Laporan hplc

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Tujuan Percobaan Praktikum Pemisahan senyawa dengan metoda High Performance Liquid Chromatography (HPLC). 1.2. Prinsip Kerja HPLC menggunakkan kolom yang mengandung partikel-partikel kecil-kecil dari fase tetap dan kkarena luas permukaan yang lebih besar dari fase tetap maka sampel dalamHPLC terpisah dengan sangat baik dengan efisiensi yang tinggi. Mekanisme pemisahan yang berbeda dengan cepat dilakukan mengikatkan gugus-gugus kimia yang berbeda pada permukaan partikel silika yang disebut dengan fase terikat. Secara teoritis HPLC itu identik dengan Liquid Solid Chromatography. Liquid Chromatography dan ion Exchange Chromatography. 1.3. Landasan Teori 1.3.1. Separation and Characterization of The Vanillin Coumpound from Soda Lignin Pendahuluan Para guineensis Elaesis

atau

diperkenalkan

berbagai

untuk

minyak memproduksi.

yang

Diperkirakan

biasa

dikenal

sebagai

kelapa

sawit

bagian

daerah

tropis

untuk

buah

2,28 juta

ha

tanah

yang

sedang ditanami dengan pohon kelapa sawit di Malaysia. Selain memproduksi sejumlah

besar

sawit minyak, industri kelapa sawit juga menghasilkan residu

lingo

selulosa

seperti

sebagai

batang, daun dan tandan

kosong (TKS). TKS

telah

diakui sebagai

berpotensi menjadi bahan baku alternatif untuk industri kertas dan pulp [2, 3, 4]. Tujuan dari proyek ini adalah untuk mengidentifikasi cara yang lebih efisien mengelola

pembuangan

lingo

selulosa

residu dan

pada

saat

yang

sama mengubah residu menjadi produk yang bermanfaat seperti lignin. Sumber

utama lignin di

Malaysia

adalah dari

luar

negeri dimana awalnya

diekstrak dari pohon pinus dan akasia sebagai produk sampingan dari kayu dan industri pulp. Namun,

metode ini

mengimpor

kurang efektif

produk

asing . Ada

karena

mata

kebutuhan

uang

asing hilang dalam

untuk

mencari alternatif

sumber lignin yang dapat berasal dari bahan limbah dan pada saat yang sama membantu melestarikan harta alami untuk masa depan generasi. Salah satu sumber tersebut adalah kelapa sawit tandan buah kosong (TKS). ini adalah

karena jumlah

besar TKS dikumpulkan setiap

hari lebih

dari kelapa

sawit 300 pabrik pengolahan yang tersebar di seluruh Malaysia. Lignin merupakan

bahan amorf polifenol yang

timbul

dari suatu

enzim yang

dimediasi dehydrogenates polimerisasi monomer tiga fenilpropanoid utama, yaitu coniferyl,

sinapyl

dan

p-coumaryl alkohol. Elemen

struktur lignin terkait

oleh ikatan karbon-karbon dan eter untuk membentuk tri-dimensi jaringan yang terkait dengan hemiselulosa polisakarida di dalam dinding sel . Lignin biasanya tidak larut dalam semua pelarut dan hanya dapat mengalami degradasi

oleh proses pulping fisik

tekanan tinggi. Reaksi

atau

kimia

delignifikasi melibatkan

4 linkage, fenolik a-0-4 keterkaitan polisakarida [8, 9].Karena

di hightemperature

dan

pembelahan

non-fenolik PO-

dan melepaskan dari yang

terkait dengan

kompleksitas

tinggi

makromolekul lignin,

lignin perlu untuk diuraikan melalui proses oksidasi untuk monomer, yang memiliki berat molekul lebih rendah sebelum mereka dianalisis. Oksidasi nitrobenzena digunakan monomer

sebelum

sebagai

mengidentifikasi

metode

untuk memecah

lignin ke

mereka menggunakan kromatografi cair

kinerja tinggi (KCKT) analisis. Sebuah penelitian sebelumnya [10] melaporkan bahwa 8 komponen oleh ligninter degradasi.Mereka adalah

vanillin , syringaldehyde, 4-hydroxybenzaldehyde,

asam syringic, 4 hydroxybenzoic asam, asam vanilat, asam p-coumaric dan asam ferulat. Diantara 8 senyawa, vanilin ditemukan menjadi komponen utama of soda lignin. Vanili, sebuah komponen utama vanili, banyak digunakan sebagai bahan dalam rasa makanan, dalam farmasi dan sebagai wewangian di parfum dan bau-masking produk . Dalam studi ini

persentase

hadir

vanillin

dalam sampel lignin soda akan

ditentukan. Selanjutnya, senyawa vanilin akan dipisahkan dari soda lignin melalui kristalisasi teknik. Bahan Kelapa sawit tandan buah kosong (TKS) bahan baku dalam penelitian ini telah diberikan oleh Sabutek (M) Sdn. Bhd, Teluk Intan, Malaysia, sebuah perusahaan lokal yang mengkhususkan diri dalam daur ulang TKS. Cairan hitam TKS itu dipasok oleh Fakultas Teknologi

Industri, Universiti Sains

Malaysia (USM). Penelitian ini dilakukan dari Mei 2005 sampai Maret 2006 di Sekolah Ilmu Kimia, Universiti Sains Malaysia (USM). nitrobenzena oksidasi Oksidasi nitrobenzena dilakukan dengan menambahkan 50 mg

lignin

sodakering

menjadi campuran

nitrobenzena dalam autoklaf baja 15 mL.

7 ml

2M

NaOH

dan 4 mL

Kemudian, otoklaf dipanaskan sampai 165 ° C selama 3 jam dalam penangas minyak termostat dipanaskan. Setelah otoklaf didinginkan sampai suhu kamar, campuran tersebut kemudian ditransfer ke cair-cair ekstraktor untuk ekstraksi kontinyu dengan kloroform (5 x20 ml)· untuk menghapus setiap produk reduksi nitrobenzena nitrobenzena dan berlebih.oksidasi campuran kemudian diasamkan dengan

HCl

pekat

sampai

pH 3-4 dan

selanjutnya diekstraksi

dengan

kloroform (5 x 15 mL). Pelarut dari larutan kloroform kedua kemudian diangkat dengan menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 ° C di bawah tekanan dikurangi agar memperoleh nitrobenzena dalam

oksidasi campuran. Campuran

dicloromethane

ini kemudian

tersebut kemudian

dilarutkan ke

dan yang disusun sampai dengan 10 mL. Campuran

digunakan

sebagailarutan

stok untuk

kinerja

tinggi

kromatografi cair (HPLC) analisis [6]. Nitrobenzena Para · campuran oksidasi dianalisa dengan menggunakan metode HPLC. 0.2 mL larutan stok yang dipipet ke dalam labu volumetrik 25 mL asetonitril dan air (1:2 v / v) ditambahkan untuk itu. Sekitar 20 ~ L dari larutan sampel adalahinjectedinto berikutnya HPLC sistem (Shimatzu) dilengkapi dengan kolom ikatan CIS Hypersil (partikelsize5J.11,25 mm x 4,6 mm Ld.) Untuk secara kuantitatif menentukan komponen vanilin sementara yang lain komponen ditentukan

secara

asam digunakan

kualitatif. Asetonitril-air (1:8) yang

sebagai eluen dengan laju

alir 2

mengandungasetat 1% mL /

menit. Eluen ini

kemudiandipantau dengan detektor (ultraviolet) UV pada 280 om . Kristalisasi Proses Produk

oksidasi

nitrobenzena digunakan dalam proses ini. Campuran adalah

dilarutkan dalam aseton dan disusun sampai dengan 10 mL. Selanjutnya,campuran tersebut

dipanaskan

plate. Endapan kemudian

sampai 60

°C

disaring dan

untuk

10

dicuci dengan

menit menggunakan hot menggunakan aseton.

Kemudian, endapan dianalisis menggunakan Transformasi Fourier infra merah (FT-

IR), inti

magnetik resonansi (IH-NMR)

dan

kromatografi

cair

kinerja

tinggi (KCKT). Persentase vanillin Komponen oflignin diperoleh tercantum dalam Tabel 1 dan diberi label menurut abjad pada Gambar 1. Solusi standar untuk setiap komponen yang diharapkan untuk hadir dalam lignin disuntikkan ke dalam 3 konsentrasi yang berbeda, 10 ppm, 100 ppm dan 1000ppm. Ini dilakukan untuk memastikan bahwa solusi untuk setiap komponen yang samapada konsentrasi yang berbeda memiliki waktu retensi yang sama. Dari kromatogram HPLC, 6

komponen yang

terdeteksi

dalam lignin soda. Mereka adalah vanilin, syringaldehyde, hydroxybenzaldehyde, 4hydroxybenzoic asam, asam vanilat dan asam syringic. Dari analisis kami menemukan bahwa konsentrasi vanilin dalam 50 mg lignin adalah 0,8032 ppm atau setara dengan1,6 bahkan meskipun hanya ada persentase yang rendah yang hadir vanilin dalam lignin, itu adalah cukup sebagai penelitian menggunakan sampel lignin dari limbah industri,

yaitu lindi

hitam. Selain

itu,

penelitian

ini bertujuan

untuk

menghasilkan produk baru dari item yang umumnyadiperlakukan sebagai limbah. Pemisahan proses melalui teknik kristalisasi digunakan untuk

memisahkan vanili

dari komponen lain yang ada di lignin. Endapan yang diperoleh dari proses ini merilis bau mirip dari jenis yang sama untuk vanilin. Analisis dilakukan untuk menentukan

apakah endapan yang

diperoleh

adalah vanilin. Ini melibatkan

penggunaan infra merah (IR) analisis spektrometri untuk menentukan kelompok fungsional hadir dalam mengendap. Pendekatan tidak

ini

dipilih

sebagai

pelet endapan

hancur ketika IR analisis dilakukan di

mudah

dibentuk dan

atasnya. Puncak terbentuk

dari IR

analisis juga lebih mudah untuk ditelusuri dan diamati. Karakterisasi · fungsional untuk sampel endapan ini dilakukan pada 4000-400 cm-! rentang frekuensi.

Spektrum

IR

jelas menunjukkan

karakterisasi

fungsi

utama

beberapa

kelompok dalam struktur vanilin. Sebuah spektrum IR khas sampel endapan dari proses kristalisasi ditunjukkan pada Gambar 2. Band yang kuat dan luas pada 3471,25 cm-I adalah karakteristik dari kelompok OH atau senyawa fenolik. Sebuah

bagian

dari

ini, C-H

di band cm'l 3230,12. Namun, sangat jelas. kelompok

Band

frekuensitidak

di 1636,19 cm'l

(C == O). Band

peregangan cincin sesuai

menunjukkan dengan

Peregangan di 1399.83cm,

aromatik berada puncak

yang

yang karbonil yang 1

dan 1338,6 em ')

merupakan karakteristik OFC-H getaran pada gugus metil. Sedangkan getaran untuk C == C pada cincin aromatik berada pada 692,77 cm'l pita [14]. Gambar 3 menggambarkan struktur vanilin(4-hidroksi-3methoxybenzaldehyde).

Dengan demikian, spektrum dari produk endapan dari kristalisasi diidentifikasi sebagai vanilin

sebagai

kelompok

fungsi utama dari

struktur adalahvanilin

terungkap melalui analisis IR. Endapan

kemudian

dianalisis menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi

(KCKT) untuk menegaskan kembali hasil sebagai dicirikan oleh analisis IR.

Endapan adalah dikumpulkan dan dilarutkan dalam larutan aseton dengan air (1:2 v/v) bertindak sebagai pelarut sebelum analisis dilakukan. Akhirnya, 1,0

ppm

sampel

pekat

disuntikkan

mesin HPLC. Kromatogram menunjukkan puncak pada

ke

sebuah

waktu retensi