Medición de Células Por Medio de Micrometría

Medición de células por medio de Micrometría Flores González Lesli Paulina, González Martínez Claudia Sarai y López  García Lucero. Universidad Nacional utóno!a de M"#ico, Facultad de Ciencias, Carrera de $iolo%ía. , Materia& $iolo%ía Molecular Molecular de la c"lula c"lula lll. Grupo& '()*. Pro+esora& Pro+esora& Paola Moreno lvarez, -/-0/12. Resumen

Con el previo conocimiento de las partes y funciones del microscopio nos dimos a la tarea de medir el tamaño de distintas preparaciones frescas con el uso de la micrometría, para un mejor desarrollo y entendimiento de las formas tan microscópicas que nos rodean. Esto nos permitió conocer el tamaño y promedio de células y núcleos de la epidermis de la cebolla, células epiteliales y células de 3lodea. Introducción

La observación de células y objetos microscópicos con el ojo umano es imposible puesto que son muy diminutos, es por eso que se utili!an tanto el microscopio como la micrometría para determinar cómo es su estructura y para obtener un tamaño lo m"s apro#imado posible de las células, objetos o microor$anismos observados a través del microscopio. microscopio.

La micrometría puede de%nirse como el arte de medir el tamaño de los deta detall lles es es estr truc uctu tura rale less de los los obje objeto toss o se serres que que se obse observ rvan an al microscopio. En micrometría la unidad de medida es la micra que es i$ual a &.&&' mm (Casartelli, ')*+.

-i$ura '. Estimación de la lon$itud celular por medio de micrometría.

ara dete determ rmin inar ar el tama tamaño ño de un obje objeto to en unid unidad ades es abso absolu luta tass es necesario conocer la lon$itud o tamaño de las divisiones o cuadrículas, que suele darse en micras. ara ello, debe acerse un calibrado de estas divisiones, compar"ndolas con un objeto de tamaño conocido (Casartelli, ')*+.

La operación de calibrado consiste en determinar, por comparación con la escala conocida, la del micrómetro del objetivo, el valor en micras en una división de la escala del ocular micrométrico. ara ello, el micrómetro objetivo, que $eneralmente tiene una escala de ' mm en '&& partes, se coloca sobre la platina del microscopio y se enfoca, se saca el ocular y se introduce el ocular micrométrico, lue$o se observan detenidamente ambas escalas y se ace coincidir al menos una raya de una escala con la de la otra de la forma m"s e#acta posible (/arcel Locquin, ')01.

-i$ura 2. 3 /icrómetro ocular, 4 micrómetro ocular superpuesto sobre la escala del micrómetro objetivo.

56 a es el número de divisiones del ocular micrométrico y 4 el número  de divisiones del micrómetro objetivo y si + es el valor en micrómetros de una división de esta última, el valor micrométrico de la escala ocular utili!ada en estas condiciones ser" i$ual a7 !5 4/a6+  8na ve! calibrada la escala del ocular micrométrico, para medir cualquier estructura, basta con superponer sobre la preparación la escala del ocular y medir9 posteriormente se consulta el cuadro de equivalencias y sale autom"ticamente en micrómetros el valor de la medida real de la estructura (/arcel Locquin, ')01. Materiales y métodos

ara la elaboración de esta pr"ctica se utili!ó un microscopio de campo claro, se reali!ó la iluminación :;ler con la ayuda de una preparación %ja y se si$uieron todos los pasos para la calibración de la re$lilla ocular. 5e ajustó primero la re$lilla micrométrica en el objetivo de '&#, se colocó el ocular micrométrico y se icieron coincidir, tomando como referencia el punto de coincidencia m"s alejado del &. osteriormente se icieron los c"lculos para determinar cuantos m e#istían en ' unidad ocular9 lo mismo se i!o para el objetivo +&#. 5e elaboró un e#udado de células epiteliales de una mejilla y se midieron distintas células, con los dos objetivos '&# y +&#. 5e procedió a desprender la epidermis de la cebolla para medir células y núcleos, al i$ual que con la 3lodea. -inalmente se sacó el tamaño de cada una.

Resultados

Imagen 1: Células epiteliales 10x

Imagen 2: Células epiteliales 40x

Imagen 3: Células de la epidermis de la cebolla

Imagen 4: Células de hoja de la Elodea

Ajuste 10x

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Ajuste 40x

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Células epiteli ales

rome dio

Barian !a

esviac ión est"nd ar

8nida des ocula res

/icrómet ros

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Cebolla 10x

Célula

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/icrómetro s ("rea de la

Fúcleo

Bolumen del núcleo

/icrómetr os (volume

cebolla '.1 u.o. '.1 u.o. 2 u.o. '.0 u.o. 2.) u.o.

'.*A u.o. D2 '.*A u.o. D2 @.'+ u.o. D2 2.1+ u.o. D2 A.A u.o. D2

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rea de las células de la cebolla romedio Barian!a esviación est"ndar

2.0 +.') 2.&+

Bolumen de los núcleos de las células de la cebolla romedio Barian!a esviación est"ndar

.&&&*01 .&&&)0 .&@'@

.&&&*01 u.o. D@ .&&&*01 u.o. D@ .&&&*01 u.o. D@ .&&&*01 u.o. D@ .&&&*01 u.o. D@

n del núcleo .&'& >mD@ .&'& >mD@ .&'& >mD@ .&'& >mD@ .&'& >mD@

Cebolla 40x

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rea de las células de la cebolla romedio

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Bolumen del núcleo '.@1 u.o. D@ .&)0 u.o. D@ .'A) u.o. D@ .&1& u.o. D@ .'A) u.o. D@

micrómet ros +.A* >mD@ .@@) >mD@ .10+ >mD@ .'*@ >mD@ .10+ >mD@

Barian!a esviación est"ndar

').' +.@*

Bolumen de los núcleos de las células de la cebolla romedio Barian!a esviación est"ndar

.@A* .@&+ .11'

Elodea 10x

Lar$o de célula de Elode a .0

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Bolumen de la célula de Elodea .'20u.o. D@ .&A@ u.o. D@ .&1+ u.o. D@ .'*1 u.o. D@ .'20 u.o. D@

micróm etros

Cloroplas tos

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Bolumen de la célula de Elodea romedio Barian!a esviación est"ndar

.'&)A .&&2* .&1'

i"metro de los cloroplastos romedio Barian!a esviación est"ndar

.2 .&'1 .'22

micrómetros

Elodea 40x

Lar$o de célula de Elode

3nco

Bolumen de la célula de Elodea

micrómet ros

Cloroplastos

micrómetros

a 2

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+.1 u.o. D@ 0.@ u.o. D@ A.+ u.o. D@ 1.0 u.o. D@ u.o. D@ A.+

Bolumen de la célula de Elodea romedio Barian!a esviación est"ndar

'1.1* >mD@ 20.*' >mD@ 22.'+ >mD@ 2&.&A >mD@

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i"metro de los cloroplastos romedio Barian!a esviación est"ndar

.+A .&22 .'+0

Discusión ¿Cul es la im!ortancia de la calibración del microsco!io"

El retículo del microscopio, el cual es fundamental para la observación óptima de una muestra, sólo es ampliado por el ocular. 5in embar$o, el aumento total del objeto depende del objetivo, del cambiador de aumentos y del ocular, por lo cual al modi%car cualquiera de esos factores también se cambia el aumento del retículo. La calibración es muy importante ya que se establece el valor de un intervalo del retículo con respecto al aumento del objeto lo que crea las dimensiones verdaderas de un objeto, por lo cual debe de acerse cada ve! que se efectúan comparaciones de mediciones o cuando se busca obtener valores de medición absolutos. ¿En #ué otras disci!linas se utili$a la micrometr%a"

En primera instancia la obtención de medidas especiales de objetos microscópicos se llama morfometría. Lo cual es importante para reali!ar un informe cientí%co y e#isten dos formas para indicar los tamaños de la estructura7 6ncluyendo una escala y su equivalencia en micras o mencionando los aumentos totales a los que se est" viendo la ima$en. 5e puede utili!ar en disciplinas tales como parasitolo$ía, ya que establecen las características morfoló$icas diferenciales en cada una de

sus fases9 también se utili!a en la citolo$ía e istolo$ía ve$etal así como en la animal9 en la embriolo$ía ve$etal y animal9 %colo$ía9 microbiolo$ía9 inmunolo$ía9 en la proto!oolo$ía. Al obser&ar una misma célula a 10x y 40x ¿'ay &ariaciones en la medida" (i es as% ¿a #ué se debe"

5i e#isten variaciones en la medida, ya que el valor micrométrico obtenido sólo es v"lido para el objetivo en que se efectuó la calibración, por ello es que se utili!a las medidas de conversiones para cada uno de los objetivos. Es decir al observa una célula en el objetivo '&#, las medidas de sus dimensiones ser"n m"s pequeñas que las medidas de las dimensiones que se obtendr"n en el objetivo +&#, esto debido a que en el primer objetivo mencionado se lo$ra ver a la muestra en un menor aumento (menor tamaño en comparación con el se$undo objetivo. Re)erencias •

•

 G. . Casartelli. (')*+. /icroscopia teórico?pr"ctica. España7 8H/I. /arcel Locquin y /aurice Lan$eron. (')01. /anual de microscopia. 4arcelona7 Editorial Labor.