Manejo de Cajas Petri

October 4, 2022 | Author: Anonymous | Category: N/A
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 “MANEJO DE LAS DE CAJAS DE PETRI EN EL LABORATORIO MICROBIOLOGIA” 

Integrantes: Irina Teherán Rubén Lara Cristian Mendoza Wendy Castro Rocío Gómez Yeris Imitola

 

Introducción

La gente más feliz, no necesariamente tiene lo mejor de todo; simplemente disfrutan al máximo de todo lo que está en su camino.

 

GENERALIDADES  

Cápsula formada por dos discos de cristal que pueden adaptarse entre sí. En el disco que forma el fondo de la caja se deposita el agar y el conjunto puede ser fácilmente esterilizado, sembrado y colocado en la estufa. La caja de Pétri, se utiliza generalmente para la separación de los microbios cuyas colonias se desarrollan aisladamente y pueden ser estudiadas con facilidad.

 

HISTORIA En 1881 Koch ideo un método para reproducir bacterias en un medio de cultivo sólido hecho con gelatina, e introdujo el método de la placa  placa  para asegurar cultivos puros. El uso de un medio sólido fue una idea nueva, ya que hasta esa época se habían empleado casi exclusivamente infusiones vegetales y otros líquidos, líquidos, lo que facilito la obtención de cultivos puros de bacterias para su estudio individual. Para los cultivos en placa empleamos una cajita de vidrio llamada cápsula o caja de Petri introducida por Petri, Petri, uno de los ayudantes de Koch durante 1887.

 

UTILIDAD  

Es utilizada para preparar cultivos de



hongos, y bacterias, yvirus también para seleccionar muestras de animales



o alimentos.   Existen de 2 tipos las plasticas y las de cristal

Plásticas: desechables estériles

y

son vienen

Cristal: son reutilizables pero nuevas y/o usadas deben pasar por un proceso desinfección y esterilización antes de ser usadas.

 

Material de Vidrio:



Generalmente el vidrio es de borosolicato, PYREX  Y KIMAX



 Y de aluminosilicato, vidrio COREX

 

PYREX Y KIMAX 





Resiste todas la temperaturas de trabajo en el laboratorio de rutina  Altamente resistente a los ataques químicos Tiene un alto punto de tensión, y le impide daños por acción del calor.



 Bajo

coeficiente de expansión lineal ( alrededor de 3 x 10 – 6significa º Celsius), lo cual un pequeño cambio de volumen al cambiar de temperaturas y le da mayor fuerza mecánica

 

 COREX  COREX  

 Además de las propiedades propiedades del Pirex y Kimax, el vidrio COREX presenta la ventaja de mayor resistencia mecánica: es más resistente al rayado , la rotura y oscurecimiento causado por los álcalis.

 

LIMPIEZA Y DESINFECCION

Material de Vidrio:

 

Limpieza del Material de Vidrio:

 

NO OLVIDE NUNCA QUE: QUE:



El material nuevo de vidrio, que aún no ha sido utilizado, debe lavarse con solución detergente, enjuagarlo con abundante agua corriente y finalmente con agua destilada.





Todo material proveniente de procedimientos de laboratorio es potencialmente infectante. El material de vidrio debe estar químicamente limpio y libre de contaminación y residuos de grasas o detergentes

 

Limpieza del Material de Vidrio:





Es importante que material de vidrio

el se

encuentre totalmente limpio antes de usarlo para análisis o para calibrarlo. Debe permitir cuando se encuentra limpio que la superficie se humedezca uniformemente, y que el agua se adhiera a la superficie del vidrio en capa continua.

 

Limpieza del Material de Vidrio: 



Hay varios métodos para limpiar el material de vidrio del laboratorio, el mas utilizado es la de ácido sulfúrico y dicromato de potasio sódico. También se pueden utilizar para lavado de material de vidrio: Ácido nítrico al 20% durante 12 horas ( material para mediciones de iones como sodio, potasio, calcio y hierro), ácido sulfúrico, alcohol y agua desionizada. La elección del agente limpiador depende de la naturaleza del contaminante.

 

Limpieza del Material de Vidrio:   Material que se va a usa por primera vez, material manchado, grasoso o pipetas con coágulos de sangre se debe pasar por una mezcla Sulfocrómica, si se necesita de urgencia dejarse por lo Enjuagar menos una hora, de lodebe contrario 12 horas. con agua del chorro y pasar por agua destilada.

 

Limpieza del Material de Vidrio:   









Mezcla Sulfocrómica: Medir 500 ml de agua destilada en erlenmeyer de un litro  Añadir lentamente con agitación constante 250 ml de ácido sulfúrico concentrado Sumergir el erlenmeyer en un recipiente que contenga100 aguag corriente para enfriar el contenido  Agregar de dicromato de potasio y mezclar hasta disolver  Aforar a un litro con agua destilada

 

Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:

  DESCONTAMINACIÓN: Es un procedimiento que remueve microorganismos patógenos de los objetos, dejándolos seguros para su manipulación.   Se realiza utilizando el hipoclorito de sodio o dicloroisocianurato de sodio según sea el caso. Se emplea jabón enzimático.

 

 

Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:   LIMPIEZA:   Es la remoción de toda materia extraña ( suciedad, materia orgánica, etc) de los objetos o las superficies; usualmente es realizada con agua y detergente enzimático para los equipos, elementos. instrumental El detergente o común se usa para superficies como paredes, pisos, etc. Esta siempre debe proceder a los procesos de desinfección.

 

Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:

  LIMPIEZA:    

Detergente:  Agente químico utilizado para la eliminación de suciedad . Debe eliminar la suciedad orgánica e inorgánica, no producir daño en los equipos, no dejar residuos ( facilidad de enjuague) y no ser tóxico tóxico para el personal que lo manipula. Detergente Enzimático: Detergente que contiene enzimas proteolíticas que disuelvenlalaposibilidad materia orgánica; preferiblemente de pH neutro, disminuyendo de corrosión y picado. Se utiliza para pre-remojo del instrumental, evitando la manipulación del material contaminado  contaminado por parte del operario. Biodegradable y no iónico al 2% ( extran, tween )

 

Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:   







LIMPIEZA: Después de haber mantenido el material en la disolución limpiante lavar totalmente con agua del grifo lavar finalmente con agua destilada. si es material para contener como los vasos de precipitados, finalmente debe lavarse con alcohol etílico.

 

Material de vidrio para análisis físicoquímico en el laboratorio:

  LAVADO DE RECIPIENTES: 

Debe adicionarse suficiente solución limpiadora y girarlo varias veces, para que una capa de disolución cubra todo el interior, cualquier ruptura en la capa indica un lugar de contaminación.

 

PROTOCOLO DE DESINFECCION Y LAVADO DE MATERIAL CONTAMINADO EN EL LABORATORIO

Material de Vidrio

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio

  DESINFECCIÓN:  

Es un proceso que elimina todos los microorganismos de los objetos o superficies con excepción de las esporas bacterianas. realiza utilizando unSe agente desinfectante. Los mas usados son yodóforos, aldehídos, clorados, alcoholes y peroxígenos

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio GERMICIDA

CONCEN TRACION

NIVEL ACCION

BACT

VIRU LIPO

VIRU HIDRO

TBC

HON GOS

ESPO RAS

50-75%

Intermed

Si

Si

No

Si

Si

No

Peróxido hidrogenode

3-25%

Alto

Si

Si

Si

Si

Si

Si

Formaldehído

3-8%

Alto Intermed

Si

Si

Si

Si

Si

Si

Amonios cuaternarios

0.4-1.6% acuoso

Bajo

Si

Si

No

No

Si

No

Fenólicos

0.4-5% acuoso

Intermed Bajo

Si

Si

Si

No

Si

No

Cloro y derivados

100-10.000 ppm

Intermd

Si

Si

Si

Si

Si

No

30-50 ppm yodo libre

Intermed

Si

Si

Si

Si

Si

No

2%

Alto

si

si

Si

Si

Si

Si

  Alcohol etílico

 Yodóforos

Glutaraldehído

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio

  DESINFECCIÓN:   Prepare diariamente una solución de hipoclorito de sodio a 500 



 

para el lavado de material así: de sodio 5%) 5PPM, cc de límpido comercial (hipoclorito 500 cc de agua del chorro Utilícela para descartar el material y para descontaminar el material biológico (muestras) Deje actuar hasta el día siguiente ( mínimo dos horas) Esta solución se debe renovar todos los días, porque es desactivada por acción de la luz directa. Produce vapores tóxicos al incinerar los residuos infecciosos, cuando a sido agregada a estos

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   Ejemplo:   Si deseamos preparar un litro de solución a una concentración de 5000 ppm y el hipoclorito viene en concentración del 5% sería:   ( 1 litro) x 5000 ppm = 100 cc de hipoclorito   5 x 10   Si la concentración del cloro cambia sea 6%, 13% u otra simplemente cambie en la formula la concentración   x= ( 1 litro) x 5.000 ppm = 38.46 cc de hipoclorito hipoclorito   13 x 10

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   Preparación: 

Medir con probeta plástica los 100 cc de hipoclorito   Agregar el hipoclorito al recipiente en el cual se va a preparar. 



 Añadir agua hasta completar el volumen de solución a preparar. El recipiente usado debe tener una capacidad c apacidad superior a la que se va a preparar.

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   Compuestos yodóforos: 

  

Son líquidos virus, hongos y bacterias conde unacción tiempocontra de contacto de 30 minutos. No tiene acción sobre esporas bacterianas. Desinfectante de nivel intermedio.

Los más usados son yodopovidona en solución o  jabón al 2,5% y yodo polietoxipolipropoxietanol.  Desinfectar unidades y quirófanos, elementos no críticos.

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACION:  

Se hace con el fin de destruir, todos los microorganismos, tanto en medio de cultivo, como en recipiente o instrumentos.

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio

  ESTERILIZACIÓN:   El material que amerite autoclavado por alta contaminación someterlo: a 121ºC, 15 libras de presión por 20 minutos.  

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio ESTERILIZACIÓN: La central de Esterilización debe cumplir con: Recepción del material Lavado Secado Inspección Lubricación 

      



 

Empaque Procesamiento  Almacenamiento  Almacenam iento mater materiales iales est estériles ériles  Almacenamiento  Almacenam iento mater materiales iales no es estériles tériles

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   





Una vez descontaminado el material deje en agua con jabón líquido neutro , lave con cepillo y asa de pipetas tubos o probetas; y laminillaso deben ser enjuagadas con las el láminas cepillo respectivo esponjilla ( este material no debe ser lavado más de 5 veces, después debe descartarse). Saque el agua de jabón con abundante agua del chorro y finalmente deje en agua destilada para extraer los residuos de jabón. Las láminas y laminillas sumergirlas en alcohol etílico y secar con tela que no deje escapar lanilla.

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio





  Los

material de vidrio dejelos secar al aire, tubos luegoy demás clasificar y colocar en sus respectivos puestos .  Al material biológico de descarte adicionar hipoclorito a 500 PPM y descartar al día siguiente en las bolsas rojas que serán enviadas a incineración, mientras es recogida por la ruta de recolección, mantener en canecas con tapa hermética, para evitar sean regadas por animales, roedores o insectos en la central de aseo y residuos.

 

Protocolo de Desinfección y Lavado de Material Contaminado en el Laboratorio   En el laboratorio clínico, de aguas y alimentos, se hace diariamente limpieza, para la suciedad o mugre yuna posteriormente una remover sanitización ( proceso de desinfección eficiente) para esto se utiliza un detergente eficaz, biodegradable y agua de buena calidad.   La desinfección se hace con el objeto de destruir microorganismos patógenos, toxigénicos y saprofíticos.

 

Material del Laboratorio de Microbiología   LIMPIEZA DE MATERIAL DE VIDRIO: 



El material de vidrio que contenga cultivos o cualquier otro tipo de es material microorganismos, colocado encontaminado un recipiente por de descarte para llevarlo a desinfección y posterior esterilización cuando así lo amerite. Luego se lava con agua corriente, se sumerge en solución detergente neutra y utilizando una esponjilla o cepillo de cerdas suaves se lava nuevamente con agua corriente, se deja escurrir y se seca al horno en calor seco, 200 ºC por 1 a 2 horas, según el volumen de material.

 

Material del Laboratorio de Microbiología 

El material de vidrio o cualquier otro material contaminado con microorganismos, es colocado en un recipiente para llevarlo al autoclave para su esterilización 121 º C por 30 minutos. Lavar con agua corriente, Luego se sumerge en solución detergente y posteriormente se lava normalmente con agua del chorro y una esponjilla, se deja escurrir y se seca en calor seco (horno).

 

Material del Laboratorio de Microbiología



Las pipetascon después uso, se colocan un recipiente solucióndedesuhipoclorito de sodio,en1 g/L de cloro libre( 1.000 ppm), se lavan con abundante agua del chorro, se enjuagan con agua destilada, se escurren, se secan en un ambiente de calor seco.

 

Material del Laboratorio de Microbiología   



ESTERILIZACION POR CALOR SECO: Se utiliza el flameado por mechero, para esterilizar asas resistentes al fuego. El horno de aire caliente, que se utiliza para esterilizar el material de vidrio y frascos para toma de muestras utiliza una temperatura de 170 º C por dos horas.

 

Material del Laboratorio de Microbiología   ESTERILIZACION EN CALOR HÚMEDO  HÚMEDO  Envolver el material en papel de esterilización (papel kraft), se sella con cinta de enmascarar para esterilización y se lleva al autoclave a 121·C por 15 a 20 minutos a 15 a 20 libras de presión. Se coloca un Indicador ya sea Químico ( Cinta Indicadora



para vapor, Oxido Integradores de Etileno) químicos, o Biológico Biológico  Cinta   ( Indicadora tiras con esporas específicas: Bacillus stearothermophilus ( vapor), B. subtilis ( oxido Etileno). Se usa para medios de cultivo y materiales

 

Material del Laboratorio de Microbiología   ESTERILIZACION ESTERILIZACION POR MEDIOS QUIMICOS:

  



Se utiliza hipoclorito de sodio al 5 %, a una concentración de 1.000 ppm de cloro libre, que es efectivo contra células bacterianas, vegetativas, esporuladas, virus, hongos y parásitos. Se utilizadepara limpieza los mesones, después trabajar, paradelimpiar paredes yantes pisos yy para sumergir el material sucio antes de esterilizar, los mesones también son limpiados con fenol al 1 % o formol al 4%.

 

Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍSTIC 

 

VAPOR

CALOR SECO

PLASMA

OXIDO DE ETILENO

GAS DE FORMALDEHIDO

Qué esterilizar?

Líquidos hidrosolubles, equipos metálicos e instrumental, material de caucho y material textil.

Artículos de vidrio, instrumental delicado con bordes de corte.

Elementos sensibles al calor.

Elementos sensibles al calor.

Elementos sensibles al calor.

Qué no esterilizar?

Material termosensible.

Telas y materiales de caucho, material termosensible.

Materiales que contengan celulosa: papel, tela, compresas, madera. No líquidos y polvos. Esterilización de canales largos y angostos como

Telas y Siliconas

Artículos porosos: papel, tela, compresas, líquidos. Polvos, silicona.

lúmenes, canales ciegos  

Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST 

 

VAPOR

CALOR SECO

PLASMA

OXIDO DE ETILENO

GAS DE FORMALDEHID

Tipo de Empaque

Algodón, kraf blanco, polipropileno no tejido

aluminio

Tyvek/Mylar y polipropilen no tejido

Kraf blanco, polietileno, Tyvek/Mylar, polipropileno no tejido

Kraf blanco, polietileno, Tyvek/Mylar, polipropileno no tejido

Tiempo y Temperatura

15 min a 121 *C

30 min a 180*C

10 min a 126*C

1 hora a 170*C

45 min a 50*C( 50Lt)

Proceso 6 horas.

8 horas a 65*C

 3 min a 134 *C ( solo en caso

2 horas a 160*C

75 min (100 Lt)

2,5 horas a 150*C

54 min (100 Lt).

Aireamiento 10 horas.

de urgencia)

3 horas a 140*C 6 horas a 120*C

Ciclo corto: cargas que no contienen endoscopios flexibles

Temperatura entre 38*C y 55*C.

Cinta indicadora para Calor Seco ( en el exterior del paquete)

Cinta Indicadora para Plasma ( en el exterior del paquete)

Cinta Indicadora para Oxido de Etileno ( en el

Indicador químico

Cinta indicadora para Vapor ( en el exterior del paquete)

Cinta Indicadora para Formaldehído ( en el exterior

exterior del paquete)

del paquete)

 

Material del Laboratorio de Microbiología CARACTERÍST 

 

VAPOR

CALOR SECO

PLASMA

OXIDO DE ETILENO

GAS DE FORMALDEHID

Indicador

Integrador químico

Integrador Químico

Integrador

Integrador

químico

Vapor ( interior del paquete)

Plasma ( interior del paquete)

químico Oxido de Etileno ( interior del paquete)

químico Formaldehído ( interior del paquete)

Indicador 

Test de Esporas de

Test de

Test de Esporas

Test de

Test de Esporas

biológico

Bacillus stearothermophilus

Esporas de Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria)

de Bacillus stearothermophilus

Esporas Bacillus subtilis variedad niger ( una vez al día en una carga aleatoria)

de Bacillus stearothermopilus (una vez al día en una carga aleatoria)

( una vez al día en una carga aleatoria)

( una vez al día en una carga aleatoria)

 

Material del Laboratorio de Microbiología DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO

Cajas de Petri, tubos con solución salina, medios líquidos de cultivo  

Diariamente

Cuando? Que usa?

 

Hipoclorito de sodio 5000 ppm





Recipientes para descartar el material Elementos de protección personal



 

Material del Laboratorio de Microbiología   DESECHO DE MATERIAL DE CULTIVO 

Esterilizar en el autoclave a 121*C por 1 hora Medios de cultivo de las cajas de petri: desechar en la bolsa roja marcada “peligroso “peligroso infeccioso”



Solución salina y tioglicolato: desecharlos en el sifón



Depositar los tubos en solución de hipoclorito a 5000 ppm durante 30 minutos



Lavar los tubos según las indicaciones del lavado de



material de vidrio.

 

Calidad del material de vidrio



PRUEBAS DE LIMPIEZA PARA EL MATERIAL DE  VIDRIO:

 

Prueba de limpieza



Los vasos sucios generalmente tienen gotas de agua en la superficie interna.

 

Prueba de limpieza  Observamos si el material de vidrio está



cubierto una capa no formapor goticas en lascontinua paredesde ni agua f luye que fluye de manera discontinua.  La forma más simple es llenar el material de vidrio con agua destilada – desionizada y vaciarla. 

 

Prueba de limpieza 



Otra forma de controlar la calidad del lavado del material de vidrio es la presencia de manchas de agua dentro y fuera del vaso o tubo de ensayo. Estas manchas podrían originarse a partir del lavado inadecuado del material con aguaen dura, que produce manchas blanquecinas las paredes al secarse.

 

Prueba de limpieza 

El auxiliar del laboratorio como parte integrante del sistema de garantía de calidad, debe analizar algunos materiales al azar, por lo menos una vez a la semana para detectar restos de detergentes y debe registrar el resultado de esta supervisión, el cual debe ser avalado por el jefe directo o de la sección.

   

Prueba de limpieza 

Cuando se advierte restos de detergentes en cualquiera de los materiales de tomarse las precauciones y vidrio ejercer deben los procedimientos de corrección de inmediato.



Revisar la calidad del detergente o del agua y prolongar el tiempo de enjuague con agua del chorro y destilada posterior al proceso de limpieza.

 

Prueba de limpieza 





La eliminación del detergente puede comprobarse con una solucion de:   2mg de sulfobromoftaleina sódica BSP en 10 ml de agua destilada O a 20 ml de agua desionizada agregar dos gotas de BSP



la disolución puede hacerse en un recipiente y ser usada para lavar las paredes internas y externas del material de vidrio seleccionado. La aparición de un color rosa ( púrpura) en cualquier momento indica la presencia de detergente residual.

 

Quepalma Dios los tenga en la de su mano  Y que los Ángeles los cuiden siempre.

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