Laporan Hasil Praktikum 3 HIDROLISIS ENZIM SUKROSA DAN ANALISIS ALDEHIDA OKSIDASE (SUSU/SCHADINGERS)

 

LAPORAN HASIL PRAKTIKUM HIDROLISIS ENZIM SUKROSA  SUKROSA DAN ANALISIS ALDEHIDA OKSIDASE (SUSU/SCHADINGERS) (SUSU/SCHADINGERS) Diajukan untuk memenuhi salah satu tugas individu ( Biokimia ) Dosen pengampu :Dick-Dick Maulana, S.P.,M.Si.

DISUSUN OLEH :

Siti Halida Hamzah Fatimah Fatimah Zaman Zaman

( 41035003171015 41035003171015 )

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS ISLAM NUSANTARA BANDUNG 2019

1

 

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh  wabarakatuh  Alhamdulillahirabbil’alamin, segala puji bagi Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan hasil praktikum ini dengan tepat waktu. Shalawat dan salam tak lupa senantiasa kita sanjungkan kepada Nabi Muhammad SAW yang kita harapkan syafa’atnya di yaumulqiyamah nanti, aamin.  aamin.   Penyelesaian makalah hasil praktikum yang berjudul “Hidrolisis Enzim Sukrosa  Sukrosa  Dan Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers)”  (Susu/Schadingers)”  ini menjadi salah satu

tugas dalam mata kuliah Biokimia. Tak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada berbagai pihak yang telah membantu dalam penyelesaian laporan hasil  praktikum, serta dosen pengampu Dick Dick Maulana,S.P.,M.Si. yang telah membimbing dan mendukung dalam penyelesaian makalah ini.   Saya menyadari bahwa bahwa laporan praktikum praktikum ini belum terbilang terbilang dalam kata sempurna karena keterbatasan pengetahuan dan kemampuan penulis. Oleh karena itu saya sangat mengharapkan kritik dan saran dari berbagai pihak untuk  perbaikan yang lebih baik pada penyusunan makalah makal ah selanjutnya. Akhirnya saya sangat berharap semoga laporan laporan praktikum ini dapat bermanfaat bagi bagi para  pembaca terutama bagi penulis. Wassalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh  wabarakatuh  Bandung, 16 Juli 2019

Penulis

i

 

DAFTAR ISI

............................................ ............................................. ............................................ ........................ i  KATA PENGANTAR ..................... ............................................ ............................................. ............................................ ...................................... ................ ii DAFTAR ISI ..................... .......................................... ............................................ .......................................... .................... 1 BAB I PENDAHULUAN .................... 1.1. Latar Belakang ........................................... ................................................................. .......................................... .................... 1  1.2. Rumusan Masalah .......................................... ................................................................. ...................................... ............... 3 1.3. Tujuan Praktikum ......................................................... ................................................................................ ....................... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................... .......................................... ............................................. ............................... ........ 4

2.1. Hidrolisis Enzim Sukrosa  .......................................... ................................................................. ....................... 4 2.1.1. Laju Hidrolisis Sukrosa .................................. ........................................................ .................................. ............ 4 2.1.2 Fermentasi Ragi .......................................... ................................................................. ...................................... ............... 5 ................................ 7 2.2. Analisis Aldehid Oksidase (s (susu/scardinge usu/scardingers) rs) ................................ 2.2.1 Pengertian Susu ............................................................. ................................................................................. .................... 7 2.2.2 Sifat-Sifat Susu ......................... ................................................ .............................................. .................................. ........... 8 2.2.3 Komponen Susu ........................................... .................................................................. ...................................... ............... 9 BAB III METEDOLOGI PRAKTIKUM ......................................... ......................................................... ................ 11 

3.1. Waktu dan Tempat............................................. .................................................................... .................................. ........... 11 3.2. Alat dan Bahan .................................................. ........................................................................ .................................. ............ 11 3.3. Prosedur Kerja ........................................... ................................................................. .......................................... .................... 12 ............................................................ ................ 13  BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................ 4.1. Hasil ........................................... .................................................................. ............................................. .................................. ............ 13 4.2. Pembahasan ................................................... ......................................................................... ...................................... ................ 15 BAB V PENUTUP .................... .......................................... ............................................ ............................................ ............................... ......... 19

5.1. Kesimpulan .................................. ........................................................ ............................................ .................................. ............ 19 .......................................... ............................................. ............................................ ........................ 20 DAFARAT PUSTAKA ................... ............................................. ............................................. ............................................ ...................................... ................ 21 LAMPIRAN ......................

ii

 

BAB I PENDAHULUAN

1.1.

Latar Belakang

Sukrosa adalah gula yang kita kenal sehari-hari, baik yang berasal dari tebu maupun dari bit. Selain dari tebu dan bit, sukrosa terdapat pada tumbuhan lain, misalnya dalam buah nanas dan dalam wortel. Dengan hidrolisis sukrosa akan terpecah dan menghasilkan glukosa dan fruktosa. Pada molekul sukrosa terdapat ikatan antara molekul glukosa dan fruktosa, yaitu antara atom karbon nomor 1 pada glukosa dengan atom karbon nomor 2  pada fruktosa melalui atom oksigen. Kedua atom karbon tersebut adalah atom karbon yang mempunyai gugus  – OH OH glikosidik atau atom karbon yang merupakan gugus aldehida pada glukosa dan gugus keton pada fruktosa. Oleh karena itu molekul sukrosa tidak mempunyai sifat dapat mereduksi ion-ion Cu 2+ atau Ag+ dan juga tidak membentuk osazon. Pada tumbuh-tumbuhan, karbohidrat yang dihasilkan merupakan cadangan makanan yang disimpan di dalam akar, batang dan biji yang sebagian besar merupakan Pati (amilum) atau selulosa. Di dalam sel, pati membentuk granula yang secara mikroskopis memiliki bentuk yang berbeda untuk setiap sumber. Pati terbagi menjadi dua fraksi yang dapat dipisahkan dengan air panas. Fraksi terlarut disebut amilosa (±20%) dengan struktur molekul linier, terdiri dari rantai unit-unit DD-glukosa glukosa yang panjang digabungkan oleh ikatan α(1→4).  α(1→4).  Hidrolisis sukrosa oleh pemanasan dengan asam mineral, atau dengan enzim intervase akan menghasilkan produk campuran dari molekul yang sama yaitu D-glukosa dan D-Fruktosa.

1

 

Manusia membutuhkan berbagai macam gizi untuk menunjang kebutuhan hidupnya. Hal tersebut bisa diperoleh dari berbagai makanan yang dikonsumsi oleh manusia, salah satunya yaitu dari susu segar. Susu segar adalah air susu yang tidak dikurangi atau ditambah apapun yang diperoleh dari perahan sapi yang sehat secara kontinyu dan sekaligus sempurna (Resnawati, 2010). Susu adalah salah satu sumber penting yang banyak mengandung protein  protein, riboflavin dan kalsium serta memberikan sejumlah s ejumlah penting vitamin B dan vitamin A. Namun susu bukanlah merupakan makanan sempurna bagi manusia karena susu relatif kekurangan zat besi, vitamin C dan vitamin D. Pada  pemasakan yang lebih lama mungkin terjadi karamelisasi laktosa. Sebagian vitamin C dan tiamin susu rusak oleh pemasakan (Resnawati, 2010). Susu merupakan bahan makanan yang mudah rusak, oleh sebab itu perlu mendapat perawatan secara khusus. Setelah itu air susu diperah, segera dibawa ke kamar susu, kemudian disaring. Penyaringan itupun perlu dilakukan dengan segera guna menghindari agar jangan sampai kuman-kuman yang hinggap pada kotoran di dalam air susu mendapat kesempatan untuk berkembang-biak lebih lanjut. Sesudah air susu disaring, barulah ditakar. Hal ini dilakukan untuk mengetahui jumlah produksi. Kemudian air susu dari beberapa ekor sapi tersebut dicampur perlahan-lahan sampai menjadi campuran air susu yang homogen. Susu mengandung suatu enzim yang mengkatalisis oksidasi macam-macam aldehid menjadi asam.

2

 

1.2.

Rumusan Masalah

1.  Apa yang dimksud hidrolisis enzim sukrosa ? 2.  Apa yang dimaksud susu? 3.  Bagaimana hasil tes hidrolisis enzim sukrosa? 4.  Bagaimana hasil dari aldehid oksidasi (susu/scardingers)? 5.  Apakah yang dimaksud enzim scardingers?

1.3.

Tujuan Praktikum

1.  Mahasiswa mengerti dan memahami mengenai hidrolisis enzim sukrosa 2.  Mahasiswa mengerti dan memahami pengertian susu 3.  Mahasiswa dapat menentukan hasil dari tes hidrolisis enzim sukrosa 4.  Mahasiswa dapat menentukan hasil reaksi aldehid oksidasi (susus/scardingers)

 

5. Mahasiswa dapat mengerti dan memahami mengenai enzim scardingers

3

 

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1.

Hidrolisis Enzim Sukrosa

2.1.1. Laju Hidrolisis Sukrosa Kecepatan reaksi adalah perubahan konsentrasi persatuan waktu atau dapat

ditulis dc/dt. Dalam reaksi kimia zat-zat kimia dapat dibagi menjadi 2 yaitu  produk dan reaktan, dimana produk adalah zat yang bereaksi dan reaktan adalah zat hasil. Reaktan selalu bertambah dan produk selalu berkurang selama reaksi  berlangsung. Larutan sukrosa adalah Dextrorotatory yaitu memutar bidang polarisasi kekanan tetapi selama hidrolisi menjadi leavorotatory yaitu memutar bidang  polarisasi ke kiri. Perputaran spesifik dari sukrosa alalah 66,5°. D-glukosa mempunyai perputaran spesifik +52 dan D-Fruktosa sebesar 92°. Pada proses hidrolisis perputaran spesifik berubah dari +66,5 0 ke -200. Tanda dari spesifik  perputaran berubah dari(+) menjadi (-). Enzim yang menyebabkan inversi (perputaran)disebut enzim intervase. Laju perputaran (inversi) dapat diketahui diketa hui dari  bertambahnya konsentrasi fruktosa Pada Laju hidrolisis sukrosa adalah reaksi orde pertana semu karena selama reaksi berlangsung konsentrasi ion H+ tetap menyebabkan konsentrasi H2O menjadi tetap. Inversi gula adalah proses hidrolisis sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa dengan bantuan katalis asam atau enzim invertase. Gula hasil invertase yang menggandung glukosa dan fruktosa dalam jumlah yang sama dinamakan gula invert. Laju reaksi dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu konsentrasi, luas  permukaan sentuhan, suhu, dan katalis. Oleh karena itu, reaksi kimia dapat  berjalan cepat atau lambat. l ambat. Dalam industri, reaksi kimia perlu dilangsungkan pada kondisi tertentu agar produknya dapat diperoleh dalam waktu yang sesingkat mungkin. Reaksi dapat dikendalikan dengan mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhinya. Aplikasinya dalam kehidupan sehari-hari adalah pembuatan kopi atau teh yang menggunakan pelarut bersuhu tinggi dengan tujuan untuk meningkatkan laju reaksi 4

 

2.1.2. Fermentasi Ragi

Fermentasi berasal dari kata “fervere” yang berarti mendidih mendidi h yang menunjukkan adanya akti;itas dari yeast pada ekstrak buah-buahan atau biji bijian. Sedangkan dalam mikrobiologi industry fermentasi fermentas i diartikan sebagai suatu  proses untuk mengubah bakan baku menjadi suatu proses oleh mikroba. Khamir mampu memfermentasi glukosa, fruktosa5 dan maltose menjadi bioethanol namun masing-masing spesies mempunyai kecepatan yang berbeda-beda di dalam menggunakan jenis gula yang ada reaksi hidrolisis pati berlangsung mengikuti  persamaan reaksi berikut:

Reaksi fermentasi glukosa menjadi bioetanol berlangsung mengikuti  persamaanreaksi berikut:

Fermentasi

adalah

proses

kimia

yang

berlangsung

oleh

adanya

mikroorganisme yang mengkatalis reaksi, jenis mikroorganisme yang dapat digunakan antara lain berupa ragi, bakteri, atau jamur untuk menghasilkan senyawa-senyawa seperti etanol, butanol, gliserol, asam asetat, atau asam sitrat. Reaksi fermentasi yang umum adalah pengubahan gula menjadi alcohol yang dikatalis oleh enzim zimese (Mulyono, 2009 : 128). Fermentasi etanol disebut juga sebagai fermentasi alcohol, adalah proses  biologi dimana gula seperti s eperti glukosa, fruktosa, dan sukrosa diubah menjadi energy seluler dan juga dapat menghasilkan etanol dan karbondioksida sebagai produk samnpingan. Karena proses ini tidak membuktikan oksigen, melainkan khamir melakukannya, maka fermentasi etanol digolongkan sebagai respirasi anaerob (Wikipedia, 2014). Menurut Sudarmadja (2003) dalam bukunya Kamus pintar kimia, pengertian fermentasi, yaitu : a.  Fermentasi merupakan penguraian metabolik senyawa organic oleh mikroorganisme yang menghasilkan energy yang umumnya berlangsung dengan kondisi anaerob dan dengan pembebasan gas.

5

 

 b.  Fermentasi

adalah

penguraian

metabolic

senyawa

organic

yang

 berlangsung dalam suatau organisme, tanpa kehadiran oksigen molecular dan dengan menggunakan senyawa organic, baik sebagai zat pengoksidasi maupun substrat yang dioksidasi. c.  Fermentasi adalah proses perubahan kimia yang disebabkan oleh mikroorganisme atau enzim. Reaksi biasanya merupakan penguraian gula dan pati menjadi etanol dan karbondioksida dengan rumus : C6H12O6 

2CO2 + 2 C2H5OH

Pada dasarnya metabolism glukosa dapat dibagi dalam dua bagian yaitu yang tidak menggunakan oksigen atau anaerob dan yang menggunakan oksigen atau aerob. Reaksi anaerob dan yang menggunakan oksigen atau aerob. Reaksi anaerob terdiri atas serangkaian reaksi yang mengubah glukosa menjadi asam laktat. Proses ini disebut dengan glikolisis. Glikolisis anaerob adalah proses  penguraian karbohidrat menjadi laktat melalui piruvat tanpa melibatkan oksigen. Proses senyawa kimia secara enzimatis menghasilkan gas, dalam hal ini adalah  penguraian karbohidrat menghasilkan etanol dan CO2  tanpa melibatkan oksigen (Danial, 2010 : 27). Hanya saccharmyces Hanya  saccharmyces cerevisiae strain cerevisiae  strain tertu saja yang dapat bertahan pada kadar alcohol 2,5-5 %. Oleh karena itu dibutuhkan lama fermentasi yang tepat untuk proses fermentasi etanol agar didapatkan kadar etanol dalam jumlah yang tinggi, nilai pH rendah, dan produksi gas yang tinggi tetapi tidak mengganggu  pertumbuhan saccharomyces cerevisiae (Sebayang, 2006). Laktosa merupakan gula sederhana sehingga dalam proses produksi  bioetanol tidak membutuhkan proses hdrolisis. Mikroorganisme yang umumnya digunakan dalam proses produksi bioetanol adalah saccharomyces cerevisiae. Saccharomyces cerevisiae memiliki beberapa kelebihan dibandingkan dengan mikroorganisme lain yang dapat memproduksi bioetanol. Kelebihan tersebut yaitu mudah beradaptasi dengan lingkungan, lebih tahan terhadap kadar alcohol tinggi, dan lebih mudah didapat (Azizah, 2012). Saccharomyces cerevisiae sendiri tidak dapat memfermentasi pati menjadi etanol, melainkan diperlukan kapang untuk mengkonversi pati dahulu menjadi glukosa (Tim Dosen Kimia, Kimi a, 2013 : 1).

6

 

2.2.

Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers)

2.2.1. Pengertian Susu

Susu dari asal katanya adalah cairan yang tak tembus cahaya yang dihasilkan oleh kelenjar susu dan terdiri atas air, protein susu (kasein), lemak, karbohidrat (laktosa) dan beberapa zat lain. Susu emulsi lemak dalam air dengan kasein sebagai zat pengemulsi/emulgator (Lehninger, 1995). Susu merupakan bahan baku dari semua produk yang mengandung susu. Susu sebagian besar digunakan sebagai suatu produk pangan. Jika dipandang dari segi gizi, susu merupakan satu-satunya bahan makanan yang hampir sempurna dan merupakan makanan alamiah yang tidak saja bagi hewan yang menyusui juga untuk manusia, dimana susu merupakan satu-satunya sumber makanan pemberi kehidupan segera sesudah lahir (Lehninger, 1995). Susu segar adalah susu hasil pemerahan yang tidak dikurangi atau ditambahkan bahan apapun dari pemerahan susu sapi yang sehat. Kriteria untuk air susu sapi yang baik setidak-tidaknya memenuhi hal-hal berikut ini : (i) bebas dari bakteri patogen, (ii) bebas dari zat-zat berbahaya ataupun toksin seperti insektisida, (iii) tidak tersemar oleh debu dan kotoran, (iv) zat gizi tidak menyimpang dari codex air susu, dan (v) memiliki cita rasa normal (Resnawati, 2010). Susu merupakan bahan pangan yang bernilai gizi tinggi yang dikenal sebagai bahan yang tidak tahan lama dan mudah rusak (perishable food), hal ini disebabkan karena susu mempunyai kandungan air yang tinggi, pH yang mendekati normal dan kandungan nutrientnya yang tinggi. Faktor-faktor ini merupakan keadaan yang cocok untuk pertumbuhan optimum mikroorganisme (Ekawasti, 2006). Berdasarkan definisi susu segar, dapat dinyatakan bahwa susu segar adalah susu murni, sehat, baik (tidak rusak), rasa manis, bau aromatis, pH mendekati netral, dan jumlah kuman sedikit (Ekawasti, 2006).

7

 

2.2.2. Sifat Sifat Susu

Air susu yang normal atau sehat mempunyai sifat-sifat tertentu yang dapat dilihat dari (Agraris, 1993): 1.  Warna Warna air susu yang sehat adalah putih kekuning-kekuningan dan tidak tembus cahaya. Air susu yang berwarna agak merah atau biru, terlalu te rlalu encer seperti air adalah susu yang tidak normal. Warna air susu yang kemerahmerahan memberi dugaan bahwa air susu tersebut berasal dari sapi yang menderita Mastitis. Warna kebiruan menunjukkan bahwa air susu telah dicampur air terlampau banyak. Sedang susu yang berlendir, bergumpal, menandakan bahwa air susu tersebut sudah rusak. 2.  Bau dan rasa Air susu yang masih segar dan murni memiliki bau yang khas. Bau yang asam menunjukkan bahwa air susu sudah basi, terlalu lama disimpan. Air susu yang berbau busuk menunjukkan bahwa air susu sudah rusak sama sekali. Air susu yang masih segar dan murni rasanya enak, sedikit manis dan agak berlemak. Air susu yang rasanya asin, atau mungkin agak masam, pahit, menunjukkan bahwa susu itu sudah mulai rusak. Rasa hambar berarti air susu itu banyak dicampuri air. 3.  Berat jenis Berat jenis pada air susu sangat dipengaruhi oleh: a.  Susunan air susu itu sendiri Dalam hal ini yang menentukan ialah kadar bahan keringnya. Semakin tinggi kadar bahan keringnya maka akan semakin tinggi pula berat  jenisnya dan demikian sebaliknya.  b.  Temperatur Air susu akan mengembang pada suhu yang semakin tinggi, per satuan volume air susu pun mengembang pula menjadi menjadi ringan. Dan sebaliknya, dengan pendinginan, air susu akan menjadi  padat sehingga per kesatuan volume akan menjadi lebih berat. Oleh karena itu, di Indonesia berat jenis air susu itu ditetapkan pada o

temperatur 25  (suhu kamar). 8

 

4.  Derajat keasaman Susu yang normal derajat keasamannya sekitar 4  –   7,5o SH. Susu yang rusak derajat keasamannya akan meningkat.

2.2.2. Komponen Susu

Ada 3 komponen dalam air susu yang mempengaruhi mutu susu dalam  pengolahan antara lain (Setiawati dan Rahayu, 1992): 1992): a.  Lemak susu Lemak susu mempunyai nilai gizi yang tinggi karena jumlah kalori yang dikandungnya, vitamin-vitamin dan asam-asam lemak esensial. Lemak susu menentukan rasa, bau dan tekstur air susu.  b.  Laktosa Laktosa merupakan karbohidrat yang digunakan untuk pembuatan bahan makanan bayi. Penyerapan laktosa dalam dinding usus dapat merangsang  penyerapan kalsium, fosfor dan mineral lain yang disebabkan karena kenaikan daya serap (permeabilitas) dinding sel. c.  Protein Komponen protein susu antara kasein, laktoglobin dan laktaalbumin yang dihasilkan dari proses sedimentasi. Koagulasi protein susu yang disebabkan kontaminasi susu dengan bakteri-bakteri merupakan hal yang tidak dikehendaki karena menyebabkan rusaknya air susu. Kasein susu digunakan unutk pembuatan lem, industri cat yang larut dalam air dan industri plastic Menurut Ekawasti (2006), menyatakan bahwa pemeriksaan kesegaran susu terdiri atas beberapa uji sebagai berikut : 1.  Uji sensorik atau uji organoleptik. 2.  Kestabilan protein. Uji didih Uji alkohol 3.  Uji pH. Susu adalah bahan makanan yang sempurna karena mengandung protein, lemak, karbohidrat (laktosa), vitamin dan garam anorganik. Dalam susu terdapat

9

 

 pospat baik sebagai protein, maupun sebagai ion pospat anorganik. Kesegaran susu dapat ditandai dengan masih aktifnya enzim-enzim enzim -enzim yang terdapat didalamnya diantaranya aktifnya enzim amylase, lipase, peroksidase, katalase dan sebagainya (Tim Dosen Biokimia, 2001). Susu mengandung suatu enzim yang mengkatalisis oksidasi macammacam aldehid menjadi asam. Reaksinya berlangsung secara anaerobik dan dapat ditunjukkan bila ada akseptor hidrogen yang sesuai seperti : metilen biru. Jalannya J alannya reaksi dapat dilihat dari perubahan warna biru (bentuk oksidasi) menjadi tak  berwarna (bentuk reduksi). Reaksi ini biasanya dilakukan dalam tabung Thunberg (Patong, dkk., 2012). Uji metilen biru dapat memberikan gambaran perkiraan jumlah bakteri yang terdapat dalam susu. Pada uji ini akan ditambahkan sejumlah zat yang biru ke dalam susu, kemudian diamati waktu yang dibutuhkan oleh bakteri dalam susu tersebut untuk melakukan aktifitas yang dapat mengakibatkan perubahan warna zat tersebut. Semakin tinggi jumlah bakteri dalam susu tersebut, semakin cepat terjadinya perubahan warna zat tersebut. Uji metilen biru didasarkan pada kemampuan bakteri dalam susu untuk tumbuh dan menggunakan oksigen terlarut, sehingga menyebabkan perubahan penurunan kegiatan oksidasi-reduksi dari campuran tersebut. Maka akibatnya metilen biru yang ditambahkan akan tereduksi menjadi putih metilen. Selain itu bekerja pula enzim yang disebut Schardinger enzyme (Girindra, 1990). Schardinger pada tahun 1902 mengamati bahwa metilen biru berkurang formaldehida di dalam susu segar. Enzim yang bersangkutan dalam oksidasi ini dan aldehida lainnya dikenal sebagai "enzim Schardinger" (Booth, 1935). Enzim Schardinger merupakan enzim yang termasuk golongan enzim oksidase ini terdapat antara lain di dalam susu ncubato dikenal pula sebagai enzim xanthine oksidase karena dapat mengoksidase xanthine. ncubator juga dapat mengoksidasi aldehid. Di dalam percobaan ini ncubator blue digunakan sebagai  penangkap hydrogen hydrogen (Anonim, 2012).

10

 

BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM

3.1.

Waktu dan Tempat

Tempat

: Laboratorium Kimia Lantai II, Prodi Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Islam Nusantara Bandung. 

Hari/Tanggal : Kamis, 11 Juli 2019  Pukul

3.2.

: 13.00 –  13.00 –  18.00  18.00 WIB

Alat dan Bahan Hidrolisis Enzim Sukrosa

Bahan : 1.  Fermipan (Ekstrak Ragi) 2.  Buffer pH 4,4 (Asam) 3.  Aquades 4.  Formaldehida 5.  Larutan Sukrosa 6.  Larutan Pati 7.   NaHCO3 (5 %) 8.  Reagens Benedict

Alat : 1.  Gelas Ukur 2.  Tabung Reaksi 3.  Pipet Tetes 4.  Water Bath

Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers)

Bahan : 1.  Susu Steril

Alat : 1.  Kertas Parafilm

2.  Metilene Blue 3.  Formaldehida 4.  Aquades

2.  Tabung Reaksi 3.  Pipet Tetes 4.  Gelas Ukur 5.  Water Bath

11

 

3.3.

Prosedur Kerja

3.3.1. Hidrolisis Enzim Sukrosa

1.  Membuat ragi roti (enzim sukrosa) dari fermipan

dengan cara

melarutkan Toulena + Aquades (hingga larut) 2.  Semua tabung dipanaskan selama 30 menit dalam Water Bath lalu tambahkan NaHCO3 dan reagen benedict 1 tetes saja 3.  Amati perubahan yang terjadi! Daftar Tabel Percobaan

3.3.2. Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers)

1.  Masukkan 3 ml susu kedalam tabung reaksi lalu tambahkan 3 tetes metilene blue, kocok hingga homogen, lalu tutp dengan kertas  parafilm. setelah itu panaskan dalam water bath dengan suhu 40 40 OC 2.  Masukkan 3 ml susu kedalam tabung reaksi lalu tambahkan 1 ml formaldehida dan 3 tetes metilene blue, kocok hingga homogen, lalu tutp dengan kertas parafilm. setelah itu panaskan dalam water bath dengan suhu 40 OC. 3.  Masukkan 3 ml susu kedalam tabung reaksi lalu tambahkan 1 ml aquades dan 3 tetes metilene, kocok hingga homogen, lalu tutup dengan kertas parafilm. setelah itu panaskan dalam water bath dengan suhu 40 oC 4.  Pemanasan dilakukan selama 15 menit namun harus diperiksa setiap 5 menit untuk diamati perubahan yang terjadi

12

 

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1.

Hasil

4.1.1. Hidrolisis Enzim Sukrosa

Tabel Hasil Hidrolisis Enzim Sukrosa KELOMPOK

BAHAN YANG DIGUNAKAN

HASIL PERCOBAAN

3 ml ekstrak ragi+1 ml Hasil setelah larutan dipanaskan selama  buffer

asam+3

ml 15 menit, perubahan warnanya tidak  berubah dari keadaan awal yaitu warna

aquades

kuning bening setelh di tetesi 1 tetes

5

 NaHCO3 dan selang 5 menit di tetesi 1 tetes reagent benedith hasilnya tetap sama. 3 ml ekstrak ragi+1 ml Hasil reaksi setelah dipanaskan selama 15 6

 buffer asam+3 as am+3 ml larutan

menit yaitu tidak terjadi perubahan warna

sukrosa

dan hanya terdaat endapan.

3 ml ekstrak ragi+3 ml Hasil reaksi setelah dipanaskan 15 menit larutan pati (amilum)

terjadi perubahan warna, membentuk dua  bagian yaitu warna hijau dan kuning

7

 pekat,

dan

terjadi

perubahan

warna

selama 17 menit pada warna hijau menjadi cokelat. 3 ml ekstrak ragi+1 ml Terjadi perubahan warna dan terdapat 8

 buffer asam+3 as am+3 ml larutan sukrosa

13

endapan

 

4.1.2. Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers)

Tabel Hasil Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) LARUTAN WAKTU

3 ml susu+1 tetes 3 ml susu+1 ml metilen blue formaldehida+1 tetes metilen blue 

3 ml susu+1 ml aquades+1 tetes metilen blue 

5 menit

Berubah Biru muda putih

Tidak berubah Biru pekat

Tidak berubah Biru muda

Tidak berubah Putih

Tidak berubah Biru pekat

Berubah Biru muda Putih

Tidak berubah Putih

Tidak berubah Biru pekat

Tidak berubah Putih

10 menit

15 menit

14

 

4.2.

Pembahasan

4.2.1. Hidrolisis Enzim Sukrosa

Percobaan ini sukrosa akan dihidrolisis menjadi glukosa dan fruktosa dengan melakukan penambahan mikroba yaitu ragi roti  saccharmyces cerevisiae. cerevisiae . Lengkah awal percobaan ini adalah membuat suspense dari semua ragi. Menyiapkan tabung reaksi sebanyak empat buah untuk melakukan  pengujian, yaitu: 1.  Tabung reaksi 1 diisi 3 ml ekstrak ragi+1 ml buffer asam+3 ml aquades 2.  Tabung reaksi 2 diisi  3 ml ekstrak ragi+1 ml buffer asam+3 ml larutan sukrosa, 3.  Tabung reaksi 3 diisi 3 ml ekstrak ragi+3 ml larutan pati (amilum) 4.  Tabung reaksi 4 diisi 3 ml ekstrak ragi+1 ml buffer asam+3 ml larutan sukrosa Keempat tabung rekasi tersebut dipanaskan selama 15 menit, lalu diisi 1 tetes NaHCO3 dan selang lima menit ditambah 1 tetes reagent benedith. Hasil keempat percobaan tersebut dua tabung reaksi 1 dan 2 tidak mengalami perubahan warna yang signifikan yaitu tetap dari keadaan warna awal, sedangkan tabung reaksi 3 dan 4 mengalami perubahan warna. Pada percobaan dalam tabung reaksi yang ke 3 mengalami perubahan warn karena Hal ini tidak sesuai dengan teori, yang menyatakan bahwa pati akan terhidrolisis menjadi glukosa. Hal ini karena  pati termasuk polisakarida yang apabila terhidrolisis akan menjadi monosakarida (Hamdani,2011). Tujuan penambahan iod adalah untuk mengetahui pembentukan kompleks dengan amilum yang ditandai dengan larutan menjadi biru dan saat pati terhidrolisis larutan biru akan berubah menjadi tidak berwarna (Hamdani,2011). Hidrolisis sukrosa oleh pemanasan dengan asam mineral, atau dengan enzim intervase akan menghasilkan produk campuran dari molekul yang sama yaitu D-glukosa dan D-Fruktosa.

15

 

4.2.2. Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers) 1.  Tabung reaksi mana yang kehilangan paling awal warna birunya? Jawaban:

Uji metilen biru dapat memberikan gambaran perkiraan jumlah bakteri yang terdapat dalam susu. Pada uji ini akan ditambahkan sejumlah zat yang biru ke dalam susu, kemudian diamati waktu yang dibutuhkan oleh bakteri dalam susu tersebut untuk melakukan aktifitas yang dapat mengakibatkan perubahan warna zat tersebut. Semakin tinggi jumlah bakteri dalam susu tersebut, semakin cepat terjadinya perubahan warna zat tersebut. Uji metilen biru didasarkan pada kemampuan bakteri dalam susu untuk tumbuh dan menggunakan oksigen terlarut, sehingga menyebabkan perubahan penurunan kegiatan oksidasi-reduksi dari campuran tersebut. Maka akibatnya metilen  biru yang ditambahkan akan tereduksi menjadi putih metilen. Selain itu  bekerja pula enzim yang disebut Schardinger Schardinger enzyme (Girindra, 1990). Pada percobaan ini urutan warna biru yang hilang lebih awal adalah susu ke1, susu ke-3, dan susu ke-2. Pada susu kedua tidak mengalami perubahan warna karena adanya campuran formaldehida yang tidak tereduksi oleh susu, sehingga tidak dapat merubah warna menjadi putih.

16

 

2.  Tuliskan dalam percobaan ini reaksi enzimatis yang terjadi? Jawaban : Tabung reaksi 1( 3 ml susu+1 tetes metilen blue)

H

O C=O + metilen blue

H

C

OH + metilen blue H2 (Putih)

H

Tabung reaksi 2(3 ml susu+1 ml formaldehida+1 tetes tetes metilen blue)

Xanthin dehidrogenase

O

oksidase

C + H2O H

H

H

OH

-H2

C OH

H

FAD Xanthin Oksidase FADH

O H C

OH metilen blue H2 (Putih) metilen blue (biu)

Tabung reaksi 3 (3 ml susu+1 ml aquades+1 tetes metilen blue)

H

O C=O + metilen blue

H

C

OH + metilen blue H2 (Putih)

H O H

C

H H + H2O

H

C

OH

OH

17

 

3.  Mengapa dalam proses reaksi oksidai ini perlu keadaan anaeroobik (ditutup parafilm)? Jawaban: Anaerobik   adalah kata teknik yang secara harfiah bererti "tanpa udara" (di

mana "udara" biasanya bererti oksigen) bererti oksigen).. Kata yang berlawanan dengannya adalah aerobik. adalah  aerobik.   Dalam pengolahan limbah, tidak adanya oksigen bebas dinamakan

sebagai

'anoxic';

sedangkan anaerobik  digunakan

untuk

mengindikasikan tidak adanya akseptor elektron (nitrat, sulfat (nitrat, sulfatatau atau oksigen) oksigen) Bakteri anaerob merupakan Bakteri yang tidak dapat tumbuh dalam suasana O2 atau zat asam karena dalam suasana ini akan terbentuk H 2O2 yang bersifat toksik terhadap bakteri. Sebab lain menyatakan dalam suasana zat asam  potensi oksidasi-reduksi yang diperlukan kuman anaerob tidak akan menurun. Proses anaerobik pada dasarnya merupakan proses yang terjadi karena aktifitas mikroba dilakukan pada saat tidak terdapat oksigen bebas. Salah satu yang data merusak enzim aldehida oksidase adalah oksigen. Pengaruh keberadaan oksigen didalam tabung reaksi dapat menumbuhkan bakteri yang dapat mempengaruhi reaksi dan menonaktifkan cara kerja enzim tanpa merusak struktur kimianya. Sehingga pada proses reaksi aldehida oksidase memerlukan keadaan anaerobic agar tidak tumbuh bakteri yang dapat merusak reaksi yang sedang terjadi.

18

 

BAB V PENUTUP 4.1.

Kesimpulan

4.1.1. Hidrolisis Enzim Sukrosa

1.  Dari keempat percobaan larutan tersebut menghasilkan reaksi dan warna yang berbeda-beda karena larutan bahan yang dicampurkan berbeda 2.  Hasil percobaan keempat larutan tersebut, tabung reaksi 1 dan 2 tidak mengalami perubahan warna, sedangkan tabung reaksi 3 dan 4 mengalami  perubahan warna. 3.  Pada tabung reaksi 3 terdapat perubahan warna yang membentuk dua  bagian warna, yaitu hijau dan kuning pekat dikarenakan adanya larutan  pati. 4.  Pati yang terhidrolisis akan berubah menjadi tidak berwarna dari larutan sebelumnya yang berwana biru dan percobaan ini tidak terbukti pada tabung reaksi 3. 4.1.1.

Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) (Susu/Schadingers)

1.  Perubahan warna yang terjadi pada susu dikarenakan adanya penambahan metilen blue.  2.  Pada percobaan ini urutan warna biru yang hilang lebih awal adalah susu ke-1, susu ke-3, dan susu ke-2. Pada susu kedua tidak mengalami  perubahan warna karena adanya campuran formaldehida yang tidak tereduksi oleh susu, sehingga tidak dapat merubah warna menjadi putih. 3.  Enzim yang bekerja pada Analisis Aldehida Oksidase (Susu/Schadingers) yaitu Enzim Schardinger, merupakan enzim yang termasuk golongan enzim oksidase ini terdapat antara lain di dalam susu ncubato dikenal pula sebagai enzim xanthine oksidase karena dapat mengoksidase xanthine. ncubator juga dapat mengoksidasi aldehid. Di dalam percobaan ini ncubator blue digunakan sebagai penangkap hydrogen (Anonim, 2012). 4.  Pada percobaan ini dilakukan dalam keadaan anaerobic (tanpa oksigen) karena keberadaan oksigen didalam tabung reaksi dapat menambahkan  bakteri, mempengaruhi reaksi dan menonaktifkan cara kerja enzim tanpa merusak struktur kimianya. 19

 

DAFTAR PUSTAKA

Azizah, H dkk. 2012. Pengaruh lama fermentasi terhadapa kadar alcohol, pH, dan  produksi gas pada proses fermentasi bioetanol dengan subtitusi kulit nanas. Jurnal  Jurnal aplikasi teknologi pangan Vol Vol 1. No. 2. 2. Ponegoro : UNDIP Danial, Muhammad. 2010. Konsep-konsep 2010. Konsep-konsep dasar biokimia. biokimia. Malang : Selaras Hamdani, s. 2011. Fermentasi 2011. Fermentasi.. Http://catatankimia.com. Diakses  Http://catatankimia.com. Diakses pada tanggal 16  januari 2014. Mulyono. 2009. Kamus 2009. Kamus kimia. kimia. Jakarta : Bumi Aksara Sebayang, Firman. 2006. Pembuatan etanol dari molase setara fermentasi menggunakan sel saccharomyces cerevisiae yang termobilisasi pada kalsium alginate. Jurnal alginate. Jurnal teknologi proses Vol 5. No. 2. 2. Medan : USU Suradmaja. 2003. Kamus 2003. Kamus pintar kimia. kimia. Jakarta. Eramedia Tim Dosen Biokimia. 2013. Penuntun 2013. Penuntun Praktikum Biokimia. Biokimia. Makassar : Lab. Kimia FMIPA UNM Wikipedia. 2014. Fermentasi 2014. Fermentasi Etanol. Http://wikipedia.org. Etanol. Http://wikipedia.org. diakses  diakses pad tanggal 16  januari 2014. Anonim,

2012,

Enzim

Schardinger

dan

Peroksidase

(online),

(http://apoteksejati24.blogspot.com/2012/03/enzim-schardinger-dan peroksidase.html), ) Patong, A.R., dkk., 2012, 2012, Biokimia Dasar, Lembah Harapan Press, Makassar. Resnawati, H., 2010, Kualitas Susu pada Berbagai Pengolahan dan Penyimpanan (online),(http://peternakan.litbang.deptan.go.id/fullteks/lokakarya/loksp0 (online), (http://peternakan.litbang.deptan.go.id/fullteks/lokakarya/loksp0 8-70.pdf)   8-70.pdf) Tim Dosen Biokimia, 2001, Penuntun Praktikum Biokimia, Universitas Negeri Makassar, Makassar.

20

 

LAMPIRAN

No

1

Gambar

Keterangan Keterangan

Bahan-bahan yang digunakan dalam  praktikum

2

Proses pemanasan hodrolisis enzim sukrosa

3

Hasil laurtan setelah  percobaan dilakukan

4

Proses pemanasan menggunakan watter  batch.

Parafilm, alat yang digunakan untuk 5

menutup tabung reaksi, sehingga dalam kedaan anerob

21