Laporan Uji Karbohidrat

 

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA PRAKTIKUM VI UJI KARBOHIDRAT

OLEH:

NAMA

: NYOMAN ADRINI

STAMBUK

: F1D1 14 045

KELOMPOK

: I (SATU)

ASISTEN PEMBIMBING PEMBIMBING : ADE PUTRA RIZKY T.

PROGRAM STUDI BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS HALU OLEO KENDARI 2015

 

I.  PENDAHULUAN

A. Latar Belakang  Karbohidrat merupakan zat gizi sumber energi paling penting bagi makhluk hidup karena molekulnya menyediakan unsur karbon yang siap digunakan oleh sel. Secara kimia, karbohidrat dapat didefinisikan sebagai turunan aldehid atau keton dari alkohol polihidrik (karena mengandung gugus hidroksi (lebih dari satu), atau sebagai senyawa yang menghasilkan turunan tersebut apabila dihidrolisis. Senyawa karbohidrat dikelompokkan menjadi empat kelompok penting, yaitu monosakarida, disakarida, oligosakarida dan polisakarida. Monosakarida merupakan karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis dan tidak kehilangan sifat gulanya, contohnya ribosa dan glukosa. Disakarida merupakan karbohidrat yang bila dihidrolisis menghasilkan dua monosakarida yang sama atau berbeda. Contohnya yaitu sukrosa yang jika dihidrolisis akan menghasilkan glukosa dan fruktosa. Polisakarida yang merupakan polimer monosakarida yang memiliki  bobot molekul yang tinggi dan bila dihidrolisis akan menghasilkan lebih dari sepuluh monosakarida, contohnya amilum, glikogen, dan selulosa. Pengujian kandungan karbohidrat dapat dilakukan dengan beberapa metode, diantaranya dengan menggunakan uji benedict dan uji iodin. Uji  benedict merupakan uji kimia untuk mengetahui kandungan gula (karbohidrat)  pereduksi. Gula pereduksi meliputi semua jenis monosakarida dan beberapa disakarida, seperti laktosa dan maltosa. Uji iodin merupakan uji kimia untuk mengetahui kandungan amilosa dan amilokpektin pada pati. Berdasarkan

 

uraian tersebut, maka perlu dilakukan praktikum uji karbohidrat melalui uji  benedict dan uji iodin.

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah pada praktikum uji karbohidrat yaitu : 1.  Bagaimana mengidentifikasi karbohidrat melalui uji benedict ? 2.  Bagaimana mengidentifikasi karbohidrat melalui uji iodin ? C. Tujuan Praktikum

Tujuan yang ingin dicapai pada praktikum uji karbohidrat yaitu :   1.  Untuk mengidentifikasi karbohidrat melalui uji benedict 2.  Untuk mengidentifikasi karbohidrat melalui uji iodin D. Manfaat Praktikum

Manfaat yang diperoleh dari praktikum uji karbohidrat yaitu : 1.  Dapat mengidentifikasi karbohidrat melalui uji benedict 2.  Dapat mengidentifikasi karbohidrat melalui uji iodin

 

II. TINJAUAN PUSTAKA

Senyawa karbohidrat terdiri atas atom C, H dan O. Rumus umum dari senyawa karbohidrat adalah Cn(H2O)n atau CnH2nOn . Kata karbohidrat berasal dari kata karbon dan air, secara sederhana karbohidrat didefinisikan sebagai  polimer gula. Karbohidrat adalah karbon yang mengandung sejumlah besar gugus hidroksil. Karbohidrat paling sederhana bisa berupa aldehid (disebut polihidroksi aldehid atau aldosa) atau berupa keton (disebut polihidroksiketon atau ketosa) (Mukaromah, dkk., 2010). Pati umumnya akan terbentuk dari dua polimer molekul glukosa yaitu amilosa (amylose (amylose)) dan amilopektin (amylopectin (amylopectin). ). Amilosa merupakan polimer glukosa rantai panjang yang tidak bercabang sedangkan amilopektin merupakan  polimer glukosa dengan susunan yang bercabang-cabang. Komposisi kandungan amilosa dan amilopektin ini akan bervariasi dalam produk pangan dimana produk  pangan yang memiliki kandungan amilopektin tinggi akan semakin mudah untuk dicerna (Hawab, 2001). Gugus reduksi adalah gula yang mempunyai gugus aldehid atau keton  bebas yang dalam suasana basa dapat mereduksi logam-logam. Komponen gula akan teroksidasi menjadi asam-asam (asam aldonat, asam ketonat, atau asam uronat). Sebagian gula disakarida (sukrosa) mengalami hidrolisis menjadi glukosa dan fruktosa karena adanya air didukung kerja enzim invertase kemudian  berlanjut terjadi fermentasi membentuk asam asetat dan beberapa asam organik lainnya (Indahyanti, dkk., 2013).

 

Larutan Benedict terbuat dari campuran CuSO4, NaOH, dan Na sitrat, gula tersebut akan mereduksi C u2+ yang berupa Cu(OH)2 menjadi Cu+  sebagai CuOH, selanjutnya menjadi Cu 2O yang tidak larut, berwarna kuning atau merah. Pada saat bersamaan gula pereduksi akan teroksidasi dalam larutan benedict. Gugus aldehida pada aldoheksosa mudah teroksidasi menjadi asam karboksilat dal  pH netral oleh pengoksidasi. Gugus aldehida atau gugus keton monosakarida, dapat di reduksi secara kimia atau enzimatis menjadi gula alkohol (Yuanita, 2009). Uji Iodin digunakan untuk memisahkan amilum atau pati yang terkandung dalam larutan. Reaksi positifnya ditandai dengan adanya perubahan warna menjadi biru. Warna biru yang dihasilkan diperkirakan adalah hasil dari ikatan kompleks antara amilum dengan Iodin dan sewaktu amilum yang telah ditetesi Iodin kemudian dipanaskan, warna yang dihasilkan sebagai hasil dari reaksi yang  positif akan menghilang, ketika didinginkan warna biru akan muncul kembali (Monruw, 2010). Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui adanya gula pereduksi dalam suatu larutan dengan indikator yaitu adanya perubahan warna khususnya menjadi merah bata. Benedict reagen digunakan untuk menguji atau memeriksa kehadiran gula pereduksi dalam suatu cairan. Monosakarida yang bersifat redutor, dengan diteteskannya reagean akan menimbulkan endapan merah bata. Selain menguji adanya gula pereduksi, juga berlaku secara kuantitatif, karena semakin banyak gula dalam larutan maka semakin gelap warna endapan (Wahyudi, 2005).

 

III. METODE PRAKTIKUM

A. Waktu dan Tempat

Praktikum uji karbohidrat dilaksanakan pada hari Jum’at, 4 Desember 2015 pukul 14.00- 17.00 WITA. Bertempat di Laboratorium Botani, Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Halu Oleo, Kendari.

B. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat yang digunakan pada praktikumuji karbohidrat dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Alat dan Kegunaan No. Nama Alat 1. Tabung reaksi

2. 3.

Rak tabung reaksi Gelas kimia

4. 5. 6. 7. 8.

Pipet tetes  Hot plate Kamera Alat tulis Stopwatch

Kegunaan menyimpan larutan

Wadah yang akan diamati Tempat meletakkan tabung reaksi Tempat merebus tabung yang beisi objek  pengamatan Mengambil larutan dalam jumlah sedikit Memanaskan larutan yang akan diamati Mendokumentasikan hasil pengamatan Menulis hasil pengamatan Untuk menghitung waktu

 

2. Bahan

Bahan yang digunakan pada praktikum uji karbohidrat dapat dilihat  pada Tabel 2. Tabel 2. Bahan dan Kegunaan No. Nama Bahan 1. Aquades 2. Larutan benedict 3. Larutan Larutan iodin 4. Larutan pati 5. Larutan glukosa 6. Larutan HCl 6N 7. Larutan NaOH 6% 8. Kertas 9. Air

Kegunaan

Sebagai pelarut Sebagai larutan penguji Sebagai larutan penguji Sebagai objek pengamatan Sebagai objek pengamatan Larutan penghidrolisis pati Larutan penghidrolisis pati Penghantar panas pada tabung reaksi Untuk merebus tabung reaksi yang berisi objek pengamatan

C. Prosedur Kerja

Prosedur kerja pada praktikum uji karbohidrat yaitu sebagai berikut: 1.  Uji Iodin Tabung 1

Tabung 2

Tabung 3

3 mL pati

3 mL pati

3 mL pati

2 tetes aquades

2 tetes HCl 6 N

2 tetes NaOH 6%

Diamati Ditambahkan larutan iodin Dipanaskan pada hot  plate selama  plate selama 5 menit Didinginkan Diamati perubahan warna Hasil Pengamatan

 

2.  Uji Benedict

Tabung 1

Tabung 2

8 ml larutan gula 5 tetes larutan benedict

8 ml larutan pati 3 tetes larutan benedict

Dipanaskan pada hot  plate selama  plate selama 5 menit Didinginkan Diamati perubahan warna Hasil Pengamatan

 

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 

A. Hasil Pengamatan

Hasil pengamatan pada praktikum ini dapat dilihat pada Tabel 3 dan 4. Tabel 3. Hasil pengamatan Uji Iodin Tabung

Jenis Perlakuan

Tabung 1

3 ml larutan pati + 2 tetes aquades→diamati → ditambahkan larutan iodin→dipanaskan pada hot  plate selama  plate selama 5 menit →didinginkan→ diamati perubahan

Hasil Pengamatan Pengamatan Sebelum Sesudah

warna Keterangan: Larutan berwarna kekuningan Tabung 2

Keterangan: Larutan berwarna ungu kehitaman

3 ml larutan pati + 2 tetes HCl→diamati→  HCl→diamati→  ditambahkan larutan iodin→dipanaskan pada hot  plate selama  plate selama 5 menit→  didinginkan→ menit→ diamati perubahan warna Keterangan: Keterangan: Larutan berwarna Larutan berwarna kuning kecoklatan ungu kehitaman

Tabung 3

3 ml larutan pati + 2 tetes NaOH→diamati→  NaOH→diamati→  ditambahkan larutan iodin→dipanaskan pada hot  plate selama  plate selama 5 menit→didinginkan →diamati perubahan warna Keterangan: Larutan berwarna  bening

Keterangan: Larutan berwarna  bening

 

  Tabel 4. Hasil pengamatan Uji Benedict Tabung

Jenis Perlakuan

Tabung 1

8 ml larutan gula + 5 tetes larutan benedict → dihomogenkan→di  panaskan pada hot    plate selama 5 menit → didinginkan→  didinginkan→  diamati perubahan warna

Hasil Pengamatan Pengamatan Sebelum  Sesudah 

Keterangan: Larutan berwarna  biru muda  Tabung 2

Keterangan: Larutan berwarna orange 

8 ml larutan pati + 3 tetes larutan benedict →dihomogenkan→di  panaskan pada hot    plate selama 5 menit → didinginkan→ didinginkan→   diamati perubahan warna Keterangan: Larutan berwarna  biru muda 

Keterangan: Larutan berwarna  biru muda

B. Pembahasan

Karbohidrat merupakan polihidroksi aldehida atau keton atau senyawa yang menghasilkan aldehid dan keton apabila dihidrolisis. Nama karbohidrat  berasal dari kenyataan bahwa kebanyakan senyawa dari golongan ini mempunyai rumus empiris, yang menunjukkan bahwa senyawa tersebut adalah karbon “hidrat”. “hidrat”. Karbohidrat di bagi menjadi empat golongan besar  berdasarkan

jumlah

monomernya,

yaitu

monosakarida,

disakarida,

oligosakarida dan polisakarida. Pati merupakan contoh senyawa polisakarida,

 

terdapat dalam jumlah tinggi pada golongan umbi seperti kentang dan pada  biji-bijian seperti jagung, tetapi kemampuan membentuk pati dijumpai pada hampir semua sel tanaman. Pati mengandung dua jenis polimer glukosa yaitu α-amilosa dan amilopektin. α-Amilosa terdiri dari rantai unit-nit D-glukosa yang panjang dan tidak bercabang, digabungkan oleh ikatan α(1 → 4). Rantai ini beragam dalam berat molekulnya dari beberapa ribu sampai 500.000. Amilopektin  juga memiliki berat molekul yang tinggi tetapi strukturnya st rukturnya bercabang tinggi. Ikatan glikosidik yang menggabungkan residu glukosa yang berdekatan di dalam rantai amilopektin adalah α(1 → 6). 6). Pati dapat diuraikan menjadi gula sederhana melalui proses hidrolisis. Reaksi hidrolisis ini, terjadi serangkaian reaksi kimia yang melibatkan air dan juga membutuhkan adanya senyawa yang bersifat katalis. Amilum atau pati ini dapat terhidrolisis dengan menggunakan asam, misalnya HCl maupun basa misalnya NaOH sehingga menjadi molekul yang sederhana yaitu glukosa. Praktikum uji karbohidrat dilakukan menggunakan larutan glukosa dan larutan pati, direaksikan dengan larutan benedict dan iodin sebagai larutan  penguji

kandungan

karbohidrat.

Uji

benedict

merupakan

uji

untuk

membuktikan adanya gula pereduksi. Gula pereduksi adalah gula yang mengalami reaksi hidrolisis dan bisa diurai menjadi sedikitnya dua buah monosakarida. Karateristiknya tidak bisa larut atau bereaksi secara langsung dengan benedict, contohnya semua golongan monosakarida, sedangkan gula non pereduksi struktur gulanya berbentuk siklik yang berarti bahwa hemiasetal

 

dan hemiketalnya tidak berada dalam kesetimbangannya, contohnya fruktosa dan sukrosa. Larutan gula dan pati ditetesi larutan benedict dengan perlakuan yang sama kemudian dipanaskan. Setelah proses pemanasan yang dilakukan,  pada tabung I terjadi perubahan warna, yang semula berwarna biru muda menjadi warna orange, sedangakan pada tabung II tidak terjadi perubahan warna. Larutan yang terdapat pada tabung

I yaitu larutan gula, perubahan

warna yang terjadi pada tabung I menunjukkan bahwa adanya kandungan glukosa dan gula pereduksi pada larutan tersebut. Semakin pekat pula warna yang dihasilkannya maka kandungan glukosanya semakin tinggi Tabung II tidak terjadi perubahan warna, dimana warna tetap  berwarna biru muda setelah pemanasan. Tidak terjadinya perubahan warna dikarenakan larutan pada tabung II yaitu pati tidak mengandung glukosa atau tidak termasuk golongan gula pereduksi. Sifat homogen dan tidak homogennya suatu larutan bisa mempengaruhi keberhasilan pengujian suatu larutan. Selain itu, kondisi larutan yang sudah lama juga bisa turut mempengaruhi. Pengamatan uji iodin dilakukan dengan menggunakan tiga larutan, yang  berbeda sebagai penghidrolisis pati, yaitu aquades, HCl 6 N dan NaOH 6%. Uji iodin bertujuan untuk mengidentifikasi kandungan amilosa dan amilopektin yang terdapat dalam polisakarida. Iodium dapat digunakan untuk uji karbohidrat karena pada uji iodium hanya patilah yang menunjukan reaksi  positif bila direaksikan dengan iodium. Hal ini disebabkan karena dalam larutan pati terdapat unit-unit glukosa yang membentuk rantai heliks karena adanya ikatan dengan konfigurasi pada tiap unit glukosanya. Bentuk ini

 

menyebabkan pati dapat membentuk kompleks dengan molekul iodium yang dapat masuk ke dalam spiralnya, sehingga menyebabkan warna biru tua pada kompleks tersebut. Polisakarida pada umumnya membentuk rantai helix (melingkar), sehingga

dapat

berikatan

dengan

iodin,

sedangkan

disakarida

dan

monosakarida yang tidak membentuk struktur helix sehingga tidak dapat  berikatan dengan iodin. Larutan yang mengalami perubahan warna yaitu pada tabung I dan tabung II, sedangkan tabung III tidak mengalami perubahan warna. Perubahan warna pada tabung I yaitu semula berwarna kekuningan menjadi ungu kehitaman. Hal ini disebabkan aquadest pada tabung I bersifat netral sehingga tidak dapat menghidrolisis glukosa walaupun disertai  pemanasan. Aquades bukanlah reagent dan aquades memiliki pH netral, tidak asam dan tidak basa. Pencampuran aquades tidak akan menghambat reaksi hidrolisis pati. Sehingga dengan penambahan larutan iodin maka terjadi  perubahan warna. Aquades hanya berfungsi sebagai pelarut. Tabung kedua, kedua, perubahan warna yang yang terjadi yaitu dari warna kuning kecoklatan

menjadi

ungu

kehitaman.

Larutan

HCl

berfungsi

untuk

menghidrolisis polisakarida menjadi monosakrida penyusunnya. Pati yang telah terhidrolisis sempurna menunjukkan perubahan warna setelah dilakukan  proses pemanasan. Hal ini menunjukkan bahwa larutan pada tabung tersebut mengandung amilosa. Penggunaan iodin terhadap amilosa menunjukkan warna biru gelap, yang terjadi karena pembentukan kompleks. Kompleks tersebut terjadi akibat

 

amilosa membentuk kumparan heliks di sekeliling molekul iodin. Namun, pada hasil pengamatan warna yang dihasilkan setelah pemanasan yaitu ungu kehitaman. Hal ini disebabkan karena polimer amilosa terputus menjadi lebih  pendek, sehingga terjadi perubahan ikatan kompleks dengan iodin sehingga warna menjadi gelap. Semakin pekat perubahan warna pada bahan makanan yang diujikan, semakin besar kandungan polisakarida yang terkandung didalamnya. Tabung ketiga yang semula berwarna bening setelah pemanasan tidak terjadi perubahan warna yaitu tetap berwarna bening. Hal ini disebabkan karena iodin bereaksi dengan basa sehingga tidak mengalami reaksi dengan amilum atau pati. NaOH yang sudah ada dalam larutan lebih dulu bereaksi dengan iodin membentuk

suatu senyawa, sehingga pada uji dengan

 penambahan NaOH tersebut tidak terjadi perubahan warna pada larutan amilum.

 

V. PENUTUP

A. Simpulan

Simpulan dari praktikum uji karbohidrat yang telah dilakukan yaitu: 1.  Uji iodin dilakukan untuk mengidentifikasi karbohidrat yaitu kandungan amilosa dan amilopektin pada pati, semakin pekat warna yang dihasilkan maka kandungan amilosa pada pati semakin tinggi. 2.  Uji benedict dilakukan untuk mengidenifikasi karbohidrat yang termasuk gula pereduksi.

B. Saran

Saran yang diajukan pada praktikum uji karbohidrat yaitu sebaiknya sebaiknya asisten memberikan beberapa materi pengantar sebelum kegiatan praktikum dimulai dan prosedur yang yang akan dilakukan telah diketahui terlebih dahulu sehingga tidak terjadi kesalahan saat praktikum serta diharapkan kepada  praktikan tidak membuat aktivitas tambahan saat kegiatan praktikum  berlangsung dan memperhatikan saat praktikum berlangsung agar praktikum yang dilakukan dapat dimengerti.

 

  DAFTAR PUSTAKA

Manruw, 2010, Pengantar 2010, Pengantar Biokimia, Biokimia, UI Press, Jakarta. Wahyudi, 2005, Kimia 2005, Kimia Organik II . UM Press, Malang. Hawab, M., 2001,  Dasar-Dasar Biokimia Umum, Umum, Institut Pertanian Bogor: Unit Biokimia Jurusan Kimia FMIPA, Bogor. Yuanita, L., 2009, Analisis Monomer dan Gugus Fungsi Kompleks Fe- Serat Pangan pada Perebusan Kondisi Asan, J. Ilmu  Ilmu Dasar , 10(III) :121-123 Indahyanti, E., Kamulyan, B., Ismuyanto, B., 2013, Optimisme Konsentrasi Garam Bisulfit Pada Pengendalian Kualitas Nira Kelapa , J.  Unimus Unimus   , 12(II):54-55 Mukaromah, A.H., 2010, Proses Hidrolisis Dengan Variasi Asam Pada Pembuatan Ethanol , J. Unimus Unimus ,  , 32(V):20-22