Manual Farma II 2017
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UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA ESCUELA DE BIOLOGIA DEPARTAMENTO DE BOTANICA, RECURSOS RENOVABLES Y CONSERVACION
NATURALES
MANUAL DE LABORATORIO FARMACOBOTÁNICA II
© Andrea Ugarte
Ing. Agr. Jorge Mario Vargas Br. Carlos Gaitán
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ÍNDICE Nombre de la práctica
No. De página
Reglamento de Laboratorio................................................................................................... 3 No. 1. Identificación, clasificación, nomenclatura, claves dicotómicas de determinación Botánica y reconocimiento de especies y plantas de uso medicinal…................................... 6 No. 2. Técnicas histológicas.................................................................................................. 11 No. 3. Droga cruda............................................................................................................... 18 No. 4. Divisiones Pteridophyta y Pinophyta............................................................................. 24 No. 5. Angiospermas Basales............................................................................................... 38 No. 6. Monocotiledoneas...................................................................................................... 50 No. 7. Eudicotiledoneas basales........................................................................................... 65 No. 8. Eudicotiledoneas Rosides: Fabides (Eurosides I) .................................................... 79 No. 9. Eudicotiledoneas Rosides: Malvides (Eurosides II) ................................................. 99 No. 10. Eudicotiledoneas Asterides: Lamides (Euasterides I)............................................. 114 No. 11. Eudicotiledoneas Asterides: Campanulides (Euasterides II). ................................ 128
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REGLAMENTO DE LABORATORIO Único horario de laboratorio:
Día: Miércoles Hora: 7:00 a 10:00
A. Lineamientos Generales El salón de laboratorio es un lugar de trabajo, por lo que se debe cumplir con un reglamento establecido que asegure la adecuada realización de las prácticas: 1. La asistencia mínima de laboratorio debe ser del 80% para tener derecho a examen final. 2. Utilizar bata blanca, larga, de mangas largas, abotonada. 3. Traer el instructivo de la práctica de laboratorio, previamente leído y estudiado. NOTA: para tener derecho a examen corto, el estudiante deberá entregar los antecedentes y el mapa conceptual de la práctica a realizar (Ver figura 1) . 4. Se exige puntualidad en la asistencia, de lo contrario no podrá realizar el examen corto. 5. Es prohibido: comer, beber o fumar dentro del laboratorio. 6. No podrá utilizar celulares o cualquier tipo de telecomunicaciones dentro del laboratorio. 7. Queda prohibido realizar actividades ajenas a la práctica dentro el período de laboratorio. 8. Manejar adecuadamente el equipo óptico, microscopio y estereoscopio. 9. Al finalizar la actividad se debe dejar limpio y ordenado todo el equipo de laboratorio. 10. Una semana después de la práctica el estudiante deberá entregar por grupo el reporte de la siguiente manera: 1. Se presentará en grupos de máximo 5 personas 2. Todos los resultados y datos experimentales deben anotarse durante la práctica 3. Todos los informes deben llevar: 1. Introducción (15 pts.): Aquí se incluye un breve resumen tanto del fundamento teórico, como de la práctica realizada (como se realizó, con qué objetivos, qué se logró observar, etc.), incluyendo también conclusiones finales. 2. Metodología (10 pts.): Síntesis de las actividades realizadas en la práctica de laboratorio. Esta sección debe ser redactada en tiempo pasado y tercera persona. 3. Resultados y Discusión (40 pts.): Estos dos van aunados, para esta sección en el caso que realice cortes, a la izquierda irán los esquemas y a la derecha la descripción/discusión. Presentar una descripción de los resultados obtenidos utilizando lenguaje técnico y complementar con información teórica fundamentada con fuentes bibliográficas. Discutir las observaciones realizadas dentro del laboratorio, por qupe se usaron los distintos medios, reactivos, 3
instrumentos, así como posibles errores en el procedimiento. De la misma forma, se realizarán esquemas cuando se trate de material vegetal fresco, describiendo características morfológicas como el tipo de filotaxia, formas de las corolas, presencia de frutos, coloración etc. 4. Conclusiones (25 pts.): son afirmaciones breves que se deducen a partir los resultados y la discusión. Debe presentar al menos una conclusión por cada objetivo específico. 5. Bibliografía (10 pts.): utilizar como mímino 5 referencias bibliográficas. Citar en el documento la bibliografía utilizada, siguiendo el formato APA. B. Evaluación del desempeño en el laboratorio El laboratorio constará de 10 prácticas con un valor de 2.5 puntos cada una para un total de 25 puntos. Habrá dos exámenes parciales, uno después de la práctica 5 y el otro después de la práctica 10, cada uno con un valor de 3 puntos. El total de la zona de laboratorio es de 25 puntos y deberá obtener como mínimo un punteo de 15.3 para tener derecho al examen final del curso. Por cada día de retraso de la entrega del reporte se restará 25% de la nota total de la práctica. La ponderación de cada práctica se hará de la siguiente manera: a) 50% reporte b) 30% corto c) 10% desempeño (comportamiento, limpieza, buen manejo de equipo, etc.) d) 10% antecedentes y mapa conceptual
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Figura 1. Ejemplo de mapa conceptual explicando el manejo del equipo óptico de laboratorio (Microscopio y Estereoscopio). 5
PRÁCTICA 1 IDENTIFICACIÓN, CLASIFICACIÓN, NOMENCLATURA, CLAVES DICOTÓMICAS DE DETERMINACIÓN BOTÁNICA Y RECONOCIMIENTO DE ESPECIES Y PLANTAS DE USO MEDICINAL INTRODUCCIÓN La taxonomía vegetal es la parte de la Botánica que se encarga de nombrar y clasificar a las plantas, basándose en caracteres morfológicos, fisiológicos, ecológicos, moleculares y biogeográficos. La clasificación es el ordenamiento de las plantas en grupos que presentan características en común. Estos grupos, a su vez, se ordenan en un sistema, que en la actualidad trata de reflejar las relaciones filogenéticas y la evolución entre las plantas. Especies semejantes se colocan en un género, géneros semejantes se agrupan en familias, familias con características comunes se incluyen en órdenes, órdenes en subclases, subclases en clases y clases en divisiones. La clasificación da como resultado el ordenamiento de plantas en una jerarquía de rangos y categorías, tales como especies, géneros, familias, etc. Además de expresar las relaciones de las plantas, con base en características comunes, la clasificación es útil porque funciona como un sistema de archivo que permite recuperar información. La identificación de una planta es el reconocimiento de ciertos caracteres de la misma (en flor, fruto, hojas o tallos), que la hacen idéntica o similar a otra planta ya conocida. En la práctica taxonómica, se combina la identificación de una planta con la determinación de la misma, aplicándole el nombre correcto, basado en el sistema binomial de Linneo (género y epíteto específico). Si al comparar una planta desconocida con especies similares, nos encontramos con que es diferente a las especies conocidas, podemos nombrarla como una nueva especie. La taxonomía es útil, porque si se tiene conocimiento de las características de un grupo determinado, se puede conocer acerca de una planta desconocida que pertenece a ese grupo. Y por otro lado, si se conoce uno o dos miembros de un grupo, se puede tener una idea del grupo como un todo.
OBJETIVOS 1 2 3
Conocer diferentes tipos de claves dicotómicas. Desarrollar un sistema de clasificación usando hojas de diferentes plantas, formando grupos de hojas con características en común, y ordenando los grupos en un sistema. Usar las características de las hojas para construir una clave dicotómica que podrá ser usada posteriormente.
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MATERIALES 1. Regla graduada en pulgadas y/o centímetros. 2. Hojas de diferentes plantas. PROCEDIMIENTO: 1) IDENTIFICACION: DESCRIPCIÓN TAXONÓMICA (BOTÁNICA) La identificación no puede llevarse a cabo, a menos que todos los objetos a considerar estén incluidos en un sistema de clasificación. 1. Determine las unidades básicas. 2. Analice las variaciones de las hojas y encuentre si hay dos o más hojas que tienen todas las características en común. 3. ¿Cuántas unidades básicas (“especies”) tiene, con cuántas hojas por cada unidad? Cuando se trata de plantas, cada grupo puede asignarse a la unidad básica de la sistemática, que es la ESPECIE. Esta analogía, sin embargo, no es válida cuando se considera la naturaleza de la variación intraespecífica en plantas. ¿Por qué razón? 2) NOMENCLATURA La identificación de sus “especies” de hojas, basada en las características de forma, borde, ápice y base probablemente le dio como resultado cierto número de grupos, cada uno con especies. Siguiendo la jerarquía botánica, puede asignarle a estos taxa el rango de “género”. Ahora, puede darle nombre a todas sus categorías, empezando por el nivel de género: a)
Puede establecer un sistema de nomenclatura al nivel de especie. Siguiendo las reglas de nomenclatura botánica, cada nombre específico debe incluir el nombre del género más un epíteto específico. Este nombre completo se conoce como binomial. Establezca los binomiales para sus “especies” de hojas, de la siguiente manera: a. Examine las especies de cada género de hojas y complete la siguiente tabla. Adjudíquele a cada especie un epíteto, después de haber completado la descripción del taxón. b. La tabla le permitirá fijar, o dejar constancia del epíteto, al taxón que usted escoja. Cuando se trata de plantas, se escoge un espécimen TIPO (una hoja de herbario con el ejemplar de planta seleccionado para representar toda la especie) en donde queda fijado el nombre específico.
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Forma
Borde
Ápice
Base
Otro
Género
Especie
3) CLASIFICACIÓN Desarrolle su sistema de clasificación de hojas examinando la variación interespecífica, busque caracteres clave, es decir, características útiles desde el punto de vista taxonómico. La comunicación en taxonomía requiere la asociación de términos con objetos o caracteres. La identificación depende de un buen conocimiento de la terminología de plantas con semilla. Trabajar con hojas, sin embargo, requiere el uso de pocos términos especializados. Examine la variación de forma, borde, ápice y base de las diferentes “especies” de hojas, y ordénelos en grupos relacionados. ¿Cuántos grupos obtuvo? Un sistema de clasificación emplea una serie de categorías, desde la más hasta la menos inclusiva. La jerarquía taxonómica de las plantas se escribe a continuación: Reino (la más inclusiva, todas las plantas) División Clase Orden Familia Género Especie (la menos inclusiva) Cada categoría de la jerarquía tiene su propio rango y circunscripción. El rango define la posición jerárquica de la categoría, (por ejemplo: Familia tiene un rango más elevado que Género). La circunscripción es una línea imaginaria alrededor del taxón, está basada en caracteres claves y separa una categoría (taxón) de otras categorías (taxa). ¿Qué rangos adjudicó a sus grupos de hojas? 8
4) CLAVE DICOTOMICA. Cuando su sistema de clasificación y nomenclatura para la familia Hojaceae esté completo, puede pasar al trabajo práctico, diseñando una clave dicotómica. La clave permitirá a cualquier persona identificar cualquier ejemplar de la familia Hojaceae hasta género y especie en su sistema de clasificación. Organice su clave de tal manera que el usuario se confronte con una serie de coplas, cada una de las cuales ofrezca dos alternativas. Las alternativas, basadas en caracteres clave de la hoja a identificar, eventualmente lo guiarán hasta la identificación o determinación de una especie. Construya una clave para todas las “especies” de hojas. Puede encontrar características contrastantes en su tabla de datos, pero puede utilizar cualquier aspecto de la morfología de las hojas. Recuerde que mientras más concreta es una característica, mejor será para formar una copla. Cuando complete su clave, utilícela con varias hojas para revisar la exactitud de la misma. Finalmente, use las claves de sus otros compañeros. Compare los métodos de organización, los caracteres claves empleados y la eficiencia de las claves. También note la confusión que se genera cuando un solo objeto tiene muchos nombres. Esa fue una de las principales razones por las que se estableció un Código Internacional de Nomenclatura Botánica. ALGUNAS REGLAS A TOMAR EN CUENTA PARA LA CONSTRUCCION DE UNA CLAVE DICOTÓMICA 1)
Asegúrese que la clave sea siempre estrictamente dicotómica.
2)
Seleccione caracteres que están en oposición uno respecto al otro, de tal manera que los encabezados de una copla sean dos proposiciones contradictorias, una de las cuales se puede aceptar y la otra no.
3)
Hasta donde sea posible, utilice frases positivas, especialmente cuando se trate del encabezado inicial de la copla. Evite escribir por ejemplo: “flores amarillas” versus “flores no amarillas”.
4)
La palabra inicial de cada encabezado de la copla debe ser idéntica. Es decir, que si el primer encabezado de la copla inicia con la palabra “hojas”, el segundo encabezado de la misma copla debe iniciar también con la palabra “hojas”. Esto facilita la orientación de encabezados para cualquier copla.
5)
Dos coplas consecutivas no deben comenzar con la misma palabra, para evitar la confusión entre coplas. Esta fuente potencial de confusión puede evitarse si a la segunda copla que llevaría la misma palabra inicial se antepone el artículo.
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6)
Evite usar límites de variación que se traslapan, o generalidades, en encabezados opuestos de una copla. Por ejemplo, no es conveniente usar encabezados como los siguientes: 1. Inflorescencia en racimo; pedicelos de 4-6 cm de longitud. 1. Inflorescencia en racimo o panícula, pedicelos de 6-10 cm de longitud. O bien, 1. Flores en pedúnculos largos; hojas muy anchas. 1. Flores en pedúnculos cortos; hojas poco anchas.
7)
Utilice características fácilmente observables. Es decir, evite la separación de grupos basándose en la distribución geográfica, datos citológicos o números cromosómicos, porque aunque son datos que pueden ser significativos, no son útiles para una clave.
8)
En algunos casos puede ser necesario o útil hacer dos claves dicotómicas. Por ejemplo, de material con flores y de material con frutos; de material vegetativo y de material en flor; de plantas pistiladas y de plantas estaminadas, cuando la especie es dioica.
ANTECEDENTES 1.
¿A quién se le acredita el uso de las claves modernas para identificar especies vegetales?
2.
¿Cuáles son los dos tipos de claves dicotómicas que existen comúnmente y en qué se diferencian?
3.
Mencione las diferencias entre una clave de multientrada y una clave de un solo acceso (como lo son las claves dicotómicas estándar).
4.
Mencione dos tipos de policlaves.
5.
¿Qué es el libro “Flora de Guatemala”? Explique para qué sirve.
6.
¿Qué es el epíteto específico en un nombre científico?
7.
¿Cuáles son los tres elementos que conforman el nombre científico completo de una especie vegetal?
8.
Investigue los siguientes términos relacionados con hoja, su traducción al inglés y realice un esquema cuando crea conveniente. Simple, compuesta, foliolo, palmeado, ternada, trifoliada, bipalmeada, biternada, triternadas, tripalmadas, pinnado, paripinnado, imparipinnado, bipinnado, tripinnado, entero, hendido, lobulada o incisa, dentado, crispado, sinuado, crenado, eroso, aserrado, digitado, palmatífido, disectada, lacerada, runcinada, pinnatisecta, pinnatífida.
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PRÁCTICA 2 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS EL DIAFANIZADO Y EL DISOCIADO INTRODUCCIÓN La histología vegetal es una ciencia experimental por excelencia y dentro del contexto de la misma se incluye el estudio del control de calidad de la materia médica de una planta medicinal. Este estudio incluye la descripción microscópica de los tejidos y componentes celulares tanto de las drogas crudas como de las pulverizadas, por lo cual es necesario conocer las técnicas que pueden utilizarse para poder describirlas correctamente. Los componentes celulares de interés histoquímico son aquellos que conforman el material no protoplásmico de la célula vegetal, que se designa colectivamente con el nombre de sustancias no protoplásmicas (sustancias ergásticas o inclusiones celulares). Son productos finales del metabolismo orgánico e inorgánico (metabolitos secundarios) que no participan en la construcción de la célula, pueden estar en solución o en partículas sólidas en el citoplasma o en las vacuolas. Pueden ser sustancias de reserva, materiales alimenticios como el almidón, gránulos de aleurona, aceites o resina. También látex, mucílagos, gomas, alcaloides y cristales de diferentes formas y composición. Muchos de estos tienen actividad farmacológica y por lo tanto son importantes en la búsqueda de la cura a muchas enfermedades. En el semestre anterior aprendimos a hacer los cortes a mano alzada con el uso de hojas de afeitar, así como a reconocer muchos de estos componentes celulares utilizando reactivos y colorantes específicos. En esta práctica aprenderemos dos nuevas técnicas muy utilizadas en el control de calidad. La primera es el diafanizado, que permite aclarar los tejidos de forma que se eliminen compuestos que puedan obstruir la observación tales como la clorofila y los taninos, para que la tinción final a utilizar pueda absorberse de forma apropiada y haya claridad al observar la preparación. La técnica de diafanizado, permite observar los complejos arreglos de la venación en las hojas, pétalos o brácteas, asimismo permite la observación de estructuras epidérmicas de los mismos órganos, como los estomas y los tricomas. Existe en dos modalidades, el semidiafanizado que se utiliza con órganos muy suaves y poco carnosos y el diafanizado que se utiliza con flores y hojas muy carnosas o gruesas. El disociado permite observar células o complejos de tejidos individualmente, especialmente aquellos lignificados (que son difíciles de aislar), para poder caracterizarlos. Existen dos modalidades de este método: a) Disociado débil, el cual se utiliza para hojas, tallos herbáceos y cortezas comerciales. b) Disociado fuerte, el cual se utiliza para tallos, raíces y tegumentos de semillas. Al caracterizar a las especies basado en las técnicas de disociado y/o diafanizado, se puede determinar si una planta seca y pulverizada es la especie requerida, siendo útil a la hora de ejercer controles de calidad de la materia médica.
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OBJETIVOS
Practicar las técnicas de diafanizado y disociado en sus diferentes modalidades. Diferenciar la utilidad de cada una de las técnicas en el estudio microscópico de la materia médica. Preparar láminas fijas del material diafanizado y disociado. Reconocer las características microscópicas de dos especies medicinales.
MATERIALES 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.
Microscopio Agujas de disección Porta y cubre objetos Safranina al 1% Gelatina-glicerina Estufa Beakers de 50 y 200 ml Probetas de 10 y 25 ml Vidrios de reloj
10. Cajas de petri 11. Alcohol al 95% 12. Hidróxido de potasio al 5% 13. Hidróxido de sodio al 5% 14. Agua destilada 15. Papel mayordomo 16. Papel filtro 17. Esmalte de uñas 18. Varillas de vidrio
PROCEDIMIENTO 1) Utilice la técnica del semidiafanizado (ver Anexo 1) con dos hojas de albahaca Ocimum basilicum L. 2) Escoja su mejor muestra y prepare una lámina fija con el uso de gelatina-glicerina de la siguiente forma: 1) Tome el beaker con la gelatina-glicerina y colóquelo sobre la estufa a fuego lento para que no llegue a ebullición, de lo contrario formará burbujas. Cuando esté líquida, retírela del fuego. 2) Levante su cubre objetos y con la ayuda de papel absorbente retire el exceso de safranina tanto en el porta como en el cubreobjetos. 3) Luego, tome con una varilla de vidrio una o dos gotas de gelatina-glicerina y échelas sobre el portaobjetos a manera de cubrir la hoja semidiafanizada. 4) Coloque con mucho cuidado el cubreobjetos a manera de no dejar burbujas. Elimine el exceso de gelatina-glicerina de los bordes. 5) Agregue una pequeña capa de esmalte de uñas a la orilla del cubreobjetos con el fin de sellar la lámina. 6) Identifique la lámina con los datos de la muestra y sus datos personales. 7) Observe nuevamente al microscopio, dibuje los estomas, las células epidérmicas, los tricomas y describa las características de la venación y la presencia o no de aceites esenciales y cristales. (Ver Anexo 2) 12
3) Tome una semilla de Trigonella foenum-graecum L. (fenogreco) y haga finos cortes transversales y longitudinales a la misma. Colóquelos en un beaker y realice la técnica del disociado débil (ver Anexo 1). 1) Cuando finalice, lave su muestra en una caja de petri con agua destilada hasta que quede sin reactivo y colóquelo sobre un portaobjetos. 2) Con la ayuda de una aguja de disección disgregue el tejido hasta que quede en partículas muy pequeñas y agregue una gota de safranina y móntela con gelatinaglicerina. 3) Escurra y monte con agua destilada. 4) Observe al microscopio y busque los tipos celulares presentados en la lámina del Anexo 3. Anote sus resultados. 4) INVESTIGUE la materia médica e indicación terapéutica de la albahaca y el fenogreco y preséntelos en su reporte.
REFERENCIAS 1. 2. 3.
Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. Paniagua, H., Fernández, L., y Paredes D. (2001). Técnicas histológicas. Práctica de laboratorio para Farmacobotánica II. Guatemala: USAC.
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ANEXO 1: Técnicas de diafanizado y disociado Técnica de Semidiafanizado Luego de la selección del material, se procede a: 1. Colocar en un vaso de precipitado una mezcla de alcohol de 95º e hidróxido de potasio al 5% en partes iguales y colocar en una estufa a 60ºC durante media hora. 2. Enjuagar con agua tibia hasta que el líquido quede límpido. 3. Montar con gelatina-glicerina.
Técnica de diafanizado 1) Colocar el material (hojas, brácteas, antófilos, etc.) en un vaso de precipitado con alcohol de 96º, llevar a ebullición (en baño de María) durante 10 minutos. 2) Pasar a una solución de partes iguales de alcohol de 95º e hidróxido de sodio al 5%, llevar a ebullición (en baño de María) durante 5-10 minutos, según la consistencia del material. 3) Lavar con agua destilada tibia varias veces hasta que el agua quede totalmente limpia. 4) Pasar con mucha precaución el material a una caja de Petri que contenga hipoclorito de sodio al 50%, dejarlo hasta que queden blanco transparente. 5) Lavar con agua destilada, hasta eliminar completamente el hipoclorito de sodio, hacer mucho énfasis en esto, ya que de lo contrario el hipoclorito de sodio reacciona con la safranina (colorante) dando como producto un precipitado. 6) Si es necesario, colocar en hidrato de cloral (5:2) durante 10 – 15 minutos como mínimo, hasta que se tornen transparentes. Puede el material permanecer en esta solución todo el tiempo que transcurra hasta el momento de colorearlos y montarlos definitivamente. Al material así obtenido, podemos realizarle una coloración con Safranina al 1% en agua y montarlos con gelatina-glicerina, o bien una coloración con Safranina Fast Green con deshidratación y montarlos con Bálsamo de Canadá.
Método de disociado débil Se utiliza para hojas, tallos herbáceos y cortezas comerciales. Se procede así: 1) 2) 3) 4)
Colocar el material cortado finamente en una solución de hidróxido de sodio al 5%. Hervir durante 5 minutos o hasta que se suavice. Lavar con agua destilada hasta que el líquido quede limpio. Colocar con ayuda de un pincel o aguja histológica una porción del material sobre el portaobjeto y disgregarlo con ayuda de una aguja. 5) Cubrir con el cubreobjeto y observar, si se desea conservar por más tiempo montar con gelatina-glicerina. 14
Método de disociado fuerte (Método de maceración de Boodle) Se utiliza para tallos, raíces, y tegumentos de semillas. Se procede así: Hervir el material con hidróxido de potasio al 10% durante 5-10 minutos. Lavar bien con agua. Colocar el material así tratado en un tubo de ensayo con ácido crómico al 25% y dejar actuar durante 30 minutos o más, dependiendo del material, retirar cuando al pinchar el material tenga consistencia de manteca. Lavar bien varias veces. En el último lavado agitar fuertemente el tubo de ensayo contra la palma de la mano, de manera que todo el material se disgregue contra las paredes del mismo. Colocar una pequeña cantidad de material, con ayuda de un pincel, sobre el portaobjeto, aplastar con la aguja histológica y añadir una gota de Safranina al 1% en agua. Escurrir el excedente y montar con gelatina-glicerina.
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Anexo 2: Cartilla micrográfica de Ocimum basilicum L.
(1) Epidermis superior (3) Granos de polen (5) Lámina con glándula multicelular (7) Glándula multicelular en epidermis de la hoja (9) Epidermis sobre una vena de la hoja con tricoma de cubierta (11) Esclerenquima de la pared del fruto (13) Epidermis del tallo con una célula capitada y cicatriz (cic)
(2) Epidermis con estomas diácticos (4) Glándulas capitadas (6) Epidermis externa de la corola (8) Vasos del tallo (10)Superficie de epidermis interna de la corola (12) Esclerenquima (sl) (14) Epidermis del cáliz con glándulas capitadas y Tricomas de cobertura.
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Anexo 3 Cartilla micrográfica de Trigonella foenum-graecum L.
3.1. Epidermis de la testa en vista superficial, desde arriba. 3.2. Cutícula (c.), epidermis (ep.) e hipodermis (h.) de la testa en vista seccional. 3.3. Hipodermis de la testa en vista superficial, desde abajo. 3.4. Epidermis de la testa en vista superficial, desde abajo. 3.5. Epidermis y células parenquimatosas de los cotiledones en vista seccional. 3.6. Parte de la semilla en vista seccional mostrando la epidermis, hipodermis y capas parenquimatosas (p.) de la testa y la capa más externa (en.s.) y las células de mucilago (mu.) del endospermo.
3.7. Epidermis (ep.) e hipodermis (h.) de la testa en vista superficial, desde arriba. 3.8. Capas de parénquima de la testa en vista superficial. 3.9. Capa más externa del endospermo en vista superficial. 3.10. Epidermis y palizada de los cotiledones en vista seccional. 3.11. Parénquima indiferenciado de los cotiledones. 3.12. Una sola capa de parénquima de la testa en vista superficial.
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PRÁCTICA 3 DROGA CRUDA INTRODUCCIÓN: La parte de la planta medicinal (raíz, rizoma, tallo, hoja, flor, etc.) que ejerce una acción farmacológica sobre los organismos se denomina materia médica. Es importante indicar que algunos productos del metabolismo secundario del vegetal como las gomas, resinas o bálsamos, etc., son utilizados también con fines terapéuticos. La droga cruda vegetal es la materia médica desecada. El estado de la droga cruda vegetal debe ser óptimo antes de ser comercializada, por lo que para garantizar su calidad debe cumplir con exámenes de identidad, pureza y potencia. Los exámenes de identidad o botánica incluyen la determinación botánica, la descripción micromorfológica y macromorfológica de los órganos utilizados como materia médica, el análisis químico de metabolitos y la cromatografía de metabolitos. Los exámenes de pureza incluyen los análisis físico-organolépticos y los microbiológicosanitarios. Los primeros consisten en analizar al ojo y estereoscópicamente el secado, acabado, contaminación por larvas e insectos, parásitos u otros agentes. También las características de olor y color, contenido de materia extraña, el porcentaje de humedad, condiciones de almacenaje y aspecto general de una muestra representativa de cada lote. Los métodos microbiológicosanitarios consisten en cuantificar el número más probable/gramo de coliformes. Finalmente los exámenes de potencia incluyen estudios del contenido de principios activos y ensayos de actividad biológica o farmacológica de la materia prima, extracto o producto terminado. Los procedimientos que realizaremos en esta práctica serán de identidad y pureza (físicoorganolépticos).
OBJETIVOS: 1. Realizar el control de calidad a drogas crudas vegetales por medio de algunos exámenes de identidad y pureza (físico-organolépticos). 2. Utilizar las técnicas histológicas de semidiafanizado como examen de identidad (micromorfológico) de una droga cruda vegetal.
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MATERIALES: 1. Microscopios 2. Balanza monoplato 3. Balanza analítica 4. Papel kraft 5. Lupas y estereoscopios 6. Estufas 7. Vidrios de reloj 8. Beakers de 50 ml 9. Pinceles 10. Agujas de disección 11. KOH al 5%
12. Alcohol etílico al 95% 13. Agua destilada 14. Hipoclorito de sodio (comercial) 15. Espátula 16. Gelatina-glicerina 17. Hidrato de cloral (5:2) 18. Safranina acuosa al 1% 19. Droga cruda vegetal de Manzanilla 20. Cinnamomum verum y Cinnamomum cassia 21. Matricaria recutita
PROCEDIMIENTO: Comprobación de los requisitos macroscópicos: Droga de Matricaria recutita (matricarie flos) 2. Tome la muestra comprada en el mercado y observe a simple vista o con ayuda de una lupa o estereoscopio, la morfología, el color, el olor y la textura. 3. Observe y anote si la muestra cumple con los requisitos generales presentados en el Anexo 1 (punto de requisitos generales y características sensoriales). Repita el procedimiento con la muestra estándar proporcionada por el instructor. Observaciones: la muestra del mercado no cumple con la definición de lo que constituye la droga de la manzanilla, pero muchas veces es lo que compramos y consumimos como un “té de manzanilla”. Droga de Cinnamomum verum y Cinnamomum cassia (cinnamomi cortex) 1. Lea cuidadosamente las características macroscópicas de la droga de cada especie en el Anexo 3 2. Tome una de las dos muestras de canela proporcionada por el instructor y compare sus características con las descritas para las dos drogas 3. Compruebe las características organolépticas 4. ¿Con cuál de las dos drogas podemos relacionar mejor las características que observamos en nuestra muestra? 5. Repita el procedimiento con la otra muestra de canela.
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2. Determinación de materia orgánica e inorgánica extraña (pureza):
Utilizando nuevamente la muestra de manzanilla obtenida del mercado, pese en la balanza semianalítica la muestra completa y luego separe toda la materia orgánica e inorgánica extraña, es decir que debe separar los tallos, hojas y cualquier otra materia como insectos, otras plantas, piedras, etc., Haga tres grupos: todo lo orgánico extraño, lo inorgánico extraño y las cabezuelas. En el Anexo 2 encontrará la fórmula para obtener el porcentaje de materia orgánica e inorgánica extraña, utilice una balanza semianalítica para obtener los pesos por separado. Haga los cálculos correspondientes. Compare el porcentaje obtenido con la sección del Anexo 1 “sustancia estándar de referencia” en donde aparecen los porcentajes aceptados para las materias extrañas en la droga de manzanilla ¿Qué puede concluir de los resultados? Observaciones: cuando se hace el examen de materias extrañas en lotes grandes de materia prima almacenados en costales o barriles, debe tomarse una muestra de la parte superficial, una muestra del centro y una muestra del fondo y realizar el procedimiento antes expuesto.
1) Técnica de Semidiafanizado: Hojas y Flores: Para verificar las características microscópicas de la Manzanilla, seleccione diez (10) flores de la muestra estándar y realice lo siguiente: Coloque las flores en un vaso de precipitado con una mezcla de alcohol al 95º e hidróxido de potasio al 5% en partes iguales y colocar en una estufa a 60ºC durante 12 a 20 minutos. Enjuague con agua tibia hasta que el líquido quede limpio. De ser necesario clarifique los cortes con hipoclorito de sodio al 50% hasta que se observen blancos. Coloree con safranina acuosa al 1%. Monte y observe al microscopio, esquematice y describa guiándose con la lámina del Anexo 4. Prepare una lámina fija con las mejores muestras de las flores, utilizando gelatinaglicerina. BIBLIOGRAFIA:
Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. Montenegro, G., y Gómez, M. (1997). Anatomía y Evolución del cuerpo vegetativo de las plantas vasculares. Chile: Red Latinoamericana de Botánica. World Health Organization. (1988). Quality control methods for medicinal plants materials. England: World Health Organization. CRdeZ/ladeg. 20
Anexo 1 Especificaciones de la norma de características y requisitos que debe cumplir la manzanilla desecada. La siguiente información le será de utilidad para comparar sus resultados con las especificaciones para cada especie. Matricaria recutita L. Requisitos generales: El producto debe ser preparado con las inflorescencias del disco desecadas enteras, molidas en forma gruesa o picada en forma fina. Debe proceder de materia prima que no esté alterada, adulterada o contaminada. No debe contener insectos en cualquiera de sus formas de desarrollo, ni otras impurezas que denoten un deficiente estado higiénico sanitario. Sustancia estándar de referencia: el estándar de Matricaria recutita L., enteras no deben contener más del 10% de elementos extraños, ni más de 2% de materias orgánicas extrañas y no más de 4% de ceniza insolubles en agua. Características sensoriales: color pardo amarillento, olor aromático agradable, sabor aromático y amargo, aspecto propio según la presentación del producto. Características microscópicas: en el polvo de manzanilla es común observar numerosos granos de polen, esféricos o triangulares, espinosos, fragmentos de corola de las flores marginales, con células epidérmicas en forma de papilas, pelos glandulares cortos, del tipo de las compuestos; fragmentos de estigma, hacesillos vasculares con tráqueas espiraladas, anilladas o reticulares. Estomas elípticos hasta de 0.3 mm de diámetro.
Anexo 2 Determinación de porcentaje de materia orgánica e inorgánica extraña. Expresión de resultados: el por ciento de materia orgánica e inorgánica extraña (Mo) se calcula mediante la fórmula siguiente: M o=
m ∗100 M
Donde: M m 100
masa inicial de la muestra de ensayo (g) masa de otras partes de la propia planta e inorgánicas (g) factor matemático para los cálculos
Informe: Se informa en números enteros, el por ciento de materia orgánica e inorgánica extraña.
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Anexo 3 Definición, microscopía y microscopía de la monografía de Cinnamomum rerum J.S. Presl. y C. cassia Blume Definición La droga cruda Cortex Cinnamomi consiste en la corteza interna seca de los vástagos injertados de Cinnamomum verum J.S. Presl. o de la corteza del tronco, sin corcho, de Cinnamomum cassia Blume (Lauraceae). Material vegetal de interés: corteza seca, libre del corcho externo. Apariencia general Cinnamomum verum J.S. Presl. La corteza es de cerca de 0.2-0.8 mm de grosor y se presenta como canutos compuestos bien empacados de una o dos capas. La superficie externa es suave, café amarillento con cicatrices débiles que marcan la posición de las hojas y yemas axilares y exhibe estriaciones longitudinales delgadas, blanquecinas y ondulantes. La superficie interna es ligeramente más oscura y longitudinalmente estriada. La fractura es corta y fibrosa. Cinnamomum cassia Blume La droga es acanalada o como canuto, 30-40 cm de largo, 3-10 cm de diámetro, 2-8 mm de grosor. La superficie externa es café grisácea, ligeramente áspera, con arrugas suaves e irregulares y lenticelas transversas levantadas, algunas veces muestra rayas blanco grisáceas; la superficie interna es café rojiza, con finas estriaciones longitudinales y muestra una traza oleosa al raspar. La textura es dura y frágil, fácilmente se quiebra, la fractura es desigual, la capa externa es café y relativamente áspera, la capa interna es café rojiza y aceitosa y muestra una línea café amarillo entre las dos capas. Propiedades organolépticas Olorosa, sabor característico y aromático, ligeramente dulce y fragante. Características microscópicas Cinnamomum verum J.S. Presl. El exterior muestra unas pocas capas discontinuas de parénquima cortical dentro de las cuales se encuentra una capa ancha y continua de esclerénquima del periciclo, compuesta de grupos de esclereidas isodiamétrica o tangencialmente alongadas con paredes engrosadas y agujereadas, y ocasionalmente grupos de fibras. El floema está compuesto de tejido cribado y parénquima con células largas de secreción conteniendo aceite esencial o mucílago y fibras de floema que aparecen solas o en grupos pequeños, las fibras individuales son de 15-25 µm de diámetro con paredes engrosadas; los rayos medulares son uniseriados o beseriados. Algunas células contienen pequeños cristales aciculares de oxalato de calcio; El resto de tejidos, junto con el floema del parénquima, contiene gránulos de almidón, simples o compuestosde 2-4, raramente de más de 10 µm de diámetro. Cinnamomum cassia Blume La sección transversal muestra el corcho compuesto de varias capas de células, la capa más interna con paredes externas lignificadas y engrosadas. La corteza esta dispersa con litocistos y células secretoras. Los litocistos del periciclo tienen un arreglo de añillo interrumpido, acompañado de haces de fibras hacia el exterior, La pared externa de los litocistos son usualmente más delgadas. Los rayos de floema son de 1 o 2 filas de células de ancho, y contienen cristales aciculares de oxalato de calcio; usualmente de 2 a 3 fibras por haz; las células de aceite aparecen dispersas en todas partes. Las células parenquimatosas contienen gránulos de almidón.
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Anexo No. 4 Cartilla micrográfica de Matricaria recutita L.
1. Epidermis de la parte interna de un lóbulo de la corola de una flor tubular en vista superficial mostrando a un grupo de papilas (pap.) cerca del ápice. 2. Células del tejido interno de la pared del ovario conteniendo una acumulación de cristales de oxalato de calcio. 3. Capa fibrosa de la antera en vista superficial. 4. Epidermis externa de la corola de una flor tubular en vista superficial mostrando un tricoma glandular. 5. Estigma papiloso y parte de un estilo en vista superficial. 6. Parte de una bráctea en vista superficial mostrando las células de pared delgada y estomas de la región marginal y esclereidas alongadas de la región central.
7. (a) Un grupo de granos de polen inmaduros; (b) granos de polen maduros. 8. Parte del filamento de una antera en vista superficial. 9. Epidermis interna de la corola de una flor ligulada en vista superficial mostrando células del margen con papilas (pap.) 10. La punta de un lóbulo de la antera en vista superficial mostrando una acumulación de cristales de oxalato de calcio en el tejido. 11. Parte de la pared del ovario en vista superficial 12. Epidermis externa de la corola de una flor ligulada mostrando estriaciones y tricoma glandular. 13. Esclereidas de la base de la pared del ovario.
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PRACTICA 4 DIVISIÓN PTERIDOPHYTA Y PINOPHYTA INTRODUCCIÓN División Pteridophyta Los helechos representan esta división de plantas vasculares sin semillas. Hay cerca de 11,000 especies, con lo cual son el grupo de plantas más grande después de las angiospermas y son ampliamente diversas en forma y hábito. En general la planta del helecho es un esporofito que consta de un tallo subterráneo (rizoma) que produce raíces adventicias y grandes hojas llamadas frondes. La fronde consta de un pecíolo y un limbo. Típicamente, el limbo está seccionado en pequeñas hojas llamadas pinnas, llevadas por un pedículo central, el raquis. Los frondes muestran por lo común un enrollamiento característico durante su desarrollo, denominado vernación circinada. El xilema y floema primarios se encuentran en todos los órganos de la planta; en cambio están ausentes los tejidos secundarios (con excepciones). Una característica anatómica principal de los helechos y de las plantas con semillas es la presencia de brechas foliares en sus cilindros vasculares que parece ser un rasgo evolutivo de los tipos de hojas. Familias Polypodiaceae y Adiantaceae La familia Polypodiaceae es de las más homogéneas del reino vegetal. Incluyen cerca del 80% de las Filicales, es decir unas 7,000 especies. El carácter distintivo reside en los esporangios, casi siempre provistos de largos pedicelos. Los soros nacen generalmente en la cara inferior de las hojas, sobre ciertos nervios llamados fértiles o bien lo hacen en el borde de la hoja. En la mayor parte de las polipodiáceas, los soros están cubiertos por un indusio, de formas variables según los géneros. La familia Adiantaceae (o Pteridaceae según la clasificación) ha sido separada recientemente de Polypodiaceae, basándose en características de los esporangios. Las gimnospermas son plantas vasculares y productoras de semillas. La principal característica distintiva de las gimnospermas son sus semillas desnudas, las cuales nacen expuestas al aire sobre la superficie de escamas de conos o sobre pedúnculos entre las hojas. En contraste, las semillas de las angiospermas nacen dentro del tejido del fruto que se desarrolla a partir del ovario o de alguna otra estructura floral. El grupo de gimnospermas (división pinophyta) comprende 4 Clases: Cycadopsida, Ginkgopsida, Coniferopsida o Pinopsida, y Gnetopsida. Familia Pinaceae Pertenece a la Clase Pinopsida (coniferopsida), orden pinales (coniferales). Son árboles, generalmente perennifolios, resiníferos, monoicos, de hojas estrechas aciculares, dispuestas helicoidalmente sobre macroblastos ó en grupos (o fascículos) de 1 a 8 hojas (dependiendo de la 24
especie) sobre una estructura llamada braquiblasto. La Infrutescencia pseudocárpica lignificada, llamada estróbilo o cono (piña), contiene las semillas aladas terminalmente. La bráctea y escama se encuentran separadas, con dos óvulos sobre cada escama, observándose como escamas aplanadas distintas de las brácteas subyacentes, siendo la bráctea usualmente más corta que la escama. Esta familia se caracteriza por tener diterpenos del tipo ácido abiético y ácido pimárico. Familia Cupressaceae Pertenece a la Clase Pinopsida (coniferopsida), orden pinales (coniferales). Son árboles generalmente perennifolios, resiníferos, monoicos o dioicos, con hojas escamiformes o alesnadas opuestas o en verticilos trimeros. La infrutescencia pseudocárpica, con escamas de los conos opuestas ó verticiladas, contiene las semillas aladas lateralmente. La bráctea y la escama están fusionadas, con 2 a más óvulos sobre cada escama. Contienen diterpenos con esqueleto tipo labdano y diterpenos fenólicos como ferruginol y totarol. Familia Taxaceae Árboles o arbustos perennifolios, dioicos, no resinosos. Hojas aciculares, opuestas o en verticilos trímeros. Semillas parcial o totalmente cubiertas por una masa carnosa de color brillante (arilo). En taxus existen terpenos de tipo taxano.
Familia Ginkoaceae Pertenece a la familia Ginkgopsida, orden Gikgoales. Son árboles dioicos, caducifolios, de hojas loriformes o en forma de abánico, con venación dicotómica. Semillas con la testa exteriormente carnosa (sarcotesta). Esta familia posee una sola especie no extinta, Ginkgo biloba. OBJETIVOS: 1) Reconocer y describir las características vegetativas de los helechos de las familias Polypodiaceace y Adiantaceae. 2) Identificar las características anatómicas del rizoma de la calahuala y las sustancias ergásticas que presenta. 3) Reconocer el contenido fitoquímico de la división pteridophyta. 4) Reconocer y describir las características vegetativas de gimnospermas de las familias Pinaceae, cupressaceae y ginkoaceae. 5) Identificar las características anatómicas y las sustancias ergásticas que presentan las familias. 6) Reconocer el contenido fitoquímico de las división pinophyta.
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MATERIALES: 1. Microscopios 2. Estereóscopos 3. Vidrios de reloj 4. Porta y cubreobjetos 5. Agujas de disección 6. Hojas de afeitar 7. Duroport 8. Beakers de 50 ml. 9. Pinceles 10. NaOH al 5% 11. Embudos 12. Pipetas
13. Lugol 14. Sudan III ó IV 15. Reactivo de Dragendorff 16. Sulfato férrico 17. Pinus sp. 18. Cupressus lusitanica 19. Taxus sp. 20. Ginkgo biloba 21. 22. Polypodium sp. o Phlebodium sp. (calahuala) 23. Adiantum sp. (culantrillo)
PROCEDIMIENTO: Tome un ejemplar de calahuala y describa: a)
Hábito ¿Para qué le sirve al rizoma la materia orgánica que lo rodea?
b) Frondas: Forma y tamaño Tipo de nervadura c)
Esporangios: Disposición de los soros en la fronda (obsérvelos en el estereoscopio) Presencia o ausencia de indusio.
d) Características del rizoma: Forma, color y disposición de las escamas Presencia de raíces adventicias en el rizoma e)
Realice un esquema de la planta y sus características señalando sus partes.
f)
Repita los pasos 1.1 a 1.4 para el culantrillo (Adiantum sp.)
g) Observando las características anteriores, ¿en qué se diferencia la calahuala del culantrillo? h) ¿Corresponde la descripción de la calahuala que usted ha hecho con la que leyó previo al laboratorio? Realice cortes transversales (finos) del rizoma de calahuala, colóquelos en un vidrio de reloj; monte uno de ellos con agua destilada y una gota de lugol. Observe al microscopio y esquematice. 26
a)
Epidermis. Observe las escamas que son tejidos epidérmicos
b) Parénquima cortical. Observe la presencia de gránulos de almidón. ¿pueden observarse en algún otro tejido? c)
Observe el cilindro vascular (o estele). Determine si es un sifonoestele, euestele o protoestele.
d) ¿Puede observar la presencia de endodermis? e)
¿Es posible observar la laguna foliar?
f)
Para llenar el siguiente cuadro utilice cortes transversales del rizoma Colorante
Sustancia ergástica
Prueba positiva/negativa
Tejido donde se observa
Dragendorff Sudan III o IV Sulfato férrico Aplique la técnica de disociado débil a la materia médica (rizoma). Anote resultados y esquematice lo observado. a) Cortar finamente con una hoja de afeitar, fragmentos del rizoma y colocarlo en un beaker con solución de NaOH al 5%. b) Hervir durante 5 minutos. c) Lavar repetidamente con agua destilada hasta que quede sin reactivo. d) Colocar con ayuda de un pincel una porción del material sobre el portaobjetos y disgregarlo con una aguja. e) Agregar una gota de safranina, escurrir y montar con agua destilada. f) Observe la presencia y describa los elementos disociados ayudándose con los Anexos 1 y 2. FAMILIA PINACEAE Tome el ejemplar de Pinus sp. proporcionado en el laboratorio. Describa las características morfológicas de estróbilos (disposición de escamas y brácteas, monoicos o dioicos) y hojas (descripción, número y partes). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado.
Realice cortes transversales de la acícula de Pinus sp. haga una prueba de aceites con Sudan III y observe al microscopio. Haga esquemas de lo observado
FAMILIA CUPRESSACEAE
Tome el ejemplar de Cupressus lusitanica proporcionado en el laboratorio. Describa las características morfológicas de gálbulas (disposición de escamas y brácteas), monoicos o dioicos, hojas (descripción, número y partes). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado. 27
Realice cortes transversales de la acícula de Cupressus lusitanica haga una prueba de aceites con Sudan III, y observe al microscopio. Haga esquemas de lo observado.
Coloque estróbilos de Ciprés en baño maría hasta ebullición. Deje enfriar la solución acuosa y coloque 5 mL de ésta solución en un tubo de ensayo. Adicionar 1-2 gotas de Sulfato férrico y observa a formación de un precipitado azul-verdoso. Detalle positiva o negativa la prueba de taninos.
FAMILIA TAXACEAE
Tome el ejemplar de Taxus sp proporcionado en el laboratorio. Describa las características morfológicas del fruto (descripción de arilo), hojas (descripción, número y partes). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado.
FAMILIA GINKOACEAE
Describir las características morfológicas, Hábito y esquematizar el ejemplar de Ginkgo biloba.
Realice cortes transversales de la hoja de Ginkgo biloba, haga una prueba con sulfato ferrico, y observe al microscopio. Haga esquemas de lo observado
Realizar un cuadro comparativo para distinguir las 4 familias de gimnospermas observadas en base a las muestras observadas.
BIBLIOGRAFIA: 1. 2. 3.
4. 5. 6.
Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. Gattuso, M.A., Cortadi, A.A., y Gattuso, S.J. (2008). Caracteres morfoanatómicos de especies de Phlebodium. Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 7(1):10-17. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal. (Trad. 2a.). México: Ed. McGraw Hill. Lagenheim, J. (2003). Plant Resins. Chemistry, Evolution, Ecology, and Ethnobotany. Portland-Cambridge: Timber Press. Raven, P., Evert, R., y Eichhorn, S. (1999). Biology of Plants (6a ed.). New York: Worth Publishers.
ANTECEDENTES: 1. Defina y ejemplifique con un dibujo: sifonostele, eustele, protostele, endodermos, laguna foliar. 2. Investigue la descripción botánica, materia médica y usos medicinales de la calahuala (Phlebodium decumanum o P. pseudoareum) y el culantrillo (Adiantum sp.) 3. Investigue los tipos de resinas naturales, la composición de cada una y las familias vegetales que las producen.
CRdeZ/HPDP. 28
Anexo 1
Caracteres anatómicos comunes de Phlebodium decumanum, Phlebodium pseudoareum, Phlebodium aureum. A-C: sección transversal de la lámina: A, lámina, esquema; B, zona del nervio medio, detalle; C, soro, detalle. D-E: peciolo: D, esquema; E, detalle según lo indicado en D. F-G: rizoma: F, esquema; G, detalle según lo indicado en F. H-I: vista superficial de la epidermis: H, adaxial; I, abaxial. J-N: elementos disociados del rizoma: J, granos de almidón simples céntricos; K, célula parenquimática sin almidón; L, célula parenquimática con almidón; M, célula de la endodermos engrosada en U; N, traqueida escalariforme. Las reglillas corresponden a: 1 a F; 2 a A y D; 3 a B, C, E y G; 4 a H-N.
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Anexo 2
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Anexo 3: Morfología de la familia Polypodiaceae
2 1
3
4
5
6
7
Figura 3. Polypodium vulgare L. 1. Gametofito, 2.-7. Esporofito, 2. Fronda (haz), 3. Envéz de la fronda, 4. Soros, 5. Esporangio y células del esporogonio, 6. Rizoma, 7. Raíces. 31
Anexo 4. Morfología de la familia Pinaceae
2
3 1
4
Figura 1. Pinus strobus. 1. Acículas, 2. Estróbilo femenino, 3. Bráctea
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Anexo 5. Morfología de la familia Cupresaceae 1
3
2
5
4
Figura 2. Cupressus macrocarpa Hartw. ex Gord. 1. Rama con hojas verticililadas, 2. Estróbilos femeninos, 3. Estróbilos masculinos, 4. Fruto, 5. Semilla 33
Anexo 6. Morfología de la familia Ginkgoaceae
Figura 3. Morfología de Gingko biloba L. a. Rama con hojas jóvenes e inflorescencias en amentos, b. Amentos masculinos, c. Amento masculino son transformados en frutos, d. Brote y dos frutas maduras. e. Fruto en diferentes vistas.
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Anexo 7. Morfología de la familia Taxaceae
1
2
5 3
6
4
7
Figura 4. Morfología de Taxus baccata L. 1. Rama, 2. Flor femenina (dispuestas en estróbilo), 3. Detalle de las hojas opuestas, 4. Fruto con arilo, 5. Flor masculina (detalle con escamas en la base), 6. Detalle del fruto, 7. Semilla.
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PRACTICA 5 ANGIOSPERMAS BASALES Y MAGNOLIIDES INTRODUCCIÓN Hasta hace poco, gran parte de la clasificación de plantas estaba basada casi exclusivamente en la morfología. Sin embargo, se ha abierto un nuevo panorama para la taxonomía y la sistemática a partir de los descubrimientos aportados por el uso de la información proveniente de los análisis moleculares. Con este desarrollo revolucionario surgido del aporte genético, se han propuesto nuevos grupos de plantas (clados) que previamente no existían en función de las nuevas relaciones filogenéticas descubiertas. Las Angiospermas Basales son el grupo que posee las características más ancestrales entre las plantas con flores. Fueron separadas de las dicotiledóneas debido a que tienen polen monocolpado y cuatro o nueve núcleos en el saco embrionario. Las angiospermas basales están conformadas principalmente por Amborellales, Nymphaeales y Austrobaileyales. Cada orden es por separado monofilético, pero en conjunto no forman un grupo monofilético, siendo las angiospermas vivas que integran el supuesto linaje más cercano a las angiospermas ya extintas. Este linaje fue obtenido a través del análisis filogenético de Amborellaceae, Nymphaeales, Illiciaceae, Trimeniaceae y Austrobaileyaceae (las dos últimas familias integrantes del orden Austrobaileyales), conocido con fines didácticos por su acrónimo como Grado “ANITA”. Actualmente, se ha planteado la hipótesis donde Amborella tricopoda se considera como la angiosperma viva con más características ancestrales, convirtiéndose en la hermana más cercana de las plantas con flores ya extintas. Esto le quitó el lugar a la hipótesis de Cronquist, quién argumentaba lo mismo para Magnolia grandiflora. ORDEN NYMPHAEALES Este es un orden monofilético de plantas acuáticas que actualmente incluye tres familias: Cabombaceae, Hydatellaceae y Nymphaeaceae. Las plantas de este orden son hierbas acuáticas con rizomas; tienen espacios de aire y canales laticíferos. Presentan esclereidas estrellado ramificadas en el aerénquima. Las hojas pueden tener la lámina sumergida, flotante o emergente. Las flores son perfectas, largamente pediceladas y usualmente flotando. Tienen entre 4-12 tépalos fusionados o unidos. Familia Nymphaeceae Son plantas de agua dulce, perennes con largos rizomas horizontales. Las hojas pueden ser sumergidas o flotantes. La lámina es ovada a orbicular, entera o dentada. Las flores son grandes y vistosas, actinomórficas, perfectas, solitarias, emergentes en largos pedúnculos. Los tépalos pueden ser de 3 a muchos, y los carpelos pueden ser de 3-40, unidos o parcialmente libres. Los géneros más conocidos son Nymphaea, Victoria y Nuphar. El fruto es una cápsula esponjosa que se abre por hinchamiento debido a la acumulación del mucílago que tiene dentro, o a veces es indehiscente. Las semillas son ariladas. La polinización es por escarabajos. La familia presenta variedad de alcaloides y flavonoides. Las flores del género Nymphaea contienen glico-flavonoles, isoflavonas, antocianidinas y taninos hidrolizables. Se ha reportado la presencia del alcaloide nymphaeina (pirrolidina) en Nymphaea alba, el cual tiene efectos psicotrópicos, afrodisíacos, tranquilizantes, anticolinérgicos. En Nuphar lutea y Nuphar japonica han sido reportados los alcaloides α-binufaridina y β-binufaridina (tiobinufaridinas derivados de quinolizidina). 36
ORDEN AUSTROBAILEYACEAE Este orden incluye Austrobaileyaceae, Schisandraceae, Illiciaceae y Trimeniaceae. Familia Schisandraceae Son árboles pequeños, arbustos y bejucos o trepadoras sarmentosas, aromáticas, glabras, de hasta 25 m. Hojas simples, ovadas a ovado-oblongas, alternas, espirales, a veces agrupadas apicalmente, pecioladas, sin estípulas, coriáceas, margen denticulado a sinuado, a veces entero. Tallos con nodos unilacunares, elementos del esclerénquima fibrosos, con o sin ramificaciones. Inflorescencias axilares, supraaxilares o subterminales, flores solitarias, pareadas o a veces en glomérulo. Plantas monoicas o dioicas, con flores unisexuales o hermafroditas, actinomorfas. Flores pequeñas, blancas, verdosas, amarillo crema, anaranjadas, a veces rosas o rojas, receptáculo cónico, corto, a veces muy modificado, tépalos 5-30(-33), en (1-)2-3 verticilos, elípticos a obovados, los más externos e internos frecuentemente reducidos en tamaño y de textura diferente, estambres 4-50(-80), de desarrollo centrípeto; gineceo superior, carpelos ovoides a obovoides, en espiral sobre el receptáculo, formando una masa elipsoidal a subglobosa, o bien en un verticilo, estilo subulado a cónico, óvulos anátropos, crasinucelados, bitégmicos, péndulos o unidos ventralmente. Fruto en baya o folículo múltiple, cada baya subglobosa a elipsoide; pericarpo suculento, rojo o púrpura oscuro. Semillas subglobosas a ovoides o reniformes, aplanadas, con la testa dura o quebradiza, lisa, rugulosa o tuberculada Familia Illiaceae La importancia de esta familia se debe a que incluye el anís estrella, llicium verum (anis estrella chino) y Ilicium anisatum (anís estrella japonés). Las plantas del género Illicium, son arbustos o árboles aromáticos con hojas simples, alternas y enteras; tiene flores actinomórficas, perfectas, las cuales están solitarias en las axilas. Este género tiene alrededor de 42 especies y es altamente variable en forma, número y tamaño de los segmentos del perianto. Los segmentos del perianto son de 7-12 a numerosos, libres, espiralmente arreglados, los externos son sepaloides, intercalados con los más internos que son petaloides, los cuales al mismo tiempo son transicionales a estambres. Los ovarios son de 8-15 carpelos libres, algunas veces verticilados. El saco embrionario tiene 4-núcleos. Las especies de Illicium contienen compuestos prenilados, neolignanos, y sesquiterpenos. El anis estrella (Illicium verum) contiene anetol y ácido tíglico. MAGNOLIIDAE Magnoliide comprende 4 órdenes monofileticos según el nuevo Sistema de Clasificación de Angiospermas (APG III), los cuales son Magnoliales, Laurales, Canellales y Piperales. En sistemas de clasificación antiguos como el de Cronquist pertenecía a la clase Magnoliopsida (las dicotiledóneas), división Magnoliophyta (las angiospermas). En los sistemas de clasificación modernos este taxón se sigue utilizando pero no está clasificado dentro de las dicotiledóneas que son parafiléticas, aunque sí está dentro de las angiospermas; además Cronquist dividía Magnoliidae en 8 órdenes. Es un grupo que presenta un elevado polimorfismo y un gran número de caracteres arcaicos. Las especies de esta subclase suelen poseer un eje floral con las piezas en disposición helicoidal: las flores son acíclicas. El perianto cuenta con numerosos piezas, generalmente tépalos bien desarrollados con muchas partes y a menudo diferenciados en sépalos 37
o pétalos, aunque también incluye algunos grupos apétalos. Los estambres son numerosos y maduran en una forma centrípeta. El polen más típico, es binucleado y monosulcado. El gineceo apocárpico con primordios seminales bitégmicos y crasinucelados. Todas las familias, a excepción de Lauraceae, presentan endospermo. Las Magnolidas tienen además sus propias defensas químicas, y gran parte de los taxones producen alcaloides isoquinolínicos. La presencia de traqueidas en las formas primitivas, gineceos apocárpicos, poliandria primaria, son algunos de sus caracteres más primitivos. Aceites escenciales y alcaloides de bencilisoquinolina. ORDEN LAURALES Familia Lauraceae Esta familia comprende aproximadamente 32 géneros y 2500 especies que se distribuyen en regiones tropicales y subtropicales. Se divide en dos subfamilias: Lauroide y Cassythoideae. La mayoría de las especies son árboles o arbustos, aunque existen algunas trepadoras parásitas que no poseen hojas verdaderas. Se caracterizan por presentar hojas alternas, no poseer estípulas y poseer numerosas cavidades de aceite esencial en diferentes partes de la planta, característica que le da la naturaleza aromática a esta familia. Las inflorescencias generalmente son racimos o cimas. Las flores son regulares, trímeras, bisexuales o unisexuales en la misma planta; los pétalos y sépalos forma un perianto inconspicuo. El ovario es usualmente superior, tiene un lóbulo con un solo óvulo. El fruto es una drupa o baya. En Guatemala se encuentran alrededor de 57 especies de Lauráceas, de las cuales 4 tienen usos medicinales populares: el aguacate (Persea americana Mill), dos especies de laurel (Litsea glaucescens H.B.K. y L. guatemalensis Mez) y la canela (Cinnamomum zeylanicum Breyene) que es exótica. Además esta familia, por su contenido químico (Anexo 1), es importante como fuente de energía calórica, alimento, medicina, ornamento y aromatizante. ORDEN PIPERALES Familia Aristolochiaceae Son hierbas o arbustos (principalmente lianas), con hojas alternas, a menudo cordadas y con venación palmada, sin estipulas. Poseen flores axilares, solitarias o arregladas en racimos o cimas. Flores Bisexuales, actinomorfas ó cigomorfas. Cáliz de 3 ó 4 lóbulos. Corola por lo común ausente, rara vez con 3 pétalos vestigiales. Androceo de 6-36 estambres, libres o parcialmente fusionados formando una columna estaminal (ginostemo). El fruto es una cápsula con muchas semillas. Las semillas son pequeñas con mucho endospermo. Familia Piperaceae Son hierbas, trepadoras leñosas, arbustos ó árboles pequeños. Hojas alternas, simples, enteras, con la base del pecíolo alada; estipuladas. Inflorescencia racimosa o espigada, usualmente opuestas a hojas. Flores bisexuales o unisexuales. Perianto ausente. Andróceo de 1-10 estambres. Gineceo de 2-4 carpelos unidos, unilocular, de una semilla, placentación basal, ovario súpero, estigmas cortos, 1-5. Se pueden encontrar Cavalactonas en Piper methysticum; en Piper nigrum, piperina y sus derivados (piperovatina, isopiperina, chavicina), y aceites esenciales, alrededor de 80 terpenoides (Campheno limoneno, caryophylleno, eugenol, benzaldehído, anetol). 38
ORDEN MAGNOLIALES Familia Annoaceae Árboles y arbustos, con hojas en dos filas, sin estípulas, con un brillo glauco o metálico. Flores solitarias o inflorescencias de varios tipos. Flores bisexuales (raramente unisexuales). Perianto por lo común en tres verticilos de tres, uno o dos de los verticilos externos sepaloides. Androceo constituido de estambres numerosos, arreglados en espiral. Gineceo con carpelos de pocos a numerosos, generalmente separados, placentación marginal o basal, ovario súpero. Fruto abayado. Semillas con endospermo de construcción complicada y variables. Familia Magnoliaceae Árboles o arbustos con hojas simples, alternas, venación pinnada, pecioladas, con estípulas deciduas y que dejan un anillo estipular en cada nudo. Flores conspicuas, actinomorfas, bisexuales, estambres y carpelos numerosos, perianto espiral o cíclico en 3 o más series de 6 a 18 partes. Fruto un folículo, una sámara o rara vez una baya. Semilla a menudo suspendida dentro del folículo por un funículo filiforme. Se caracteriza por los conductos de aceite de su tejido parenquimatoso.
OBJETIVOS: 1. Reconocer y describir las características vegetativas de las familias Nymphaeaceae y Schisandraceae. 2. Identificar las características anatómicas y las sustancias ergásticas que presentan las familias Nymphaeaceae y Illiaceae. 3. Reconocer el contenido fitoquímico de las angiospermas basales. 4. Reconocer y describir las características distintivas de las familias Lauraceae, Piperaceae, Annonaceae, Magnoliaceae, Aristolochiaceae. 5. Identificar los metabolitos secundarios que presentan las familias Lauraceae, Piperaceae, Annonaceae, Magnoliaceae, Aristolochiaceae. 6. Reconocer y describir las características morfológicas de 3 especies medicinales de las familias Lauraceae. 7. Identificar las características histoquímicas de la familia Lauraceae. MATERIALES: 1. Microscopios 2. Estereóscopos 3. Vidrios de reloj 4. Porta y cubreobjetos 5. Agujas de disección 6. Hojas de afeitar 7. Duroport 8. Beakers de 50 ml. 9. Pinceles 10. Hidrto de Clroal 11. KOH al 10%
16. NaOH al 5% 17. Agua destilada 18. Estufas 19. Safranina acuosa al 1% 20. Sudan III ó IV 21. Reactivo de Dragendorff 22. Sulfato férrico 23. Nymphaea sp. ó Nuphar sp. 24. Illicium verum 25. Hojas de laurel Litsea guatemalensis 26. Hojas de aguacate Persea americana 39
12. Alcohol al 95% 13. Ácido crómico 25% 14. Hipoclorito de Sodio 50% 15. Tubos de ensayo
27. Corteza de canela Cinnamomum zeynalycum 28. Aristolochia sp. 29. Pimienta negra Piper nigrum 30. Anona 31. Michelia champaca
PROCEDIMIENTO: ORDEN NYMPHAEALES
Tome el ejemplar de Nuphar sp y/o Nymphaea sp. proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, forma del rizoma, simetría de la flor (si es actinomorfa o zigomorfa)). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado.
Realice cortes transversales de la raíz de Ninfa y haga una prueba de alcaloides con Draggendorf, y observe al microscopio. Haga esquemas de lo observado.
Realice cortes transversales de las hojas de Ninfa y haga una prueba de aceites con Sudan III, y observe al microscopio. Determine si la prueba es negativo o positivo y su fundamento. Haga esquemas de lo observado.
ORDEN AUSTROBAILEYACEAE
Tome el ejemplar de Anis estrella (Illicium verum) proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas. Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado.
Pique un fragmento de fruto de Anis esterella y realice la técnica de disociado fuerte. Con la ayuda de una pinza coloque en un portaobjetos un poco del material y termine de romper los tejidos con las agujas de disección. Agregue una gota de safranina acuosa y observe al microscopio.
ORDEN LAURALES FAMILIA LAURACEAE Descripción Macromorfológica Tome el ejemplar de canela proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, tipo de inflorescencia si la presenta, cómo es la flor si es actinomorfa o zigomorfa). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado. Técnica de diafanizado Realice la técnica de diafanizado (revise página 13) con fragmentos de hoja de Laurel Litsea guatemalensis. Haga montajes con safranina al 1%, describa y esquematice lo observado.
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Determinación de aceites esenciales y Taninos: Realice cortes transversales de la hoja de Aguacate Persea americana haga una prueba de aceites volátiles con Sudan III y observe al microscopio. Haga esquemas de lo observado. Realice cortes transversales de la hoja de Laurel Litsea guatemalensis. En cortes distintos aplique una gota de Sudan III para observar presencia de aceites volátiles, una gota de sulfato férrico para taninos, y una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reporte los resultados de estas pruebas en una tabla y esquematice. En base a las características del corte transversal y el diafanizado de Litsea guatemalensis, elabore una cartilla micrográfica con las estructuras observadas. Técnica de Disociado fuerte 1. Pique un fragmento de corteza de canela Cinnamomum zeylanycum y realice la técnica de disociado fuerte (revise pagina 14). Con la ayuda de una pinza coloque en un portaobjetos un poco del material y termine de romper los tejidos con las agujas de disección. Agregue una gota de safranina acuosa y observe al microscopio. Compare los tipos celulares observados con la cartilla micrográfica del Anexo 3. Esquematice sus observaciones. ORDEN PIPERALES FAMILIA ARISTOLOCHIACEAE Tome el ejemplar de Aristolochia sp proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, tipo de inflorescencia si la presenta, cómo es la flor si es actinomorfa o zigomorfa, tipo de fruto si lo presenta). Esquematice y señale las características distintivas. Realice cortes transversales de la hoja de Aristolochia sp haga una prueba de alcaloides con dragendorff y observe al microscopio. Discuta si la prueba es positiva o negativa y la razón de esto. FAMILIA PIPERACEAE Tome el ejemplar de Pimienta Negra proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, tipo de inflorescencia si la presenta, cómo es la flor si es actinomorfa o zigomorfa, tipo de fruto si lo presenta). Esquematice, señalando las características distintivas. Realice cortes transversales de la hoja de Pimienta negra. En cortes distintos aplique una gota de Sudan III para observar presencia de aceites volátiles y una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reporte los resultados de estas pruebas en una tabla y esquematice. Tome una porción de frutos secos de Pimienta negra y colóquelos en un Beaker con etanol al 95%. Calentar a ebullición. Separar 3 fracciones del extracto etanolico en tubos de ensayo y adicionarle a cada uno Dragendorff, sulfato ferrico y reactivo de Arnow (nitrato sódico y molibdato sódico).
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ORDEN MAGNOLIALES FAMILIA ANNONACEAE Tome el ejemplar de Anona proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, tipo de inflorescencia si la presenta, cómo es la flor si es actinomorfa o zigomorfa, tipo de fruto). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado. Realice cortes transversales de la hoja de Anona. En cortes distintos aplique una gota de Sudan III para observar presencia de aceites volátiles y una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reporte los resultados de estas pruebas en una tabla y esquematice. FAMILIA MAGNOLIACEAE Tome el ejemplar de Michelia champaca proporcionado en el laboratorio. Describa sus características morfológicas (hábito, filotaxia, forma de las hojas, tipo de inflorescencia si la presenta, cómo es la flor si es actinomorfa o zigomorfa, tipo de fruto). Ilustre sus descripciones con esquemas de lo observado y esquematice señalando las características distintivas. Realice cortes transversales de la hoja de Michelia champaca. En cortes distintos aplique una gota de Sudan III para observar presencia de aceites volátiles y una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reporte los resultados de estas pruebas en una tabla y esquematice BIBLIOGRAFIA: 2. Cabral, E., Casco, S., Medina W., Salas, R., Cabaña, A., y Ayala, N. (2009). Introducción al estudio de las Angiospermas, diversidad vegetal, biología de Spermatofitas. Recuperado de : http://exa.unne.edu.ar/biologia/diversidadv/documentos/ANGIOSPERMAS/Introducci% F3n%20a%20las%20Angiospermas.pdf. 3. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. 4. Cronquist, A. (1981). An Integrated of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. 5. Fernández, H. (1992). Etnobotánica de los recursos filogenéticos de uso medicinal en 8 municipios del área de influencia étnica Mam, del Departamento de Huehuetenango (Tesis de Ingeniero Agrónomo). Universidad de San Carlos de Guatemala. Guatemala. 6. Flores-Vindas, E. (1999). La Planta, Estructura y Función (Vol. I.). Costa Rica y Alemania: Editoriales Universitarias de América Latina y el Caribe. 7. Jackson, B., y Snowdon D. (1990). Atlas of Microscopy of Medicinal Plants. Culinary Herbs and Species. Boca Raton, FL: CRC Press. 8. Pérez, M. (2001). Estudio de la etnobotánica médica Mam, en los Municipios de Todos los Santos, Cuchumatán, San Juan Atitlán, San Rafael Petzal y Chantla, del departamento de Huehuetenango, Guatemala (Tesis Ingeniero Agrónomo). Universidad de San Carlos de Guatemala. Guatemala. 9. Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC.
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ANTECEDENTES: 1. Investigue en donde se encuentran las familias de ésta práctica en la Clasificación de Cronquist y la razón de su traslado en la clasificación de APG III. 2. Investigue con que especies se confunde Illicium verum, y que importancia tiene la distinción entre ambas.
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Anexo 1. Esquema morfológico de Nymphaea alba L. 1
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Figura 1. Nymphaea alba L. 1. Flor, 2. Hoja 3. Fruto, 4. Corte transversal del fruto, 5. Semilla, 6. Estambres
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Anexo 2. Esquema morfológico de Illicium verum
Figura 2. Illicium verum Hook. 1. Flores y rama con frutos, 2.-5. Tépalos externos, internos y verticilos más internos , 6. Androceo y gineceo, 7. Gineceo, 8. Vista abaxial y adaxial del estamen, 9. Folículo, 10. Semilla. 45
Anexo 3 COMPUESTOS ACTIVOS PRESENTES EN LA FAMILIA LAURACEAE Las lauráceas pueden almacenar carbohidratos como inulina, taninos, produciendo proantocianinas y comúnmente benzyl-isoquinolina y/o alcaloides como aporfina. Generalmente poseen células esféricas que contienen aceites etéreos (monoterpenos y/o sesquitermpenos) o células mucilaginosas en los tejidos parenquimáticos, o a menudo ambos tipos de células en el mismo tejido. En el parénquima también suelen presentarse pequeños cristales de oxalato de calcio en estructuras denominadas idioblastos. (Cronquist A, 1981; Flores-Vindas E., 1999) Compuestos activos de las especies utilizadas en el laboratorio Litsea glaucescens Kunth (laurel) Los principios activos presentes en las hojas incluyen alcaloides cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, cardenólidos, flavonoides, leuconatocianinas, taninos y polifenoles, carotenos, tiamina y rivoflavina. El aceite contiene limoneno y citral. (Pérez M., 2001) Persea americana Miller (Aguacate) La pulpa del fruto es rica en los siguientes ácidos grasos: oléico, linoléico, palmítico, estéarico, linolénico, capricho y mirístico. La semilla posee ácidos grasos (con abundante alfa-tocoferol), proantocianidina, hidrocarburos, derivados de esteroides glúcidos y una saponina. Las hojas contienen un aceite esencial de diferente composición según la variedad, rico en estragol, metilchavicol, alfa-pireno, beta-pireno, metileugenol, cineol y limoneno; flavonoides, taninos y terpenoides. La corteza contiene taninos. (Alonso J., 2004; Fernández H., 1992) Cinnamomum zeylanicum Blume (canela) La corteza contienen los aceites esenciales que dan su perfume a la especia, presenta también taninos (Jaques, 1989). El aceite presente ene este género esta compuesto principalmente por aldehídos aromáticos entre los que destacan: aldehído cinámico, eugenol, hidroxi-cinamaldehido, benzaldehido y cuminaldehido. Otros componentes minoritarios son el beta cariofileno, alfailageno, pireno, para-cimeno, alcohol cinámico, humuleno, alcohol bencílico, alcohol 2feniletílico, benzoato de bencilo, benzoato de 2-feniletilo, cinamato de metilo. Otros componentes activos son mucílago, resinas, procianidinas ologomércas, taninos condensados, oxalato de calcio, cinceilanina y goma de manitol. (Alonso J., 2004)
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Anexo 4. Morfología de Magnolides
Figura 1. 1. Orden Laurales, família Lauraceae; 2. Orden Piperales, família Aristolochiaceae y Piperaceae; 3. Orden Magnoliaceae, família Annonaceae y Magnoliaceae 47
Anexo 5. Cartilla micrográfica de Litsea sp.
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Diafanizado Laurel: 1) Venación reticulada en hoja, 2) a. vista de hoja con tricomas, b. tipos de tricomas observados, 3) Estomas paracíticos 4) salida de aire y estomas.
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Anexo 6. Cartilla micrográfica de Corteza de Canela
1. Fibras. 1a Parte de un pequeño grupo de fibras 2. Esclereidas. 3. Gránulos de almidón. 4. Corcho en vista superficial 5. Parénquima del floema y una célula de aceite (o.c.). 6. Parte de un rayo medular con algunas células conteniendo cristales aciculares de oxalato de calcio (cr.), y parénquima del
floema asociado en sección tangencial longitudinal. 7. Cristales de oxalato de calcio. 8. Parte de una fibra con una célula de aceite asociada y parénquima del floema. 9. Parte de un grupo de fibras y esclereidas del periciclo. 10. Una célula de aceite. 11. Parte del corcho y corteza en vista seccional.
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PRACTICA 6. MONOCOTILEDONEAS MONOCOTILEDONEAS: Plantas en su mayoría herbáceas, nunca con típico crecimiento secundario. El patrón que presentan los haces vasculares en el corte transversal del tallo es atactostela (haces vasculares están dispersos por toda la superficie y no forman ningún patrón aparente); polen monosulcado; raíces adventicias; las hojas típicamente con venación paralela o pinnada paralela. Flores frecuentemente con nectarios septados, otro tipo de nectarios de 3 (rara vez 4 ó 2) nunca 5 (excepto los estambres de algunas Zingiberales). Un cotiledón. ORDEN POALES Familia Poaceae ó Graminae Hierbas anuales o perennes, rara vez arbustos o árboles; tallos (culmos o cañas) con diferenciados entrenudos, muy prominente (maíz), erectos, ascendentes, postrados o rastreros, cilíndricos, huecos en medio con los extremos cerrados, sólidos en los nudos, unas cuantas son sólidas por completo. Las hojas en dos filas, alternas, con venación paralela, con peciolo envainador, con lígulas generalmente membranosas o reducidas a pelos. Flores usualmente perfectas, pequeñas e inconspicuas. Inflorescencias compuestas por unidades llamadas espiguillas o espículas, arregladas en formas variadas; en espigas, racimos o panículas, cada espiguilla tiene una o más flósculos, los flósculos arreglados sobre un eje (raquilla) y cada espiguilla con 2 glumas subyacentes. Cada flósculo tiene 2 brácteas: la externa (lema) y la interna (pálea). Las flores presentan estambres y pistilo y dos escamas hialinas llamadas lodículos, que representan el perianto, localizadas justo por encima de la pálea o a veces ausentes. Androceo de 1, 3 o 6 estambres. Gineceo constituido por un pistilo compuesto de 2 ó 3 carpelos unidos, con 1 lóculo, ovario súpero, 1, 2 o 3 estilos, estigmas por lo común plumosos. Fruto una cariópside, con el pericarpio rodeando a la semilla, rara vez nuez, baya o un utrículo. Semilla con endospermo farinoso. Especies que la representan: maíz, caña de azúcar, trigo, arroz y resto de granos. Esta familia se caracteriza por presencia de alcaloides, aceites fijos, hemicelulosas, y pectinas. ORDEN LILIALES Familia Liliaceae Principalmente hierbas perennes, que surgen de rizomas, cormos o bulbos; tallos erectos o trepadores. Hojas alternas simples, lineales, con venación paralela, a veces pocas hojas y basales que aparecen antes o después de las flores. Las flores son solitarias o generalmente en inflorescencias. Inflorescencias: Racemosas, axilares, umbeladas o solitarias. Flores: bisexuales, comúnmente actinomorfas. Cáliz de 3 sépalos, casi siempre petaloides. Corola de 3 pétalos. Androceo de 3, 6 o 12 estambres, filamentos libres o unidos de varias formas, anteras que se abren por medio de una hendidura longitudinal. Gineceo constituido por un pistilo compuesto de 3 carpelos unidos, con tres lóculos, óvulos numerosos, placentación axilar o rara vez unilocular con placenta parietal, ovario súpero o ínfero. Fruto una cápsula o una baya carnosa. Algunas especies de esta familia tienen alcaloides. 50
Familia Amaryllidaceae Son plantas herbáceas, con bulbos, hojas simples, paralelinervadas, de borde entero, lineares, oblongas, elípticas, lanceoladas, flores hermafroditas, actinomórficas, dispuestas en inflorescencias similares a umbelas, rodeadas de dos brácteas en la extremidad de un escapo (tallo desprovisto de hojas que presenta las flores en el ápice), perigonio compuesto por 6 tépalos dispuestos en dos verticilos de 3 piezas cada uno. El fruto es una cápsula indehiscente, una cápsula loculicida, ó una baya. Esta familia presenta saponinas esteroideas, compuestos azufrados derivados de la cisteína, tiosulfinatos y flavonoides. Familia Smilacaceae La mayor parte son enredaderas leñosas (o herbáceas) trepadoras por medio zarcillos estipulares o hierbas erectas, a veces tallos espinosos; hojas alternas, con venación reticulada; las inflorescencias son racimos, espigas o umbelas axilares; con flores unisexuales (en Smilax nacen en plantas separadas), actinomorfas; el fruto es una baya que contiene de 1-3 semillas; semillas con un embrión pequeño y un endospermo duro. Esta familia presenta saponinas esteroideas. ORDEN ZINGIBERALES Familia Zingiberaceae La familia del jengibre, se compone de 49 géneros y 1,500 especies. Plantas herbáceas, aromáticas y perennes, con rizomas carnosos y raíces tuberosas; hojas dísticas largamente envainadas formando un pseudo tallo o pecioladas, una o en un tallo principal o en un tallo que surge directamente del rizoma. Las flores forman racimos, cabezuelos o cimas. Perianto hexámero, el externo caliciforme, el interno coroliforme. Dos de los seis estambres están modificados en forma de labelo petaloideo, el resto son estaminodios y sólo un estambre es fértil. El fruto es una cápsula. Semilla con perispermo. Esta familia se caracteriza por su presencia de aceites esenciales. Familia Musaceae Son plantas herbáceas perennes, generalmente de gran tamaño, a veces parcialmente leñosas. Los tallos son subterráneos, simpodiales, rizomatosos a cormosos. Presentan hojas basales, espiraladas, grandes, simples, de margen entero, de base envainadora (con las grandes vainas solapándose, formando un pseudotallo). Las plantas son monoicas. Las inflorescencias nacen del meristema apical del cormo y crecen dentro de las vainas enrolladas de las hojas. Son bracteadas. Las flores son unisexuales, zigomórficas, epíginas. El perianto consta de 2 verticilos, 3 piezas en cada verticilo, los tépalos fusionados (aunque el tépalo interno adaxial usualmente está libre). El androceo está constituido generalmente por 6 o 5 estambres, si 5 puede haber 1 estaminodio. Los estambres están separados entre sí y libres de las otras piezas de la flor, el estambre faltante o el estaminodio opuesto al tépalo interno medio adaxial. El gineceo es sincarpo (los carpelos fusionados). El ovario es ínfero y trilocular, con 3 carpelos (el carpelo medio es anterior). El fruto es una baya. Las semillas tienen endospermo y arilos rudimentarios. ORDEN DIOSCOREALES Familia Dioscoreaceae Hierbas, muchas veces enredaderas trepadoras, perennes, con rizomas gruesos, a veces con crecimiento secundario, tallo con haces vasculares que en el corte transversal se encuentran formando 1 o 2 anillos. Pelos simples a estrellados, espinas a veces presentes. Hojas usualmente 51
alternas y espirales, opuestas o verticiladas, simples, pero a veces palmadamente lobadas o compuestas, enteras, diferenciadas en peciolo y lámina, con venación palmada. Inflorescencias axilares, puede ser una panícula, racimo, umbela, o espiga reducidas a flores solitarias. Flores usualmente unisexuales, o bisexuales, radiales, pediceladas, epíginas. Tépalos 6, en dos verticilos de 3 piezas, todos iguales entre sí, separados a ligeramente conados. Polen monosulcado a variadamente porado. El fruto es usualmente una cápsula, pero a veces una baya o sámara. Las semillas usualmente aplanadas o aladas, el tegumento con pigmentos amarillo-marrones a rojos. Sapogeninas esteroideas y alcaloideas comúnmente presentes en tallo. Esta familia se caracteriza por la presencia de sapogeninas esteroideas y alcaloideas. ORDEN ASPARAGALES Familia Asparagaceae Arbustos, hierbas rizomatosas ó enredaderas trepadoras, con tallo leñoso que se marchita anualmente, usualmente verdes asociados con hojas escamosas formando filoclados foliosos o tallos reducidos. Hojas alternas y espirales, simples, de margen entero, usualmente reducidas, más o menos escamosas, con espuela basal espinosa. El fruto usualmente es una baya de pocas semillas. Las semillas son angulares a más o menos globosas. La cubierta seminal con fitomelaninas (una costra negra) y las capas internas colapsadas. Los tallos presentan saponinas esteroideas y aceites esenciales. Esta familia se caracteriza por la presencia de mucilagos. Familia Xanthorrhoeceae A esta familia pertenecen 3 subfamilias: Asphodeloideae, Xanthorrhoeoideae y Hemerocallidoideae. En este laboratorio sólo se observará la subfamilia Asphodeloideae, debido a su importancia farmacológicas. Subfamilia Asphodeloideae Hierbas rizomatosas ó árboles paquicaules (trepadoras; crecimiento secundario disperso) frecuentemente con hojas suculentas formando rosetas; haces vasculares foliares frecuentemente invertidos, células parenquimatosas en la vaina del haz interno adyacentes al floema (células de aloina), (esclerenquimatosas); hojas dispuestas en espiral o en dos filas, márgenes frecuentemente dentados, vaina cerrada ó la base de la hoja no envainante; inflorescencia espigada; (pedicelos no articulados), comúnmente con monosimetría débil; tépalos mas o menos libres y connados en el género Kniphofia; estigma seco, except en algunos géneros; óvulos 1 a muchos por carpelo, más ó menos erectos en el clado de Asphodelus, hemítropos, integumento externo con 3-4 células de grosor, tejido parietal con 1 (2) células de grosor; semillas más o menos anguladas, arilo orignado en el funículo, delgado; endospermo con pared gruesa, de hemicelulosa. Posee tetrahidroantracinonas (e.g. crisofanol) y antraquinonas. El género más conspicuo de esta subfamilia es Aloe. ORDEN ARECALES Familia Arecaceae Arbustos leñosos o árboles; hojas grandes, en forma de abanico o pinnaticompuestas, con bases envainadoras; inflorescencias paniculadas, espatas a menudo presentes, flores pequeñas. Hojas láminas palmadas, pinnadas, ó simples, a menudo muy grandes, pecíolo envainador en la base, hojas usualmente en un penacho terminal. Inflorescencias grandes, paniculadas, entre o por debajo de las hojas, con una o más espatas subyacentes, plantas monoicas o dioicas o flores 52
bisexuales. Flores unisexuales o bisexuales, actinomorfas, cáliz de 3 sépalos, pequeños, separados o unidos. Corola de 3 pétalos, pequeños, separados o unidos. Androceo comúnmente de 6 estambres, en 2 series. Gineceo por lo general constituido por un pistilo compuesto de 3 carpelos unidos, con 1 a 3 lóculos, óvulo solitario, ovario supero. Fruto en baya o drupas, exocarpo carnoso o coriáceo. Semilla con endospermo relativamente grande, a veces lechoso. Esta familia se caracteriza por la presencia de aceites fijos, taninos y polifenoles. OBJETIVOS: 1. Observar las características más relevantes que comparten las monocotiledoneas. 2. Conocer la morfología vegetal de algunas de las especies del grupo de las monocotiledoneas. 3. Reconocer los metabolitos secundarios de las familias Poaceae, Liliaceae, Smilacaceae, Zingiberaceae, Muscaceae, Dioscoreaceae, Asparagaceae y Arecaceae. MATERIALES
Estereoscopios Microscopios Pinzas Agujas de disección Vidrios de reloj Porta y cubre objetos Safranina al 1% Gelatina glicerina Cajas de petri Varillas de vidrio Sudan IV Zea mays Zingiber officinale
Flores de Lirio Curcuma longa Ajo Allium sativum Zarzaparrilla Smilax aspera Banano Dioscorea Sábila Palma Agua destilada Alcohol al 95% Hidróxido de potasio al 5% Papel filtro Esmalte de uñas
PROCEDIMIENTO: ORDEN POALES FAMILIA POACEAE O GRAMINAE 1) Tome un ejemplar de Zea mays, observe sus características morfológicas (ver Anexo No. 1) y describa lo siguiente: a) Hábito y apariencia del tallo. b) Hojas: filotaxia, anteras, divididas, forma, olor, partes que la forman. c) Flores: tipo de inflorescencia, descripción y ubicación de las glumas o brácteas. Sexo, descripción del perianto, descripción de los estilos. d) Fruto: tipo.
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e) Esquematice, señalando las características distintivas. Materia médica: estilos y estigmas de la flor. Indicación terapéutica: diurético. ORDEN LILIALES FAMILIA LILIACEAE 1) Tome una flor de lirio y observe sus características morfológicas. Describa el perigonio FAMILIA SMILACACEAE 1) Tome un ejemplar de Zarzaparrilla, observe sus características morfológicas (ver Anexo No. 5), y describa lo siguiente: a) Hábito y apariencia del tallo. b) Hojas: filotaxia, forma, olor, partes que la forman. c) Flores: tipo de inflorescencia d) Sexo, descripción del perianto, descripción de los estilos. e) Fruto: tipo. Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Tome una muestra de Rizoma de Zarzaparrilla y tritúrelo. Colocar la muestra dentro de un tubo de ensayo con agua y calentar en baño maría durante 30 minutos. Enfriar, tapar y agitar vigorosamente el tubo de ensayo durante 20-30 segundos. Este procedimiento se utiliza para la observación de saponinas, dará positiva la prueba si hay producción de espuma. FAMILIA AMARYLLIDACEAE Tome un ejemplar de Ajo, describa sus características morfológicas.
ORDEN ZINGIBERALES FAMILIA ZINGIBERACEAE: 1) Realice un corte transversal del rizoma del jengibre (Zingiber officinale Roscoe), observe, describa y esquematice: a) Epidermis suberificada b) Parénquima cortical c) Meristele: estructura con células meristemáticas que en cualquier momento se pueden activar para formar otra plántula. d) Grupo de células meristemáticas e) Agregue a uno de los cortes reactivo de Sudán y observe la presencia de aceites esenciales, coloreados de rosado a rojo, indicando la prueba positiva. f) Realice un disociado del rizoma y monte en un porta objetos, esquematice y compare con el Anexo 2 2) Tome una muestra de polvo de Curcuma longa, móntela en un portaobjetos con agua y observe sus características, comparándolas con la lámina de referencia. Anexo 3. 54
FAMILIA MUSACEAE 5) Tome un ejemplar de Banano, describa sus características morfológicas. Anexo 8.
ORDEN DIOSCOREALES FAMILIA DIOSCOREACEAE 7) Tome un ejemplar de Dioscorea, describa sus características morfológicas. Anexo 7. 8) Tome una muestra de Dioscorea y tritúrela. Colocar la muestra dentro de un tubo de ensayo con agua y calentar en baño maría durante 30 minutos. Enfriar, tapar y agitar vigorosamente el tubo de ensayo durante 20-30 segundos.
ORDEN ASPARAGALES FAMILIA XANTHORRHOEACEAE. 6) Tome un ejemplar de Sábila, describa sus características morfológicas.
ORDEN ARECALES FAMILIA ARECACEAE 1) Tome un ejemplar de Palma, describa sus características morfológicas. ANTECEDENTES: Investigar previo a realizar la práctica, los siguientes términos: Entomófilo Lodícula Farinoso Lema Flósculo Pálea Gluma Perianto Hialina Perigonio BIBLIOGRAFIA: 1. Cronquist, A. (1991).Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. 2. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal (Trad. 2a.). México: McGraw Hill. 1. Standley, P.C., y Steyermark, J.A. (1958). Flora of Guatemala: Fieldiana Botany (Vol. 24.) Illinois: Chicago Natural History Museum. 2. Trease G.E., y Evans, W. (1984). Farmacognosia. México: CECSA.
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Anexo No 1 Diagrama de la familia Poaceae.
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Anexo 2 CARTILLA MICROGRAFICA DE Zingiber officinale Roscoe
(1) Células del parénquima con paredes arrugadas (3) Parénquima con gránulos de oleoresína y almidón (5) Fibra (7) Fibras con paredes dentadas y septa (sm) (9) Parénquima y células de oleorresina (11) Parénquima con gránulos de almidón y células de oleorresina
(2) Gránulos de almidón (4) Vaso reticulado engrosado asociado a células de pigmento (pg) (6) Grupo de fibras (8) vaso reticulado con células de pigmento (10) Parénquima asociado a tejido colapsado
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Anexo 3 CARTILLA MICROGRAFICA DE Curcuma longa L.
(1) Corcho superficial (3) Gránulos de almidón (5) Fragmentos de vasos engrosados (7) Células de parénquima (9) Epidermis en vista superficial (11) Fragmento de vasos
(2) Parénquima lleno de almidón gelatinizado (4) Epidermis con estoma (sa) y cicatriz (cic) (6) Corcho en vista oblicua (8) Tricomas de cobertura unidos a epidermis (ep) (10) Tejido externo con epidermis (ep)
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Anexo 4. Esquema morfológico de Liliaceae 3 2
1
4
5
Figura 2. Muscari botryoides l. 1. Hoja acanalada, 2. Flores formando racimos, 3. Corola formada pro 6 piezas, 4. Bulbo, 5. Fruto, cápsula alada.
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Anexo 5. Esquema morfológico de Smilacaceae
5 6 4
2
7
1
10
3
9
8
Figura 3. Smilax hispida Muhl. 1.-2. Hábito, 3. Base de la hoja, con tendrilos estipulares, 4. Fruto, 5. Estambre, 6.Flor estaminada, 7. Flor pistilada, 8. Pistilo, 9. Estambre de una flor pistilada, 10. Sección transversal del ovario. 60
Anexo 6. Esquema morfológico de Zingiberaceae
1 3
2
4
Figura 4. Zingiber officinale. 1. Forma de crecimiento de la planta, 2. Unión de las hojas al tallo, 3. Detalle de la hoja, 4. Rizoma delgado.
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Anexo 7. Esquema morfológico de Dioscoreaceae
1
2
3
4
Figura 5. Dioscorea dometorum (Kunth) Pax. 1. Hojas trifoliadas, 2. Detaller de los tallos trepadores, 3. Disposición de las inflorescencias, 4. Flores.
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Anexo 8. Esquema morfológico de Musaceae
1
2
5
3
6
4
Figura 6. Musa paradisiaca L. 1. Hábito, 2. Vista lateral de la flor, 3. Vista frontal de la flor, 4. Estmbre, 5. Pétalo adaxial, 6. Estilo y estigma. 63
Anexo 9. Esquema morfológico de Arecaceae
3
2
4
7
6 1 10
8 9
5
Figura 7. Veitchia merrillii (Becc.) H.E. Moore. 1. Hábito, 2. XXX, 3. Base del fruto, mostrando un arreglo persistente de tépalos y bractéolas en espiral, 4. Flor, 5. Pistilos de una flor estaminada, 6. Sección longitudinal del pistilo, 7. Sección transversal del pistilo, 8. Estambre, 9. Sección longitudinal del fruto, 10. Fruto con tépalos y bracteolasl persistentes. 64
PRÁCTICA 7. EUDICOTILEDONEAS BASALES INTRODUCCIÓN Eudicotyledoneae y su castellanización eudicotiledóneas, son términos utilizados para hacer referencia a un grupo monofilético de angiospermas que previamente habían sido llamadas "tricolpadas" o "dicotiledóneas no-Magnoliidae". Este clado fue reconocido en el análisis filogenético basado en morfología, mientras que la monofilia del grupo fue pronto sustentada por otros análisis moleculares. Actualmente, sus subclados principales son bien reconocidos y se les ha asignado categorías de órdenes y familias. Se dividen en eudicotiledoneas basales y nucleares. Las eudicotiledoneas basales están conformadas por los ordenes Ranunculales, Sabiales, Proteales, Trochodendrales y Buxales. Las eudicotiledoneas nucleares están conformadas por Berberidopsidales, Dilleniales, Caryophyllales, Santalales, Saxifragales, Vitales, Rósides y Astérides. EUDICOTILEDONEAS BASALES ORDEN RANUNCULALES Familia Berberidaceae Hierbas o arbustos, estambres biseriados, anteras con dehiscencia por medio de valvas. Hojas alternas o basales, simples o compuestas, deciduas o perennes, con frecuencia espinosas; estípulas ausentes. Inflorescencias solitarias, cimas o racimos. Flores bisexuales, actinomorfas. Cáliz de 3 a 6 sépalos, libres y separados. Corola de 3 a 6 pétalos, libres y separados. Fruto baya o folículo. Semilla con endospermo copioso. Esta familia se caracteriza por la presencia de alcaloides derivados de la bisbenciltetrahidoisoquinolina, aporfina y protoberberinas, y flavonoles. Familia Menispermaceae Bejucos leñosos o enredaderas, raramente arbustos erectos, más raramente hierbas o epífitas, perennifolios o caducifolios, con pelos simples a uniseriados. Hojas alternas, espirales, simples, enteras, dentadas, lobuladas a palmatífidas, frecuentemente peltadas, pecioladas, sin estípulas, a veces con espinas derivadas de los peciolos, Plantas dioicas. Inflorescencias en racimo, panícula, o tirso con inflorescencias parciales en cima, a veces en cimas capituliformes o pseudoumbelas, multifloras, raramente flores solitarias o pareadas. Flores pequeñas, regulares a zigomórficas, cíclicas a irregularmente espirales, hipóginas, básicamente trímeras. Fruto compuesto, cada unidad en drupa recta o aplastada y asimétrica. Polen tricolpado. Esta familia se caracteriza por la presencia de alcaloides derivados de la bisbenciltetrahidoisoquinolina, aporfínicos, protoberberinas y hemiterpenicos, flavonoles y lignanos.
Familia Papaveraceae Hierbas de anuales a perennes, raramente leñosas, comúnmente con savia lechosa o coloreada. Hojas alternas, basales o caulinares. A menudo muy divididas. Inflorescencias flores solitarias y vistosas. Flores bisexuales; cáliz de 2 a 3 sépalos separados, tempranamente deciduos; corola de 4 a 6 o más pétalos, en dos series, corrugados en el botón. Fruto una cápsula 65
que abre por valvas o poros. Semillas numerosas y pequeñas. Esta familia se caracteriza por la presencia de alcaloides bencilisoquinolinicos, aporfínicos, morfinanos, protoberberinas, glucósidos cianogéneticos y flavonoides (kaempferol y quercetina). ORDEN PROTEALES Familia Nelumbonaceae Hierbas acuáticas perennes, con rizomas horizontales, laticíferos articulados presentes, cutícula con cera en túbulos agrupados. Nudos con raíces adventicias, una hoja y un catafilo carnoso envolviendo su base en un lado, otro catafilo opuesto. Indumento ausente. Hojas simples, peltadas, emergidas o flotantes, pecíolos cilíndricos, Estomas anomocíticos, haploqueílicos, epistomáticos. Tallos rizomatosos, xilema sin vasos, cavidades secretoras presentes, con látex. Rizomas, raíces y pecíolos con aerénquima desarrollado, dejando grandes espacios intercelulares, las células que recubren los canales aéreos con acúmulos de cristales de oxalato cálcico. Haces de vasos colaterales, esparcidos, sin cámbium. Limbo foliar con cavidades secretoras conteniendo látex. Raíces con vasos xilemáticos. Flores perfectas, actinomorfas, solitarias, aparentemente axilares, sin bractéolas, hipóginas, con perianto de disposición espiralada. Semillas soldada al pericarpo, con endospermo escaso o prácticamente inexistente, sin perispermo, embrión con 2 cotiledones gruesos, carnosos, la plúmula verde envuelta en una vaina. Polen globoso a esferoidal, tricolpado. Esta familia se caracteriza por presencia de alcaloides derivados de la benciltetrahidoisoquinolina, aporfina, bisbenciltetrahidoisoquinolina; proantocianidinas y ceras. EUDICOTILEDONEAS NUCLEARES ORDEN CARYOPHYLLALES En este Orden encontramos hierbas, y con menos frecuencia arbustos o árboles pequeños. Se observa en las especies leñosas un crecimiento secundario anómalo. Son plantas más o menos suculentas que producen saponinas triterpenoides, carecen de ácido elágico y raramente se encuentran proantocianinas. La mayoría de los miembros de esta familia producen betalaínas. En las angiospermas, las betalaínas son conocidas sólo en este orden aunque se producen también en los basidiomicetes. Este orden se conocía como Centrospermae, en referencia a la placentación libre central o basal de varios miembros. Familia Amaranthaceae (Incluye Chenopodiaceae) Las clasificaciones modernas basadas en la historia evolutiva incluyen a Chenopodiaceae dentro de Amaranthaceae como subfamilia. Las principales diferencias entre Amaranthaceae y Chenopodiaceae son pétalos membranosos y estambres a menudo unidos en forma de anillo. Las hojas de ésta familia son simples, opuestas o alternas, con márgenes enteros o toscamente dentados y sin estípulas. Las flores son solitarias o agrupadas en racimos, espiguillas o panículas, generalmente bisexuales y actinomorfas. Las bracteadas flores son regulares, con 4 ó 5 pétalos, a menudo unidos, y de 1 a 5 estambres. El ovario hipogino tiene de 3 a 5 sépalos. El fruto puede ser un utrículo, nuez o una cápsula circuncisa, raramente una baya.
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Familia Nyctaginaceae Son hierbas, arbustos o árboles, erectos o escandentes, comúnmente con crecimiento secundario anómalo, a veces con espinas; plantas hermafroditas, monoicas o dioicas. Hojas opuestas, subopuestas, verticiladas, fasciculadas o alternas, simples, comúnmente enteras, pinnatinervias; estípulas ausentes. Inflorescencias comúnmente cimosas, dicasios compuestos paniculados, tirsiformes o capituliformes, terminales o axilares, con 1–3 brácteas o bractéolas subyacentes a cada flor, éstas a veces conspicuas y coloridas, libres o fusionadas; flores hipóginas; perianto con 1 verticilo, pero con frecuencia semejando ser 2 debido a las brácteas sepaloides y cáliz petaloide. Fruto un aquenio o una nuez, comúnmente envuelto e inseparable del cáliz persistente (en conjunto se conocen como un antocarpo), carnoso, coriáceo o leñoso. Familia Phytolaccaceae Son árboles, arbustos o hierbas, anuales o perennes, a veces volubles o escandentes, glabras o casi glabras; plantas hermafroditas o dioicas. Hojas alternas, simples, enteras, mayormente mucronadas; pecioladas, estípulas pequeñas o ausentes. Inflorescencias espigas, racimos o panículas terminales, extraaxilares o axilares, brácteas presentes o ausentes, flores actinomorfas; sépalos 4–5, libres o unidos en la base, Frutos bayas, cápsulas, drupas, utrículos, aquenios o sámaras. Familia Cactaceae Herbáceas o leñosas, algunas veces ramificadas o semejantes a árboles, suculentas, habito carnoso, con espinas arregladas en aréolas; flores solitarias y vistosas con un perianto de numerosas partes; estambres numerosos, ovario ínfero. Hojas generalmente escuamiformes, o planas y carnosas, muy reducidas. Flores solitarias y por lo común vistosas. Flores bisexuales, actinomorfas o casi zigomorfas. Perianto con numerosas partes, mostrando una transición gradual de sépalos a pétalos. Cáliz a menudo petaloide. Fruto baya, a menudo espinosa o cerdosa. OBJETIVOS: 11. Reconocer y describir las características morfológicas de tres especies medicinales de las familias Phytolaccaceae, Nyctaginaceae y Amaranthaceae (Subfamilia Chenopodiaceae). 12. Identificar las características anatómicas e histoquímicas de una especie medicinal de la familia Amaranthaceae (Subfamilia Chenopodiaceae). MATERIALES:
Microscopios Estereoscopios Vidrios de reloj Porta y cubreobjetos Agujas de disección Hojas de afeitar Agua destilada Sudan III ó IV
Teloxys ambrosioides (Apazote) Cissampelos pareira (Alcotán) Argemone mexicana (Chicalote) Nelumbo nucifera (Flor de Loto) Bougainvillea glabra (Buganvillea) Opuntia guatemalensis (Nopal) Beta vulgaris (Remolacha) Petiveria alliacea (Apacin) 67
PROCEDIMIENTO: EUDICOTILEDONEAS BASALES ORDEN RANUNCULALES FAMILIA MENISPERMACEAE 5) Tome un ejemplar de Alcotán (Cissampelos pareira L.) observe y anote lo siguiente: a) Hábito b) Hojas: filotaxia, tipo (simple o compuesta), forma, ápice, borde, base, presencia o ausencia de estipulas, modificaciones, si hay tricomas de qué tipo. c) Inflorescencia: tipo d) Flor: tamaño, color, descripción de verticilos. e) Fruto: tipo y características principales. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS. 6) Realice cortes transversales de raiz de Alcotán. Agregue una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Observe al microscopio y esquematice. FAMILIA PAPAVERACEAE 1) Tome un ejemplar de Chicalote observe y anote lo siguiente: a) Hábito b) Hojas: filotaxia, tipo (simple o compuesta), forma, ápice, borde, base, presencia o ausencia de estipulas, modificaciones, si hay tricomas de qué tipo. c) Inflorescencia: tipo d) Flor: tamaño, color, descripción de verticilos. e) Fruto: tipo y características principales. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS. 2) Realice cortes transversales de pétalos de Chicalote. En cortes distintos aplique una gota de Sudan III para observar presencia de aceites volátiles y una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reporte los resultados de estas pruebas en una tabla y esquematice. ORDEN PROTEALES FAMILIA NELUMBONACEAE 1) Tome un ejemplar de Flor de Loto observe y anote lo siguiente: a) Hábito b) Hojas: filotaxia, tipo (simple o compuesta), forma, ápice, borde, base, presencia o ausencia de estipulas, modificaciones, si hay tricomas de qué tipo. c) Inflorescencia: tipo d) Flor: tamaño, color, descripción de verticilos. e) Fruto: tipo y características principales. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS. 2) Realice cortes transversales de flor de Nelumbo. Agregue una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Reportar resultados. 68
EUDICOTILEDONEAS NUCLEARES ORDEN CARYOPHYLLALES Para las características morfológicas consulte los datos obtenidos en su investigación prelaboratorio, así como los anexos FAMILIA PHYTOLACACEAE: 1) Tome un ejemplar de Petiveria alliacea L. (Apacín) (Anexo 7), observe y anote lo siguiente: a) Hábito b) Hojas: filotaxia, tipo (simple o compuesta), forma, ápice, borde, base, presencia o ausencia de estipulas, modificaciones, si hay tricomas de qué tipo. c) Inflorescencia: tipo d) Flor: tamaño, color, descripción de verticilos. e) Fruto: tipo y características principales. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS. FAMILIA NYCTAGINACEAE 1) Tome un ejemplar de Bougainvillea glabra Choisy in DC o Bougainvillea spectabilis Willd (Buganvilea) (Anexo 6) observe y anote lo siguiente: a) Hábito b) Tallo: características principales. c) Hojas: filotaxia, tipo (simple o compuesta), forma, ápice, borde, base, presencia o ausencia de estipulas, si hay tricomas de qué tipo. Presencia de aguijones. d) Inflorescencia: tipo e) Observe la presencia de las brácteas protectoras de la inflorescencia f) Flor: tamaño, color. Abra una flor y observe la ausencia de la corola. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS FAMILIA AMARANTHACEAE: 1. Observe un ejemplar de Teloxys ambrosioides L. (Apazote) (Anexo 5si) y anote las características de las siguientes partes: 1.1. Hábito 1.2. Tallo: longitud, presencia o ausencia de tricomas. 1.3. Hojas: filotaxia, forma, ápice, borde, base. Presencia de estipulas y presencia de tricomas. 1.4. Inflorescencia: tipo 1.5. Flores: tamaño, color, descripción de los verticilos. DIBUJE LAS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS. 2. Realice cortes transversales de la hoja usando duroport. Tome uno, móntelo con agua destilada y observe al microscopio. Dibuje el corte señalando lo siguiente: 2.1. Epidermis adaxial y abaxial, indicando el número de estratos. Observe la presencia de tricomas, si los hay determine el tipo. 2.2. Características del parénquima en empalizada y esponjoso. 2.3. Presencia de betalaínas. Determine en qué tejido(s) se localizan estos pigmentos. 69
2.4 En otros cortes determine la presencia de aceites esenciales. de ser positiva la prueba anote los tejidos en donde observó esta sustancia ergástica. Subfamilia Chenopodiaceae 8) Tome un ejemplar de Beta vulgaris (Remolacha), describa sus características morfológicas. 9) Realice cortes transversales de la hoja usando duroport. Tome uno, móntelo con agua destilada y observe al microscopio, determina presencia de betalaínas y los tejidos en donde ser observan. Tome una porción del bulbo y macere, luego agregue KOH, de ser positivo para betalaínas, la coloración debe ser amarilla. FAMILIA CACTACEAE 1) Tome un ejemplar de Nopal, describa sus características morfológicas. BIBLIOGRAFIA: 1. Cáceres, Armando. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. 2. Cronquist, A. (1981). An Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. 3. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de Procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. 4. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal (Trad. 2a.). México: McGraw Hill. 5. Raven, P., Evert, R., y Eichhorn, S. (1999). Biology of Plants (6ta ed.). New York: Worth Publishers. 6. Standley, P.C., y Steyermark, J.A. (1958). Flora of Guatemala: Fieldiana Botany (Vol. 24.) Illinois: Chicago Natural History Museum. ANTECEDENTES Investigue las descripciones botánicas de Petiveria alliacea (Apaciin), Beta vulgaris (Remolacha), Teloxys ambrosioides (Apazote), Cissampelos pareira (Alcotán); Argemone mexicana (Chicalote); Nelumbo nucifera (Flor de Loto); Bougainvillea glabra (Buganvillea); Opuntia guatemalensis (Nopal)
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Anexo 1. Esquema morfológico de Berberidaceae
Figura 1. Berberis thunbergii DC. a.-b. Hábito, c. Se,oñña, d. Base de lahojao articulada, e. Flor, f. Estambre con valvas, g. Petal nectarífero, h. Flor, i. Estambres y pistilo, k. Pistilo, m. Pistilo partido en sección longitudinal.
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Anexo 2. Esquema morfológico de Menispermaceae
Figura 2. Cissampelos pareira var. hirsuta. A. Hábito de planta masculina , B y C. Flor estaminada (masculina), D. Estambres, E. Hábito de planta femenina, F. Flor pistilada (femenina), G. Bráctea, H. Fruto
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Anexo 3. Esquema morfológico de Papaveraceae
Figura 3. Chelidonium majus L. a. Hábito, b. Fruto, después de la dehiscencia, c. Botón floral, d.-e. Apertura del botón floral, f. Flor, g. Pistilo, h. Fruto, después de la dehiscencia, i. Flor con el perianto removido, k. Papaver orientale L. k. Fruto, m. Sección transversal del ovario. 73
Anexo 4. Esquema morfológico de Nelumbonaceae
Figura 4. Nelumbo nucifer Gaerth. A. Hábito, b. Flor, c. Estambres, d. Receptáculo del fruto, e. Fruto
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Anexo 5. Esquema morfológico de Amaranthaceae
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Anexo 6. Esquema morfológico de Nyctaginaceae
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Anexo 7. Esquema morfológico de Phytolacaceae
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Anexo 8. Esquema morfológico de Cactaceae
4
1
3
5
6
7 2
8 9
Figura 8. Opuntia ficus-indica. 1. Hábito, 2. Cladodio, 3. Areola del cladodio, 4. Flor, 5. Areola de la flor, 6. Corte longitudinal de la flor, 7. Fruto, 8.-9. Semilla
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PRÁCTICA 8. EUDICOTILEDONEAS ROSIDES: FABIDES (EUROSIDES I). INTRODUCCIÓN Las Eudicotiledoneas Rósides son un grupo de plantas que contiene aproximadamente 70.000 especies, esto representa más de la cuarta parte del total de especies de angios-permas conocidas. Conjuntamente con las Astérides, constituyen los dos grupos más grandes de eudicotiledóneas. El término rósidas se refiere a un clado (grupo monofilético) de plantas dentro del árbol filogenético surgido del aporte genético y análisis moleculares. Algunas de las características de este grupo son presencia de nectarios receptaculares, embrión largo, los sépalos tienen tres trazos a partir de tres hendiduras; células mucilaginosas distintivas en flores con una pared periclinal interna mucilaginosa muy engrosada; y citoplasma característico. Las Rósides comprenden dos grandes clados: las Fábides y las Málvides. Las Fábides son un clado de eudicotiledóneas que habían sido nombradas informalmente como Eurósidas I o Fabides. A la fecha, no se han descubierto para este clado sinapomorfías que no estén basadas en los datos moleculares.
FABIDES Son un grupo de eudicotiledóneas llamadas tambien Eurósidas I. El clado está compuesto por los siguientes órdenes: Celastrales, Cucurbitales, Fabales, Fagales, Oxalidales, Malpighiales, Rosales y Zygophyllales. ORDEN MALPIGHIALES Familia Euphorbiaceae Esta familia es una de las más diversas en hábito y morfología. Suelen ser hierbas, arbustos o árboles; algunas xerófitas y con apariencia de cacto, a menudo con savia lechosa blanca o de colores. Las hojas, principalmente alternas, simples o compuestas, generalmente reducidas o deciduas en las especies xerófitas; con estipulas. Las flores en inflorescencias variadas, a menudo condensadas, de ahí que den la apariencia de una sola flor, un ciatio; plantas monoicas o dioicas. Las flores son unisexuales, actinomorfas. Cáliz de 5 sépalos o ninguno. Corola de 5 pétalos o generalmente ninguno. Androceo de 1 a muchos estambres, libres o fusionados, a menudo se presenta un ovario rudimentario en las flores masculinas. El gineceo está constituido por un pistilo compuesto de 3 carpelos unidos, con 3 lóculos, óvulos solitarios o en par, placentación axilar, ovario súpero, estilos libres o unidos en la base. El fruto es un esquizocarpo o una cápsula. La semilla a menudo con una carúncula conspicua. En esta familia se presentan antraquinonas, heterosidos cianogenicos, alcaloides tropánicos y piridinicos. Familia Passifloraceae Las Passifloraceae son generalmente árboles, arbustos, hierbas, frecuentemente trepadoras, con zarcillos enrollados auxiliares; hojas alternas enteras o lobadas; flores por lo común bisexuales, actinomorfas, sobre un pedúnculo articulado, bracteado; presentan una 79
corona, de una o más series de filamentos filiformes; ovario unilocular, óvulos numerosos; estilos libres o unidos, estigmas capitados o discoides, fruto una baya o una cápsula. Presentan comúnmente cianógenos asociados a cicloterpenoides. Acumulan además alcaloides de carbolina tal como la Passiflorina y células taníferas dispersas en el parénquima. Además se presentan alcaloides con núcleo indolico (derivado de la β-carbolina) Esta familia de 16 géneros y 650 especies está dominada por el género Passiflora (400). Muchos de los frutos de Passiflora son comestibles, pero la amplia producción de cianuro y passiflorina en varios miembros de la familia las hace peligrosas en general; medicinalmente, las especies de interés en Guatemala son P. ligularis Juss y P. quadrangularis L. conocidas ambas como granadilla, ambas se usan indistintamente en el tratamiento de la ansiedad, hipertensión, migrañas, neuralgia, convulsiones, histeria e insomnio. Familia Malpighiaceae Esta familia consta de 68 géneros y 1250 especies. Son árboles, arbustos o bejucos, perennes, con tricomas unicelulares, generalmente hermafroditas, a veces funcionalmente dioicas. Hojas generalmente opuestas, a menudo con glándulas multicelulares grandes sobre el pecíolo o la lámina (generalmente en el envés) o sobre ambos, lámina simple, generalmente entera, raramente lobada o pseudodentada; estípulas generalmente presentes. Flores con simetría bilateral leve o marcada; sépalos 5, eglandulares o, más frecuentemente, los 4 laterales o los 5 con (1) 2 glándulas multicelulares grandes sobre el lado abaxial; 5 pétalos, libres, unguiculados, alternando con los sépalos, imbricados, el posterior más interno y a menudo diferente a los otros 4; estambres en su mayoría 10, o menos por reducción en algunos géneros, anteras generalmente dehiscentes por hendiduras longitudinales; ovario súpero, compuesto de (2) 3 carpelos libres a connados, cada lóculo fértil con un óvulo anátropo péndulo, estilos generalmente 1 por carpelo, algunas veces connados o reducidos en número. Fruto seco o carnoso, dehiscente o indehiscente, samaroide, nuciforme o drupáceo; semillas sin endosperma. Los géneros más conocidos son Malpighia y Byrsonima, ambos de la parte meridional de América. Los miembros de esta familia presentan alcaloides con núcleo indólico. Heteropterys glabra Griseb. (falso tilo, tilo del campo) es utilizado en medicina popular en casos de problemas nerviosos para lo que se hierven varios gajos con hojas, y una vez colado y tibio, el líquido se utiliza en baños en caso de ataques de nervios. Familia Salicaceae La familia Salicaceae comprende alrededor de 350 especies distribuidas en climas templados y fríos, principalmente del hemisferio boreal. Las salicáceas se caracterizan por árboles o arbustos caducifolios y dioicos. Hojas alternas, simples, estipuladas. Flores inconspicuas, unisexuales, aclamídeas, acompañadas de brácteas y reunidas en amentos péndulos o erectos. Las flores aparentemente tienen brácteas subyacentes con un disco en forma de copa o una glándula. Anemófilos y entomófilos (Salix); periantio copiforme o nulo, androceo con 2 - 10 estambres; gineceo bicarpelar sincárpico de carpelos abiertos; numerosos óvulos; flores acompañadas de brácteas. Frutos en cápsula loculicida, que se abre mediante 2-4 valvas; con semillas numerosas, pequeñas, orladas de pelos (diseminación anemocora), con corto poder germinativo. 80
En algunas especies de esta familia se producen sustancias resinosas constituidas por parafinas, ácido salicílico, taninos, glúcidos flavonoides y fenólicos (salicina y populina) en la superficie de la corteza y la yemas foliares. Entre las sustancias de uso medicinal en esta familia se encuentran las sustancias resinosas y la esencia que embadurnan las yemas foliares del álamo negro (Populous nigra L.), éstas incorporadas con manteca de cerdo y otras substancias se emplean desde para calmar los dolores de las hemorroides. ORDEN FABALES Familia Fabaceae El orden Fabales actualmente consta de 1 familia monofilética, Fabaceae, que incluye como subfamilias a familias que anteriormente pertenecían a este orden (Mimosaceae, Caesalpiniaceae y antigua Fabaceae, siendo ahora las subfamilias Mimosoideae, Caesalpinioideae y Faboideae). Reúne árboles, arbustos y hierbas perennes o anuales, fácilmente reconocibles por su fruto tipo legumbre y sus hojas compuestas y estipuladas. En esta familia se pueden encontrar antraquinonas, cumarinas, flavonoides, taninos hidrolizables, heterósidos cianogénicos, alcaloides derivados de la pirrolidina, alcaloides con núcleo pirrolizidina, alcaloides con núcleo pirrolindol, alcaloides con núcleo quinolína. Esta familia se caracteriza por poseer plantas con actividad laxante y purgante (propiedad atribuida a las antraquinonas). ORDEN ROSALES Familia Cannabaceae Las plantas de esta familia son hierbas aromáticas, erectas (género Cannabis) o trepadoras (género Humulus), hojas opuestas, palmaticompuestas o simples, con estípulas, flores unisexuales, plantas dioicas, flores pentámeras, gineceo unilocular, el fruto es un aquenio, parcialmente oculto por el cáliz persistente. Estas hierbas acumulan alcaloides de piridina, taninos, proantocianinas, cristales de oxalato de calcio en el parénquima y en el tallo se observan canales secretores en el floema, pero sin ninguna sustancia lechosa. La familia Cannabaceae cuenta únicamente con 2 géneros y 3 especies nativas de la zona templada norte. Cannabis sativa tiene dos subespecies. La subespecie de regiones templadas, sativa, es cultivada principalmente para la obtención de fibra (cáñamo) y la subespecie indica, más tropical, se cultiva para la obtención de drogas psicotrópicas (marihuana y hashish). Humulus lupulus (lúpulo) es utilizada en la industria cervecera. Familia Urticaceae Principalmente hierbas, muchas con pelos urticantes, inflorescencias cimosas sobre ramas axilares cortas, ovario unilocular; un estilo. Las plantas son monoicas o dioicas con flores unisexuales actinomorfas muy reducidas, son apétalas, y el fruto es un aquenio o una drupa carnosa. Es una Familia de cerca de 45 géneros y 700 especies con una distribución tropical y templada. La Familia es de poca importancia económica. Familia Rosaceae Esta es una de las familias que incluye géneros con características muy heterogéneas, sin embargo la característica común más importante es la presencia de un receptáculo floral, o tálamo, muy desarrollado, que varía desde una forma plana, pasando por convexa hasta de forma cóncava. Es frecuente la de modificaciones como espinas, estípulas y aguijones, rara vez 81
ausentes. Las flores son normalmente hermafroditas, actinomorfas (a veces zigomorfas), solitarias o en inflorescencias variadas (racimos, espigas y corimbos). Frutos muy variables (aquenio, poliaquenio con receptáculo abombado (eterio) o cóncavo (cinorrodón), drupa, polidrupa (sorosis), folículo, pomo); semillas pequeñas, sin endosperma (las substancias de reserva en los cotiledones). Esta una de las familias más importantes debido al número de especies (casi 3000), importancia económica, y amplia distribución (cosmopolita). Rosa damascena M. (rosa), se utiliza para la extracción de la esencia de rosas y su producción constituye una gran industria. Además numerosos géneros se utilizan como ornamentales, siendo más importantes en esta categoría las obtenidas por hibridación de especies silvestres Algunos representantes de esta familia contienen taninos hidrolizables, saponinas esteroidales pentaciclicas, heterósidos cianogenicos, alcaloides diterpenicos. ORDEN CUCURBITALES Familia Coriariaceae Esta familia presenta yemas agrupadas en las axilas de las hojas de los ejes principales; ramillas notablemente angulares que se convierten a teretes, algunas veces arqueadas a péndulas, con lenticelas suberosas, las ramas superiores opuestas y las inferiores opuestas o ternadas. Las hojas son simples, opuestas o verticiladas, sin estípulas, de ovadas a lineares angostas, la base cordada, truncada o redondeada, el ápice de rostrado a mucronado. Las inflorescencias se disponen en racimos alargados, péndulos, con 3 a 4 pares de brácteas pequeñas en la base del racimo, rara vez presentan flores solitarias. Y las flores son pequeñas, bisexuales o unisexuales, proteróginas, pentámeras, actinomorfas o con cáliz ligeramente zigomorfo, con brácteas o sin ellas; sépalos imbricados, persistentes; pétalos valvados, carnosos, aquillados, más cortos que los sépalos. El fruto es una pseudodrupa compuesta de 5 a 10 cocos o aquenios, aquillados en la parte dorsal, comprimidos en ambos lados y envueltos por los pétalos acrescentes. Esta familia posee un solo género Coraria. Los representantes de este género son plantas ricas en taninos flavonoides en los tejidos de las hojas. Para algunas especies de Coriaria se han reportado contenidos de sustancias tóxicas como el coriarin y el coriaria-myrtin. Estas son plantas extremadamente tóxicas y sus hojas, frutos y semillas son nocivas para el ganado, pues les causa convulsiones, incremento de la actividad respiratoria y del corazón, y finalmente la muerte por asfixia o paro cardiaco. También se tienen informes de niños intoxicados por comer sus frutos que son llamativos y bastante agradables por su sabor dulce. En cantidades mínimas, la planta es alucinógena Familia Cucurbitaceae Las cucurbitáceas son una familia de plantas oriundas en su mayor parte del Nuevo Mundo. Son hierbas rastreras o trepadoras mediante zarcillos en los tallos (caulinares); muestran hojas alternas, en general simples, más o menos lobadas, carnosas, escabras; poseen cistolitos. Las flores son unisexuales, las masculinas con traza de gineceo, generalmente monoicas, regulares, gamopétalas, pentámeras, con periantio doble y estambres atípicos: filamento sigmoide rematado por una antera con una única teca, estambres libres o soldados en 3 grupos: (2)+(2)+1. En las formas primitivas se muestran los pétalos libres, y el ovario ínfero; algunas 82
presentan inflorescencias en cima. Los frutos son muy variables; casi siempre son bayas o bayas modificadas, pero a veces se presentan como cápsulas. Entre las cucurbitáceas se encuentran importantes fuentes de alimento como calabazas, chilacayotes, pepinos, pepinillos y sandías. Algunas otras especies se cultivan como ornamentales y otras son consideradas como malezas. En esta familia se producen triterpenos ligados a diversos azúcares para formar saponinas surfactantes. ORDEN FAGALES Familia Fagaceae Estos son árboles con hojas caducas o marcescentes, simples, dispuestas de forma alterna, de margen entero, lobado o dentado y estipuladas. Con flores son unisexuales, pero aparecen masculinas y femeninas en la misma planta, generalmente reunidas en inflorescencias de tipo amento al menos las masculinas. El perianto es muy reducido (4 – 9 piezas) de aspecto sepaloideo, poco vistosas. Las flores masculinas tienen el androceo formado por el mismo o doble número al de piezas del perianto, y las femeninas suelen estar protegidas por un involucro de brácteas o cúpula que agrupa a 1 – 3 flores; su gineceo está formado por un ovario ínfero. El fruto, de tipo glande, son las conocidas bellotas, castañas y hayucos, que tienen una sóla semilla. Las especies de esta familia son de importancia forestal (haya, roble, castaño) y son aprovechadas tanto por la madera como por los frutos. La corteza y la madera de Castanea se usan en curtiduría. En esta familia se encuentran presentes flavonoides, taninos condensados e hidrolizables. OBJETIVOS: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
Reconocer y describir la morfología general del género medicinal Passiflora. Establecer la presencia o ausencia de sustancias activas en la materia médica del género Passiflora con el uso de la histoquímica. Reconocer, describir la morfología general de las familias Euphorbiaceae, Fabaceae, Fagaceae y Cucurbitaceae. Reconocer y describir la morfología general de algunos géneros medicinales de Euphorbiaceae. Establecer las diferencias y/ semejanzas de las familias Euphorbiaceae, Fabaceae, Fagaceae y Cucurbitaceae. Establecer la presencia o ausencia de sustancias activas con la ayuda de pruebas histoquímicas de las familias Euphorbiaceae, Fabaceae, Fagaceae y Cucurbitaceae. Reconocer y describir las características vegetativas de la Familia Cannabaceae Identificar características anatómicas y metabolitos secundarios en Cannabis sativa
MATERIALES:
Microscopios Estereóscopos Vidrios de reloj Porta y cubreobjetos Agujas de disección
Passiflora sp. Leguminosas en floración Crotalaria longirostrata (Chipilín) Euphorbia lancifolia (Ixbut) Acalypha spp., (Hierba del cáncer) 83
HCl al 10% Agua destilada Azul de Cresil Reactivo Dragendorff Ácido Sulfurico diluido Sulfato férrico Hojas de afeitar
Ricinus comunis (Higuerillo) Cannabis sativa (Mariguana) Urtica dioica (Ortiga) Salix sp Sechium edule (Güisquil) Quercus ilex L. (Encino) Prunus persica (Durazno)
PROCEDIMIENTO: ORDEN ROSALES. FAMILIAS CANNABACEAE, URTICACEAE Y ROSACEAE 1. Observe e identifique al microscopio diafanizado de hoja de mariguana (Cannabis sativa L.). 1.1. La epidermis. Localice la presencia de litocistos. De acuerdo con su investigación prelaboratorio, indique la composición de los cristales. 1.2. Observe la presencia de tricomas, dibújelos y escriba a qué tipo pertenecen (Anexo 1) 1.3. Prueba para la presencia de aceites esenciales utilizando Sudan III o IV. Anote en qué tejido(s) pudo observarlos si la prueba es positiva. 2. Tome la muestra del estándar de Urtica dioica L. Describa su morfología y revise las características físico-organolépticas y anótelas en su reporte. (Anexo 8) 3. Tome un ejemplar de Durazno (Prunus persica) y describa su morfología (Anexo 9). Tome una muestra de semillas, triturarlas. Adicionar en un tubo de ensayo con 15 mL de ácido sulfúrico diluido y calentar. En el extremo del tubo de ensayo colocar una gota de ácido pícrico, y reportar cambio de color. Tome una hoja de Durazno y macere, distinga el olor carácteristico a cereza (cianuro). ORDEN MALPIGHIALES. FAMILIA PASSIFLORACEAE 1) Tome un ejemplar de Passiflora sp. y describa: (Anexo 4) a) Hábito: posición de los zarcillos. b) Hojas: filotaxia, tamaño, presencia de tricomas c) Pedúnculo: características Realice un corte longitudinal de la flor y con la ayuda del esquema identifique : Simetría Cáliz: dialisépalo o gamosépalo, características, color Corola: dialipétala o gamopétala, características, color Corona: características, posición, origen Presencia de androginóforo, características Gineceo: posición del ovario y características de los estigmas Androceo: posición y características de las anteras 2) Haga varios cortes transversales de la hoja y colóquelos en el vidrio de reloj. Seleccione cortes finos.
los 84
3) Monte uno de ellos con agua destilada y dibuje la arquitectura foliar. Anote las características de la epidermis del haz y del envés, así como del mesófilo. 4) Realice las siguientes pruebas histoquímicas y anote sus resultados. a) Alcaloides Dragendorff b) Taninos sulfato férrico compare los resultados con los esquemas del Anexo 2. FAMILIA EUPHORBIACEAE 1) Tome las muestras de ixbut, hierba del cáncer e higuerillo y compare las características investigadas con el ejemplar que tiene en su mano. Describa y esquematice para cada una de ellas: Hábito Hojas simples o compuestas, filotaxia Tipo de inflorescencia Sexo de las flores Presencia de látex ¿qué características tienen en común? Compare sus esquemas con el Anexo 3. 2) Realice cortes transversales de la hoja de ixbut y coloque uno de ellos en un portaobjetos utilizando agua destilada, observe al microscopio, describa la arquitectura foliar y esquematice. 3) Con los cortes restantes, realice las pruebas histoquímicas siguientes: a) Alcaloides Dragendorff b) Taninos Sulfato férrico Indique los resultados de las pruebas histoquímicas. FAMILIA SALICACEAE 1) Tome un ejemplar de Salix sp. y describa: (Anexo 5) o Hojas: simples o compuestas; paralelas o alternas; tipo de venación; margen en hoja juvenil y adulta; coloración en el haz y el envés; o Flores (solo si lo presenta): - Flores masculinas: disposición de la flor, número de estambres - Flores femeninas: disposición de la flor, número de carpelos. o simetría, descripción de verticilos, número de piezas, libres o fusionados, posición del ovario, número de estambres. o Fruto: tipo y tamaño (solo si lo presenta) 2) Realice cortes transversales de la hoja Salix sp. y determinado la presencia de taninos utilizando sulfato férrico.
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ORDEN FABALES. FAMILIA FABACEAE 1) Tome los ejemplares de cada subfamilia del la Familia Fabaceae presentes en el laboratorio y describa: (Anexo 6) o Hábito o Hojas: simples o compuestas y su clasificación o Flores: simetría, descripción de verticilos, número de piezas, libres o fusionados, posición del ovario, número de estambres. o Fruto: tipo y tamaño (solo si lo presenta) 2) Tome los foliolos del Chipilín Crotalaria longirostrata Hook. Et Arn. Y realice cortes transversales a los mismos 2.1) Monte uno de los cortes con agua destilada y otro con azul de cresil, describa la estructura foliar. 2.2) A otro de los cortes agregue el reactivo Dragendorff, para determinar la presencia de alcaloides. Si la prueba es positiva indique los tejidos en los cuales encontró su presencia. ORDEN CUCURBITALES FAMLIA CUCURBITACEAE 1) Tome un ejemplar de Güisquil (Sechium edule) y describa: (Anexo 10) o Hábito o Tallo: tipo de tallo o Hojas: simples o compuestas; paralelas o alternas; presencia de cistolitos. o Flores: Tipo de inflorescencia; simetría; descripción de verticilos; estambres, posición del ovario. ORDEN FAGALES FAMILIA FAGACEAE 1) Tome un ejemplar de Quercus ilex L. y describa: (Anexo 11) o Hojas: simples o compuestas; paralelas o alternas; tipo de venación; margen en hoja juvenil y adulta; coloración en el haz y el envés; o Flores: - Flores masculinas: disposición de la flor, número de estambres - Flores femeninas: disposición de la flor, número de carpelos. o simetría, descripción de verticilos, número de piezas, libres o fusionados, posición del ovario, número de estambres. o Fruto: tipo y tamaño (solo si lo presenta) 2) Realice cortes transversales de la hoja Quercus y determine la presencia de taninos utilizando sulfato férrico.
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ANTECEDENTES
Investigue la descripción botánica, materia médica e indicación terapéutica de Euphorbia lancifolia (ixbut), Acalypha arvensis, (hierba del cáncer) y Ricinus comunis (higuerillo)
Investigue la descripción botánica de Passiflora ligularis Juss. y Passiflora quadrangularis L. Asimismo investigue qué constituye la materia médica y la indicación terapéutica.
Investigue qué constituye la materia médica y la indicación terapéutica del chipilín, Crotalaria longirostrata Hook. Et Arn.
Investigue la descripción botánica, sustancias ergásticas y usos medicinales de Cannabis sativa L., y describa lo siguiente: hábito tipo de hojas: simples o compuestas filotaxia (alterna u opuesta) tipo de inflorescencia ¿Son plantas dioicas o monoicas? ¿Qué sustancias ergásticas pueden presentarse en esta especie? ¿Qué es el tetrahidrocanabinol? ¿Qué usos medicinales tiene esta especie
a. b. c. d. e. f. g. h.
En su reporte agregue la información que se le solicita a continuación: Investigue la descripción botánica, Hábito, materia médica, indicación terapéutica, y farmacología de Urtica dioica L. BIBLIOGRAFIA: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
British Herbal Medicine Association. (1983). British Herbal Pharmacopeia. England: British Herbal Medicine Association. Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina: Editora UNR. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal (Trad 2a.). México: McGraw Hill. Cronquist, A. (1981). An Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. Cronquist, A. (1988). The evolution and Classification of Flowering Plantas. (2da ed.). Bronx: The New York Botanical Garden. Shalisko, V., González L., y Carvajal, S. (2007). La familia Coriariaceae en el estado de Jalisco, México. Instituto de Botánica. México: Universidad de Guadalajara. Souza, V., Melo, L., Barbosa, S., Neves, S., Mercadante, M., y Monteiro, L. (2008). AvaliaçÃo histoquímica de folhas de Passiflora setacea D. C. (Passifloraceae). Brasil.
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Anexo 1. Cartilla Micrografica de Cannabis sativa.
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Anexo 2. Pruebas Histoquímicas en Passiflora sp.1
A. Sudàn IV presencia de lípidos en la cutícula (reacción positiva color rojo) B. Prueba de lignina con floroglucinol positiva (color rosa) Subtítulos cu= cutícula; xi= xilema
2A
2B
El cloruro férrico mostró tinción enegrecida regiones de la epidermis de las hojas empalizada en el centro de parénquima (Figura 2A) y tricomas (Figura 2B), indicando de esa manera reacción positiva a los compuestos fenólicos en general. Prueba histoquímica con Cloruro férrico para fenoles es positiva en el parénquima en empalizada, epidermis y tricomas de la epidermis, además de la nervadura central. Pa= parénquima en empalizada, tr= tricomas
Corte transversal de hoja: La prueba de alcaloides con dragendorff es positiva en la nervadura central de la hoja, y en la epidermis, esta prueba se evidencia con un precipitado rojo ladrillo a verde naranja. Imágenes tomadas de Souza, W. et al. 2008 1
Imágenes tomadas de Souza, W. et al. 2008
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Anexo 3. Esquema morfológico de Euphorbiaceae
a. Hábito d. Flores estaminadas en el ciatio g. Porción de corte longitudinal del pistilo
b. Ciatio e. Flor estaminada
c. Corte longitudinal del ciatio f. Pistilo visto desde arriba
h. Corte transversal del ovario
i. Nudo del tallo, mostrando estípulas reducidas en la axila de las ramas
k. Flores postiladas
m. Inflorescencia
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Anexo 4. Esquema morfológico de Passifloraceae
Figura 2. Passiflora coccínea Aubl. A. Hábito, b.-c. Flor, d- Sección longitudinal mostrando la base de la flor, e. Pistilo, f.-g. Vista de la antera, h. Sección transversal del ovario, i. Ovulo, k. Región nodal, mostrando estípulas. 91
Anexo 5. Esquema morfológico de Salicaceae
Figura 3. Salix serícea Marshall. a. Rama, b. Rama con inflorescencias en amentos, c. Nudo, base de la hoja y estípulas, d. Amento pistilado, e. Amentos estaminado, f.-h. Vista dorsal y ventral de una bráctera y flor pistilada, m. Nectario de flor pistilada, n. Sección longitudinal del ovario, o. Fruto abierto, p. Semilla.
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Anexo 6. Esquema morfológico de Fabaceae
Figura 4. Tephrosia virginiana (L.) Pers. A. Hábito, b. Estípulas y desarrollo de las hojas, c.-e. Flor, f. Antera, g. Pistilo, h. Sección transversal del ovario.
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Anexo 7. Esquema morfológico de Cannabaceae
Figura 5. Humulus japonicus Sieb. & Zucc. A. Hábito, b. Inflorescencia pistilada, c. Inflorescencia estaminada, d.-e. Vista frontal y lateral de la flor estaminada, f. Frutos con bracteras subtendidas, g.-h. Flores pistiladas, i. Sección longitudinal del ovario y óvulo.
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Anexo 8. Esquema morfológico de Urticaceae
Figura 6. Laportea canadensis (L.) Willd. a. Hábito, b. Nodo, con estípula abcisa, c. Pistilo, ovario en sección longitudinal, d. Flor pistilada, e. Flor pistilada, f. Aquenio.
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Anexo 9. Esquema morfológico de Rosaceae
Figura 7. Potentilla recta L. a. Hábito, b.-c. Hoja con estípula peciolar, d. Flor en sección longitudinal, e.-f. Estambres, g. Carpelo, h. Carpelo en sección particial, i. Aquenio, k.-n. Prunus serótina Ehrh. k. Flor en sección longitudinal, m. Flor, n. Pistilo en sección parciallongitudinal. 96
Anexo 10. Esquema morfológico de Cucurbitaceae
Figura 9. Echinocystis lobata (Michx.) T. & G. a. Hábito, b. Flor estaminada, c. Androceo, d. Flor pistilada, e. Estilo y estigma, f. Sección transversal del ovario, g. Fruto, h. Porción de lal flor pistilada, mostrando ovario in sección longitudinal,
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Anexo 11. Esquema morfológico de Fagaceae
Figura 10. Quecus alba L. a. Hábito, b. Nudo, mostrando estípulas, c. Flor estaminada, d. Estambre, e. Inflorescencia pistilada, f. Frutos
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PRACTICA 9. EUDICOTILEDONEAS ROSIDES: MALVIDES (EUROSIDES II). INTRODUCCIÓN Las Málvides son un grupo de eudicotiledóneas que habían sido nombradas informalmente como Eurósidas II o Malvides en varios trabajos sobre filogenia de las angiospermas. El nombre Eurósidas II también había sido aplicado para un clado más amplio que incluía a las Myrtales. Este grupo de eudicotiledóneas también es llamado Eurósidas II. El clado está compuesto por los siguientes órdenes: Myrtales, Sapindales, Malvales y Brassicales. De estos, el orden Myrtales son considerados Erósides cuyos análisis moleculares no han sido capaces de ubicarlas en otros grupos dentro de ese clado
MALVIDES (EUROSIDES II) ORDEN MYRTALES Familia Myrtaceae Las Mirtáceas son una familia de árboles o arbustos perennifolios, ricos en aceites esencia-les, perteneciente al orden Myrtales. Alrededor de 130 géneros y unas 2.900 especies de regiones tropicales y subtropicales, algunas en Europa. Son árboles o arbustos, hermafroditas o a veces con algunas flores estaminadas. Hojas simples, opuestas, raramente subalternas, enteras, pelúcido-punteadas, con glándulas generalmente resinosas y aromáticas; pecioladas, sin estípulas. Inflorescencias son racemosas o cimosas, con frecuencia paniculadas o modificadas como glomérulos, dicasios, agrupaciones umbeliformes o solitarias, bracteadas, axilares o raramente subterminales. Frutos carnosos en forma de bayas y drupas, o secos en forma de cápsulas, aquenios o pixidios en algunas especies introducidas; embrión variable. Esta familia se caracteriza por la producción de aceites esenciales y taninos hidrolizables. Familia Lythraceae Son hierbas, arbustos o árboles pequeños, frecuentemente con tallos 4-angulados; plantas hermafroditas. Hojas membranáceas o menos frecuentemente coriáceas, opuestas, raramente subalternas o verticiladas, simples y enteras; estípulas como proyecciones axilares diminutas. Inflorescencias en racimos o cimas axilares o panículas terminales, bractéolas 2, opuestas en los pedicelos; flores actinomorfas o zigomorfas, 4–6-meras, perianto y estambres periginos, tubo floral campanulado a tubular. Fruto una cápsula dehiscente o indehiscente generalmente envuelta por el tubo floral persistente; semillas 3 o más, aladas o no, sin endosperma. En esta familia se encuentran alcaloides derivados de la piridina. La familia lleva el nombre del género tipo, Lythrum cuyo nombre común es salicaria. Ahora también incluye los granados, anteriormente clasificados en la familia Punicaceae.
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ORDEN SAPINDALES Familia Anacardiaceae Esta familia agrupa plantas leñosas, hojas simples o compuestas, alternas, flores hermafroditas, generalmente diclamideas, pentámeras, de ovario súpero; dispuestas en panículas y frutos en drupa. Posee 72 géneros con unas 500 especies propias de países cálidos y templados. En esta familia se producen resinas, aceites, lacas y ácidos tánicos Las anacardiáceas presentan una resina gomosa y lechosa que, con frecuencia, produce dermatitis llamada "flechazo del quebracho". El principio que produce esta dermatitis es un cuerpo volátil del mismo grupo del cardol. Las anacardiáceas se caracterizan por la presencia de taninos hidrolizables. Familia Burceraceae Esta es una familia que presenta alrededor de 600 especies intertropicales. Son árboles o arbustos fragantes, con canales resiníferos en la parte interna de la corteza. Hojas alternas, imparipinnadas o, a veces, unifolioladas; estípulas ausentes. Las inflorescencias son racemosas, cimosas o mixtas, axilares o a veces terminales. Flores pequeñas, actinomorfas, perfectas pero funcionalmente unisexuales en plantas dioicas, subdioicas o raramente monoicas. Sépalos unidos en la base, imbricados o valvares. Pétalos libres o unidos en tubo, induplicado-valvares o a veces irregularmente imbricados. Disco nectarífero intrastaminal. Ovario súpero, 2-5-carpelar, sincárpico; óvulos 2 por lóculo. Fruto: drupa con el exocarpo y el mesocarpo secos o carnosos, dehiscente o indehiscente, endocarpo coriáceo formando pirenos libres o unidos entre sí, lóculos con una semilla cada uno; cotiledones contortotuplicados o planos, generalmente lobados; endosperma ausente o escaso. Algunas Burseraceas presentan látex oloroso que tiene de carácter distintivo. Este se encuentra en las ramitas, las hojas, fuste, y cuando está presente, usualmente es de un color claro y pegajoso que seca en un polvo blanco, también puede observarse látex blanco de apariencia lechosa. En esta familia se encuentran aceites esenciales.
Familia Rutaceae Son plantas leñosas o raramente herbáceas, provistas de glándulas secretoras oleíferas. Hojas alternas u opuestas, simples o compuestas, sin estípulas, a veces con espinas axilares. Flores generalmente hermafroditas, actinomorfas o cigomorfas, pentámeras o tetrámeras, con piezas libres o soldadas en la base; androceo con un número variable de estambres, a menudo el mismo o el doble que el de pétalos, con disco nectarífero carnoso intraestaminal; gineceo súpero o semiínfero, pluricarpelar, generalmente sincárpico y plurilocular. Inflorescencias diversas. Frutos en cápsula, polifolículo, hesperidio, drupa o samara. Unas 1.600 especies la mayoría de países tropicales y subtropicales. La familia es de importancia considerable como fuente de frutos cítricos con alto contenido de vitamina C (Citrus medida, C. limón, C. sinensis entre otros). También se presentan cumarinas, alcaloides indólicos (simples, derivados de la b-carbolina, derivados de carbazol); alcaloides quinolinicos, alcaloides con núcleo imidazol, flavonoides, aceites esenciales.
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Familia Sapindaceae Estos pueden ser árboles o arbustos, trepadoras leñosas, sufrútices o hierbas, con zarcillos a menudo floríferos. Hojas alternas y/o agrupadas en el extremos de los tallos, compuestas (im)paripinnadas, bipinnadas, bi o trifolioladas. Folíolos enteros, crenados o dentados. Flores heteroclamídeas, dialipétalas, zigomorfas o actinomorfas, a menúdo unisexuales. El fruto puede ser una di o trisamara, cápsula generalmente trigónica a veces inflada y/o alada, baya subesférica, mericarpos drupáceos. Semilla con arilo. En esta familia se presentan alcaloides con núcleo de xantina. Sapindus saponaria se caracteriza por la producción de alto contenido de saponinas (alrededor de 30%). ORDEN MALVALES Familia Malvaceae Estas presentan hojas alternas, comúnmente palmatilobadas, con tres nervios principales que surgen desde la base de la lámina foliar y, además, presentan estípulas pequeñas y caducas. En los órganos vegetativos se encuentran pelos con forma de estrella y en los tejidos se encuentran canales de mucílagos. Las flores son conspicuas, entomófilas, hermafroditas, actinomorfas y agrupadas en inflorescencias; el cáliz posee cinco sépalos libres o soldados por la base, acompañado frecuentemente por un epicálix o calículo (hipsófilos). Usualmente el cáliz lleva nectarios compuestos de tricomas glandulares. La corola presenta cinco pétalos libres con una uña muy larga, el limbo soldado o bífido. El androceo está compuesto de numerosos estambres, típicamente con los filamentos soldados en un tubo estaminal (denominado columna estaminal) que rodea los estilos, y cada estambre con una única teca. El polen es espinuloso, el gineceo de ovario súpero, formado por cinco o más carpelos y 5 estilos. El número de óvulos es variable y la placentación axilar. Los frutos son esquizocárpicos o capsulares. Las semillas presentan ácidos grasos característicos, que conjugan el anión ciclopropenilo. Esta familia se caracteriza por la producción de saponinas y flavonoides. ORDEN BRASSICALES Familia Brassicaceae Son hierbas anuales, bianuales o perennes, con savia acuosa y frecuentemente picante, raras veces sufruticosas. Hojas alternas o en roseta, simples o divididas, sin estípulas. Flores en cruz, hermafroditas, actinomorfas, sin brácteas; cáliz con 4 sépalos libres dispuestos en dos verticilos dímeros, a veces con la base ligeramente gibosa; corola con un verticilo de 4 pétalos, alternos con los sépalos, a veces en dos grupos, C 2 + 2; androceo normalmente con 6 estambres, dispuestos en dos verticilos: uno externo con dos estambres cortos, y uno interno con 4 estambres largos, con nectarios basales; gineceo súpero, sincárpico, bicarpelar, ovario generalmente dividido en dos lóculos Inflorescencias en racimos, corimbos o umbelas. Frutos de tipo capsular dehiscentes mediante dos valvas, llamados silicuas, silículas o lomentos. Los compuestos sulfurados de la familia contribuyen a proporcionar el olor pungente característico de estas plantas. En esta familia se presentan compuestos sulfocianogenicos (mirosinolatos) y alcaloides con núcleo tropano.
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Familia Caricaceae Las Caricáceas son arbustos o árboles, laticíferos, con tallos blandos o carnosos, simples o ramificados; plantas generalmente dioicas, raramente monoicas o polígamas. Hojas alternas, enteras, simples, pinnatilobas hasta pinnatífidas o palmatilobas a palmatífidas, o compuestas y digitadas; sin estípulas. Inflorescencias de racimos o panículas, flores 5-meras; cáliz 5-lobado o 5-dentado; corola de tubo largo en las flores masculinas o de tubo corto o éste inconspicuo en las flores femeninas; estambres 10, insertos en 2 series en la parte superior del tubo de la corola, anteras 2-loculares abriéndose longitudinalmente; ovario súpero de inserción ancha, óvulos casi siempre numerosos, estilo ausente o conspicuo, estigma entero o lobado o repetidamente ramificado. Fruto una baya; semillas con endosperma oleoso y envoltura externa carnosa. En esta familia se presentna alcaloides piridinicos. Esta familia tropical, muy abundante en Sudamérica, sólo dos especies son nativas del Oeste de África. La producción de látex es característica en Carica papaya donde se produce en los frutos verdes, hojas y otras partes de la planta, éste contiene una enzima denominada papaína, que actúa sobre la albúmina, su acción proteolítica es semejante a la de la tripsina. Familia Moringaceae Esta familia que comprende árboles de hoja caediza con la corteza gomosa conteniendo aceites. Hojas alternas, doble o triplemente pinnadas, con folíolos opuestos, sin estípulas. Flores en panículas axilares, de color rojo o blanco, irregulares, con 5 sépalos, 5 pétalos, 5 estambres funcionales y numerosos estaminodios. Fruto en cápsula dehiscente, leñosa, conteniendo numerosas semillas con 3 alas o a veces no aladas. Comprende 1 género, Moringa con unas 10 especies de África, Madagascar, llegando hasta la India. Algunas especies producen aceites de interés como lubricantes, comestibles y para la fabricación de jabones. Algunas otras se cultivan con fines ornamentales. Se cultiva raramente alguna especie del género Moringa. OBJETIVOS: 1. Reconocer y describir la morfología general de dos especies medicinales de las familias Myrtaceae y Punicaceae. 2.
Determinar la presencia o ausencia de principios activos en las plantas que se estudian, mediante el uso de reactivos específicos
MATERIALES:
Microscopios Estereoscopios Vidrios de reloj Porta y cubreobjetos Agujas de disección Agua destilada Sudan III ó IV (filtrado) Sulfato férrico Reactivo de Dragendorff
Eucaliptus globulus y E. cytriodora Punica granatum (Granado) Spondias purpurea (Jocote) Bursera simaruba (Palo Jiote) Ruta chalapensis (Ruda) Sapindus saponaria Hibiscus rosa-sinensis (Rosa de China) Carica papaya (Papaya) Raphanus sativus (Rabano) 102
PROCEDIMIENTO: ORDEN MYRTALES FAMILIA MYRTACEAE 1) Tome un ejemplar de Eucaliptus globulus, de E. cytriodora y de Eugenia sp, observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: a) Hábito b) Hojas: simples o compuestas, filotaxia, forma, presencia de glándulas a trasluz c) Inflorescencia: tipo d) Flores Pétalos conniventes Sépalos Estambres Gineceo. e) Fruto: tipo Esquematice, señalando las características distintivas. Compare las estructuras con el Anexo 1. 2) Hoja de Eucaliptus globulus. Anexo 2 a) Realice varios cortes transversales, seleccione los mejores. b) Monte uno de ellos en agua destilada. c) Observe al microscopio los tejidos, describa las características de los mismos y la posición de las glándulas que contienen los aceites esenciales. d) Agregue una gota de Sudan III e identifique la ubicación del aceite esencial. e) Anote sus resultados. 3) Tome un ejemplar de Eugenia: a) Observe sus características morfológicas, esquematice y describa: hábito, hojas, flores y fruto. FAMILIA LYTHRACEAE: 3. Tome un ejemplar de Punica granatum observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: 3.1. Hábito 3.2. Textura y grosor de la corteza, color, olor. 3.3. Hojas: simples o compuestas, filotaxia, forma 3.4. Flores. Características de: Corola Cáliz Androceo Gineceo. 3.5. Fruto: descripción de la balausta. 103
4. Indique en su reporte, qué tipo de técnica utilizaría para observar los tipos celulares en la corteza del granado. ORDEN SAPINDALES FAMILIA ANACARDIACEAE 1) Tome un ejemplar de Spondias purpurea (Jocote) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: Anexo 3 a) Hábito b) Olor c) Hojas: simples o compuestas; filotaxia; forma; presencia de espinas axilares. Verifique la presencia de glándulas oleíferas a trasluz. d) Flores. Las siguientes características: simetría; número de pétalos; número de estambres. Posición de ovario. e) Fruto: descripción de la cápsula 2) Realice cortes transversales de hoja de Jocote y adicione una gota de sulfato ferrico. Repote sus resultados obtenidos en tablas FAMILIA BURCERACEAE 1) Tome un ejemplar de Bursera simaruba (Palo Jiote) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: a) Hábito b) Olor c) Hojas: simples o compuestas; filotaxia; forma; presencia de espinas axilares. Verifique la presencia de glándulas oleíferas a trasluz. d) Flores. Las siguientes características: simetría; número de pétalos; número de estambres; posición de ovario. e) Fruto: descripción de la cápsula 2) Realice cortes transversales de hoja de Palo Jiote y adicione una gota de Sudan III. Repote sus resultados obtenidos en tablas FAMILIA RUTACEAE 2) Tome un ejemplar de Ruta chalapensis (Ruda) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: a) Hábito b) Olor c) Hojas: simples o compuestas; filotaxia; forma; presencia de espinas axilares. Verifique la presencia de glándulas oleíferas a trasluz. d) Flores. Las siguientes características: simetría; número de pétalos; número de estambres (¿son el doble de los petalos?); posición de ovario. e) Fruto: descripción de la cápsula 3) Realice cortes transversales de hoja de ruda y adicione una gota de Sudan III y sulfato ferrico. Repote sus resultados obtenidos en cuadros. FAMILIA SAPINDACEAE 1) Tome un ejemplar de Sapindus saponaria observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: Anexo 4 104
a) b) c) d)
Hábito Textura y grosor de la corteza, color, olor. Hojas: simples o compuestas, filotaxia, forma Flores. Características de: Corola Cáliz Androceo Gineceo. e) Fruto: descripción 2) Realice cortes transversales de hoja y adicione una gota dragendorff. Realice prueba de saponinas. Repote sus resultados obtenidos en cuadros. ORDEN MALVALES FAMILIA MALVACEAE 1) Tome un ejemplar de Hibiscus rosa-sinensis (rosa de China) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: Anexo 5 a) Hábito b) Hojas: simples o compuestas; filotaxia; forma; nervadura c) Flores. Simetría; número de sépalos; número de pétalos; número de estambres (¿están libres o soldados?); posición de ovario. Realice cortes de hoja para observar presencia de canales con mucílagos (azul de cresil) y flavonoides (Sulfato Ferrico). ORDEN BRASSICALES FAMILIA CARICACEAE 5) Tome un ejemplar de Papaya (Carica papaya) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: Anexo 7 a) Hábito b) Hojas: simples o compuestas, filotaxia, forma c) Flores. Características de: Corola Cáliz Androceo Gineceo. d) Fruto: descripción de la baya y observación de látex en frutos inmaduros. FAMILIA BRASSICACEAE 1) Tome un ejemplar de Rabano (Rhaphanus sativus) observe sus características morfológicas y describa lo siguiente: Anexo 6 a) Hábito b) Hojas: simples o compuestas, filotaxia, forma c) Flores. Características de: Corola Androceo Cáliz Gineceo. d) Fruto 105
ANTECEDENTES
Investigue la descripción, materia médica e indicación terapéutica de Eucalyptus citriodora, E. globulus y Punica granatum
BIBLIOGRAFIA: 1. Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. 2. Cronquist, A. (1991). Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. 3. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Mamual de procedimientos para el análisis de drogas en polvo. Argentina:. Editora UNR. 4. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal (Trad 2a.). México: McGraw Hill. 5. Salamanca, G. (______). La familia Euphorbiaceae como condición promisoria para la obtención de Metabolitos secundarios. Colombia. 6. Standley, P.C., y Steyermark, J.A. (1958). Flora of Guatemala: Fieldiana Botany (Vol. 24.) Illinois: Chicago Natural History Museum.
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Anexo 1. FAMILIA MYRTACEAE
a. Hábito d. Corte transversal del ovario g. Semillas k. Pétalo
b. Flor vista desde arriba e. Anteras h.Fruto
c. Sección longitudinal de la flor f. Anteras i. Flor
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Anexo 2. Cartilla micrográfica de Eucalyptus sp.
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Anexo 3. Esquema morfológico de Anacardiaceae
Anacardiaceae. a) Habito; b) Estambre; c) flor estaminada; d) Pistiloide de una flor estaminada; e) Sección parcial de flor estaminada; f) Flor pistilada; g) Sección parcial de flor pistilada; h), i) Estaminoides de Flor Pistilada; k) Sección parcial de pistilo; m) Pistilo; n) Frutos 109
Anexo 4. Esquema morfológico de Sapindaceae
Sapindaceae. a) Habito; b) flor estaminada; c) Receptaculo, disco, y pistilo vestigial de flor estaminada; d) Estambre; e) Flor pistilada; f) Receptaculo, disco y pistilo de una flor pistilada; g) Sección de pistilo; h) Sección del ovario; i) Fruto en sección parcial
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Anexo 5. Esquema morfológico de Malvaceae
Malvaceae. a) Habito; b) Anteras; c) Base del petalo; d) Nodo, con estipulas y primordios de flores; e) Pelos; f) Sección del ovario; g) Fruto con caliz persistente; h) Flor desde arriba; i) Sección de androceo; k) pistilo
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Anexo 6. Esquema morfológico de Brassicaceae
Brassicaceae. a) Habito; b) Flor desde arriba; c) Primordio de flor; d) Sección de flor; e) Sección de ovario; f) Fruto; g) Fruto sin cubierta; h) semilla; i) Fruto de Capsella bursa.pastoris
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Anexo 7. Esquema morfológico de Caricaceae
Caricaceae. a) Habito; b) Flor pistilada; c) Pistilo desde arriba; d) Pistilo; e) Sección del ovario; f) Flor quasiperfecta; g),i) Flor estaminada; k) Sección de flor estaminada; m,n) Estambres largos y cortos; o) Pistilo vestigial de flor estaminada; p) Pistilo de flor quasiperfecta 113
PRACTICA 10. EUDICOTILEDONEAS ASTERIDES: LAMIDES (EUASTERIDES I). INTRODUCCION Las Astérides son un gran grupo de eudicotiledóneas que incluye aproximadamente 80.000 especies, agrupadas en 13 órdenes y más de cien familias y entre la tercera a la cuarta parte del total de especies de las angiospermas. Conjuntamente con las Rósides, constituyen los dos grupos más grandes de eudicotiledóneas. Las plantas pertenecientes a este clado se caracterizan por ser herbáceas, con flores hermafroditas, cigomorfas (de simetría bilateral), polinizadas por insectos, por los estambres dispuestos en un círculo y los pétalos de la corola unidos entre sí formando un tubo. El gineceo está formado por dos carpelos soldados. Las flores se organizan a menudo en inflorescencias apretadas, como las espigas de las labiadas y las plantagináceas o los capítulos (cabezuelas) de las Compuestas. Cuatro de las familias más grandes de angiospermas pertenecen a este clado: las asteráceas, las rubiáceas, las lamiáceas y las apocináceas. LAMIDES (EUASTERIDES I) Las Lámides son un grupo de eudicotiledóneas que habían sido nombradas informalmente como Euastéridas I. La sinapomorfia más evidente de las Lámides es la presencia de vasos del xilema con perforaciones simples El clado está compuesto por los siguientes órdenes: Gentianales, Solanales y Lamiales. ORDEN GENTIANALES Familia Apocynaceae Árboles, arbustos, hierbas perennes, lianas, con savia lechosa, que contiene diversos tipos de compuestos como alcaloides, glucósidos cardiotónicos. Hojas opuestas o verticiladas, rara vez alternas, simples, enteras. Inflorescencia en racimos, cimas o solitarias. Flores bisexuales, actinomorfas, cáliz de 4 a 5 sépalos unidos. Corola convoluta de 5 pétalos unidos en un tubo. Androceo de 4 a 5 estambres, insertos en el tubo, filamentos libres o rara vez unidos. Gineceo constituido por un pistilo compuesto de 2 carpelos, con 1 ó 2 lóculos, placentación marginal, ovario súpero, 1 estilo. Fruto un folículo, a veces cápsula, drupa o baya. Semilla plana a menudo con una corona de pelos. En esta familia se encuentran presentes alcaloides indolicos monoterpenicos, alcaloides esteroidales, alcaloides pirrolizidinicos esteres de ácidos fenólicos, cumarinas, heterosidos cardiotónicos (cardenólidos) y flavonoides. Muchas especies de esta familia son notorias por los venenos que contienen, entre ellas Rauvolfia produce el alcaloide reserpina que es capaz de reducir la presión sanguínea y tranquilizar a los pacientes que sufren de esquizofrenia. Familia Rubiaceae En esta familia es característica la combinación de las estípulas interpeciolares, las hojas opuestas o verticiladas, la corola gamopétala y el ovario ínfero. Son plantas herbáceas o pequeños arbustos, con hojas opuestas o en verticilos de 4 – 12, estipuladas, simples y enteras. Las flores se reúnen en inflorescencias de tipo espiga, cabezuelas, cimas, corimbos o panículas, y 114
son hermafroditas o masculinas. El cáliz está formado por 4 – 5 segmentos o no existe. La corola es actinomorfa, rotácea, infundibuliforme o hipocrateriforme, con 3 – 5 lóbulos. Los estambres, 4 – 5, son epipétalos y alternan con los lóbulos de la corola. El gineceo tiene un ovario ínfero, normalmente con 2 lóculos, y en cada uno de ellos tiene uno o más primordios seminales; el estilo es simple o bífido. El fruto, seco o carnoso, se divide en hasta dos partes. Semillas con endospermo. Esta familia se caracteriza por la producción de alcaloides con núcleo de xantina, alcaloides con núcleo indol (simples derivados de b-carbolinas, carbazol y monoterpenicos), alcaloides isoquinoleinmonoterpénicos, alcaloides con núcleo quinolina, alcaloides con núcleo de quinolizidina, taninos condensados. ORDEN SOLANALES Familia Solanaceae Hierbas, arbustos o árboles o algunas veces enredaderas, hojas alternas, simples, sin estípulas, inflorescencias cimosas, flores bisexuales, usualmente actinomorfas o débilmente zigomorfas. Cáliz de 5 sépalos unidos, persistente. Corola de 5 pétalos unidos, rotados a tubulares. Androceo de 5 estambres, insertos en el tubo de la corola y alternos con sus lóbulos, anteras que se abren longitudinalmente o por medio de poros terminales. Gineceo constituido por un pistilo compuesto de 2 carpelos, a veces divididos por un septo falso, con 2 lóculos, óvulos numerosos, placentación axilar, ovario súpero, estilo terminal. Fruto una baya o cápsula, semilla con un embrión curvo o recto dentro de un endospermo. En esta familia se presentan alcaloides esteroidales, alcaloides con núcleo de tropano, alcaloides piridinicos, alcaloides con nucleo quinolizidina. Es una familia de cerca de 85 géneros y 2,800 especies de distribución tropical y templada. El mayor número de géneros (40) se encuentra en Centro y Sudamérica; sólo dos o tres géneros son nativos de Europa y Asia. Familia Convolvulaceae Son hierbas, arbustos o árboles, a menudo trepadoras con savia lechosa. Hojas alternas, simples, lobuladas en varias formas o enteras, sin estípulas. Las inflorescencias presentan disco axilar o en racimos, panículas o flores solitarias. Las flores son bisexuales, actinomorfas; brácteas a menudo grandes y vistosas que a veces forman un involucro. Cáliz de 5 sépalos, generalmente libres, persistente. Corola de 5 pétalos unidos, contorta. Androceo de 5 estambres, epipétalos, insertos hacia la basede un tubo y alternos con los lóbulos. Gineceo constituido por un pistilo compuestos de 2 carpelos unidos, con 1 a 4 lóbulos, óvulos solitarios o pareados, erectos, placentación axilar, ovario súpero, terminal. El fruto comúnmente es una cápsula. Esta familia presenta alcaloides con núcleo tropano. ORDEN LAMIALES Familia Lamiaceae (Labiatae) Comúnmente hierbas, algunas veces arbustos o árboles, tallos cuadrados, con aceites aromáticos. Hojas opuestas o verticiladas, simples con tricomas tectores y glandulares que segregan esencia. Inflorescencias axilares o verticiladas. Flores generalmente bisexuales, zigomorfas. Cáliz de 5 sépalos unidos, a menudo con costillas, persistente, con frecuencia bilabiado. Corola de 5 pétalos unidos, bilabiada. Androceo de 2 ó 4 estambres, didínamos, epipétalos. Gineceo constituido por un pistilo compuesto de 2 carpelos, falsamente tetralocular, placentación basal, ovario súpero, estilo inserto en la base de los lóbulos (ginobásico) estigma 115
bífido en la mayor parte de los casos. Fruto por lo común un grupo de 4 nuececillas. En esta familia puede observarse producción de aceites esenciales. La familia es fuente de aceites esenciales como (Lavandula, Mentha) muchas son ornamentales y hierbas culinarias importantes (Rosimarinus –tomillo y romero-, Ocimum –albahaca-, Origanum –orégano de flor roja-). Comprenden 200 géneros y unas 3,000 especies. Familia Verbenaceae Muchos miembros de esta familia son notables por sus cabezas o racimos de flores pequeñas. Son hierbas, sufrútices o arbustos. Tallos de sección cuadrangular o circu-lar. Hojas opuestas o verticiladas, pecioladas, simples o palmaticompuestas, sin estípulas. Inflorescencia racemosa, a veces espiciforme o en espiga de verticilastros formados por cimas dicasiales opuestas, bracteadas. Flores pentámeras o a veces tetrámeras, hermafroditas. Cáliz actinomorfo o zigomorfo, con lóbulos soldados hasta arriba, raramente con comisuras profundas. Corola zigomorfa, a veces escasamente, gamopétala, bilabiada, con labio superior con 2 lóbulos, generalmente corto, y labio inferior con 3 lóbulos o a veces 2. Androceo formado por 4 estambres epipétalos, alternipétalos, libres, didínamos. Ovario súpero, con 2 carpelos soldados, con 1, 2 ó 4 lóculos a causa de la formación de falsos tabiques, con 1 rudimento seminal erecto en cada cavidad, con placentación axilar. Estilo terminal. Fruto drupáceo o bien esquizocarpo. Algunas especies tropicales son de clara importancia económica por su interés maderable como la teca (Tectona grandis), otras son ornamentales y son cultivadas. Es una familia de cerca de 100 géneros y 2,600 especies de distribución principalmente tropical o subtropical. Verbena officinalis se consideró por algún tiempo como una curatodo, contiene una sustancia con acción hormonal, la verbenalina, de fuerte acción parasimpática. Esta planta produce terpenos, alcaloides, esteroides, fenoles, saponinas, rotenonas, flavonoides, cumaninas, antraquinonas y glicósidos cardiotónicos. OBJETIVOS: 1. Reconocer y describir la morfología general de algunos géneros medicinales pertenecientes a las familias Apocynaceae, Solanaceae, Verbenaceae y Lamiaceae. 2. Establecer las diferencias y/o semejanzas anatómicas e histológicas de los diferentes géneros que se estudian en la presente práctica. 3. Determinar la presencia o ausencia de principios activos en las plantas que se estudian, mediante el uso de reactivos específicos.
MATERIALES: Microscopios Estereoscopios Vidrios de reloj Porta y cubreobjetos Agujas de disección Agua destilada Sudan IV Sulfato férrico Reactivo Dragendorff Café (Coffea arabica L.) Datura sp.
Ipomoea batatas L. Lantana cámara L. Salvia sija (Lippia alba (Mill.) N.E.Brown) Lippia dulcis Trev. Nerium oleander L. Ocimum basilicum L. Rosmarinus officinalis L. (Solanum americanum o S. nigrescens Mill.) Solanum lycopersicon L. Thevetia peruviana (Pers.) K.Schum) Vinca sp. 116
PROCEDIMIENTO: ORDEN GENTIANALES FAMILIA APOCYNACEAE Tome un ejemplar de uno, Vinca sp., narciso, Nerium oleander y chilindrón Thevetia peruviana; observe sus características morfológicas, describa y esquematice. Anexo 6 a) Hábito. b) Hojas: filotaxia, forma, color, nervadura. c) Flores: cáliz, corola, androceo y gineceo. Esquematice, señalando las características distintivas. Hoja de Chilindrón Thevetia peruviana: a) Realice cortes transversales finos de la parte central de la hoja y agrúpelos en un vidrio de reloj con agua destilada y monte uno en agua destilada, obsérvela al microscopio, esquematice y señale las estructuras principales. b) Pruebas histoquímicas: uno de los cortes transversales de la hoja, agréguele el reactivo de dragendorff y observe cómo precipitan los alcaloides. Observe e indique en qué tejido de la hoja se encuentran los alcaloides. FAMILIA RUBIACEAE 1) Tome un ejemplar de Coffea arabica (café) y observe sus características morfológicas, describa y esquematice. a) Hábito. b) Hojas: filotaxia, forma, color, nervadura. c) Flores: cáliz, corola, androceo y gineceo. d) Fruto: forma y longitud (si está presente) Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice cortes transversales de la hoja de café y con ellos las siguientes pruebas histoquímicas: e) Alcaloides Dragendorff f) Taninos Sulfato férrico Indique los resultados de las pruebas histoquímicas. 117
ORDEN SOLANALES FAMILIA SOLANACEAE 1) Tome un ejemplar de Quilete (Solanum americanum Miller ó Solanum nigrescens Mart & Gal.), Tomate (Solanum lycopersicon) y de Datura sp. observe sus características morfológicas, describa y esquematice. a) Hábito y forma de tallo. b) Filotaxia, forma de las hojas (ápice, base, borde). c) Flores: tamaño, simetría, color, forma de la corola, características del gineceo (estilo, estigma, ovario); androceo, estambres conniventes, número, color. d) Fruto: tipo, tamaño. Compare las características observadas con las descripciones teóricas del Anexo 1 y las figuras del Anexo 2. Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice la prueba de Dragendorff a cortes de hoja de quilete. Reporte los resultados obtenidos. 3) Materia médica del Quilete: hojas y frutos secos. 4) Indicación terapéutica de Quilete: afecciones gastrointestinales como cólicos, diarrea, gastritis y úlcera. Enfermedades respiratorias como asma y amigdalitis. Por vía tópica para el tratamiento de enfermedades dermato mucosas. Como reconstituyente. FAMILIA CONVOLVULACEAE 1) Tome un ejemplar de camote Ipomoea batatas y observe sus características morfológicas, describa y esquematice. a) Hábito y forma de tallo. b) Filotaxia, forma de las hojas (ápice, base, borde). c) Flores: tamaño, simetría, color, forma de la corola, características del gineceo (estilo, estigma, ovario); androceo, estambres conniventes, número, color. d) Fruto: tipo, tamaño. Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice la prueba de Dragendorff a cortes de hoja de camote. Reporte los resultados obtenidos. ORDEN LAMIALES FAMILIA LAMIACEAE (LABIATAE): 1) Tome un ejemplar de Albahaca, Ocimum basilicum y uno de Romero, Rosmarinus officinalis y observe sus características morfológicas. Describa y esquematice: a) Hábito y forma del tallo. b) Hojas: filotaxia, composición. c) Flores: tamaño, simetría, color, descripción de pétalos tomando en cuenta la fusión de los mismos, forma de la corola. 118
d) Propiedades organolépticas. Esquematice, señalando las características distintivas, compare con las figuras del Anexo 4. 2) Pruebas histoquímicas: a) Realice varios cortes finos transversales de la hoja de Romero y colóquelos en un vidrio. b) Seleccione los mejores, haga montajes y describa las estructuras internas, compare con la cartilla micrográfica adjunta. Anexo 5. c) Monte uno o dos en un portaobjetos y haga la prueba correspondiente para: Aceite esencial. FAMILIA VERBENACEAE: 1) Tome un ejemplar de Cinco negritos, Lantana camara y una muestra de Salvia Sija, Lippia alba. Obsérvelas y descríba: 1. Hábito y forma de tallo. 2. Filotaxia, composición. 3. Inflorescencia: tipo. 4. Flor: simetría, tamaño, color, descripción de verticilos (lobulados, dentados, bilabiados), posición del ovario, posición del estilo. Compare las estructuras con el Anexo 3. Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Tome láminas fijas de diafanizados de la hoja de Lippia dulcis (Orozus) y de Lippia alba (Salvia Sija). Obsérvelas en el microscopio, esquematice y describa las partes principales presentes en dichas láminas. 3) Realice corte de la hoja de cinco negritos y realice con ellas la prueba de alcaloides. Reporte los resultados obtenidos. BIBLIOGRAFIA: 1. Cáceres, A. (1999). Plantas de Uso Medicinal en Guatemala (1a ed.). Guatemala: USAC. 2. Cronquist, A. (1991). Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York: Columbia University Press. 3. Gattuso, M., y Gattuso, S. (1999). Manual de Procedimientos para el Análisis de Drogas en Polvo. Argentina: Editora UNR. 4. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal (Trad 2a.). México: McGraw Hill. 5. Standley, P.C., y Steyermark, J.A. (1958). Flora of Guatemala: Fieldiana Botany (Vol. 24.) Illinois: Chicago Natural History Museum.
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ANTECEDENTES: Investigue lo que a continuación se le pide y preséntelo el día de la práctica: 1. Investigue las características morfológicas de la Subclase Asteridae. 2. Investigue las sustancias ergásticas que son características de la familia Apocynaceae. 3. ¿Qué es un estilo ginobásico? 4. ¿Cuál de las familias en esta práctica se caracteriza por presentar este tipo de estilo? 3. ¿Qué significa el término connivente?
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Anexo 1 DESCRIPCIÓN BOTÁNICA: Solanum americanum, hierba de 1 m de alto, tallo pubescente. Hojas en pares o solitarias, 3-14 cm de largo, lanceoladas, ápice agudo. Inflorescencia internodal, racemiforme, pedunculada, pocas flores. Flores en cálices de 1-2 mm, lóbulos ovalados, agudos; corola blanca, limbo partido, 5-8 mm de ancho, estilo 2.5-3.5 cm de largo, más largo que los estambres, ovario globoso. Frutos globosos, negros al madurar, 4-8 mm de diámetro; semillas pequeñas. S.nigrescens, es un hierba de 0.5-2 m de alto; tallo piloso. Hojas en pares o solitarias, diferentes en tamaño, similares en forma, enteras o dentadas, lanceoladas, 3-18 cm de largo, ápice acuminado, base atenuada, racemiforme; pedúnculos 1-3 cm de largo; cáliz 1-1.5 mm de largo, lobulado; corola blanca o lila, mancha obscura en la base; filamentos ciliados; anteras 34 mm de largo; ovario glabro. Fruto globoso, 4-7 mm de diámetro; semillas 1-1.5 mm de largo. CLAVE DICOTOMICA: Calyx pilosulous, the calyx lobes only slightly accrescent in fruit; inflorescences longpedunculate, filaments and style pubescent. Anthers 1.5-2 mm long; corolla limb 5-7.5 mm wide; sepals reflexed in fruit; lauland species, rarely found above 1,500 m…………................….………………..S. americanum Anthers (2.5) 3 - 4 mm long; corolla limb 6.5 - 10 (-16) mm wide; sepals spreading to slightly ascending in fruit; ranging from 1,500 - 3,900 m..........................................................................................................….S. nigrescens
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Anexo 2. FAMILIA SOLANACEAE
a. Hábito d. vista lateral de la flor g. Fruto
b. vista frontal de la flor e. Androceo h. semilla
c. Pistilo f. Corte transversal del ovario
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Anexo 3. FAMILIA VERBENACEAE
a. Hábito d. Vista frontal de la flor g. Pistilo
b. Botón floral e. Anteras h. corte transversal del ovario
c. Anteras f. Vista lateral de la flor i. Corola abierta, mostrando los estambres fusionados a la corola
k. Corte longitudinal del ovario
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Anexo 4. FAMILIA LAMIACEAE
a. Hábito d. Ovario y nectario basal
b. Flor e. Ovario y nectario basal
g. porción longitudinal de la corola con uno de los estambres k. Botón floral
h. Antera m. labio inferior del brote de la corola
c. Pistilo, con nectario basal f. Sección longitudinal del ovario, sin el estilo i. Vista frontal de la flor n. Fruto
o. Vista frontal del fruto
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Anexo. 5 CARTILLA MICROGRAFICA DE Rosmarinus officinalis L.
(1) Epidermis superior e hipodermis (3) Tricomas glandulares (5) Epidermis interna del cáliz (7) Epidermis interna de la corola (9 )Tricomas de cobertura (11) Tejido vascular
(2) Epidermis inferior de la hoja con estomas y tricomas (4) Fibras pericíclicas (6) Epidermis externa de la corola (8) Granos de polen (10) Cortes de lámina con epidermis superior (12) Epidermis del tallo.
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Anexo 6. Esquema morfológico de Apocynaceae
Apocinaceae. a) Habito; b) flor; c,d) Porciones de flor, con la corola abierta; e) Ovario y disco nectario; f) Fruto abierto; g) Sección de ovario; h) semilla 126
Anexo 7. Esquema morfológico de Rubiaceae
Rubiaceae. a) Hábito; b)
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Anexo 8. Esquema morfológico de Convolvulaceae
Convolvulaceae. a) Habito; b) Primordio de flor; c) Flor desde arriba; d) Estambres; e) Caliz y pistilo; f) Pistilo y nectarios; g) Sección de ovario; h,i) vista de fruto
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PRACTICA 11. EUDICOTILEDONEAS ASTERIDES: CAMPANULIDES (EUASTERIDES II). INTRODUCCION Las Campanúlides son un grupo de eudicotiledóneas que habían sido nombradas informalmente como Euastérides II. Algunos atributos son característicos del grupo: las hojas alternas, con márgenes serrados o dentados, las flores epíginas, con una fusión tardía de los pétalos, filamentos de los estambres libres y los frutos indehiscentes. Este clado está compuesto por los siguientes órdenes: Asterales, Aquifoliales, Apiales y Dipsacales.
CAMPANULIDES (EUASTERIDES II) ORDEN ASTERALES Familia Asteraceae Hierbas o menos frecuentemente arbustos, a veces árboles pequeños, glabras o con diferentes tipos de tricomas. Comúnmente almacenan carbohidratos como polifructosanos y comúnmente producen poliacetilenos. Las hojas son alternas o menos comúnmente opuestas, simples y enteras o dentadas a veces compuestas o lobuladas. Las inflorescencias están formadas por una o muchas cabezas densas con varias a muchas flores sésiles sobre un receptáculo común. La cabeza con un involucro de brácteas en la base. El receptáculo de la cabeza puede ser plano o convexo, cónico o cilíndrico. Las flores son epíginas, simpétalas, bisexuales o algunas pistiladas o neutras o funcionalmente estaminadas. Las perfectas o funcionalmente estaminadas, con anteras soldadas o conniventes, formando un tubo, dentro del cual se libera el polen y es empujado hacia fuera por el crecimiento del estilo: mecanismo especial. Las cabezas pueden ser radiadas, discoides, disciformes o liguladas, según la disposición de las flores. Cabezas radiadas: flores pistiladas (o neutras) en los márgenes del capítulo y las flores perfectas (o funcionalmente estaminadas) en el centro. Las flores de los márgenes son llamadas flores del radio y las flores centrales son las flores del disco. Las flores del radio son tubulares en la base y se prolongan en la parte exterior a una lígula o radio que representa 3 lóbulos de la corola pentámera ancestral, los otros 2 lóbulos son reducidos u obsoletos. La corola de las flores del disco tubular, actinomorfa de 5 lóbulos. Cabezas discoides: sólo con flores del disco. Cabezas disciformes: flores del disco en el centro y flores marginales pistiladas, con una corola tubular reducida, sin lígula; o sólo con ese tipo de flores pistiladas. Cabezas liguladas: todas las flores perfectas con una corola parecida a las flores marginales de las cabezas radiadas, pero con 5 lóbulos. El cáliz en todos los tipos de flores está modificado, formando un pappus o vilano característico en el borde superior del ovario y fruto, a veces obsoleto. El pappus formado por 129
dos o varias escamas, aristas o cerdas capilares o plumosas. Estambres 5, filamentos adheridos al tubo de la corola; anteras casi siempre con un apéndice apical que en tres tribus (Cynareae, Inuleae y Mutisieae) se prolonga en unas colas basales. El gineceo consta de 2 carpelos, formando un ovario ínfero, unilocular, con un estilo dividido en dos ramas cortas o largas, que se separan hasta después de empujar el polen. En las flores funcionalmente estaminadas, las ramas del estilo no están bien desarrolladas y no se separan.Las Asteráceas producen cumarinas, sesquiterpenlactonas, aceites esenciales, alcaloides con núcleo de piridina y pirrolizidina. La familia consiste en más de 1,100 géneros y probablemente hasta 20,000 especies, de distribución cosmopolita pero mejor representada en regiones templadas y subtropicales que no tienen bosques densos. Muchas de estas especies son utilizadas en medicina tradicional. ORDEN AQUIFOLIALES Familia Aquifoliaceae Árboles y arbustos caducifolios o siempreverdes. Hojas alternas, rara vez opuestas, coriáceas, simples, con bordes enteros, dentados o espinosos, normalmente con estípulas. Flores regulares, unisexuales, raramente bisexuales, muy pequeñas, en disposición axilar, solitarias o en fascículos o cimas; cáliz con 3-6 sépalos, corola con 4-6 pétalos separados o unidos en la base y estambres normalmente en igual número que los pétalos, libres o ligeramente soldados a ellos. Fruto drupáceo o bacciforme, conteniendo 3-8 semillas duras. La familia comprende 3 géneros y alrededor de 400 especies repartidas por las regiones templadas y tropicales, aunque poco representada en África y Australia. El género más conocido y numeroso es Ilex, los acebos, consta de alrededor de 600 especies. Ilex paraguarensis comúnmente conocido como mate se consume como infusión caliente de la hoja seca y tostada. Sus hojas también tienen valor comercial, industrial, vitamínico, propiedades estimulantes, tónicas, diuréticas y contra la obesidad. ORDEN APIALES Familia Apiaceae Tallo a menudo estirado; con la médula blanda o fistulosa. Hojas alternas, casi siempre con una vaina abrazadora grande, enteras, partidas, graminoides o más frecuentemente recortadas, o, hendidas, muy a menudo divididas, suelen tener resinas y alcaloides. Flores generalmente hermafroditas más o menos actinomorfas; cáliz con 5 sépalos pequeños o nulos; corola con 5 pétalos, frecuentemente lobulados; androceo con 5 estambres; gineceo ínfero bicarpelar con 2 estilos, con la base ensanchada formando un estilopodio, los cuales a su vez forman un disco; cada carpelo con dos partes, comisura y dorso, este último puede estar ornamentado. Inflorescencias en umbela compuesta, raramente en umbela simple o capituliforme. En la base de los radios de la umbelas primarias suele haber un involucro de brácteas, en ocasiones llamativas, mientras que en la base de los radios de la umbelas secundarias o umbeculas suele hallarse un involucelo de bracteolas. Frutos secos, derivados del tipo aquenio, esquizocarpicos, que cuando están maduros se separan en dos mericarpos monospermos, quedando unidos al peciolo por el carpóforo. Cada mericarpo suele presentar costillas entre las que se pueden presentar costillas secundarias, bajo ellas puede haber canales oleiferos y estrías. Se puede observar la presencia de cumarinas, alcaloides con núcleo de piridina, flavonoides. La importancia económica de las umbelíferas se debe, esencialmente, a la 130
presencia de aceites volátiles en muchas especies que son utilizadas como especias, como plantas aromáticas o como plantas medicinales; entre ellas el anís, Pimpinella anisum y el comino, Carum carvi. Familia Araliaceae Árboles de madera blanda, arbustos, lianas leñosas o hierbas perennes. Hojas alternas o rara vez opuestas o verticiladas, grandes por lo común, pinnaticompuestas o palmaticompuestas, o divididas, palmatilobuladas o enteras. Flores pequeñas, dispuestas en umbelas que en ocasiones se reúnen en otras inflorescencias. Son hermafroditas o algunas unisexuales, regulares o irregulares, epíginas o a veces hipóginas, generalmente pentámeras. Cáliz formado por pequeños dientes, reducido o ausente a menudo. Corola con (3)5(12) pétalos, libres, en ocasiones connados en la base, caduca. Androceo con mismo número de estambres que pétalos, con los que alternan; en ocasiones numerosos. Gineceo formado por 2 – 5 (más) carpelos unidos; el ovario es ínfero y plurilocular. Tiene tantos estilos como carpelos, libres o soldados en uno único, engrosado en la base formando un estilopodio que confluye con el disco nectarífero. El fruto es una drupa con tantos pirenos como carpelos, baya o en ocasiones esquizocarpo. En esta familia se producen alcaloides con núcleo quinolina. ORDEN DIPSACALES Familia Valerianaceae Son hierbas anuales, bianuales o perennes, raramente arbustos, comúnmente con un olor fétido característico, particularmente en las muestras herborizadas; plantas hermafroditas, dioicas, ginodioicas o poligamodioicas. Hojas opuestas, decusadas, simples a pinnatífidas o pinnaticompuestas, a veces envainadoras en la base; pecioladas o apecioladas, estípulas ausentes. Inflorescencias cimosas, comúnmente un tirso compacto, o un dicasio simple o compuesto, flores irregulares; cáliz de 5 sépalos foliáceos, obsoleto o variadamente modificado, comúnmente dividido en numerosos segmentos plumosos que persisten cuando está en fruto; corola simpétala, frecuentemente gibosa o espolonada, con 5 lobos imbricados; estambres 1–4, epipétalos, alternos con los lobos de la corola, anteras con 2 tecas, dehiscentes longitudinalmente; ovario ínfero, 3carpelar, con 2 lóculos estériles y 1 fértil, éste con un óvulo sencillo, pendiente, anátropo, estilo 1, estigmas 3. Fruto una cipsela. Las Valerianáceas contienen alrededor de 400 especies en 12 géneros. En Valeriana officinalis (valeriana), se producen sesquiterpenos como ácidos valerénico y acetoxivalerénico, e iridoides que reciben el nombre de valepotriatos. Esta planta se utiliza por sus propiedades como sedante y calmante, manifestaciones neurasténicas (insomnio, neurosis, calambres abdominales, en las alteraciones menopáusicas) y como antiespasmódico. OBJETIVOS 2. Conocer la morfología vegetal de la Familia Asteraceae. 3. Identificar y reconocer los diferentes tipos de capítulos y flores que presentan las especies de Asteraceae que se estudian en la presente práctica.
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MATERIALES: Estereoscopios Pinzas Agujas de disección Vidrios de reloj Amargón (Taraxacum officinale Weper) Apio (Apium graveolens L.)
Ginseng (Panax ginseng C.A.Mey.) Girasol (Helianthus annus L.) Illex sp. Pericón (Tagetes lucida Cav) Tres Puntas (Nuerolaena lobata (L.) Cass.)
PROCEDIMIENTO: ORDEN ASTERALES FAMILIA ASTERACEAE: 9) Tome un ejemplar de Girasol (Helianthus annus), haga un corte longitudinal del capítulo e identifique de acuerdo con el esquema (Anexo No. 1) todas las partes de la inflorescencia, incluido el involucro. Dibuje la planta completa. 10) Tome una flor tubular y una ligulada del girasol, e identifique sus partes. Indique además el sexo de las flores. Ubique el vilano, y descríbalo (ver Anexo No. 2). c) Tome un ejemplar de Amargón (Taraxacum officinale) y observe la presencia de látex en el tallo. Describa el involucro. Observe además las flores del disco y del radio. Anote las características la corola, vilano, aquenio y sexo de las flores. Dibuje la planta completa. Esquematice, señalando las características distintivas. 11) Tome un ejemplar de Pericón (Tagetes lucida), dibuje la planta completa y describa lo siguiente: a. La inflorescencia (corimbo de capítulos) b. número de flores liguladas en el capítulo, forma de la corola, sexo de las flores c. número de flores tubulares en un capítulo, forma de la corola, sexo de las flores d. características del involucro, número de filarios. Observe al estereoscopio las glándulas de aceite en los filarios. e. observe las glándulas de aceite en las hojas y tallos. f. ubique el vilano y descríbalo. d.Compare sus esquemas con los Anexos 3 y 4. Esquematice, señalando las características distintivas. 12) Con la información obtenida, complete la tabla adjunta. 13) Con la hoja de Pericón haga cortes transversales y observe: a. presencia o ausencia de tricomas, si los hay de qué tipo son b. describa las características de la epidermis c. describa las características del mesófilo d. haga una prueba de aceites volátiles y reporte el resultado e. observe si hay presencia de cristales. 132
14) Realice la técnica de semidiafanizado con fragmento de la hoja Tres Puntas (Nuerolaena lobata (L.) Cass.), haga montajes con safranina al 1% y esquematice (Anexo 5). TABLA DE LAS CARACTERISTICAS DE LAS FLORES DE ASTERACEAE Especies 1
2
3
Características Nombre científico Nombre común Hábito Filotaxia Hojas Inflorescencia (tipo) Tipo de cabeza Sexo ♀ ó ♂
Ligulada Disco Ligulada
Simetría (Actinomorfa o Disco Zigomorfa) Androceo Ligulada (Tipo y número de Disco estambres) Ligulada Gineceo (posición del ovario) Disco Fruto Vilano (naturaleza) Involucro libre o soldado Observaciones 8) Realice cortes transversales de la hoja de Girasol y con ellos la prueba de alcaloides utilizando el reactivo de Dragendorff. Reporte los resultados obtenidos. 133
ORDEN AQUIFOLIALES FAMILIA AQUIFOLIACEAE 1) Tome un ejemplar de Illex sp., obsérvelas y descríba: a) Hábito b) Filotaxia; forma; margen; coloración en el haz y envéz; consistencia c) Flores: posición, simetría, posición del ovario, petalos parcialmente fusionados d) Frutos: tipo, longitud y coloración (si está presente). 2) Realice pequeños cortes de la corteza de Acebo (Ilex) y aplique una gota de reactivo de Dragendorff para alcaloides. Realice lo mismo pero agregando una gota de sulfato ferrico para taninos. Reporte los resultados de la prueba en una tabla. ORDEN APIALES FAMILIA APIACEAE 1) Tome un ejemplar de Apio, Apium graveolens L., obsérvelas y descríba: a) Hábito b) Morfología del tallo c) Hojas: filotaxia; forma de unión al tallo (envinado); filotaxia; forma y margen. d) Flores: tipo de inflorescencia; disposición; simetría; número de verticiloso florales; forma; número de estambres; posición del gineceo; número de carpelos. e) Frutos: tipo y longitud (si está presente) Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice un corte transversal de la hoja de apio; añada reactivo de dragendorff y observe cómo precipitan los alcaloides. Reporte los resultados obtenidos. FAMILIA ARALIACEAE 1) Tome un ejemplar de Ginseng, Panax ginseng., obsérvelas y descríba: a) Hábito b) Morfología del tallo c) Hojas: filotaxia; forma de unión al tallo (envinado); filotaxia; forma y margen. d) Flores: tipo de inflorescencia; disposición; simetría; número de verticiloso florales; forma; número de estambres; posición del gineceo; número de carpelos. e) Frutos: tipo y longitud (si está presente) Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice un corte transversal de la hoja de Ginseng; añada reactivo de dragendorff y observe cómo precipitan los alcaloides. Reporte los resultados obtenidos. ORDEN DIPSACALES FAMILIA VALERIANACEAE. 1) Tome un ejemplar de Valeriana officinalis, obsérvelas y descríba: a) Hábito b) Olor c) Hojas: simples o compuestas; filotaxia; simples o pinadas; paciolo. d) Flores: tipo de inflorescencia; disposición; simetría; número de sépalos; número de estambres; número de carpelos en el ovario. 134
d) Frutos: tipo y longitud (si está presente) Esquematice, señalando las características distintivas. 2) Realice un corte de la hoja de Valeriana officinalis K observe las siguientes estructuras: células resinosas pardas, vasos conductores, células pétreas rectangulares.
BIBLIOGRAFIA: 2. Cronquist, A. (1991). Integrated System of Classification of Flowering Plants, New York: Columbia University Press. 3. Jones, S. (1987). Sistemática Vegetal. (Trad 2a.). México: McGraw Hill. 4. Standley, P.C., y Steyermark, J.A. (1958). Flora of Guatemala: Fieldiana Botany (Vol. 24.) Illinois: Chicago Natural History Museum. ANTECEDENTES 1. 2. 3. 4.
Investigue previo a la Práctica, los siguientes términos: Aquenio Cipsela Lígula Vilano
Investigue en qué consta la materia médica e indicación terapéutica de las siguientes especies: 5. Taraxacum officinale Weber (amargón) 6. Tagetes lucida Cav. (pericón) 7. Tanacetum parthenium (L.) Schultz-BIP (altamiza) 8. Valeriana officinalis L.(valeriana)
De al menos dos ejemplos de los usos terapéuticos que presentan las plantas mencionadas en la pregunta anterior.
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Anexo No. 1: Corte transversal de cabeza radiada:
Anexo No. 2: Diagrama de las partes de una flor del disco y una flor del radio
136
Anexo 3. Pericón (Tagetes lucida Cav.) b
a
c
Fotografía 1. Capítulo de T. lucida Cav. A) flores del radio; b) flores del disco y c) involucro en donde son observables las glándulas de aceite esencial. Aumento 6.5x a
b
c
d
Fotografía 2. Involucro del capítulo del T. lucida Cav. a) filario; b) lóbulo del Hilario c) y d) glándulas de aceite esencial. Aumento 6.5x y 40x. a
b Fotografía
3.
c
d
e
Flores del radio: a) lígula; b) estigma y c) aquenio. Aumento 6.5x. Gineceo y androceo de la flor del disco: d) estambres singenéticos y e) estigma excerto. Aumento 16x.
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Anexo No. 4 Morfología de la inflorescencia de un ejemplar de Tagetes
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Anexo No. 5. Cartilla micrográfica de Nuerolaena lobata (L.) Cass.
Corte transversal de hoja de N. lobata donde se observa B1 cutícula, B2 epidermis del haz, B3 mesófilo indiferenciado, B4 epidermis del envés C. Células de epidermis en vista superficial. D. Tricomas tectores de tipo osteolado. E. Tricoma tector con textura verrucosa. F. Tricomas glandulares de tipo surculado. G. Estoma de tipo anomocítico. G1. Poro estomático G2. Células oclusivas H. Colénquima angular en corte de pecíolo. H1 Colénquima angular H2. Parénquima
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Anexo 6. Esquema morfológico de Aquifoliaceae
Aquifoliaceae. a,b) Habito; c) Pireno; d) Sección de pireno y semilla; e) nodo con estipula; f) Flor estaminada; g) Sección de ovario; h) Fruto; i) Flor perfecta desde arriba; k) Sección de flor perfecta
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Anexo 7. Esquema morfológico de Apiaceae
Apiaceae. a) Habito; b) flor desde arriba; c) Flor de lado, con 2 pétalos y 2 estambres removidos; d,e) antera; f) Sección de Pistilo; g) Fruto con carpoforo bifido; h) Sección de mericarpio 141
Anexo 8. Esquema morfológico de Araliaceae
Araliaceae. a) Hoja; b) Foliolo; c) Hábito; d) Porción de la inflorescencia; e,f) Flor; g) Sección de ovario; h) Primordio de flor; i) Vista izquierda y a lo alto del Fruto 142
Anexo 9. Esquema morfológico de Valerianaceae
Valerianaceae. a) Habito; b) flor; c) Flor con la corola abierta mostrando su estructura interna; d) Sección de ovario; e) Fruto inmaduro, con el cáliz no expandido; f) Fruto maduro; g) Sección de fruto; h,i)Fruto de Plectritis macrocera 143
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