(Laporan Praktikum Isolasi Mikroba) (Jelang Bajapana) (13431039) (4B) 1

LAPORAN PRAKTIKUM MATA KULIAH ISOLASI MIKROBA Dosen Pengampu: PUJIATI S.Si.,M,Si Asisten Dosen: Pina A!" Puspita

Maiun, #$ Mei #%&' Disusun O(e): Je(ang Ba*apana &++&%+-B

PRO/RAM STUDI P0NDIDIKAN BIOLO/I 1AKULT 1AKULTAS AS P0NDIDIKAN P0NDI DIKAN MAT0MATIKA MAT0MATIKA DAN ILMU P0N/0TAHUAN ALAM IKIP P/RI MADIUN #%&'

ISOLASI MIKROBA

A. TAN// N//AL: Praktikum dilaksanakan pada tanggal 26 Mei 2015 di Laboratorium

2 IKIP PGRI MAI!" B. TUJU TUJUAN AN PRAK PRAKTI TIKU KUM M: 1# Menga$arkan Menga$arkan Ma%asis&a Ma%asis&a 'ara mengisolasi mengisolasi mikroba mikroba dari dari suatu suatu 'ampuran 'ampuran 2# Menga$arkan Menga$arkan ma%asis&a ma%asis&a mengeta%u mengeta%uii 'ara mengiso mengisolasi lasi dengan dengan pengen pengen'eran 'eran

2. DASA DASAR R T0O T0ORI RI : Populasi mikroorganisme (ang ada di alam sekitar kita ini sangatla% besar 

dan 'ukup kompleks# Ratusan spesies mikroba menguasai setiap bagian tubu% kita# Mereka terdapat dalam $umla% (ang besar# Mikroorganisme dapat diperole% dari lingkungan air) tana%) udara) substrat (ang berupa ba%an pangan) tanaman dan

%e&an e&an##

*eri *erik kut

pen pen$ela $elasa san n

dari ari

mik mikroor roorg ganis anism me

dalam alam

air air

dan

mikroorganisme dalam tana% : 1# Mikroorganisme dalam Air  Air merupakan +at (ang mutlak bagi setiap mak%luk %idup) dan kebersi%an air adala% s(arat utama bagi ter$aminn(a kese%atan# Menurut tempatn(a) air dapat  berada dipermukaan tana% dan selan$utn(a air ini disebut air permukaan) serta dapat pula berada dalam tana%) dan air ini selan$utn(a disebut air tana%# Air %u$an (ang $atu% di tana% sebagian meresap ke dalam tana% dan sebagian lain dapat menggenang di permukaan tana%) %al ini bergantung kepada kondisi tana%# Air  %u$an %u$an

memb memba& a&aa

serta serta

mikr mikroo oorg rgan anism isme,m e,mik ikro roor orga gani nisme sme

(ang (ang

senan senantia tiasa sa

 ber%amburan di udara) lebi%,lebi% di udara (ang mengatasi tana% (ang berdebu# -etiba di tana%) air men$adi lebi% 'emar lagi karena sisa,sisa mak%luk %idup .sampa% .sampa%/) /) kotora kotoran n dari dari %e&an %e&an maupun maupun manusia manusia)) dan mungki mungkin n $uga $uga kotora kotoran n  berasal dari pabrik,pabrik .&id$oseputro)1/# Air Air (ang (ang meng mengan andu dung ng mikr mikroo oorg rgan anis isme me itu itu dise disebu butt air air (ang ang kena kena kontaminasi) $adi air itu tidak steril# *eberapa pen(akit menular dapat se&aktu, se&ak se&aktu tu melu meluas as men$ men$ad adii &aba &aba% % .epi .epide demi mi// karen karenaa peran peranan an air air (ang (ang 'emar  'emar  .&id$oseputro)1/# Air tana% mengandung +at,+at anorganik maupun +at,+at organik dan ole% karen arenaa

itu itu

merup erupak akan an

tem tempat pat

baik baik

bagi agi

ke%i ke%idu dupa pan n

mikro ikroor org ganis anism me#

Mikroorga Mikroorganisme,m nisme,mikroo ikroorgani rganisme sme (ang autotro autotro merupakan merupakan peng%uni peng%uni pertama pertama dalam dalam air (ang (ang mengan mengandun dung g +at,+at +at,+at anorg anorgani anik# k# -el,sel -el,sel (ang (ang mati merupa merupakan kan

28

 ba%an organik (ang memungkinkan ke%idupan mikroorganisme,mikroorg mikroorganisme,mikroorganisme anisme (ang %eterotro .&id$oseputro)1/# 2# Mikroorganisme dalam 3ana% 3ana% 3ana% 3ana% terdiri atas %an'uran %an'uran batu,batuan batu,batuan## Partikel,parti Partikel,partikel kel itu ada (ang sebesar butir,butir pasir) ada pula (ang sangat %alus (ang lebi% ke'il daripada 0)02 mm) (aitu (ang merupakan lumpur# 4an'uran (ang %alus itu merupakan suatu s(stem koloid dalam air) ingat sa$ala% akan air (ang ber&arna keru% .'oklat/ karena mengandung lumpur .&id$oseputro)1/# alam tana% terdapat air kimia) (aitu air (ang bersatu dalam partikel air  %igroskopik) (aitu air (ang melekat pada partikel tana% air kapiler) (aitu air (ang  berada di sela,sela partikel,partikel tana%) dan air graitasi) (aitu air (ang  berkumpul sebagai genangan di atas lapisan tak tembus air# Ke'uali itu) tana% mengandung mineral# 7lemen,elemen (ang ada dalam tana% dapat berbentuk ion, ion)

dan

ion,ion

mempengaru%i

keasaman

atau

kebasaan

tana%

.&id$oseputro)1/# Partikel Partikel tana%) tana%) elemen,elemen) elemen,elemen) p4) udara) air) air) sinar adala% komponen, komponen, kompon komponen en anorg anorganik anik)) mereka mereka merupa merupakan kan aktor aktor,a ,akto ktorr alam# alam# alam alam tana% tana% terdap terdapat at $uga $uga %an'ura %an'uran n dari dari sisa,sis sisa,sisaa mak%lu mak%luk k %idup) %idup) baagian baagian ini merupa merupakan kan kompon komponen, en,kom kompon ponen en organi organik k .&id$ .&id$ose oseput putro) ro)1 1/# /# Kumpul Kumpulan an dari dari +at,+at +at,+at organik tersebut disebut %umus# Komponen,komponen anorganik maupun organik  merupa merupakan kan substra substrata ta tau medium medium (ang (ang baik baik bagi bagi ke%idu ke%idupan pan mikroo mikroorga rganis nisme# me# Mikroo Mikroorg rgani anisme sme,mi ,mikro kroorg organis anisme me peng%u peng%uni ni tana% tana% merupa merupakan kan 'ampur 'ampuran an dari dari  populasi dari .a/  protozoa sepe sepert rtii amoe amoeba) ba) lag lagell ellate ate)) 'illi 'illiat ata) a) .b/ .b/ bakt bakteri eri .Clostridium, Rhizobium/ Rhizobium / dan sebagain(a) .'/ alga.ganggang/ seperti alga biru) alga %i$au) diatom) dan .d/ $amur) terutama $amur bertingkat renda% seperti $amur  lendir)

berbagai

ragi

dan

berbagai

 Ascomycetes.&id$oseputro)1/#  Ascomycetes.&id$oseputro)1/# !mum !mumn( n(aa mikr mikroo oorg rgani anism sme,m e,mik ikro roor orga gani nism smee

 Phycomycetes terseb tersebut ut

lebi lebi% %

dan ban( ban(ak  ak 

terdapat di atau dekat permukaan tana%# Makin masuk ke dalam tana%) makin  berkurangla% peng%unin(a# peng%unin(a# Pen$elasan Pen$elasan di atas dapat disimpulkan disimpulkan ba%&a populasi populasi dari mikroba mikroba (ang ada diling dilingkun kungan gan ini sangatl sangatla% a% beranek beranekaa ragam# ragam# Penelit Penelitian ian (ang (ang la(ak la(ak mengen mengenai ai

29

mikroorganisme dalam berbagai %abitat ini memerlukan teknik untuk memisa%kan atau mengisolasi mikroba dari populasi 'ampuran (ang rumit) atau (ang biasan(a dikenal dengan istila% biakan 'ampuran) men$adi spesies (ang berbeda,beda (ang dikenal dengan istila% biakan murni# *iakan murni ini terdiri dari satu populasi sel (ang (ang semuan semuan(a (a berasal berasal dari dari satu sel induk induk .Pele+a .Pele+ar) r)1 16/# 6/# Isolasi Isolasi mikrob mikrobaa adal adala% a%m memis emisa% a%ka kan n

mikr mikrob obaa

ters terseb ebut ut

dari dari

ling lingku kung ngan ann( n(aa

di

alam alam

dan dan

menumbu%k menumbu%kann( ann(aa sebagai sebagai biakan murni dalam medium buatan# 4al,%al 4al,%al (ang 1# 2# 8# 9#

%arus diper%atikan dalam proses isolasi mikroba adala% : -iat -iat spesie spesiess mikrob mikrobaa (ang (ang akan akan diisol diisolasi asi 3empat empat %idup %idup atau asal mikrob mikrobaa Medium Medium (ang (ang sesuai sesuai untu untuk k pertum pertumbu% bu%an an ara ara mena menana nam m mikro mikroba ba terse tersebu butt

5# ara ara inku inkuba basi si mikr mikrob obaa 6# ara mengu$i mengu$i ba%&a ba%&a mikroba mikroba (ang diisolas diisolasii tela% berupa berupa biakan biakan murni dan dan sesuai sesuai dengan (ang dimaksud ;# ara memeli%ara memeli%ara agar agar mikroba mikroba (ang (ang tela% diisolasi diisolasi tetap tetap merupakan merupakan biakan biakan murni murni .Pu$iati) 2012/# Peminda%an bakteri dari medium lama ke medium (ang baru atau (ang dikena dikenall dengan dengan inokul inokulasi asi bakteri bakteri ini memerlu memerlukan kan ban(ak ban(ak ketelit ketelitian ian## 3erleb erlebi% i% da%ulu kita %arus mengusa%akan agar semua alat,alat (ang akandigunakan untuk   penger$aan medium dan inokulasi benar,benar steril# Meng%indari kontaminasi) (aitu masukn(a mikroba lain (ang tidak diinginkan se%ingga biakan (ang tumbu% dalam dalam medi medium um

adala adala% %

bena benar, r,be bena narr

biak biakan an

murn murnii

.&i .&id$ d$os osep eput utro ro)1 )1 / /##

Men(endirikan suatu spesies dikenal beberapa 'ara) (aitu dengan pengen'eran dan penuangan# 3eknik 3eknik Pengambilan -ampel -ebelu -ebelum m melakuk melakukan an isolasi isolasi terlebi terlebi% % da%ulu da%ulu dilaku dilakukan kan pengam pengambil bilan an sampel sampel## *erikut merupakan prosedur pengambilan sampel# 1# -ampel tana% 95?/ untuk dituang  bersama suspensi bakteri ke dalam 'a&an petri lalu kemudian di%omogenkan dan dibiarkan memadat# 4al ini akan men(ebarkan sel,sel bakteri tidak %an(a pada  permukaan agar sa$a melainkan sel terendam te rendam agar .dalam agar/ se%ingga terdapat sel (ang tumbu% dipermukaan agar (ang ka(a @2 dan ada (ang tumbu% dalam

32

agar (ang tidak ban(ak begitu ban(ak mengandung oksigen# Adapun prosedur  ker$a (ang dilakukan adala% sebagai berikut : 1/ Men( Men(ia iapk pkan an 'a&an 'a&an steri steril) l) tabu tabung ng peng pengen en'e 'eran ran (ang (ang akan akan dita ditanam nam dan dan medi mediaa  padat (ang masi% 'air .>95?/ 2/ Meneteskan Meneteskan 1 ml se'ara aseptis suspensi suspensi sel ke dalam 'a&an 'a&an kosong kosong 8/ Menu Menuan angk gkan an medi mediaa (ang (ang masi% masi% 'air ke 'a&a 'a&an n kemud kemudia ian n puta putarr 'a&an 'a&an untuk  untuk  meng%omogenkan suspense bakteri dan media) kemudian diinkubasi Alasan diteteskann(a bakteri seban(ak 0)1 ml untuk  spread plate dan plate dan 1 ml untuk   pour plate karena  spread plate  plate  ditu$ukan untuk menumbu%kan dipermukaann(a sa$a sa$a## -ed -edangk angkan an  pour plate memb membut utu% u%ka kan n ruan ruang g (ang ang lebi lebi% % luas luas untu untuk  k   pen(ebarann(a se%ingga diberikan lebi% ban(ak daripada  spread plate  plate  .Pu$iati) 2012/# 3eknik 3eknik Penanaman dengan Goresan .Streak / *ertu$ *ertu$uan uan untuk untuk mengis mengisolas olasii mikroo mikroorg rgani anisme sme dari dari 'ampur 'ampurann ann(a (a atau merema$akan kultur ke dalam medium baru .Pu$iati) 2012/# a# Goresan -inambung ara Ker$a : 1/ Men(entu Men(entu%ka %kan n inokul inokulum um loop pada koloni koloni dan gores gores se'ara kontin( kontin(u u sampai sampai setenga% permukaan agar# 2/