Laporan Biokimia Kinetika Reaksi Enzim

 LAPORAN PRAKTIKUM PRAKTIKUM BIOKIMIA (Kinetika Reaksi Enzim)

DISUSUN OLEH KELOMPOK D1 10060310105 10060310106 10060310107 1006031010" 1006031010%

Siti Aminah Irma Yunita Aryani Sey Nuru U!ah Hani#a Humani$ya &ara 'erina

ASIS&EN KELOMPOK( A)i Su*riya)i+ S, -arm, LA.O/A&O/IUM LA.O/A&O/IUM -A/MASI &E/PADU UNI& . P/O/AM S&UDI -A/MASI -AKUL&AS MIPA UNIS.A 011

I. Tujuan ujuan •

Da*a Da*att mema memaha hami mi *rin$ *rin$i* i* 2ine 2ineti ti2a 2a rea2 rea2$i $i eni enim m )an )an !a2t !a2t4r 4r yan yan

•

mem*enaruhi 24n)i$i 4*timum $uatu enim, Da*at mea2u2an *er4aan $e$uai Stan)ar) O*era$i4na Pr4e)ur,

II. Teori Dasar Dasar

Enim men2atai$i$ ham*ir $emua rea2$i8rea2$i rea2$i8rea2$i i44i$ *entin, Oeh 2are 2arena na itu ai ai ahi 2e$ehat e$ehatan an *enet *enetahu ahuan an menen menenai ai $i!at8 $i!at8$i! $i!at at 2imia 2imia )an !un !un$i $i eni enim m $an $anat at )i*e )i*er ru2 u2an an a*a a*ai ia a a2an a2an mem* mem*er eru una na2a 2an n nya nya )aa )aam m *r4$e)ur )ian4$a, .eera*a aan imu 2e$ehatan 2e$ehatan teah mem*er4eh man!aat )ari )ari *ema2 *ema2aia aian n anai$ anai$i$ i$ enim enim ini+ ini+ $e*ert $e*ertii *a)a *a)a *enya2 *enya2it it in!ar2 in!ar2 mi42ar mi42ar)ia )ia++ he*a he*ati titi ti$+ $+ 2an2 2an2er er *r4$ *r4$ta tat+ t+ *eny *enya2 a2it it *eny *enyum uma att hati hati,, A2ti A2ti#i #ita ta$ $ enim enim *a)a *a)a eera*a *enya2it mun2in tini )an *a)a eera*a yan ainnya mun2in ren)a ren)ah, h, Pr4$e Pr4$e$ $ u9i enim enim 9ua 9ua men9a) men9a)ii $ema2i $ema2in n *enti *entin n *a)a *a)a *emeri *emeri2$ 2$aan aan eneti2+ 2arena )a*at )i*a2ai untu2 men)ete2$i *ema:a heter4i4t *enya2it8 *enya2it *enya2it 2eturunan eturunan $e*erti $e*erti !eni2 !eni2et4nu et4nuria, ria, &eah )i2etahu )i2etahuii )enan )enan 9ea$ah:a 9ea$ah:a enim 9arinan )i)i$triu$i2an )enan ara yan ter4rani$a$i ai2; $e u2an hanya hanya merui* merui*a2 a2an an Mentgomery,Rex.

Enim a)aah Katai$ .i44i$ yan )a*at menin2at2an a9u rea2$i $am*ai eih )ari 106 2ai, Dan )ua $i!at )a$arnya yaitu *enin2atan a9u rea2$i )enan

tan*a *eruahan *a)a enim )an *enin2atan a9u rea2$i tan*a *eruahan 2e$eimanan >euiirium? $erta *enurunan eneri a2ti#a$i,

 La9u /ea2$i 2imia ( Perubahan konsentrasi per unit waktu

>m4 F1 $F1?   /ea2$i 2ataiti2 enimati$( turnover per unit waktu+

2ata >2at+ m4 $ F1?,   internati4na unit U

>Gm4 turn4#er minF1; 1 U  16,7 n2at?,

Pa)a enim !a2t4r8!a2t4r yan mem*enaruhi 24n)u2$i 4*timum enim iaah

*H+

Suhu+

24n$entra$i

$u$trat

)an

enim+

Inhiit4r+

A2ti#at4r,

Penamahan $u$trat )enan 24n$entra$i tini a2an menin2at2an 2er9a enim, Karena enim a2an te*at eri2atan )enan $u$trat+ )an ia $u$trat eih anya2 ma2a ti)a2 9a)i ma$aah 2arena ia ter9a)i tumu2an+ a2an ter9a)i antara $u$trat )an $u$trat $aat :a2tu er$amaan, .ere)a ha )enan *enamahan $u$trat 24n$entra$i 2ei+ ma2a a2an ter9a)i tumu2an antara

$u$trat ama )an )enan yan aru untu2 eri2atan )enan enim, Sehina a2ti#ita$ enim a2an teranu, A2ti#at4r *a)a enim )a*at eru*a 24enim atau 24!a2t4r, K4!a2t4r ini eru*a a2ti#at4r an4rani2 )an 24enim eru*a a2ti#at4r 4rani2, Dia:ah ini tae eera*a 24!at4r Enyme

@4!a2t4r

Enim

oenz!me

 &hiamine *yr4*h4$*hate -a#in a)enine nue4ti)e Ni4tinami)e a)enine )inue4ti)e Pyri)4a *h4$*hate @4enyme A >@4A? .i4tin 5 8De4ya)en4$y 4aamin  &etrahy)r4!4ate

Pyru#ate )ehy)r4ena$e M4n4amine 4i)a$e Latate )ehy)r4ena$e y4en *h4$*h4rya$e Aety @4A ar4ya$e Pyru#ate ar4ya$e Methyma4ny muta$e &hymi)yate $yntha$e

Meta"

JnB JnB MB MB NiB M4 Se MnB KB

@ar4ni anhy)ra$e @ar4y*e*ti)a$e Eco/' He42ina$e Urea$e Nitrate re)uta$e utathi4ne *er4i)a$e Su*er4i)e )i$muta$e Pr4*i4ny @4A ar4ya$e

III.A"at #an Ba$an III. %. A"at

8 8 8 8 8 8 8 8 8 8

.atan *ena)u2 @4r4n 2aa @u#et Kerta$ $arin Pi*et tete$ Pi*et u2ur 1 mL; 5 mL; 10 mL St4*:ath S*e2tr4!4t4metri  44rimetri &aun rea2$i ater ath 35 @   

III. &. Ba$an

8 8 8 8 8 8 8

Aua)e$t Larutan &@A 0  Larutan 2a$ein   Larutan )a*ar *4$!at 0,1 M *H " Larutan NaOH 0,5 N Larutan tri*$in > 10 m )aam 5 mL )a*ar *4$!at 0,1M *H " ? /eaent !4in8 @i4ateu

I'.

Prose#ur Kerja

 &aun t  0 menit 8

arutan )a*ar *4$!at )an tri*$in )ima$u22an 2e)aam taun rea2$i $erta )itamah2an ma$in8ma$in 3 mL arutan &@A 0 + )ia)u2 *erahan )an )iin2ua$i 30 menit *a)a :ater ath

35

  

@,

Kemu)ian )itamah2an arutan 2a$ein $e$uai tae )an )i)iam2an 0 mL )aam emari e$, Lau )i$entri!ua$i 10 menit )an $arin meaui 2erta$ $arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n,  &aun t  0 menit 8

Diin2ua$i 5 menit *a)a :ater ath 35

  

@ ma$in8ma$in taun

er*ena)u2 yan eri$i 2a$ein $e$uai tae $ami )ia)u2, Kemu)ian )itamah2an erturut8turut arutan uer *4$!at )an arutan tri*$in, Diin2ua$i2an $eama 0 menit *a)a in2uat4r 35

  

@ )ihitun $eteah *enamahan tri*$in, Dihenti2an rea2$i )enan *enamahan 3 mL &@A 0  2e)aam ma$in8ma$in taun )an )ia)u2 $anat 2uat, Lau Di)iam2an $eama 0 menit )aam air e$ untu2 menyem*urna2an *enen)a*an, Dan )i$entri!ua$i $eama 10 menit 2emu)ian )i$arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n+ yaitu )iam*ur2an mL &@A8-itrat )enan mL NaOH 0,5 M 2emu)ian )itamah2an 1 mL arutan

-4in8

@i4ateu > 1 #4ume reaen )itamah 1 #4ume aua)e$t?, Kemu)ian )iam2an 10 menit )an )iteta*2an $era*annya 650 nm, '.

Data Penamatan

Taun 

I

Per"akuan !an #i"akukan Penama$an Larutan Diinkuasi #an

0entri+uasi #an

u*er +os+at, tri-sin,

#ieri Larutan

#isarin

#an TA &/

kasein

Larutan er:arna *utih

Larutan er:arna *utih

Larutan men9a)i

)an $eteah )itamah

2eruh )an ter)a*at

er:arna *utih

 &@A men9a)i *utih

$e)i2it en)a*an

aa2 enin+

enin

)i$e2eiin taun

namun $eteah )i$arin men9a)i

II

Larutan er:arna *utih

Larutan er:arna *utih

$anat enin Larutan men9a)i

)an $eteah )itamah

2eruh )an ter)a*at

er:arna *utih

 &@A men9a)i *utih

$e)i2it en)a*an

aa2 enin+

enin

)i$e2eiin taun

namun $eteah )i$arin men9a)i

III

I'

Larutan er:arna *utih

Larutan er:arna *utih

$anat enin Larutan men9a)i

)an $eteah )itamah

2eruh )an ter)a*at

er:arna *utih

 &@A men9a)i *utih

en)a*an )i$e2eiin

aa2 enin+

enin

taun teta*i ti)a2

namun $eteah

terau anya2

)i$arin men9a)i

Larutan er:arna *utih

Larutan er:arna *utih

$anat enin Larutan men9a)i

)an $eteah )itamah

2eruh )an ter)a*at

er:arna *utih

 &@A men9a)i *utih

anya2 en)a*an

aa2 enin+

enin

)i$e2eiin taun

namun $eteah )i$arin men9a)i

'

Larutan er:arna *utih

Larutan er:arna *utih

$anat enin Larutan men9a)i

)an $eteah )itamah

2eruh )an ter)a*at

er:arna *utih

 &@A men9a)i *utih

en)a*an )i$e2eiin

aa2 enin+

enin

taun teta*i ti)a2

namun $eteah

terau anya2

)i$arin men9a)i $anat enin

NaO1 ,2 M

Per"akuan !an #i"akukan Reaen 3o"in4io5a"teu 6 A7ua#est

Penentuan Ni"ai Asoransi

Tau

menunakan

n

0-ektro+otom eter

I

Larutan

Larutan men9a)i  a*i$an+ )iaian

er:arna

ata$ er:arna *utih enin )an

*utih enin

)iaian a:ah er:arna 2unin+

0+050

namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i II

Larutan

h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i  a*i$an+ )iaian

0+051

er:arna

ata$ er:arna *utih enin )an

*utih enin

)iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i

III

Larutan

h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i  a*i$an+ )iaian

er:arna

ata$ er:arna *utih enin )an

*utih enin

)iaian a:ah er:arna 2unin+

0+060

namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i I'

Larutan

h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i  a*i$an+ )iaian

er:arna

ata$ er:arna *utih enin )an

*utih enin

)iaian a:ah er:arna 2unin+

0+06%

namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i '

Larutan

h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i  a*i$an+ )iaian

er:arna

ata$ er:arna *utih enin )an

*utih enin

)iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i h4m4en )an er:arna 2unin

Penamahan Larutan uer !4$!at )an tri*$in

0+060

Seteah )itamah2an &@A 0

Ditamah2an Larutan 2a$ein

Seteah )i$entri!ua$i

Ditamah2an /eaen -4in8@i4ateu )an Aua)e$t 'I.

Per$itunan

•

Perhitunan A$4ran$i

AI   At0 F At0  0+071 F 0+050  0+01 AIII   At0 F At0

AII   At0 F At0  0+0"1 F 0+051  0+030 AI'  At0 F At0

 0+0" F 0+060

 0+0" F 0+06%

 0+0

 0+13%

•

Perhitunan Kee*atan

t  t0 F t0  0 ∆A ∆ t 

'I 

'II



0,021



0,03



20

 1+05 Q 1083 mm4menit

'III

'I' 

0,024



∆A ∆ t  0,139



20

 1+ Q 1083 mm4menit •

20

 1+5 Q 1083 mm4menit

∆A ∆ t 



∆A ∆ t 

20

 6+%5 Q 1083 mm4menit

Perhitunan K4n$entra$i Su$trat

SI 

aliquot  V total  Q 

aliquot  V total  Q 

SII 

0,1



7

0,5

 Q 0+0



7

 Q 0+0

 0+"57 Q 1083 mm4

 1+"6 Q 1083 mm4

aliquot  V total  Q 

aliquot  V total  Q 

SIII



SI'



1



7

3

 Q 0+0



 +"571 Q 1083 mm4

7

 "+571 Q 1083 mm4

 &ae Ha$i )an ra2  &ae Mahei$8Menten

•

'(mmo"8menit) %,2 ; %4< %,2 ; %4< %,& ; %4< =,>2 ; %4<

 &ae Line:e#er8.ur2

 Q 0+0

90: (mmo")

0+"57 Q 1083 1+"6 Q 1083 +"571 Q 1083 "+571 Q 1083

1

1

V  (menit8mmo")

[ S ] (%8mmo") 3500+1750 6%%+%"60 350+0053 116+6671

>2&,