Manual Bd 1 100.en.es
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manual de microbiologia...
Description
Difco • y Bundesliga • Manual Manual de Microbiología Medios de Cultivo Segunda edicion
editores
Mary Jo Zimbro, BS, MT (ASCP) David A. Energía, Ph.D. Sharon M. Miller, BS, MT (ASCP) George E. Wilson, MBA, BS, MT (ASCP)
Julie A. Johnson, BA BD Diagnostics - Sistemas de diagnóstico
7 Loveton Círculo Sparks, MD 21152
Manual Difco Preface.ind 1
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Derechos de autor • 2009
Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Círculo
PO Box 999 Sparks, Maryland 21152
ISBN 0-9727207-1-5 Todos los derechos reservados
Impreso en los Estados Unidos de América
AOAC es una marca comercial y Métodos Rendimiento Probado es una marca de servicio de la AOAC International. ATCC es una marca registrada de la American Type Culture Collection. CHROMagar es una marca comercial de Dr. A. Rambach. Bacto, y bitek Difco son marcas registradas de Difco Laboratories, Inc., subsidiaria de Becton, Dickinson and Company. A menos que se indique lo contrario, BD, BD Logo y todas las demás marcas comerciales son propiedad de Becton, Dickinson and Company.
• 2009 BD.
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Tabla de contenido
Contenido Prefacio ................................................. .................................................. .................................................. .......... v Acerca de este manual .................................... .................................................. .................................................. ... VII Historia de BD Diagnostics .......................................... .................................................. ..................................... ix Sección I: Monografías ........ .................................................. .................................................. ........................... 1 Historia de la Microbiología y Medios de Cultivo ............................................ .................................................. 3 ..... Requisitos crecimiento de microorganismos ............................................... .................................................. ............ 4
Tipos funcionales de Medios de Cultivo ............................................. .................................................. ................... 5 Medios de cultivo Ingredientes - agares ............................................. .................................................. .................... 6
Medios de cultivo Ingredientes - Peptonas y hidrolizados ........................................... ....................................... 7 La esterilización de medios ................................................ .................................................. ....................................... 13
Organismos de Control de Calidad ............................................... .................................................. ...........................15
Los análisis típicos ................................................ .................................................. ........................................... 17
Sección II: Información General Técnica ............................................ .................................................. .......... 19 Medios de cultivo deshidratados ............................................... .................................................. ........................... 21
Preparado plateado Medios ............................................... .................................................. .................................. 25 Preparado Tubed, embotellada y Mycoflask ™ Medios ................................................. ........................................... 27
Sección III: Medios de cultivo e ingredientes ........................................... .................................................. .......... 31 Sección IV: Manual de referencia ............................................. .................................................. ............................ 635 Medios de cultivo para grupos específicos de microorganismos ........................................... ..................................... 637
Tablas de aplicación ................................................ .................................................. ..................................... 644 Guía de selección de agar ............................................... .................................................. ............................... 644
Prueba de Eficacia antimicrobiana ............................................... .................................................. .......... 645 Detección de residuos antimicrobianos ............................................... .................................................. ................. 646
Guía de selección de bionutriente ............................................... .................................................. ..................... 647 Las pruebas de cosméticos ................................................ .................................................. ..................................... 648
El muestreo ambiental ................................................ .................................................. ......................... 650 Alimentos, productos lácteos y Beverage Testing ............................................ .................................................. ............... 651 Pruebas de alimentos para E coli O157: H7 usando Bundesliga ™ CHROMagar ™ O157 ................................................. ..... 655 Pruebas de alimentos para Listeria utilizando Bundesliga ™ CHROMagar ™ Listeria ................................................. ................. 656 Pruebas de alimentos para Salmonela utilizando Bundesliga ™ CHROMagar ™ Salmonella ................................................. ....... 657 Pruebas de alimentos para Staphylococcus aureus utilizando Bundesliga ™ CHROMagar ™ El estafilococo aureus ................................... 658
Guía de Selección Genética Molecular .............................................. .................................................. .......... 659 Las pruebas farmacéuticas por USP .............................................. .................................................. ................ 660
USP Capítulo : Pruebas de enumeración microbiana .......................................... ........................................... 661
USP Capítulo : Las pruebas de organismos incluidos ......................................... ........................................... 662
Prueba veterinaria ................................................ .................................................. ................................... 663 Agua / Aguas Residuales Prueba .............................................. .................................................. ......................... 666 Prueba de agua para Enterococcus utilizando Bundesliga ™ mEI Agar ................................................ ............................. 669 Prueba de agua para E coli utilizando Bundesliga ™ Modificado MTEC Agar ............................................... ....................... 670
Prueba de agua para coliformes totales y E coli utilizando Bundesliga ™ MI Agar ................................................ .......... 671
Tablas de productos ................................................ .................................................. ........................................... 672 Medios de Cultivo - Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana ............................................ .................................... 672
Medios de Cultivo - Uso General ............................................ .................................................. ............... 672 Medios de Cultivo - Suplementos / agentes selectivos ........................................... .............................................. 673
Peptonas e hidrolizados (lista de productos) ........................................... .................................................. 674 Peptonas por Categoría ............................................... .................................................. .............................. 675
Los análisis típicos - peptonas y hidrolizados ............................................ .............................................. 676 Índice de productos ................................................ .................................................. ................................................ 679
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Primera edición 2003 Segunda edición 2009
Copyright 2009 por Becton, Dickinson and Company Sparks, Maryland 21152 EE.UU.
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Prefacio
Prefacio Nos complace presentar la segunda edición de la Difco y el BBL manual. La primera edición, publicada en 2003, sustituyó a la Manual Difco, ed 11. (1998) y la Manual de los productos BBL y procedimientos de laboratorio, 6ª ed. (1988), manuales que fueron publicados por primera vez en 1927 y 1948, respectivamente. los Difco y el BBL Manual se dedica exclusivamente a medios de cultivo y reactivos asociados ofrecidos por BD como Difco ™ y Bundesliga ™ las marcas de medios de cultivo deshidratados y Bundesliga ™ marca prepara plateado, entubada y los materiales en frascos. En este manual, más de 170 años de experiencia combinada de medios se reunieron en un texto educativo y de referencia.
Para la segunda edición de la Difco Manual de BBL, hemos añadido nuevos productos, productos descontinuados retirados y actualizaciones generales incorporados en todas partes. De especial interés, las descripciones de los medios afectados por la armonización de las farmacopeas (Estados Unidos, Europa y Japón) se han actualizado en consecuencia.
Se informa al lector de que estos productos son para uso por o bajo la supervisión de los microbiólogos y otros profesionales cualificados por formación y experiencia para manejar los microorganismos patógenos y las muestras y las muestras que contienen o se sospecha que contenerlos. Además, se espera que el usuario va a estar bien familiarizado con los usos previstos de las formulaciones presentadas y seguirá los procedimientos de prueba descritos en los compendios oficiales aplicable y textos estándar o el manual de procedimientos del uso de laboratorio.
Además de proporcionar este manual como un recurso educativo, BD Diagnostics ofrece una gran variedad de materiales y servicios educativos:
•
BD Bionutrientes ™ Manual Técnico - un manual dedicado a los productos utilizados en el cultivo celular y la producción de la fermentación microbiana.
• BD Labo ™ - un boletín de noticias que proporciona las últimas noticias sobre microbiología e ideas para el laboratorio clínico.
•
Técnica y Soporte de producto - un grupo de especialistas disponibles para contestar preguntas acerca de cualquiera de nuestros productos o procedimientos.
•
Nuestro sitio Web, www.bd.com/ds
Se agradece el aliento y el apoyo recibido de los microbiólogos en todo el mundo. Nuestro agradecimiento se extiende, también, a los que han contribuido con su talento y su tiempo a la creación de este manual y sus predecesores. Es nuestro deseo de seguir ampliando nuestros servicios para el avance de la microbiología y ciencias relacionadas.
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Acerca de este manual
Acerca de este manual los Difco y ™ Bundesliga ™ Manual presenta en uno descripciones de volumen de los medios ofrecidos por BD como Difco ™ y Bundesliga ™ las marcas de medios de cultivo deshidratados y Bundesliga ™ marca prepara plateado, entubada y los materiales en frascos. Puesto que los productos y el etiquetado se están revisando continuamente, la información proporcionada en este manual es reemplazada por listas de productos actuales y etiquetado, cuando difiere de las descripciones en este manual (por ejemplo, etiquetas de productos, prospectos, certificados de análisis, etc.). Disponibilidad de productos, consulte nuestro catálogo de productos (en línea) o póngase en contacto con su distribuidor o representante local de BD. Este manual está organizado en cuatro secciones principales:
1. monografías relativas al desarrollo, control de calidad y la utilización de medios de cultivo microbiano. 2. Información técnica general sobre medios de cultivo deshidratados y preparados. 3. Descripción del producto para medios de cultivo y los ingredientes.
4. Sección de referencia que contiene cuadros que resumen las aplicaciones industriales y clínicos y descripciones de medios relacionados y medios de análisis de componentes.
descripciones de productos para medios de cultivo deshidratados contienen las siguientes secciones: Uso previsto
Resumen y explicación Principios de la Fórmula Procedimiento (e) Precauciones (según corresponda) Instrucciones de Preparación a partir de procedimientos de control de calidad esperado deshidratada usuario del producto Resultados
Limitaciones del procedimiento (según corresponda) Referencias disponibilidad
Como se destaca en el prefacio, las descripciones de los medios de comunicación que se hace referencia en los capítulos y de la recientemente armonizados Farmacopea de
los Estados Unidos ha sido actualizado. Específicamente, la sección en “Control de calidad del usuario” contiene las informaciones necesarias para verificar que estos medios se ensayaron de acuerdo con el Farmacopea de los Estados Unidos, la Farmacopea Europea y Farmacopea japonesa - tanto para los medios de cultivo deshidratados y productos de los medios de cultivo preparados. En otras palabras, los medios enumerados en “disponibilidad” y se identifican con una marca personal (†), han sido probados y cumplen USP, EP y JP especificaciones de rendimiento en su caso. Tenga en cuenta también que para estos medios, la “fórmula” proporcionada es la misma para ambos productos de medios deshidratados y preparados.
Para los medios ofrecidos solamente como se preparó plateado, tubed o medios embotelladas, las descripciones se abrevian; descripciones completas, incluyendo las secciones para “Fórmula” y “Control de calidad del usuario”, se proporcionan en el acompañamiento de los insertos del envase o el
Bundesliga ™ Control de calidad y de información del producto Manual para el plateado y el entubado de Medios. Este manual está disponible en línea en http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/qcpiManual.asp oa petición del BD Servicios Técnicos (en papel). cepas Colección de Cultivos Tipo Americanos (ATCC ™), o derivados de los comercialmente disponibles de estas cepas, se especifican para la realización de procedimientos de control de calidad en medios de laboratorio preparada (y comercialmente preparada). Cuando aparece en la sección “Control de calidad del usuario”, nombres organismo se ajustan en general al etiquetado ATCC. En el texto, nombres abreviados se pueden utilizar; por ejemplo, los serotipos de Salmonella enterica.
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Acerca de este manual, cont.
Este manual incluye los números de catálogo internacionales e iconos métodos estándar. Bajo “disponibilidad”, números de catálogo se proporcionan para los medios en placa preparados fabricados en Europa, Japón y México que son comparables a las formulaciones fabricadas en los Estados Unidos. Además, se proporcionan los iconos que indican los medios enumerados en “métodos estándar” “oficiales” y las publicaciones. Estos iconos representan:
AOAC Official Methods of Analysis de la AOAC International 1
Manual Analítico Bacteriológico BAM (FDA) 2 CCAM El Compendio de Métodos Analíticos (Canadá) 3 COMPF Compendio de métodos para el examen microbiológico de alimentos (APHA) 4
Farmacopea Europea 5
EP
Manual de la EPA para la certificación de los laboratorios Análisis de Agua Potable (EPA) 6
ISO
Organización de Estándares Internacionales 7
JP
Farmacopea japonesa 8
Métodos estándar SMD para el examen de los productos lácteos (APHA) 9
Standard Methods SMWW para el examen de agua y aguas residuales (APHA) 10 USDA USDA / FSIS Laboratorio de Microbiología Guidebook 11 USP
La Farmacopea de los Estados Unidos 12
Para muchos medios preparados, se proporcionan iconos que denota el listado de estos medios de comunicación en publicaciones seleccionadas que describen los procedimientos microbiológicos: BS12
Bailey y Diagnostic Microbiology de Scott, 12 º ed. 13
CMPH2 Clinical Microbiology Procedures Handbook (ASM) 14
Manual MCM9 de Microbiología Clínica, 9 º ed. (ASM) 15 CLSI
Clinical and Laboratory Standards Institute 16-18
Debido a los procedimientos especificados en estas publicaciones pueden ser diferentes uno de otro y de los incluidos en este manual, estas publicaciones se deben consultar cuando se prefiere o se requiere adherencia a los procedimientos específicos.
A medida que se obtiene nueva información entre las impresiones de este manual, las descripciones de cada producto serán actualizados y disponibles en nuestro sitio web en www.bd.com/ds/DifcoBBLManual. Todas las consultas técnicas sobre los productos de BD deben ser dirigidas a BD Diagnostics servicios técnicos en los Estados Unidos en 800 a 6.388.663 o consultar www.bd.com/support/contact/international.asp para su oficina local de BD Diagnostics.
1. Horwitz (ed.). 2007. Los métodos de análisis oficiales de la AOAC International, 18ª ed., En línea. AOAC International, Gaithersburg, Md. 2. Estados Unidos Administración de Alimentos y Drogas. 2001. Manual de análisis bacteriológico, en línea. AOAC International, Gaithersburg, Md.
3. Salud de Canadá. El compendio de métodos analíticos, en línea. Dirección de Alimentos, Productos de Salud y Alimentos, Health Canada, Ottawa, Ontario, Canadá.
4. Downes y Ito (ed.). 2001. Compendio de métodos de análisis microbiológico de alimentos, 4ª ed. American Public Health Association, Washington, DC 5. Dirección Europea de Calidad del Medicamento y Salud. 2008. La Farmacopea Europea, 6ª ed., Supp. 1, 01.04.2008, en línea. Dirección Europea de Calidad del Medicamento y Salud, Consejo de Europa, 226 Avenue de Colmar BP907-, F-67029 Strasbourg Cedex 1, Francia. 6. Agencia de Protección Ambiental de Estados Unidos. 2005. Manual para la certificación de los laboratorios de análisis de agua potable: criterios y procedimientos de aseguramiento de la calidad, 5ª ed. Oficina de Agua Subterránea y Agua Potable, División de Apoyo Técnico, USEPA, Cincinnati, Ohio.
7. Organización Internacional de Normalización. 2008. Organización Internacional de Normalización, Ginebra, Suiza. 8. Ministerio japonés de Salud, Trabajo y Bienestar. 2006. La Farmacopea Japonesa, 15ª ed., En línea. Ministerio japonés de Salud, Trabajo y Bienestar. 9. Wehr y Frank (ed.). 2004. Los métodos estándar para el examen de los productos lácteos, 17ª ed. American Public Health Association, Washington, DC
10. Eaton, Rice y Baird (ed.). 2005. Los métodos estándar para el examen de agua y wasterwater, ed 21a., En línea. American Public Health Association, Washington, DC 11. Departamento de Agricultura. guía de laboratorio de microbiología, en línea. Servicio de Inspección y Seguridad Alimentaria, USDA, Washington, DC 12. Convención de la Farmacopea de Estados Unidos, Inc. 2008. La Farmacopea de Estados Unidos 31 / El formulario nacional 26, Supp. 1, 08/01/08, en línea. Convención de la Farmacopea de Estados Estado, Inc., Rockville, Md.
13. Forbes, Sahm y Weissfeld. 2007. Diagnostic Microbiology & Scott Bailey de, 12 ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo. 14. Isenberg y García (ed.). 2004 (actualización de 2007). Clinical manual procedimientos de microbiología, segunda ed. Sociedad Americana de Microbiología, Washington, DC
15. Murray, Baron, Jorgensen, Landry y Pfaller (ed.). 2007. Manual de Microbiología Clínica, 9ª ed. Sociedad Americana de Microbiología, Washington, DC 16. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2006. Estándar aprobado: M2-A9. Normas de funcionamiento de las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de disco, 9ª ed. CLSI, Wayne, Pa.
17. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2006. Estándar aprobado: M7-A7. Métodos para la dilución pruebas de susceptibilidad antimicrobiana para bacterias que crecen aeróbicamente, 7ª ed. CLSI, Wayne, Pa.
18. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2007. Estándar aprobado: M11-A7. Los métodos para la prueba de susceptibilidad antimicrobiana de bacterias anaerobias, 7ª ed. CLSI, Wayne, Pa.
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Historia BD Diagnostic Systems
Historia
BD Diagnostics - una tradición de excelencia Difco Laboratories, conocido originalmente como Ray Química, fue fundada en 1895. La compañía produjo enzimas de alta calidad, tejidos deshidratados y productos glandulares. Ray química adquirió la Digestivo fermentos Company, una compañía especializada en la producción de enzimas digestivas para su uso como ingredientes de medios de cultivo de bacterias. Esta fusión de plomo a la preparación de una línea de peptonas, comenzando con Bacto ™ Peptona, y medios de cultivo deshidratado. En 1913, la empresa se trasladó a Detroit, Michigan, y dejó caer el nombre de Ray química. En 1934, la Compañía digestivo fermentos eligió el acrónimo “Difco” para cambiar el nombre de la empresa. El enfoque de Difco Laboratories fue desarrollar nuevos y mejorados medios de cultivo bacteriológico, muchos de los cuales fueron adoptados como formulaciones “estándar” en el agua, productos lácteos, alimentos, otros laboratorios de microbiología industrial y farmacéutica. Difco Laboratories creció a través de la adquisición, en 1974, de Lee laboratorios, uno de los mayores fabricantes de antisueros bacteriológica. El Paul A. Smith Company, conocido más adelante como Pasco, que fabrica un instrumento semiautomatizado utilizado para la identificación de bacterias y pruebas de susceptibilidad, fue adquirida en 1983.
Laboratorios Difco originales planta de fabricación.
la división de productos de microbiología original del BD, adquirida en 1955, fue fundada en 1935 como una asociación entre Theodore J. Carski y el Dr. Einar Leifson, empleados del Hospital Johns Hopkins en Baltimore, Maryland. Llamado el Laboratorio de Biología Baltimore, el laboratorio llevó a cabo un estudio de la preparación de peptonas, y se inició la producción de tres nuevos medios de cultivo: Selenita-F Enrichment, desoxicolato Agar y desoxicolato-citrato de Agar. El acrónimo “gargantas” se utiliza a menudo y se convirtió en la marca de los productos ofrecidos por la empresa.
El Laboratorio de Biología Baltimore recibió mayor ímpetu de los inventos y el estímulo del Dr. John Brewer. máquinas de pipeteo principios de cerveza fueron producidos por la empresa, y el frasco anaerobio Brewer, el precursor de la GasPak ™ tarro, hizo que el rendimiento de la bacteriología anaerobia rutina de práctica y segura.
Los nuevos descubrimientos siguieron rápidamente. Incorporación del tioglicolato de sodio química reducción resultó en la introducción de tioglicolato de medios para el cultivo de anaerobios. se añadieron Otras nuevas formulaciones que resulta en el desarrollo de una línea completa de medios de cultivo. Muchos de estos medios utilizan peptonas de derivación conocidas, tales como tripticasa ™ Peptona, un digerido pancreático de caseína, y fitona ™ Peptona, un digesto papaico de harina de soja, ingredientes que se emplean en tripticasa Agar de soja, tripticasa Caldo de soja y muchos otros medios de comunicación.
En 1952, se introdujo la formulación de la versión de EE.UU. de Lowenstein-Jensen Medium, el lanzamiento de la línea de medios en tubos preparados. En 1960, la línea de medios de cultivo preparados se completó mediante la introducción de medios en placa preparadas comercialmente. Con los años, la división de microbiología de BD creció a través de una serie de fusiones y adquisiciones. En 1972 y 1979, BD compró dos más empresas de microbiología con sede en Baltimore - Hynson Wescott y Dunning (HW + D) y Johnston Laboratories, Inc., respectivamente. HW + D trajeron consigo la Macro-Vue ™ RPR, RUBAscan ™ y CMVscan ™ kits de prueba de la tarjeta y la Directigen ™
línea de sistemas immunomicrobiology para la detección no-crecimiento dependiente directa de antígenos en muestras de pacientes. Johnston laboratorios era el desarrollador y fabricante de la BACTEC ™ línea de sistemas de cultivo de sangre y de detección automatizados. los BACTEC Sistema, lanzado en 1968, fue el primer sistema automatizado de detección bacteriana a aparecer en el mercado. En 2009, BACTEC celebra su 40 aniversario con el lanzamiento de su décimo generación - FX BD BACTEC Sistema de cultivo de sangre. Las líneas de los medios de comunicación se han reforzado por la adquisición en 1987 de GIBCO Laboratories de Madison, Wisconsin. Muchas formulaciones de medios especializados se añadieron a la existente Bundesliga ™ marca prepara plateado y líneas de productos medios en tubos. En 1989, cuando Marion Laboratorios decidió desprenderse de las líneas de productos de microbiología de su división de Marion Científica, se selecciona la división de microbiología de BD como el nuevo proveedor de productos tales como el Bio-Bag ™ sistemas ambientales y Culturette ™ kit de prueba de CD toxina para la rápida Clostridium difficile pruebas.
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Historia BD Diagnostic Systems, cont.
En 1992, la división adquirió el negocio de la microbiología en todo el mundo de Roche Diagnostic Systems, añadiendo el SEPTI-Chek ™ frascos de cultivo de sangre y Enterotube ™ y Oxi / Ferm ™ productos de identificación.
En junio de 1997, BD anunció la adquisición de Difco Laboratories, Inc. La fusión de esta filial de la división de Microbiología Sistemas de BD reunió a los principales proveedores de productos de microbiología de los laboratorios de microbiología industrial y clínicas de todo el mundo, con un total combinado de más de 170 años de cultura experiencia multimedia. Tanto las empresas comprenden BD Diagnostics - Diagnostic Systems, con sede en Sparks, Maryland, cerca de la ciudad de Baltimore. El amanecer del siglo XXI anunció la llegada de varios nuevos productos. En 2000, el BD ProbeTec ™ ET análisis de ADN amplificado para Chlamydia trachomatis y Neisseria
gonorrhoeae se pusieron en marcha. Utilizando la tecnología patentada homogénea de amplificación de desplazamiento de cadena (SDA), estos ensayos fueron los primeros en tiempo real pruebas de amplificación de ADN en el mercado. Este logro fue seguido por el lanzamiento de la BD Phoenix ™ Sistema automatizado de microbiología en 2004 - un sistema totalmente automatizado para la rápida identificación y pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de bacterias. Para no ser menos, entre 2000 y 2006 la línea de productos de medios preparados presentó siete nuevas formulaciones de medios cromogénicos - Bundesliga ™ CHROMagar ™ medios en placa preparados para Candida,
Salmonella, Staphylococcus aureus, Listeria, E. coli O157 y MRSA, así como CHROMagar Orientación para la detección de patógenos de las vías urinarias.
Con ganas de ampliar su compromiso con la prevención de las infecciones nosocomiales (infecciones hospitalarias), en 2006 adquirió BD GeneOhm Sciences, Inc., una empresa pionera en el desarrollo de diagnósticos moleculares para resistente a la meticilina Staphylococcus aureus ( MRSA) y Clostridium difficile ( Cdiff). los BD GeneOhm ™ MRSA y BD GeneOhm ensayos Cdiff producen resultados en horas no días, permitiendo que estas infecciones sean controladas antes de que ocurran los brotes. Finalmente, 2009 marcará la apertura de una nueva, dedicada AF 2 ™ ( -Animal libre / Instalación para la producción de cGMP de los medios de cultivo celular y suplementos libre de antibióticos). Esta nueva planta fabricar productos que son controlados por origen animal materias primas de componentes hasta el nivel terciario, el nivel más estricto de control disponible. el AF 2 Instalación proporcionará un nuevo estándar para la seguridad y la calidad de medios de cultivo celular que reduce significativamente los riesgos actuales asociados con las plantas de uso mixto. BD Diagnostics ofrece un espectro total de productos de laboratorio de microbiología de los medios de cultivo deshidratados a automatizado totalmente instrumentación para la identificación rápida de bacterias clínicamente relevantes. BD Diagnostics sigue centrándose en las misiones y necesidades tanto de los laboratorios de microbiología industrial y clínicos.
Las empresas que ahora constituyen BD Diagnostics fueron fundadas por empresarios cuyas ideas, diligencia y previsión han contribuido a la creación de BD como uno de los líderes mundiales en el campo de la salud. A través de sus productos y servicios, BD se compromete a “ayudar a todas las personas a vivir saludablemente”.
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sección I Historia de la Microbiología
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Historia de la Microbiología
Historia de la Microbiología y Medios de Cultivo La ciencia de la microbiología evolucionó a partir de una serie de descubrimientos significativos. El microscopista holandés, Anton van Leeuwenhoek, fue el primero en observar bacterias, mientras que el examen de diferentes fuentes de agua. Esta observación fue publicado en 1676 por la Royal Society de Londres. Anton van Leeuwenhoek fue también el primero en describir el parásito conocido hoy en día como Giardia
lamblia.
En 1667, el descubrimiento de hongos filamentosos fue descrito por Robert Hooke.
Después se observaron visualmente los microorganismos, su crecimiento o reproducción crean una gran controversia. El conflicto había terminado la teoría de la generación espontánea, la idea de que los microorganismos crecen espontáneamente. Esta controversia continuó durante años hasta que la investigación reconocido de Louis Pasteur. Pasteur se dio cuenta de que la teoría de la generación espontánea debe ser refutada por la ciencia de la microbiología para avanzar. La controversia se
Primeros años en Difco Laboratories.
mantuvo incluso después de exitoso experimento de Pasteur usando infusiones esterilizadas por calor.
Se requieren dos acontecimientos importantes para la ciencia de la microbiología para evolucionar. El primero fue un microscopio sofisticado; el segundo era un método para cultivar microorganismos. Los microscopios
Durante el periodo 1857-1878, tanto Louis Pasteur y Joseph Lister publicaron trabajos importantes en sus extensos estudios sobre la fermentación.
compuestos se han desarrollado en Alemania a finales del siglo XVI, pero no fue hasta principios del siglo XIX que se desarrollaron lentes
En 1887, un dispositivo simple llamado la placa de Petri revolucionó la
acromáticas, permitiendo que la luz en el microscopio para ser enfocado.
microbiología. Con la invención de la placa de Petri, el foco se volvió a formulaciones de medios de cultivo. Con toda la investigación que se lleva a cabo, los científicos empezaron a sustituir la gelatina con agar porque era resistente a la
En 1719, Leeuwenhoek fue el primero en intentar la diferenciación de las bacterias
digestión microbiana y licuefacción.
mediante el uso de agentes de colores naturales tales como el jugo de remolacha. En 1877, Robert Koch utiliza azul de metileno a las bacterias de la mancha. En 1882,
El estudio de la inmunidad comenzó después del descubrimiento del bacilo de la
Robert Koch logró teñir el bacilo de la tuberculosis con azul de metileno. Este
tuberculosis por Robert Koch. Con este descubrimiento aclamado, la implicación de
descubrimiento hito se realizó mediante el uso de calor para penetrar en la mancha
bacterias como agentes de la enfermedad se hizo evidente. Los primeros intentos
en el organismo. Dos años más tarde, Hans Christian Gram, un patólogo danés,
racionales para producir inmunidad activa artificial eran por Pasteur en 1880
desarrolló la tinción de Gram. La tinción de Gram es todavía ampliamente utilizado en
durante su trabajo con el cólera.
la diferenciación de bacterias gram-positivas y gram-negativas.
Los antibióticos tenían un comienzo dramático con el famoso descubrimiento de la penicilina por Alexander Fleming en 1928. Fleming observó que un molde había En 1860, Pasteur fue el primero en utilizar un medio de cultivo para el crecimiento de
contaminado una cultura de estafilococos y produjo una sustancia que inhibe el
bacterias en el laboratorio. Este medio consistía en sales de ceniza levadura, azúcar y
crecimiento de las bacterias. No fue hasta la década de 1930 que los científicos
amonio. En 1881, W. Hesse utilizó agar de su esposa (que se considera un alimento
podrían purificar la penicilina y demostrar sus efectos antibacterianos. La
exótico) como un agente de solidificación para el crecimiento bacteriano.
producción comercial de la penicilina comenzó como un proyecto de guerra combinada entre los Estados Unidos e Inglaterra. Este proyecto fue el comienzo
El estudio de los hongos y parásitos quedó atrás otros microorganismos. En 1839, la
de la industria de la fermentación y la biotecnología.
tiña fue la primera enfermedad humana encontrado que es causada por hongos, seguido de cerca por el reconocimiento de Candida albicans como la causa de la candidiasis. No fue hasta 1910 que Sabouraud introdujo un medio que apoye el
Alrededor de 1930, ciertos factores de crecimiento, incluyendo los factores X y V, se
crecimiento de hongos patógenos. El interés de los científicos en el estudio de los
mostró a ser importante en la nutrición bacteriana. En la década de 1950, la mayoría de
hongos se relaciona a menudo con la protección de cultivos. Sigue existiendo una
las vitaminas también se caracterizaron como co-enzimas. Esta información detallada
estrecha relación entre la micología y la botánica en la actualidad.
conducir a los científicos a desarrollar una comprensión de las vías bioquímicas.
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Difco secta Manual I.ind 3
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sección I Historia de la Microbiología, cont.
Un “boom” desarrollo de la microbiología se inició después de la Segunda Guerra
material. Este estudio y otros estudios similares comenzaron una revolución de
Mundial. la biología molecular, la biotecnología y el estudio de la genética eran
la biotecnología que ha cobrado fuerza en los últimos años.
campos de crecimiento extraordinario. Por 1941, el estudio de la microbiología y genética se juntaron cuando Neurospora crassa, un molde de pan de color rojo, se utilizó para estudiar la fisiología microbiana. El estudio de la genética bacteriana trasladó dramáticamente hacia adelante durante la década de 1940 tras el descubrimiento de resistencia a los antibióticos. El nacimiento de la biología molecular se inició en 1953 después de la publicación de Watson y Crick de la estructura del ADN.
En 1953, los virus fueron definidos por Luria como “entidades submicroscópicas, capaces de ser introducidos en células específicas de vida y de reproducir en el interior únicamente las células.” El trabajo de John Enders en el cultivo de virus conducen al desarrollo de vacunas. Enders demostraron que un virus puede ser cultivado en embriones de pollo y perdería su capacidad de causar la enfermedad
En la década de 1980, entró en la instrumentación del laboratorio de microbiología. Los procedimientos manuales podrían ser reemplazadas por instrumentos completamente automatizados para la identificación bacteriana, las pruebas de sensibilidad y procedimientos de cultivo de sangre. Inmunoensayos y tecnologías de sonda amplían las capacidades del microbiólogo.
Los avances significativos continuaron en la década de 1990. El uso de sustratos cromogénicos en los medios de cultivo fue mostrado para mejorar las capacidades de identificación microbiana directamente desde el medio de cultivo. En 1995, J. Craig Venter, Claire Fraser y Hamilton Smith publicaron la secuencia de ADN del primer organismo de vida libre, Haemophilus influenzae.
después de sucesivas generaciones. Usando esta técnica, Salk desarrolló la vacuna contra la polio.
Con los rápidos avances en las tecnologías y la instrumentación, los medios de cultivo básicas y los ingredientes que figuran en este manual se mantienen algunas de las herramientas más eficaces en fiables y económicos en microbiología en la actualidad.
Un organismo que ha hecho una gran contribución a la biología molecular es Escherichia
coli. En 1973, Herbert Boyer y Stanley Cohen producen ADN recombinante mediante la transformación del plásmido. Los investigadores encontraron que el gen extraño no sólo sobrevivió, sino que copian la genética
referencias 1. Marti-Ibanez (ed.). 1962. La épica de la medicina. Clarkson N. Potter, Inc., Nueva York, NY
2. Wainwright y Lederberg. 1992. En Lederberg (ed.), Enciclopedia de microbiología, vol 2. Academic Press Inc., Nueva York, NY
Requisitos crecimiento de microorganismos El cultivo de los microorganismos depende de una serie de factores importantes:
El pH del medio de cultivo es importante para el crecimiento de microorganismos. La temperatura es otro parámetro importante: bacterias y hongos mesófilos tienen un
•
nutrientes adecuados deben estar disponibles.
•
Oxígeno u otros gases deben estar disponibles, como sea necesario.
•
La humedad es necesario.
crecimiento óptimo a temperaturas de 25-40 ° C; termófila ( “amantes del calor”) organismos crecen sólo a temperaturas superiores a 45 ° C; organismos psychrophilic ( “frías de amor”) requieren temperaturas inferiores a 20 ° C. organismos patógenos humanos son generalmente mesófilos.
• El medio debe tener un pH apropiado. •
relaciones adecuadas de temperatura deben prevalecer.
•
El medio debe estar libre de interferencia carga biológica.
• La contaminación se debe evitar. Un medio de cultivo microbiológico satisfactoria debe contener fuentes disponibles de:
Constituyentes de los medios comunes formulaciones de medios se desarrollan en la capacidad de las bacterias para usar componentes de medios.
constituyentes
Fuente
Amino-Nitrógeno
Peptona, hidrolizado de proteína,
Factores de crecimiento
Sangre, suero, extracto de levadura o
Fuentes de energia
Azúcar, alcoholes y carbohidratos Fosfatos, acetatos y citratos
• Carbón • Nitrógeno • fosfato inorgánico y azufre •
Rastrea metales
• Agua • vitaminas Estos fueron suministrados originalmente en forma de infusión de carne. De carne o
infusiones y extractos vitaminas, NAD
sales tampón
Sales Minerales y Metales
Fosfato, sulfato, magnesio, calcio, hierro
Los agentes selectivos
Productos Químicos, antimicrobianos y colorantes
extractos de levadura con frecuencia reemplazan infusión de carne en medios de cultivo.
indicador Colorantes
Rojo fenol, rojo neutro
La adición de peptonas, que son resúmenes de las proteínas, proporciona fuentes
Los agentes gelificantes
Agar, gelatina, alginato, gel de
fácilmente disponibles de nitrógeno y carbono.
sílice
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Difco secta Manual I.ind 4
16/03/09 03:08:42 PM
tipos funcionales de Medios
Ingredientes medios
microaerófilos, que se desarrollan mejor en condiciones anaeróbicas parciales, y los
Agua purificada se recomienda para su uso en la preparación de medios de cultivo.
anaerobios facultativos, que son capaces de crecer en la presencia o ausencia de
Según la definición de la Farmacopea de los Estados Unidos,
oxígeno. Las condiciones anaeróbicas para el crecimiento de los microorganismos
El agua purificada es el agua obtenida por un procedimiento adecuado. Se prepara a
se obtienen en un número de maneras:
partir del agua que cumpla con el Nacional primaria Agencia de Protección Ambiental de Estados Unidos regulaciones de agua potable o normas comparables de la Unión Europea o Japón. No contiene ninguna sustancia añadida. 1
•
La adición de pequeñas cantidades de agar a los medios líquidos
• La adición de tejido fresco al medio de • La adición de una sustancia reductora al medio; por ejemplo,
Peptona, hidrolizados de proteínas, infusiones y extractos son las principales fuentes de nitrógeno y vitaminas en los medios de cultivo. Peptonas son ingredientes solubles en agua derivados de proteínas por hidrólisis o la digestión del material de fuente; por ejemplo, carne, leche. Los hidratos de carbono se emplean en medios de cultivo como fuentes de energía y pueden ser utilizados para diferenciar los géneros y la identificación de especies.
tioglicolato de sodio, ácido tioglicólico y L-cistina
•
El desplazamiento del aire por hidrógeno o nitrógeno
•
La absorción del oxígeno por los productos químicos
•
Inoculación en las capas profundas de medios sólidos o bajo una capa de aceite
en medios líquidos Muchos microorganismos requiere un ambiente de 5-10% CO 2. Niveles mayores que 10% son a menudo inhibidora debido a una disminución en el pH como formas de ácido carbónico. Los medios de cultivo varían en su susceptibilidad a formar
Los tampones mantener el pH de los medios de cultivo.
productos de oxidación tóxicos si se expone a la luz y aire.
Los agentes selectivos incluir sales biliares, colorantes y agentes antimicrobianos. Las sales biliares y desoxicolato son selectivos para el aislamiento de microorganismos gram-negativas, la inhibición de cocos grampositivos.
Actividad de agua
condiciones adecuadas de humedad son necesarios para el crecimiento continuo
Colorantes e indicadores son esenciales en la preparación de diferencial y medios de
exuberante de microorganismos. Organismos requieren un ambiente acuoso y deben
cultivo selectivos. En estas formulaciones, colorantes actúan como agentes o
tener agua “libre”. agua “libre” no está ligada en estructura compleja y es necesario para
indicadores de cambios en la acidez o alcalinidad del sustrato como bacteriostáticos.
la transferencia de nutrientes y productos de desecho tóxicos. La evaporación durante la incubación o almacenamiento de los resultados en la pérdida de agua “libre” y la
Agentes antimicrobianos se utilizan en los medios para inhibir el crecimiento de
reducción de tamaño de la colonia o la inhibición total de crecimiento del organismo.
bacterias, levaduras y hongos.
agentes solidificantes, incluyendo agar, la gelatina y la albúmina, se puede añadir a un medio líquido con el fin de cambiar la consistencia a un estado sólido o semisólido.
Agentes de protección y factores de crecimiento
El carbonato de calcio, almidón soluble y el carbón vegetal son ejemplos de agentes protectores utilizados en medios de cultivo para neutralizar y absorber metabolitos tóxicos
Cromógenos y fluorógenos son sustratos incorporados en los medios de cultivo para permitir la diferenciación organismo y la identificación. Cuando
producidos por el crecimiento bacteriano. nicotinamida adenina dinucleótido, NAD (factor V) y hemina (factor X) son factores de crecimiento requerido por ciertas bacterias; p.ej,
estos sustratos son degradados por enzimas específicas, liberan compuestos de distintos colores o fluorescentes. Un ejemplo de esto último es
Haemophilus especies, y para el crecimiento mejorado de Neisseria
4-metilumbeliferil
especies.
β- D-glucurónido o una taza.
Tensioactivos, incluyendo polisorbato 80, reducen la tensión interfacial alrededor de
Factores ambientales en medios de cultivo Atmósfera
bacterias suspendidas en el medio. Esta actividad permite la entrada más rápida de los compuestos deseados en la célula bacteriana y puede aumentar el crecimiento bacteriano.
La mayoría de las bacterias son capaces de crecer en condiciones ordinarias de la tensión de oxígeno. Obligan aerobios requieren la admisión libre de oxígeno,
Referencia
mientras que los anaerobios sólo crecen en ausencia de oxígeno atmosférico. Entre
1. Convención de la Farmacopea de Estados Unidos, Inc. 2008. La Farmacopea de Estados Unidos 31 / El formulario nacional 26,
estos dos grupos son el
Supp. 1, 08/01/08, en línea. Convención de la Farmacopea de Estados Unidos, Inc., Rockville, Md.
tipos funcionales de Medios de Cultivo La composición de una formulación de medio de cultivo particular, determina la
amplia variedad de tipos de microorganismos y carece de propiedades inhibidoras. Tal
clasificación del medio como de propósito general, enriquecido, selectiva o diferencial o
medio puede ser o bien nonenriched o enriquecida con un aditivo, por lo general de
una combinación de estos tipos. Un medio de propósito general es uno que es
sangre animal, con el fin de cultivar especies microbianas altamente exigentes.
compatible con el crecimiento de una
Ejemplos de tales medios
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sección I tipos funcionales de los medios de comunicación, cont.
incluir tripticasa ™ Soy Agar (nonenriched) y tripticasa Agar de soja con 5% de sangre
Muchas formulaciones de medios de cultivo se combinan las propiedades de
de carnero (enriquecida).
selectividad y diferenciación debido a su inclusión de una variedad de productos
Un medio selectivo favorece la recuperación de tipos o géneros de microorganismos específicos e inhibe otros miembros de una flora mixta. La selectividad se logra por lo general con un agente químico, tinte o antibiótico. Grupo A Selective Strep Agar con 5% de sangre de carnero ( ssA ™) es un ejemplo de un medio selectivo, ya que preferentemente aísla estreptococos del grupo A a partir de cultivos de la garganta
químicos. medios cromogénicos entran en esta categoría. Además de los agentes selectivos, estas formulaciones únicas contienen sustratos cromógenos que liberan compuestos de colores diferentes tras la degradación por enzimas específicas. Esta reacción enzimática produce colores de colonias distintas que permite una fácil diferenciación e identificación. Por ejemplo, en
debido a la inclusión de una combinación de agentes selectivos. Los medios de cultivo difieren en su grado de selectividad, y los altamente selectivos pueden inhibir algunas
Bundesliga ™ CHROMagar ™ medio aureus Staph, Staphylococcus aureus produce
cepas de los organismos de la recuperación de los cuales es deseable. Por ejemplo,
colonias de color malva, mientras que la mayoría de organismos grampositivos, si no
cuando se intenta el aislamiento de enterics, se deben utilizar varios medios de
inhibida, producen colonias blanco, azul, verde o azul-verde (AQUA). organismos y
comunicación que poseen grados variables de selectividad.
levaduras Gram-negativas son parcialmente a suprimida por completo. El aislamiento de microorganismos a partir de materiales clínicos con frecuencia requiere el uso de medios de caldo enriquecido además de la selectiva, diferencial y
Un medio diferencial es uno que posee ciertos ingredientes que permiten la identificación presuntiva de un género o especies, ya sea a partir de un cultivo puro o mixto. La identificación se basa generalmente en el aspecto del organismo; es decir, color de la colonia o la presencia de un precipitado. Por ejemplo, TSI Agar (Triple Azúcar Hierro Agar) es un medio diferencial para
medios no selectivos chapado utilizado normalmente para el aislamiento primario. El uso de medios líquidos “back up” reduce la posibilidad de que falta completamente un agente etiológico que está presente en números bajos, de crecimiento lento en medios en placa, susceptibles de agentes selectivos, o sensibles a condiciones de incubación desfavorables.
organismos entéricos gram-negativos sobre la base de su capacidad para fermentar dextrosa, lactosa y sacarosa y para producir sulfuros.
Medios de cultivo Ingredientes - Agar Historia Agar fue descubierto en 1658 por Minora Tarazaemon en Japón. 1 Según la leyenda, este dueño japonesa lanzó sopa de algas excedente en la noche de invierno y se dio cuenta más tarde transformado en un gel mediante la congelación de la noche y el calor del día. 2 En 1882, Koch fue el primero en utilizar agar en microbiología. 3,4 Walter Hesse, un médico rural de Sajonia, introdujo Koch a este agente gelificante de gran alcance. 5 Hesse había aprendido sobre agar de su esposa, Fanny Hesse, cuya familia tuvo contacto con las Indias Orientales holandesas, donde se estaba utilizando agar de jaleas y mermeladas. 3,5,6
A comienzos de 1900, el agar se convirtió en el agente gelificante de elección en lugar de gelatina. Agar se encontró más conveniente porque se mantuvo sólido a las temperaturas requeridas para el crecimiento de patógenos humanos y era resistente a la descomposición por las enzimas bacterianas.
La producción de agar en los Estados Unidos se inició justo antes del comienzo de la Segunda Guerra Mundial como un material estratégico. 5 En la década de 1940, el agar bacteriológico de calidad fabricado por la American Company Agar de San Diego,
Agar se deriva de un grupo de algas marinas-rojo púrpura como se ilustra arriba.
zonas. Gelidium es la fuente preferida de agar. Las propiedades más importantes de agar son: 5
•
California, sirvió como agar de referencia para la evaluación de las características de otros componentes de medios de cultivo, tales como peptonas. 5
Buena transparencia en formas sólidas y de gel para permitir la identificación del tipo de colonia
•
Consistente resistencia de gel de lote a lote que es suficiente para soportar los rigores de las rayas, pero no tan rígido que afecta a las características de
características El agar es un ficocoloide, polisacárido soluble en agua, extraído de un grupo de algas marinas de color rojo púrpura (Clase rhodophyceae)
incluso Gelidium y Gracilaria. 7 Estas algas marinas de color rojo púrpura se distribuyen ampliamente en todo el mundo en templado
difusión
•
gelificante Consistente (32-40 ° C) y fusión (aproximadamente 85 ° C) temperaturas, una propiedad conocida como histéresis
•
la libertad esencial de los productos químicos metabólicamente útiles, tales como péptidos, proteínas y hidrocarburos fermentables
?
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Peptonas e hidrolizados
• Bajo contenido y regular de grupos electronegativos que podría causar
primer lugar, haciendo que los contaminantes solubles y en suspensión a ser atrapadas,
antibióticos, nutrientes)
después se lavó desde el agar, la eliminación de los contaminantes. métodos de
• Libertad de sustancias tóxicas (inhibidores bacterianos) •
Gelidium, resultando en un agar líquido que es purificada. El agar líquido se gelifica en
diferencias en la difusión de moléculas electropositivos (por ejemplo,
fabricación detalladas se describen en las referencias. 2,5
Libertad de sustancias hemolíticas que pueda interferir con las reacciones hemolíticas normales en medios de cultivo
• La ausencia de contaminación por esporas termófilas agares se usan normalmente en concentraciones finales de 1-2% para solidificar medios de cultivo.
Aplicaciones del producto Para aplicaciones específicas de productos, consulte la Descripton producto para “Agar”.
Pequeñas cantidades de agar (0.050,5%) se utilizan en medios de cultivo para los estudios de la motilidad (0,5% w v) y el crecimiento de los anaerobios (0,1%) y microaerófilos. / 2
referencias 1. Tseng. 1946. En Alexander (ed.). Coloide Química. Reinhold Publishing Corp., Nueva York, NY 2. Selby y Selby. 1959. En Whistler (ed.)., Gomas industriales. Academic Press Inc., Nueva York, NY
el proceso de manufactura el mejor Gelidium se selecciona algas marinas a partir de fuentes mundo. A través de una variedad de procesos, el agar se extrae de la
3. Hitchens y Leikind. 1939. J. Bacteriol. 37: 485. 4. Koch. 1882. Berl. Klin. Wochenschr. 19: 221.
5. Armisen. 1991. Hydrobiol. 221: 157. 6. Hesse. 1894. Mitt. ad Kaiserl. Gesh. Berlina 2: 182. 7. Convención de la Farmacopea de Estados Unidos, Inc. 2008. La Farmacopea de Estados Unidos 31 / La
forumulary nacional 26, Supp. 1, 08/01/08, en línea. La Convención de la Farmacopea de Estados Unidos, Inc., Rockville, Md.
Medios de cultivo Ingredientes - Peptonas e hidrolizados Historia
Peptona, un digerido pancreático de caseína, y fitona ™ Peptona, un digesto papaico
Peptonas fueron descritas originalmente en 1880 por Naegeli. 1 Con los ricos compuestos
de harina de soja.
de aminoácidos y nitrógeno fácilmente utilizados por las bacterias, peptonas pronto se convirtió en uno de los constituyentes más importantes de los medios de cultivo.
En 1955, adquirió el BBL BD y utiliza su experiencia para mejorar continuamente el mercado clínico con medios preparados y herramientas de diagnóstico. En 1997, BD adquirió Difco Laboratories y se fusionó Difco Laboratories y BBL Sistemas de
A partir de 1895, Difco Laboratories produce enzimas de alta calidad, tejidos
Microbiología en una división BD que proporciona a los clientes de medios, peptonas
deshidratados y productos glandulares para ayudar en el proceso de digestión. El
/ hidrolizados y extractos. Hoy en día, la instalación Difco Laboratories en Detroit y la
conocimiento obtenido de procesamiento de tejidos animales, purificando las enzimas
facilidad de BD en Baltimore continúan fabricando muchas de las peptonas e
y la realización de procedimientos de deshidratación permite una transición suave a la
hidrolizados ofrecidos por separado como Bacto, Difco y Bundesliga marcas o
preparación de medios de cultivo deshidratado, además de sus peptonas. La carne y
utilizado en una variedad de Difco
otros digiere las proteínas se desarrollaron para estimular el crecimiento de bacterias y hongos. Una amplia investigación condujo al desarrollo de Bacto ™ Peptona, que se
o Bundesliga formulaciones de medios de cultivo deshidratado. A finales de 2009, BD
introdujo en 1914. Desde entonces, Bacto Peptona ha sido reconocido como el
se abrirá una nueva, dedicada AF 2 ™ ( AnimalFree / libre de antibióticos) Facilidad para la
estándar de calidad premium para todos los demás peptonas. Partiendo de esta base
producción de GMPc de los medios de cultivo celular y suplementos. La planta, ubicada
de conocimientos, Difco Laboratories continuaron desarrollando más peptonas a
en Miami, fabricará productos que son controlados por origen animal materias primas
añadir a la Bacto línea de productos. Bacto Proteosa peptona, Bacto Proteosa Peptona
de componentes hasta el nivel terciario, el nivel más estricto de control disponible. el AF 2
No. 2, y Bacto Proteosa Peptona No. 3 se crea a partir de la información acumulada
Instalación proporcionará un nuevo estándar para la seguridad y la calidad de medios
que ninguna peptona era la fuente de nitrógeno más adecuado para el cultivo de
de cultivo celular que reduce significativamente los riesgos actuales asociados con las
bacterias exigentes y completa el cultivo de células de mamífero. Hoy en día, muchos
plantas de uso mixto.
procedimientos de cultivo de células, además de cultivos microbianos, requieren la adición de una peptona para mejorar el rendimiento. BD mantiene su compromiso con la producción de las peptonas de más alta calidad que nuestros clientes confían en y esperan.
Los procesos bioquímicos En 1935, el Laboratorio de Biología Baltimore (BBL) fue fundado por Theodore J.
Las proteínas son moléculas esenciales para la estructura y función de todos los
Carski y Dr. Einar Leifson, empleados de la Johns Hopkins Hospital. El laboratorio
organismos vivos. Ellos se componen de cadenas de cualquier número de aminoácidos
llevó a cabo un estudio de la preparación de peptonas. El acrónimo " Bundesliga ”Se
unidos por enlaces peptídicos y plegadas en una variedad de estructuras complejas. Las
utiliza a menudo y se convirtió en la marca de los productos ofrecidos por la
proteínas pueden ser divididas en aminoácidos y péptidos por hidrólisis, usando ácidos
empresa. Se añadieron nuevas formulaciones, lo que resulta en el desarrollo de una
fuertes, bases o enzimas proteolíticas, con el fin de proporcionar los nutrientes en formas
línea completa de medios de cultivo. Muchos de estos medios utilizan peptonas de
que las células pueden utilizar fácilmente. Los hidrolizados de proteínas, también
derivación conocidas, tales como tripticasa ™
llamados peptonas, son el resultado del proceso de hidrólisis en el material de proteínas.
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sección I
Peptonas y sus hidrolizados, cont.
Las características únicas de cada producto peptona BD depende de la calidad y
filtró para eliminar los materiales insolubles y para clarificar y concentrar el producto.
la fuente del material de partida de proteína, la calidad y la fuente de la enzima, y
Vacuum-evaporación se puede usar para la concentración rápida. El jarabe de
el método de hidrólisis utilizada para hacer la peptona. Los materiales de partida
peptona, que contiene aproximadamente 67% de sólidos, puede someterse a un
para peptonas varían de animal a vegetal. Las fuentes de proteínas incluyen
procesamiento adicional para el ajuste del pH, la pasteurización, y / o filtración. La
carne, caseína y suero de leche (proteínas de la leche), gelatina, soja, levadura y
etapa de secado final del proceso se concentra aún más la peptona mediante secado
granos. 2 fuentes de enzimas incluyen órganos de animales (pancreatina y
por pulverización o por pan-secado en hornos de vacío, que se prepara el material
pepsina), papaya (papaína), higo (ficina), piña (bromelaína) y microbios. 2
para el embalaje.
ultrafiltración La hidrólisis de proteínas
La ultrafiltración (UF) es un proceso de filtración de membrana usado para separar o
La hidrólisis ácida es un proceso dura, por lo general llevado a cabo a altas temperaturas,
concentrar componentes de soluciones de proteínas basados en el peso molecular.
que ataca a todos los enlaces peptídicos en el sustrato de la proteína, la destrucción de
BD ofrece varios productos de peptona y extracto de levadura que se somete a
algunos de los aminoácidos individuales liberadas. El triptófano es por lo general
ultrafiltración utilizando una membrana 10K Dalton de peso molecular de corte
totalmente perdida en una hidrólisis ácida. La cistina, serina y treonina se rompen
(MWCO). El resultado de usar la 10k Da MWCO es un retenido que contiene
parcialmente hacia abajo y la asparagina y la glutamina se convierten en sus formas
moléculas de más de 10k Da MW, que pueden incluir grasas, polipéptidos MW más
ácidas. Las vitaminas son en su mayoría destruidos por hidrólisis ácida. Las sales se
grandes y proteínas, y un permeato que contiene sales, azúcares, péptidos,
pueden formar durante la neutralización de una hidrólisis ácida, resultando en un
polipéptidos más pequeños y otros compuestos de menos de 10k Da MW.
producto con alto contenido de sal.
Las enzimas proteolíticas hidrolizan proteínas más suavemente que los ácidos, no
En la fabricación de peptona, la ultrafiltración se utiliza para crear un producto que es
requieren la alta temperatura y por lo general requieren enlaces peptídicos
bajo en endotoxina, la parte lipopolisacárido contiene la toxina de la pared celular de
específicos. El material que resulta de una digestión proteolítica es una mezcla de
las bacterias gram-negativas derramada viables y se libera cuando las bacterias
aminoácidos y polipéptidos de diferentes longitudes. La enzima pepsina cortará una
gramnegativas mueren. Las endotoxinas provocan enfermedad en los seres humanos,
cadena de aminoácidos donde hay un enlace fenilalanina o leucina. 3 La papaína se
por lo que se consideran contaminantes que se deben evitar o minimizar en la
corte la cadena adyacente a la arginina, lisina y fenilalanina, 3
preparación de productos farmacéuticos. La etapa de ultrafiltración se lleva a cabo antes del secado en el proceso de fabricación de peptona.
y pancreatina muestra la actividad en bonos arginina, lisina, tirosina, triptófano, fenilalanina y leucina. 3 Las proteasas microbianas, enzimas proteolíticas secretadas por microorganismos, son cada vez más ampliamente utilizados en la producción de peptona. Las proteasas de bacterias, algas, hongos y fuentes de levadura cubren una amplia variedad de actividades enzimáticas, se puede producir en gran escala y por lo general requieren purificación solamente simple. 4
Peptonas de carne peptonas de carne son proteínas de origen animal que han sido hidrolizadas, o rotas en aminoácidos y péptidos, para proporcionar nitrógeno para los microorganismos. peptonas de carne pueden ser adaptadas a las necesidades nutritivas específicas de microorganismos mediante el control de la calidad y el origen de la proteína, la calidad y
Fabricación de peptona La mayoría de las peptonas son fabricados de manera similar, con los pasos para
el origen de la enzima usada para digerir la proteína, y los métodos utilizados para la hidrólisis, la concentración y el secado de la peptona. Las fuentes de proteína animal
la hidrólisis y el procesamiento aguas abajo. Las etapas básicas de fabricación
incluyen carne a partir de tejido muscular de o despojos (partes de desecho, vísceras) y
peptona incluyen: hidrólisis / digestión, centrifugación, filtración, concentración y
gelatina. El tejido muscular y los despojos se utilizan frescos, congelados o secos. La
secado. La proteína y el agua desmineralizada se combinan para formar una
gelatina se extrae por ebullición de colágeno, la proteína fibrosa que se encuentra en el
suspensión espesa de material de proteína en recipientes de digestión de gran
tejido conjuntivo, hueso y cartílago. Una variedad de enzimas proteolíticas, o proteasas,
capacidad, que se agitó continuamente durante todo el proceso de digestión. La
se puede utilizar para llevar a cabo la hidrólisis enzimática de proteínas de origen
suspensión de proteína se ajusta entonces al pH óptimo para la enzima específico
animal. La pepsina y tripsina son ampliamente utilizados para la fabricación de los
elegido para la hidrólisis. Por ejemplo, la pepsina es más eficaz a un pH de 2,0 y
animales de peptona. La pepsina es aislado de estómago animal porcino u otro. La
tripsina muestra actividad máxima a pH 8,5. 2 Enzyme se añade cuando el pH y la
tripsina, junto con quimotripsina, carboxipeptidasa A, carboxipeptidasa B, y elastasa,
temperatura son óptimas. La cantidad de enzima necesaria, el tiempo para la
son enzimas aisladas a partir de páncreas de animales.
digestión, y el control de pH y la temperatura dependen del grado deseado de hidrólisis.
Una vez que se consigue el grado predeterminado de la digestión de proteínas, la actividad enzimática debe ser detenido; la suspensión es bien calentada para inactivar las enzimas o neutralizados para inactivar ácidos o bases. La suspensión de proteína se centrifuga a continuación y / o
La caseína Peptonas Caseína y suero peptonas son hidrolizados de proteínas de la leche bovina. La leche es un material complejo, que consiste en agua, lactosa, lípidos, sales y proteínas.
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Difco Sección 8 Manual I.ind
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Peptonas y sus hidrolizados, cont.
Caseína (80%) y suero de leche (20%) son los componentes de las proteínas
productos de levadura
fundamentales en la leche. Después de la crema, o la grasa, se ha eliminado de la
El extracto de levadura se define en el USP como “un, derivado peptonelike soluble en
leche bovina, se añade ácido clorhídrico o sulfúrico con el fin de precipitar la caseína,
agua de las células de levadura ( Saccharomyces). ” 10 El extracto de levadura es fácilmente
la porción insoluble. 5,6 La caseína recuperado se conoce como la caseína ácida y es
disponible en los EE.UU. como un polvo secado por pulverización. En Europa, las
insoluble en agua. Generalmente, la caseína ácida se disuelve en un hidróxido
compañías farmacéuticas utilizan como un líquido o pasta, así como en la forma de
adecuada, tal como NaOH, para que sea soluble en agua. El caseinato de sodio resultante se utiliza luego como base para las caseínas hidrolizadas. El caseinato de sodio típicamente consiste en proteína 87% a 90%. 7 La caseína, que puede hacer hasta un 3% del total de componentes en la leche bovina, es uno de los más nutritivo de las proteínas de la leche, ya que contiene todos los aminoácidos comunes y es rica en los esenciales.
El material sobrenadante soluble extraído de la leche después de la caseína precipita se suero de leche, también llamado plasma de leche. Suero de leche contiene las proteínas de lactoalbúmina y lactoglobulina y es un subproducto de la caseína (y queso) producción. La proteína del suero se concentra y aislamientos se recuperan utilizando diversas tecnologías de separación tales como intercambio iónico y filtración; lactoalbúmina se recupera por desnaturalización de calor y luego la separación. 5 peptonas de suero de leche se fabrican utilizando el proceso de hidrólisis enzimática en las proteínas aisladas de suero de leche. Las peptonas de suero de leche contienen aminoácidos libres y péptidos, así como hidratos de carbono, vitaminas y minerales.
polvo. El extracto de levadura es utilizado por la industria de alimentos naturales como una fuente barata para muchas de sus vitaminas, y ha sido reconocida como una importante fuente de vitaminas del complejo B. El extracto de levadura, como un sustrato en una formulación de medios de comunicación, suministra no sólo vitaminas, sino también proteínas, carbohidratos y algunos micronutrientes.
Hay muchos tipos de extracto de levadura. Las dos fuentes principales de extracto de levadura son la levadura “de cerveza” y levadura “de panadero”. La levadura de cerveza es un subproducto de la industria cervecera. Requiere (extracción de resinas de lúpulo)-amargor de antes de que sea adecuado para su uso fermentación. 2 Una amplia variedad de cepas y los procesos de crecimiento se han utilizado en la fabricación de la levadura de cerveza, impidiendo así cualquier consistencia del producto final. Levadura de panadería ( Saccharomyces cerevisiae) se define como una levadura primaria debido a que la levadura se cultiva para el propósito específico de ser utilizado como un sustrato en un bioproceso o como un producto alimenticio / aromatizante. Fabricación de la levadura del pan es un proceso reproducible y controlada. El organismo de levadura se cultiva en un medio a base de melaza optimizado para la levadura específica. 11
peptonas de caseína son fabricados por cualquiera de hidrólisis ácida o enzimática. Muchos ácidos se pueden utilizar en la hidrólisis ácida de la caseína, pero el ácido clorhídrico se utiliza más comúnmente en el proceso. Este proceso conduce a completar la hidrólisis de la caseína a los aminoácidos y otros compuestos de simplicidad química relativa.
El proceso de fabricación para una hidrólisis enzimática de la caseína no es tan destructivo como una hidrólisis ácida. La caseína no se descompone tan completamente en sus componentes constituyentes. En muchos casos, esto lo convierte en un hidrolizado de más nutritivos, especialmente para aquellos organismos que prefieren péptidos a los aminoácidos. Enzimas del páncreas se utilizan para la fabricación de estas peptonas. Mientras que el páncreas contiene una batería de enzimas de la proteasa, lipasa y amilasa grupos, son las proteasas
fermentaciones de levaduras comerciales están siempre discontinuos alimentados tipo fermentaciones que dura de 12-20 horas. 12 fabricantes de levadura de panadería comercial han encontrado que el más altamente aireada una cultura, mayor será el rendimiento del producto final. 12 El proceso de extracto de levadura de panadero de fabricación es único en comparación con la fabricación de otros peptonas. El extracto de levadura es un producto sometido a autólisis. hidrólisis de la célula se lleva a cabo por las enzimas endógenas de la Saccharomyces organismo. La autolisis se suele iniciado ya sea por un choque de temperatura controlada o, para la industria alimentaria, un choque osmótico, que hace que las células de levadura de expirar. El choque de temperatura no es suficientemente alta para inactivar las proteasas de la célula de levadura, que proceden de degradar la célula. La autolisis
que se utilizan en la hidrólisis de la caseína. Estas proteasas sólo tienen la
puede proceder a partir de 10 a 60 horas. Después de la autolisis, el material soluble se
capacidad de digerir las proteínas en péptidos; que no pueden romper la proteína
separa del insoluble por medio de centrifugación y varias etapas de filtración. 12 El producto
hacia abajo en sus aminoácidos componentes. Como resultado, digiere pancreático
filtrado final se concentró y después se secó por pulverización, o se puede dejar en la
de caseína, a diferencia de los hidrolizados de ácido de caseína, producen peptonas
forma de pasta concentrada, que contiene aproximadamente 60-80% de sólidos.
que contienen mayores cantidades de péptidos.
Las peptonas de soja peptonas de soja son todos los digeridos enzimáticos de harina de soja. La soja contiene inhibidores de la proteasa lábil varios de calor. 8 La forma más común de la eliminación de
Temperatura, pH, adición de otras enzimas, tipo de sustrato medio para el crecimiento de la Saccharomyces y la duración de la autolisis son todas las variaciones que crean la gran variedad de extractos de levadura disponibles.
estos factores es calentar o tostar las habas de soja desgrasadas en una planta de procesamiento en condiciones controladas. La harina de soja, el sustrato principio en una peptona de soja, es rica en proteínas de alta calidad, carbohidratos, calcio y vitaminas B. 9
Rendimiento peptona Las materias primas y las condiciones de fabricación para la hidrólisis de proteínas se controlan para producir productos de peptona consistentes. Los ingredientes utilizados
Las enzimas utilizadas en la digestión de la harina de soja son típicamente de fuentes libres de animales o de microorganismos que han sido cultivados en medios libres de
para la fabricación de peptona, incluyendo la proteína, agente de hidrólisis, y cualquier agente de tamponamiento se usan, están
animal.
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Peptonas y sus hidrolizados, cont.
seleccionados en base a los estándares específicos de pureza y calidad. Las
que peptona está presente desde el principio de la carrera, otros realizan mejor cuando
condiciones de la hidrólisis, tales como la cantidad de enzima utilizada, el tiempo para
se añade el peptona como una alimentación más tarde en el proceso. En algunos casos,
la digestión, y el pH y la temperatura a la que se lleva a cabo la hidrólisis, determinan
el rendimiento óptimo se logra cuando el proceso comienza con una peptona luego otro
el grado de hidrólisis y la calidad de la hidrolizado. Por lo tanto, estas condiciones
se añade como una alimentación más tarde en el ciclo de producción.
deben ser cuidadosamente controlados durante todo el proceso de fabricación. Purificación, concentración y secado pasos están regulados cuidadosamente debido a su influencia sobre las características de una peptona. Finalmente, cada lote de hidrolizado de proteínas es la prueba de una gran variedad de productos químicos, ensayos físicos, analíticos y de apoyo de crecimiento para asegurar la calidad y consistencia del producto de lote a lote.
BD Autonutrient ™ Servicio de Diseño de Medios (AMDS) Realizar optimizaciones a fondo puede requerir mucho tiempo y recursos, por lo que la decisión se hace a menudo para eliminar muchos puntos de diseño potencialmente críticos. Para hacer frente a esta necesidad y garantizar la identificación de la formulación de medios óptima que cumpla con los objetivos de producción, BD ofrece la AutoNutrient ™
Servicio de Diseño de Medios (AMDS). El equipo de BD dedicados, científicos
Peptonas / hidrolizados están disponibles como inicial de la prima
experimentados trabaja con cada cliente en un proceso de gran colaboración para
Bacto ™ formulaciones, o como Difco ™, Bundesliga ™ o bitek ™ marcas. los bitek la marca ha
desarrollar una formulación de los medios que satisfaga los requisitos. A través del
desarrollado para productos de calidad industrial que no se requiera un producto de
programa AMDS, BD ofrece una biblioteca de 45 diversos medios de comunicación,
primera calidad.
químicamente definidos, así como una serie de peptonas diseñados específicamente
aplicaciones
para la industria biofarmacéutica. asociados del Servicio con cada cliente de pantallas iniciales a través de escala final hasta asegurar un proceso optimizado en cada paso.
Cultivo de células
En la industria biofarmacéutica, la necesidad de procesos libres de animales de alto rendimiento ha llevado a un mayor enfoque en los medios de comunicación y la optimización de procesos. 13 la suplementación con suero se ha utilizado tradicionalmente para compensar las deficiencias de los medios de base. Sin embargo, las cuestiones reglamentarias y los altos costos asociados con el uso de suero han dado lugar a un amplio esfuerzo para encontrar alternativas libres o químicamente definidos animales.
Fermentación formulaciones de medios de fermentación son de dos tipos: definido y complejo. medios definidos se realizan mediante la adición de ingredientes químicamente definidos a agua para inyección (WFI) o agua destilada. medios complejos se hacen con digestiones de peptona o extractos de origen vegetal o animal. 18
Mientras que los medios químicamente definidos son ideales, a menudo no cumplen con los objetivos de producción previstos.
Las ventajas de medios químicamente definidos son una mayor reproducibilidad, A través de un trabajo adicional, se ha observado que los suplementos de peptona, cuando se aplica adecuadamente, puede superar el rendimiento de suero, mientras que el cumplimiento de estrictos requisitos regulatorios. Además, los requisitos de procesamiento aguas abajo se reducen considerablemente debido a la falta de contaminación de las proteínas del suero, lo que reduce el tiempo de procesamiento y los costes. Con el fin de lograr este tipo de éxito, una optimización del proceso completo debe ocurrir cuando los medios de comunicación de base, los suplementos de peptona, y la estrategia de alimentación se determinan empíricamente a través del uso de una estrategia de optimización metódica. 14
etapas de procesamiento aguas abajo más limpias y simplicidad en el análisis del producto final. Las desventajas son los rendimientos más bajos y mayor gasto, especialmente si la lista de componentes de medios incluyen factores de crecimiento y vitaminas. 19
Las ventajas de los medios complejos son que son relativamente de bajo costo, que apoyan una amplia variedad de crecimiento de un gran grupo de microorganismos, que promueven el crecimiento de los organismos más fastidiosos que no va a crecer en un medio de chemicallydefined, estimulan la producción de toxina y que habitualmente producir rendimientos más altos que muchos medios definidos. Las desventajas de los medios complejos son que el procesamiento aguas abajo puede ser más difícil y la reproducibilidad a veces puede ser comprometida. En el
Los beneficios de los suplementos de peptona en aplicaciones de cultivos celulares han
desarrollo de una nueva formulación del medio, se debe tener cuidado en la
sido bien documentado durante muchos años. Debido a la compleja composición de
elección de las peptonas para la nueva formulación. experimentación individual con
peptonas, que proporcionan una amplia gama de beneficios a las células. En algunos
una variedad de peptonas se sugiere para seleccionar la peptona óptimo o
casos, los péptidos de diferentes longitudes se han traducido en un aumento de
combinación de peptonas.
rendimiento de la célula. 15 Otros han beneficiado de aminoácidos libres y otros nutrientes de bajo peso molecular. dieciséis Dado que los requisitos nutricionales para cada línea celular son diferentes, es importante identificar una peptona que cumpla con los requisitos únicos de una línea celular particular. Las mezclas de peptonas también deben ser considerados, como se han observado efectos sinérgicos en algunos procesos cuando se utilizaron múltiples peptonas. 17 Significativamente los rendimientos más altos de anticuerpos se puede lograr con la identificación de una peptona que cumpla con los requisitos específicos de la línea celular.
Con la continua aparición de nuevos casos confirmados de EEB / EET, una directriz principal para el desarrollo de nuevos productos de fermentación ha sido el de las materias primas, ya sea de origen desde un país libre de BSE o reformular los medios de comunicación que utilizan componentes libres de animales. 20 BD comenzó a ofrecer alternativas sin animales a formulaciones de medios clásicos en 1997. En
1998, Seleccione APS ™ ( se introdujeron fuente) productos de proteína alternativos. Estas formulaciones no animales proporcionan características de apoyar el crecimiento
Determinar cómo aplicar la peptona es esencial para lograr el mayor
comparable, y en algunos casos superior, a formulaciones animales clásicos.
rendimiento. Mientras que algunos procesos requieren
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Peptonas y sus hidrolizados, cont.
Medios de cultivo Ingredientes
Los estudios de estimulación del crecimiento. Acidicase Peptona es un hidrolizado de
extracto de carne de vaca Bacto ™ extracto de carne
ácido clorhídrico de caseína con un alto contenido de sal. Es deficiente en cistina, porque
de vaca, carne desecada polvo del extracto
la caseína contiene poco cistina, y en triptófano, que se destruye por el tratamiento con ácido. Se utiliza en los medios de comunicación vitamina ensayo, las pruebas de
Los productos de extracto de carne de res son sustitutos de las infusiones acuosas de
susceptibilidad y otros soportes de laboratorio y la fermentación microbiana en el que el
carne. extracto de carne de vaca no está expuesto al tratamiento dura utilizada para la
alto contenido de sal no interfiera.
hidrólisis de proteínas, lo que puede proporcionar algunos de los nutrientes perdidos durante la fabricación de peptona. 19 Extracto de carne es una mezcla de péptidos y
Bacto ™ casitona tripticasa ™
aminoácidos, fracciones de nucleótidos, ácidos orgánicos, minerales y algunas vitaminas.
peptona Bacto ™ triptona
Su función es complementar las propiedades nutritivas de peptona por los minerales que contribuyen, fosfatos, fuentes de energía y los factores esenciales que faltan de peptona. 2
Bacto casitona, tripticasa peptona y Bacto Triptona son digiere pancreático de caseína. Estos productos se recomiendan para los medios de comunicación que se preparan las que se desea una enzimático de caseína hidrolizada. El proceso de fabricación para una
extracto de carne de vaca se emplea usualmente en concentraciones de 0,3 a
digestión enzimática de la caseína no es tan destructivo como una hidrólisis ácida. Por lo
1,0% en medios de cultivo. Extracto de carne está en forma de pasta. Bacto
tanto, la caseína no se descompone tan completamente en sus componentes
Extracto de carne, desecado, la forma seca de extracto de carne, se desarrolló para
constituyentes. En muchos casos, esto lo convierte en un hidrolizado de más nutritivos,
proporcionar un producto para la facilidad de uso en el manejo. Estos dos productos se
especialmente para aquellos organismos que prefieren péptidos a los aminoácidos. La
utilizan en un uno para una sustitución. Beef Polvo de extracto es un extracto de carne
caseína es una rica fuente de nitrógeno amino. Estos productos se utilizan para apoyar
seca a una forma en polvo.
el crecimiento de microorganismos exigentes y son adecuados para su uso en estudios
Bacto ™ Corazón de carne para infusión
Bacto Corazón de carne para infusión se prepara a partir de tejido de corazón de res fresca y se recomienda para la preparación de medios de infusión de corazón.
de fermentación. tripticasa Peptona se prueba biológicamente por la libertad de los carbohidratos detectables. Su alto contenido de triptófano hace Bacto casitona, tripticasa peptona y Bacto Triptona valiosa para la detección de la producción de indol.
Proporciona de nitrógeno, aminoácidos y vitaminas en los medios de cultivo microbiológico. Bacto Corazón de res para infusión se procesa a partir de grandes volúmenes de materia prima, conservando todas las propiedades estimulantes nutritivas y el crecimiento de tejido fresco.
Biosate ™ peptona Biosate Peptona es un hidrolizado mixta de extracto de caseína y de levadura. El producto proporciona nitrógeno, aminoácidos y vitaminas en los medios de cultivo microbiológico. La combinación de digestión pancreática de caseína y extracto de levadura, en una proporción de 65:35, proporciona beneficios nutricionales que no son proporcionados por los componentes solos.
Bacto ™ Casamino Acids Bacto ™ Casaminoácidos, casaminoácidos técnica, vitamina Ensayo Acidicase ™ peptona
Bacto Casamino Acids, Bacto Casaminoácidos, Técnico, casaminoácidos, vitamina Ensayo y Acidicase Peptona son hidrolizados de ácido de caseína. La caseína es una proteína de la leche y una rica fuente de nitrógeno amino ácido. Estos productos se añaden a los medios de comunicación, principalmente a causa de sus componentes de nitrógeno y factor de crecimiento orgánicos. Sus componentes inorgánicos también juegan un papel vital. 21
Gelysate ™ peptona Gelysate Peptona es un digerido pancreático de gelatina. La gelatina se extrae de colágeno, que es la proteína fibrosa en hueso, cartílago y tejido conectivo. hidrolizado de gelatina es alta en residuos de prolina. 2 Gelysate Peptona es deficiente en hidratos de carbono y se caracteriza por una baja cistina, metionina y contenido de triptófano. Gelysate Peptona se debe utilizar para los cultivos que requieren baja en carbohidratos, cistina y los niveles de triptófano en cultivo celular y fermentación bacteriana.
Bacto ™ Extracto de malta
Bacto Extracto de Malta es la porción soluble en agua de cebada malteada. El proceso de extracción se descompone los polisacáridos en azúcares simples. Después de que el proceso de malteado es completa, el extracto se prepara a partir de la cebada malteada por craqueo el grano en un molino y luego extraer el grano con un licor caliente. El resultado de “hierba” se filtra y se evapora o se seca bajo vacío. 2,22 Se utiliza en medios de cultivo para la propagación de levaduras y mohos, ya que contiene una alta concentración de azúcares reducidos, particularmente maltosa. Este producto se emplea generalmente en concentraciones de 1-10%. Bacto Extracto de Malta ofrece carbono, proteínas y nutrientes en medios de cultivo.
Bacto Casamino Acids se recomienda para uso con cultivos microbiológicos que requieren una proteína completamente hidrolizado como una fuente de nitrógeno. Bacto Casamino Acids, Técnico se recomienda para su uso en medios de cultivo donde se requieren mezclas de aminoácidos para una fuente de nitrógeno, pero el cloruro de sodio y el contenido de hierro no se han disminuido en la misma medida como con Casamino Acids. Casaminoácidos, vitamina ensayo está especialmente tratada para reducir significativamente o eliminar ciertas vitaminas. Se recomienda para uso en medios de ensayo microbiológico y en
Bacto ™ neopeptona Bacto Neopeptona es un digesto enzimático de la proteína. Este producto contiene una amplia variedad de tamaños de péptidos en combinación con vitaminas, nucleótidos y minerales. Bacto Neopeptona es particularmente adecuada en el suministro de los requisitos de crecimiento de las bacterias exigentes. Además, esta peptona es extremadamente valioso en medios para el cultivo de hongos patógenos.
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Peptonas y sus hidrolizados, cont.
Bacto ™ peptona
microorganismos exigentes. Bacto Proteosa Peptona No. 4 es una versión secada por
Bacto Peptona es una digestión enzimática de la proteína animal. Bacto
pulverización de Bacto Proteosa peptona. Estos productos proteosa peptona proporcionan
Peptona se introdujo por primera vez en 1914 y se convirtió en la peptona estándar
nitrógeno en una forma que es fácilmente disponible para el crecimiento bacteriano.
para la preparación de medios de cultivo bacteriológico. Esta peptona contiene nitrógeno en una forma que es fácilmente disponible para el crecimiento bacteriano. Bacto Peptona tiene un alto contenido de peptona y ácidos amino y sólo una cantidad insignificante de proteosas y constituyentes nitrogenados más complejas. Bacto
Peptona se utiliza como una fuente de nitrógeno orgánico en medios de cultivo microbiológico para el cultivo de una variedad de bacterias y hongos, y en formulaciones de medios de cultivo celular.
fitona ™ Peptona Seleccionar Phytone, uF Seleccionar Soytone Bacto ™ Soytone
fitona Peptona, Seleccionar fitona, UF, Select Soytone, y Bacto Soytone son digeridos enzimáticos de harina de soja / harina. La proteína de soja en estas peptonas de origen natural contiene altas concentraciones de vitaminas y carbohidratos. fitona Peptona es una peptona de soja libre de productos animales que retiene la alta vitamina y alto contenido de carbohidratos de tejido de la planta de soja. Este producto es un excelente peptona planta para el cultivo de hongos y tipos fastidiosos de bacterias. También se ha utilizado en aplicaciones de cultivo celular debido a su alto contenido de carbohidratos. Seleccionar fitona, UF es una peptona ultrafiltrada que fue desarrollado para el mercado de cultivo de tejidos. Su contenido en nitrógeno
Bacto ™ tC hidrolizado de lactoalbúmina Bacto TC hidrolizado de lactoalbúmina es la porción de proteína hidrolizada por enzimas del suero de la leche. Es una mezcla de péptidos, aminoácidos y carbohidratos, simple y complejo. Se utiliza para la preparación de medios de cultivo de células bacterianas, de insectos y de mamíferos.
Bacto ™ tC yeastolate tC yeastolate, uF Bacto TC Yeastolate y TC Yeastolate, UF son porciones solubles en agua de la levadura autolisada de libre de productos animales, Saccharomyces cerevisiae. Estos productos son mezclas de péptidos, aminoácidos, hidratos de carbono simples y complejos, y vitaminas. Se utilizan para la preparación de medios de cultivo de células bacterianas, de insectos y de mamíferos.
Bacto ™ triptosa Bacto Triptosa es un hidrolizado enzimático se mezcló con propiedades nutricionales distintivas. El proceso digestivo de Bacto resultados de triptosa en péptidos surtidos de mayor peso molecular adecuado para las necesidades de aminoácidos de cadena larga. Bacto Triptosa se utiliza para el cultivo de organismos fastidiosos y para aplicaciones de cultivo celular.
en combinación con las vitaminas de origen natural ha demostrado apoyo notable crecimiento con anticuerpos monoclonales y expresión de proteínas. Seleccionar
Bacto ™ Extracto de levadura Extracto de levadura,
Soytone se utiliza en medios de genética molecular y cultivo celular. Bacto Soytone se
extracto de levadura uF, LD Bacto ™ extracto de
recomienda para uso en medios para el cultivo de una gran variedad de organismos,
levadura, extracto de levadura técnica
incluyendo hongos, y medio de ensayo microbiológico. Bacto Soytone utiliza una enzima de origen animal en la digestión de la harina de soja. Bacto Extracto de levadura, extracto de levadura, UF, extracto de levadura, LD, Bacto
Extracto de levadura, extracto de levadura técnica y son concentrados de la porción soluble en agua de Saccharomyces cerevisiae Las células que han sido autolizadas.
polipeptona ™ peptona polipeptona Peptona es una mezcla de peptonas compone de partes iguales de digerido pancreático de caseína y digerido péptico de tejido animal. polipeptona Peptona incluye el alto contenido de aminoácidos y pequeños polipéptidos característicos de
Estos productos proporcionan vitaminas esenciales solubles en agua, aminoácidos, péptidos y carbohidratos en medios de cultivo microbiológicos. El extracto de levadura se considera un producto no animal y se usa ampliamente para muchas formulaciones no animales de origen bacteriano, fúngico, de cultivo de células de mamíferos e insectos.
digerido pancreático de caseína y de los polipéptidos más grandes característicos de digerido péptico de tejido animal. polipeptona Peptona proporciona nitrógeno, aminoácidos y vitaminas en los medios de cultivo microbiológico.
Para obtener información adicional acerca de peptonas, llame a Servicios Técnicos de BD 800-638-8663 y solicitar una copia de la BD Bionutrientes ™ Manual
Bacto ™ Proteosa Peptona Bitek ™ Proteosa peptona Bacto ™ Proteosa Peptona no. ? Bacto ™ Proteosa Peptona no. ? Bacto ™ Proteosa Peptona no. ?
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1?
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