- GAL y X - glucurónido , por lo que las colonias positivas adquieren un color azul oscuro al color violeta. Estos se distinguen fácilmente de las otras colonias de coliformes que tienen un salmón al color rojo . La inclusión de triptófano mejora la reacción indol , aumentando así la fiabilidad de la detección cuando se utiliza en combinación con la reacción de color salmón - GAL y X - glucurónido como parte de una confirmación adicional para E. coli .