Laporan Praktikum Protein Total

 

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA  “PEMERIKSAAN KADAR PROTEIN TOTAL”

Disusun oleh: KELOMPOK 5

Nur Hid!h "

P#$%%5##&''5

No(i An Andrini

P#$%%5##&')&

Kels : II A

POLITEKNIK POLITEKN IK KES KESEHAT EHATAN AN KEMENTRI KEMENTRIAN AN KES KESEHAT EHATAN AN PRO*RAM STUDI D+III ,ARMASI BANDUN* )'#5 I- .UDU .UDUL L

 

Pemeriksaan kadar protein total

II- TAN**AL TAN**AL PRAKTIK PRAKTIKUM UM III- TU.UAN TU.UAN PRAKTI PRAKTIKUM KUM Menentukan kadar protein yang ada pada sampel dengan menggunakan metode Biuret. I/-- PRINSIP PRAKTIKUM I/

Ikatan peptide yang terdapat dalam protein dalam suasana basa akan  bereaksi dengan pereaksi biuret membentuk kompleks berwarna ungu, intensitas warna yang terjadi setara dengan kadar protein total dalam sampel dan diukur dengan menggunakan fotometer pada panjang gelombang 546 nm. /- DASAR DASAR TEORI TEORI Pro0ein

Protei Pro tein n merupa merupakan kan polime polimerr L!ami L!amino. no. "uatu "uatu asam amino amino adala# adala# senyawayan senyaway ang g men mengandung gandung gugus amino dan gugus karboksil. Pada asam amino !amino,kedua gugus ini terikat pada atom karbon yang sama, yang dinamakan sebagaikarbon!. karbon! setiap asam amino juga berikatan dengan atom $ dan berbagai berbagai pengganti, pengganti, dinamakan gugus % atau rantai samping &Murray, &Murray, '(() '(()*. *.+ +erd rdap apat at '( as asam am amin amino o yang ang la lai im m di dida dapa patt da dan n memb memben entu tuk  k   protein."embilan belas asam amino #anya berbeda pada rantai samping % atau karboksilya karbo ksilyang ng terikat terikat pada karbon!. -ang -ang kedua pulu#, yaitu prolin berbeda berbeda  pada rantai sampingnya yang merupakan struktur inin yang mengandung nitrogen amino. &Murray, '(()* Ikatan peptide merupakan polimer tak berabang. "elama polimerisasi gugus !  bereaksi dengan ! karboksil dari asam amino lainnya membentuk  ikatanamida yang dikenal sebagai ikatan peptide. /arena alasan ini protein  jugadinamakan polipeptida &Murray, &Murray, '(()*. %antai polipeptida dapat dianggap memiliki ' komponen, yaitu rangka monoton berulang, dimana karbon! dan ikatan peptide saling bergantian0 dan  berbagai rantai samping yang berupa asam amino yang terikat pada karbon !."emua gugus !amino, keuali !amino yang terdapat pada asam amino  pertama dan  semua gugus !karboksil, keuali yang terletak pada asam amino

 

terak#i tera k#irr berper berperana anan n dalam dalam ikatan ikatan peptid peptide. e. 1adi 1adi setiap setiap rantai rantai protein protein #anya #anya mempunyai mempu nyai satu  gugus !amino !amino bebas bebas dan satu gugus gugus !karb !karboks oksil il bebas, bebas, masingmasing pada 2 dan3 terminal te rminal &Murray, '(()*. Meskipun adanya pembatasan rotasi yang ditimbulkan ole# polaritas ikatan peptide, rantai polipeptida mempunyai fleksibelitas yang besar. /arena karbon!  dari setiap residu asam amino yang berdekatan di#ubungkan ke atom yang yan g berdek berdekatan atan dalam dalam rantai rantai ole# ole# ikatan ikatan tungg tunggal. al. %antai %antai bebas bebas memutar  memutar  sekitar seki tar dua pertig pertigaa ikatan ikatan yang yang memben membentuk tuk tulang tulang punggu punggungn ngnya ya.. /arena /arena konform kon formasi asi bebas bebas ini rantai rantai polipe polipepti ptida da mampu mampu melipa melipatt menjad menjadii berbag berbagai ai  bentuk. alam lingkungan alamia#nya, setiap protein enderung #anya mengambil satu konformasi, dan dinamakan konformasi asli. Bentuk lipatan  protein ditentukan ole# pembatasan dan tarik menarik. %igiditas ikatan  peptide dan

rintangan antara rantai

samping

menega# rantai

polipeptida

mengam men gambil bil bentuk bentuk konfor konformas masii tertent tertentu. u. /onfor /onformasi masi yang yang diambil diambil adala# adala#  bentuk dimana jumla# ikatan nonkoalen maksimal yangdibentuk ole# protein dan pelarut dimana protein ditemukan &Murray, '(()*. '(()*. +erdapat +erdapat 4 tingkat tingkat struktur struktur protein, protein, yaitu primer, sekunder, sekunder, tersier, tersier, dankuartener. "truktur primer protein adala# urutan linear asam amino dan terminal 2sampai terminal 3. struktur primer protein menentukan identitas. +ubu# manusiamengandung beriburibu spesies protein, seperti #emoglobin,  pembawa oksigendalam dara#, dan tripsin, suatu eim penernaan yang di#asilkan di#asil kan ole# panreas.Masingm panreas.Masingmasing asing spesies spesies protein protein berbeda berbeda berbeda berbeda dari  protein lainnya dalam strukturprimernya. "ebaliknya semua molekul spesies  protein tertentu mempunyai strukturprimerb yang sama. "truktur primer juga menentukan menent ukan pelipatan pelipatan polipeptida polipeptida.. 1adistruktur 1adistruktur primer primer menentukan menentukan struktur  struktur  sekunder, tersier, dan kuartener protein &Murray, '(()*

,un1si Pro0ein 1.

ntuk pertumbu#an dan pembentukan 2. Mekanisme pengangkutan atat metabolit 3.

Menjaga keseimbangn airan tubu#

 

4.

Mekanisme perta#anan tubu# dalam merangkang kekebalan 5. 7aktor genetik  6. Mengatur metabolism tubu# 7. 7aktor yang diperlukan dalam koagulasi dara# normal /I- PROSEDUR PROSEDUR PRAKTIKUM PRAKTIKUM

a. Pe Pemb mbua uata tan n blan blanko ko 8. ipipe ipipett sebany sebanyak ak 4( 9l a:uade a:uadest st mengg mengguna unakan kan lin linipe ipette tte lalu lalu '.

dimasukkan kedalam tabung reaksi ipipe ipipett sebanya sebanyak k '((( '((( 9l reagen reagen 8 menggu menggunak nakan an linipe linipette tte lalu lalu diamkan diamkan

selama 85 menit ). "etela "etela# # 5 menit, menit, ditam ditamba# ba#kan kan 5(( 5(( 9l reage reagen n ' menggu menggunak nakan an linip linipette ette  b. Pembuatan standar 8. ipipet ipipet sebanyak sebanyak 4( 9l standar standar dengan dengan konsen konsentrasi trasi 5g;dL 5g;dL menggunak menggunakan an linipette lalu dimasukkan kedalam tabung reaksi '. ipipet ipipet sebanyak sebanyak '((( '((( 9l reagen reagen 8 menggunak menggunakan an linipette linipette lalu lalu diamkan diamkan selama 85 menit ). "etela# "etela# 5 menit, menit, ditamba# ditamba#kan kan 5(( 5(( 9l reagen reagen ' menggu menggunakan nakan linipette linipette . Pe Pemb mbua uata tan n "a "amp mpel el 8. ipipet ipipet sebanyak sebanyak 4( 9l sampel sampel dengan dengan konsentr konsentrasi asi 5g;dL 5g;dL menggun menggunakan akan linipette lalu dimasukkan kedalam tabung reaksi '. ipipet ipipet sebanyak sebanyak '((( '((( 9l reagen reagen 8 menggunak menggunakan an linipette linipette lalu lalu diamkan diamkan selama 85 menit ). "etela# "etela# 5 menit, menit, ditamba# ditamba#kan kan 5(( 5(( 9l reagen reagen ' menggu menggunakan nakan linipette. linipette. iamkan selama satu jam lalu diukur menggunakan spektrofotometer  pada gelombang maksimum 546 nm /II- DATA DATA PEN*AMAT PEN*AMATAN AN 2 PERHITUN*AN  2ama Pasien < 3ieu =bsorban sampel < (.8(> =bsorban standar < (.886 Per#itungan < 0.108 0.116

 x 5 g / dl =4.65 g / dl

/III/I II- PEMBAH PEMBAHASA ASAN N

ua kelompok besar daripada serum protein yang umumnya diminta untuk unt uk diperi diperiksa ksa di bidang bidang laborat laboratori orium um /imia /imia /linik /linik adala# adala# =lbum =lbumin in dan ?lobulin. 7raksi albumin merupakan fraksi yang #omogeny, sedangkanfraksi

 

globulin adala# fraksi yang #eterogen yang terdiri dari berbagai jenis fraksi yan  berbeda . karena kedua perbedaan tersebut, maka pemeriksaan yang rutin dilakuk dila kukan an adala# adala# protei protein n total total dan albumi albumin, n, dimana dimana selisi# selisi#ny nyaa merupa merupakan kan globulin. ntu n tuk k pr prot otein ein to tota tall ya yang ng ru ruti tin n di digu guna naka kan n ad adala ala# # meto metoda da bi biur uret et,, sedangkan sedang kan untuk albumin yang digunakan digunakan adala# metoda warna &B3?;B3P*. &B3?;B3P*. Pada praktikum ini menggunakan metode biuret karena akan a kan meng#itung kadar   protein total. /adar protein total yang normal adala# #suis Protei Pro tein n merupak merupakan an polime polimerr L!am L!amino ino.. "uatu "uatu asam amino amino adala# adala# senyawayan senyaway ang g men mengandung gandung gugus amino dan gugus karboksil. Pada asam amino !amino,kedua gugus ini terikat pada atom karbon yang sama, yang dinamakan sebagaikarbon!. karbon! setiap asam amino juga berikatan dengan atom $ dan berbagai berbagai pengganti, pengganti, dinamakan gugus % atau rantai samping &Murray, &Murray, '(() '(()*. *.+ +erd rdap apat at '( as asam am amin amino o yang ang la lai im m di dida dapa patt da dan n memb memben entu tuk  k   protein."embilan belas asam amino #anya berbeda pada rantai samping % atau karboksilya karbo ksilyang ng terikat terikat pada karbon!. -ang -ang kedua pulu#, yaitu prolin berbeda berbeda  pada rantai sampingnya yang merupakan struktur inin yang mengandung nitrogen amino. &Murray, '(()*   ji biuret ini dapat digunakan digunakan untuk untuk mengeta#ui mengeta#ui ada atau tidaknya tidaknya ikatan peptide dalam suatu senyawa se#ingga uji biuret dapat dipakai untuk  menunjukan adanya senyawa protein. Langka# pengujian yang dapat dilakukan adala# larutan sampel yang diduga mengandung protein ditetesi dengan larutan  2a@$ kemudian diberi beberapa tetes larutan 3u"@4 ener. =pabila larutan  beruba# menjadi arna unggu maka larutan tersebut mengandung mengandung protein. %eaksi biuret merupakan reaksi warna yang umum untuk gugus peptide dan protein. %eaksi positif ditandai dengan terbentuknya warna ungu karena terbentuk senyawa kompleks antara 3u'A dan 2 dari molekul ikatan peptide. Banyaknya asam amino yang terikat pada ikatan peptide mempengaru#i warna reaksi ini. "enyawa "enyawa dengan dengan dipeptida dipeptida memberikan warna mera#. Beberapa  protein yang mempunyai gugus 3"2$, 3$2$ dalam molekulnya juga member tes warna positif dari reaksi biuret ini membentuk suatu senyawa kompleks.

 

Pada praktikum ini pengukuran pengukuran dilakukan dengan spektrofoto spektrofotometri metri u  pada panjang gelombang maksimum 546 nm. Pertama tama kita lakukan blank  ero terlebi terlebi# # da#ulu da#ulu,, selanju selanjutny tnyaa #itung #itung absorb absorban an standa standarr lalu lalu dilanju dilanjutka tkan n dengan sampel yang akan diukur. "tandar dengan konsentrasi 5g;dl didapatkan absorban sebesar (.886 sedangkan sampel abosrbannya sebesar (.8(>. setela# dilakukan per#itungan kadar sampel sebesar 4.65 g;dl.

I3- KESIM KESIMPUL PULAN AN

/adar protein total pada sampel pasien bernama 3ieu sebesar 4.65 g;dl yang merupakan kadar protein total pada anakanak. "edangkan kadar protein normal sebesar  normal sebesar 

3- DA,TAR DA,TAR PUSTAKA PUSTAKA

Lange Murray, %obert /.,dkk /.,dkk '(().  Harper’  Harper’ss Ilustrated Bio#emistry. Bio#emistr y. London< London