Laboratorio 2 OFICIAL

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA

DEPARTAMENT O ACADEMICO DE INGENIERIA PESQUERA CURSO: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

PRACTICA Nº2 “LIMPIEZA, ACONDICIONAMIENTO Y

ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL DE USO MICROBIOLÓGICO” GRUPO: -

BALLONAS FIESTAS PERCY FACUNDO PIEDRA CLERY PAUCAR YANAYACO JESSICA PINGO BUOLANGGER. ANTHONY CASTILLO PEÑA LUIS

DOCENTE: DRA. MARÍA JIMENES FORERO

FECHA DE PRESENTACION: 12 de octubre del 2016

PIURA–PERU

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I. INTRODUCCION Los procesos de esterilización y/o desinfección son diariamente llevados a cabo, no solamente en el laboratorio, donde son fundamentales para evitar la contaminación de medios, cultivos, placas, etc., sino también en otros ámbitos tales como los hospitales. No hay que confundir la esterilización con la desinfección en la que no se eliminan todos los microorganismos, sino únicamente aquellos que pueden causar enfermedad o efectos deletéreos sobre los productos en los que se encuentran (en alimentos, cosméticos, etc.). Un objeto desinfectado, por lo tanto, no está estéril. La esterilización es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus formas esporuladas altamente resistentes, hongos y sus esporos. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo microbiológico , ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. Entre éstos podemos destacar: El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología y la preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, análisis microbiológico de medicamentos, cosméticos, alimentos, etc.) Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos como: el calor que se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. También incluye a la radiación, o emisión y propagación de la energía que a través de un medio, puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos.

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II. OBJETIVOS: Objetivos específicos: 

Identificar materiales sucios de uso microbiológico y efectuar su limpieza  Aprender el procedimiento de empacar y acondicionar diversos materiales de uso microbiológico para su esterilización en seco  Determinar y conocer el método de esterilización para esterilizar diversos materiales de uso microbiológico para el análisis de alimentos y productos pesqueros.

Objetivo general 

Aprender a manejar eficazmente los materiales estériles , que se utilizan en los análisis microbiológicos de alimentos y productos pesqueros adecuadamente , en el área de control de calidad y procesamiento de productos pesqueros

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III. FUNDAMENTO TEÓRICO Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos, agentes químicos, o por procesos físicos y agentes quimioterapéuticos. Se dispone de una gran variedad de técnicas y agentes que actúan de maneras diferentes y cada uno tiene su aplicación y límite de uso Un agente físico es una propiedad o condición que causa un cambio, por ejemplo la temperatura, la presión, radiación y los filtros. Un agente químico es una sustancia que causa una reacción específica y que se caracterizan por una estructura molecular típica, por ejemplo tenemos los compuestos fenólicos, los alcoholes, alógenos (cloro y yodo), aldehídos, oxido de etilo, fenoles. Un proceso físico es un procedimiento que causa un cambio, por ejemplo la filtración la esterilización, incineración, higienización.

CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

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AGENTES FISICOS  Calor húmedo: El efecto que causa este calor es matar al microorganismo por la coagulación de sus proteínas cuando se encuentran en una zona atmósfera húmeda y sometidos a altas temperaturas, además, es mucho más rápido y efectivo en su acción. La acción letal del vapor proviene del calor latente liberado cuando se condensa en una superficie fría aumentando de esta manera la temperatura dela zona enfriada. La destrucción de las esporas bacterianas sigue un comportamiento de forma similar en tanto que el vapor se condensa en la pared de la espora y aumenta su contenido en agua que finalmente hidroliza y degrada el contenido proteico. El calor húmedo puede penetrar más rápidamente que el calor seco porque las moléculas de agua conducen mejor el calor que las moléculas de aire. Por ello el calor húmedo puede ser usado a temperaturas más bajas y menor tiempo de exposición que el calor seco.  Pasteurización: El proceso consiste en calentar grandes volúmenes de leche en un recipiente a 63 °C durante 30 minutos, para luego dejar enfriar bruscamente a 10ºC, muriendo el 90% de los microorganismos DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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 Ebullición: La ebullición es el proceso físico en el que un líquido pasa a estado gaseoso (100ºC)

 Calor seco: El calor seco es un método térmico de esterilización y su efecto en los microorganismos es equivalente al horneado. El calor cambia las proteínas microbianas por las reacciones de oxidación y crea un medio interno árido, así quema a los microorganismos lentamente. En este caso el calor se propaga a través del aire. No es tan penetrante como en el caso anterior. Por lo tanto se debe esterilizar a temperaturas mayores a 120°C para lograr la misma eficacia. No es recomendado para esterilizar soluciones que tengan contenido acuoso como algunos productos de farmacia o alimentos. Pero si se puede esterilizar productos secos o material de metal ya que a diferencia del calor húmedo, al no haber vapor de agua no hay riesgos de oxidación. Para este método existen las estufas. Este tipo de calor comprende:  Flameado: es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Se esteriliza de esta forma, ej. asas de platino o alambre  Incineración: es el mejor sistema para esterilizar todas aquellos productos en los que no importe su destrucción, ej. Material biológico  Estufa: calor seco a alta temperatura, 20 minutos durante 180º, 60 minutos a 160º, siendo suficiente la esterilización durante 60 minutos a 100-140º, se lo utiliza para esterilizar material de vidrio debidamente envuelto en papel, metal. etc. Horno Pasteur (calor seco) La esterilización puede llevarse a cabo mediante calor seco y en este caso se realiza en una estufa denominada horno Pasteur en cuyo interior se disponen los materiales que van a ser esterilizados debidamente protegidos con papel satinado, o en contenedores especiales para evitar la contaminación ambiental una vez finalizado el proceso y hasta su utilización. El horno Pasteur se utiliza para esterilizar productos u objetos de porcelana o vidrio como pipetas, probetas, embudos, y generalmente aquellos materiales metálicos que no se pueden esterilizar en autoclave por problemas de corrosión y también fluidos oleaginosos La esterilización mediante este tratamiento, debe alcanzar temperaturas entre 160º-180ºC y el tiempo de tratamiento oscila entre 3 horas y 30 minutos en función de la temperatura seleccionada

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 Radiaciones Su acción depende de:  El tipo de radiación  El tiempo de exposición  La dosis  Ionizantes: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos. Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos.  Rayos Ultravioletas: Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilización en quirófanos.  Rayos Gamma: Su empleo está basado en los conocimientos sobre la energía atómica. Este tipo de esterilización se aplica a productos o materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibióticos, vacunas, alimentos, etc.

AGENTES MECÁNICOS  Filtración La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material. Es un proceso de remoción de bacterias de un fluido al pasarlos a través de un filtro con tamaño de poro tan pequeño que las bacterias no puedan pasar, este tamaño se mide en m. Los filtros modernos están diseñados para retener incluso algunos virus, estos filtros son aplicados especialmente para esterilizar antibióticos en solución, líquidos termolábiles como los sueros, soluciones de carbohidratos usados en medios de cultivo, recuperación de toxinas, etc.

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AGENTES QUÍMICOS Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas, membranas, etc.) En este caso existen productos biocidas, es decir, que eliminan a todo microorganismo por envenenamiento de un producto químico con o sin intervención del calor. Algunos muy usados son el Glutaraldehído, los aldehídos, la formalina, la lavandina al 10%, etc. En el caso del glutaraldehído no hay necesidad de aplicar calor sino que se puede hacer en frío sumergiendo los materiales en una solución al 2% y dejarla actuar un buen tiempo. Los métodos químicos son efectivos para la desinfección de manos y el lavado de mesadas. No son aplicables para alimentos ya que serían envenenados. Desinfectantes de alto nivel:  Peróxido de Hidrógeno: Es un antiséptico débil, con capacidad oxidante y formadora de radicales libres. Se está utilizando como desinfectante de superficies o descontaminante de gabinetes biológicos  El glutaraldehído: Es el desinfectante más utilizado en la esterilización de Equipos de endoscopía y de tratamiento respiratorio ya que no corroe metales y gomas, ni deteriora lentes.  Óxido de etileno: Se utiliza ampliamente para la esterilización de instrumentos termolábiles como ser: tubuladuras de polietileno (catéteres, sondas), equipos electrónicos médico-quirúrgicos, materiales biológicos, drogas, etc.

Definiciones básicas  Antiséptico: Una sustancia que se opone a la infección (sepsis) o previene crecimiento o acción de los microorganismos, bien sea destruyendo o bien inhibiendo su crecimiento o actividad, se denomina un antiséptico.

 Bactericida: Un agente que mata las formas vegetativas de las bacterias. Del mismo modo, los términos fungicida, viricida y esporocida se refieren a agentes que matan a los hongos, virus y esporas respectivamente.

 Bacteriostático: DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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Una condición en la que se previene (se inhibe) el crecimiento de las bacterias se denomina bacteriostasis. Los agentes que tienen en común la capacidad de inhibir los crecimientos de los microorganismos se designan colectivamente, como agentes microbiostáticos.

 Desinfección La desinfección es el proceso mediante el cual se destruyen las células vegetativas pero no necesariamente las esporas de los agentes infecciosos.

 Esterilización: El proceso que destruye todas las formas de vida se llama esterilización. Un en sentido microbiológico está libre de microorganismos vivos.

objeto estéril,

 Fungistático: Agente que detiene el crecimiento de los hongos

 Germicida (microbicida): Un agente que mata las células vegetativas pero no necesariamente las formas esporuladas de los gérmenes se llaman germicida (microbicida). En la práctica, germicida es casi sinónimo de desinfectante. Pero un germicida se usa generalmente para toda clase de gérmenes microbios y para cualquier aplicación.

IV. MATERIALES Y EQUIPOS 1. 15 pipetas de 10 ml 2.

3. Placas de Petri

4. 5. 4 espátula de driglasky DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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6.

19. 20. 21. Horno Pasteur 22.

7. 8. 9. 6 Erlenmeyer

10. 11. 12. Gradilla 13. 15 Tubos de ensayo

23.

14.

24. 25. Algodón , papel kraft , detergente. 26. 27.

15. 16. 17. Mortero con mazo 18.

28. 29.. 30. 31.

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32. 33.

V. PROCEDIMIENTO

Empacado del material

34. Se hará una demostración para empacar o envolver las placas de Petri y pipetas con papel Kraft, como elaborar tapones de algodón para tubos de cultivo y Erlenmeyer así como las forma de empacar la boca de los mismos (tubos y matraces). El acondicionamiento debe realizarse de manera tal de asegurar la perfecta esterilización del material y evitar la posterior contaminación. 35. Placas de Petri

Se colocan las placas de Petri

Se coloca una base de papel 36.

Se doblan los lados hacia el centro

Todos los lados son envueltos

37. 38. 39.

Queda envuelto totalmente de la forma conocida como envoltura de regalo DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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40. 41.

43.

Se envuelve en nuestro puño de la parte inferior Se forma un puño con el algodón

44. 45. 46.

42. TUBOS DE ENSAYO

Se coloca en el tubo de ensayo

47. 48. 49.

Se dobla el papel en la parte superior La parte superior es envuelta con papel

50. 51.

52.

PIPETAS 53.

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ipio de colocar algodón en la parte extrema superior, previamente colocar 63. 62.

60. MATRAZ DE ERLENMEYER

61. 58. 59.

Una vez llegada a la parte extremaSe inferior se dobla el la papel envuelve toda pipeta hasta la parte extrema inferior

57. 56.

Se forma un triángulo y se empieza envolver forma oscilatoria Sede toma la pipeta de la parte extremo superior

54. 55.

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64. 65.

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Se deja al descubierto la parte del mango por tema s de seguridad

71. 72. 73.

Se envuelve completamente el cuchillo Se toma de la parte metálica al cuchillo

69. 70.

68.

CUCHILLO DE LABORATORIO

67. 66. El triturador del mortero también es envueltoSecon envuelve papel con papel al mortero UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

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74. NOTA: POR TEMAS DIDACTICOS Y FALTA DE MATERIAL, SE HIZO USO DE PAPEL CORRIENTE Y NO DE PAPEL KRAFT (que por términos de seguridad en laboratorio debería utilizarse) PARA LA ENVOLTURA DE LOS MATERIALES DE LABORATORIO. 75. 76.

GRUPO ENCARGADO DE REALIZAR LA PRÁCTICA MATERIALES RESPECTIVAMENTE ENVUELTOS POR PAPEL 76. 76. 76. 76. 76. 76. 76. 76. 76. 76. 76. 77. 78. 79. 80. 81. 82. 83. 84. 85. 86. 87. 88.

VI.CUESTIONARIO 89. 90. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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91. 92. 93. 94. 95. 96.

97. 98. 99. 100. 101. 102. 103. 104. 105. 106. 107. 108. 1) Mencione tres diferencias entre esterilización en vapor en seco y esterilización en vapor húmedo 109. Esterilización en Vapor 110. Esterilización en Vapor seco húmedo 111. Las temperaturas de 112. Las temperaturas de esterilización van desde 121 °C a esterilización en un autoclave 180 °C, teniendo en cuenta los van de 121 °C a 134 °C y 40-50 tiempos de esterilización para psi. cada caso.

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113. Produce desecación de la célula, efectos tóxicos por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusión de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. 115. El aire es mal conductor del calor y el aire caliente entra más lentamente que el vapor en los materiales. Por ello se requiere más temperatura y tiempo de exposición que en la esterilización con calor húmedo. 117. Ventajas  No es corrosivo para metales e instrumentos.  Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no volátiles. 118.



121. Desventajas Requiere mayor tiempo de esterilización, respecto al calor húmedo, debido a la baja penetración del calor. 122. 125. Este tipo de calor comprende:  Flameado  Incineración  Aire caliente: 127.

114. Produce desnaturalización y coagulación de proteínas.. Estos efectos se deben principalmente a dos razones: 



El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.

116. Los materiales húmedos conducen mejor el calor que los secos, Por eso el vapor de agua es más eficaz que el calor seco matando a los microorganismos. Así la esterilización en presencia de vapor de agua requiere menos temperatura y tiempo que sin agua. 119. Ventajas  Rápido calentamiento y penetración  Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo  No deja residuos tóxicos  Hay un bajo deterioro del material expuesto  Económico 120. 123. Desventajas  No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua , es corrosivo con ciertos metales 124. 126. Dentro del Calor Húmedo tenemos  Ebullición:  Pasteurización  Vapor a presión

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128. 2) ¿Porque es importante tomar precauciones durante el funcionamiento del manejo de la autoclave y el horno Pasteur? 129. Cuando hablamos de precauciones nos referimos a la prevención de cualquier lesión o daño que nos puedan causar. 130. Es importante tomar precauciones durante el manejo de la autoclave ya que no puede ocasionar peligros físicos como por ejemplo calor, vapor y presión. También pueden ocasionar peligros biológicos como por ejemplo materiales infecciosos desinfectados incorrectamente. 131. Para el horno Pasteur es importante tomar precauciones durante el manejo y que la esterilización por calor seco se utiliza generalmente para materiales que toleran altas temperaturas, generalmente de metal o vidrio. Es el método de elección siempre que sea posible, pues la superficie del material de vidrio, al ser la que está en mayor contacto con el producto, puede ser origen de contaminación pirogénica, siendo el calor seco un buen agente de destrucción de pirógenos. Además tiene la ventaja de que, al finalizar el ciclo, el material sale seco. 3) ¿cuáles son las formas de más uso de esterilización del material de laboratorio de microbiología de los alimentos? 132. CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN 133. 134. Los métodos mediante los cuales se realiza la esterilización pueden ser clasificados de dos tipos: Físicos y Químicos, en dependencia de que el agente utilizado para ello sea físico o químico. 135. 136. MÉTODOS FÍSICOS 137. 138. 1. Calor seco (estufa u horno): 139. La esterilidad se consigue por las altas temperaturas del aire. Es un método muy usado en Estomatología. Consisten en el aprovechamiento de calor que produce una resistencia eléctrica dentro de un recipiente herméticamente cerrado o cuba, entrepaños para colocar instrumental, termostato, y un regulador automático de temperatura. 140. 141. 2. Calor húmedo (Autoclave): 142. Es el medio más práctico y eficaz para la esterilización en el consultorio estomatológico. La esterilización se logra por el vapor de agua supercalentado y mantenido a presión, que provee una caldera de metal de paredes resistentes y tapa de cierre hermético. Se compone de un cilindro de cobre, con una tapa en su parte anterior, la que cierra herméticamente. 143. 144. 3. Radiaciones Ionizantes: 145. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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146. * Rayos gamma. Son radiaciones ionizantes que se usan en la industria de artículos médicos, odontológicos y farmacéuticos. Se caracterizan por una alta energía y gran penetración. Es un método costoso. 147. * Rayos beta. Se usan principalmente en la industria. Su poder de penetración es menor que el de las radiaciones gamma 148. * Rayos ultravioleta. Son radiaciones no ionizantes. No tienen efecto esterilizante sobre algunos microorganismos. Son de baja energía y escasa penetración. Su acción es superficial y se usan para mantener una baja tasa de microorganismos en el quirófano y para mantener estéril el instrumental una vez que ha sido ya esterilizado. 149. 150. 4. Ondas Supersónicas: (microondas odontológico): 151. Este aparato está formado por un foco emisor de alta frecuencia que causa vibraciones en las moléculas de los microorganismos. Dichas vibraciones se transforman, por fricción interna, en calor y de esta forma se altera y se desactiva todo tipo de estructura viva. El instrumental se coloca en un contenedor cubierto por bolitas de vidrio humedecidas con un líquido (ortobencil para clorofenato de sodio). El tiempo de esterilización es de 90 segundos. 152. 153. 5. Filtración: 154. Es un proceso que impide el paso de microorganismos de un ambiente a otro. Se utiliza en la industria farmacéutica, en soluciones termolábiles que no pueden sufrir la acción del calor. Actualmente este método se usa en los compresores de aire que utilizan filtros coalescentes que filtran partículas hasta 0,001 ?m (99,9 % de pureza). 155. 156. 6. Flameo: 157. Se trata del calor que produce una llama de gas o alcohol; es un procedimiento de emergencia y consiste en colocar directamente en la llama el objeto que se desea esterilizar. Con la llama se consigue una temperatura muy alta que puede exceder, en la de gas, los 1000ºC. Esta temperatura tan elevada deteriora el instrumento, y para evitarlo, se debe colocar por encima de la llama a fin de que no reciba directamente el calor de esta. 158. 7. Ebullición: 159. 160. Se pueden usar 2 tipos de líquidos: agua y aceite 161. 162. * Agua en ebullición. El agua hierve a 100ºC, este sistema ofrece todas las garantías de esterilización siempre y cuando se cumpla el tiempo en que el material debe permanecer en ebullición, para lograr la muerte de las bacterias, no así las de las esporas que aún siguen resistentes. Aquí por supuesto no se puede esterilizar gasas, artículos de papel (conos) etc. Tiempo de ebullición establecido: 20 minutos. 163. * Aceite en ebullición. Para esto se utiliza un aceite especial volátil, aprovechando la ventaja de que el aceite hierve a una temperatura mayor que la del agua, la que puede llegar a 300ºC. Desde luego, no hace falta que hierva, basta con mantener el instrumental a 130ºC Tiempo de ebullición establecido: 20 minutos 164. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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165. 8. Microesferas de vidrio (esterilizadora de bolitas): 166. Este tipo de esterilización se realiza con un equipo que contiene un recipiente con microesferas de vidrio que son calentadas eléctricamente y que pueden ser sustituidas por sal común o arena. Se usa para esterilizar instrumental pequeño de Endodoncia, conos de papel o bolillas de algodón, que se introducen en el compartimiento durante 15 a 20 segundos a temperatura de 250 °C. Su uso es cuestionado. 167. 168. AGENTES QUÍMICOS 169. 170. Esta tipo de esterilización se utiliza para algunos instrumentos muy delicados, cuyo temple y filo conviene proteger del calor. Los productos químicos que se utilizan son bactericidas o desinfectantes. Tales productos, en unos casos destruyen la bacteria, actuando como desinfectantes y en otros impiden su desarrollo por lo que se denominan antisépticos. 171. La eficiencia de estos bactericidas está en razón directa de la concentración del producto, del tiempo que el instrumento permanezca dentro de ellos y de su prolija limpieza, ya que la sangre, así como los detritos adheridos al instrumento demoran y anulan la acción del agente químico que se utilice. 172.

Óxido de etileno: 173. Es un poderoso agente esterilizante gaseoso de acción lenta, inflamable cuando aparece en concentraciones iguales o superiores al 3 %, y altamente tóxico cuando es ingerido o inhalado (mutágeno y carcinógeno). 174. 2 Plasma de peróxido de hidrógeno. 175. El plasma es el cuarto estado de la materia no sólido, no líquido, no gaseoso. Consiste en un conjunto de iones, electrones y partículas atómicas neutras que se produce mediante temperaturas altísimas o fuertes campos electromagnéticos. Es un método reciente de esterilización rápida, a baja temperatura, baja humedad y sin residuos tóxicos pues su residuos finales son oxígeno y agua). 176. 3 Soluciones químicas (esterilización en frío): 177. El uso de soluciones salinas para la esterilización consiste en la inmersión del instrumental en desinfectantes de alto nivel, los cuales tienen acción bactericida, virucida, fungicida y esporicida. 1

178. 179. 180. 181. 182. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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183. 184. 4) ¿Qué características de una material o sustancia se requieren conocer para elegir el método adecuado de esterilización? 185. Rpta: La esterilización es un proceso a través del que se logra la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. 186. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico, ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. Entre éstos podemos destacar:   

El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, análisis microbiológico de medicamentos, cosméticos, alimentos, etc.). La descontaminación de material utilizado.

187. Existen diversos métodos de esterilización. La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. 188. Po eso, un material debe tener las siguientes características para saber que método de esterilización se le puede aplicar: Que el artículo esté bien limpio. Este cubierto completamente todo el artículo. Que la envoltura tenga su referencia para manejarla asépticamente. Tenga una barrera biológica efectiva. Tenga una resistencia al envejecimiento. Alta resistencia mecánica en seco y en húmedo. Resiste cualquier rotura durante el proceso de esterilización.  Resista la humedad.  Resista las condiciones físicas de los procesos de esterilización. 189. Para asegurar el éxito de un proceso esterilizante es necesario considerar las siguientes pautas: A. Esterilización previa: Será necesaria cuando el material y/ o equipos hayan sido utilizados con material infeccioso o presunto infeccioso, por ejemplo placas de Petri inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos, frascos empleados en el cepario, etc. Serán esterilizados en autoclave a 1 atm. de presión durante 15 – 30 minutos. Para las pipetas, micropipetas y tubos de hemólisis puede emplearse este método o sumergirlas inmediatamente después de ser utilizadas en solución desinfectante de formol al 10 % durante una hora. 190.      

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B. Limpieza previa: Se realizará para eliminar las partes gruesas de suciedad o residuos no infecciosos (gratitud, resto de pegamento, cinta adhesiva, carbono, tinta de rotulado, etc.). Se empleará el raspado con espátulas, cepillo, esponjas metálicas, paños, etc. Se enjuagará repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión (conectando a la canilla un tapón perforado o tapando parcialmente con un dedo). Se aconseja un último enjuague con agua destilada. Se dejará secar en canasto o rejilla de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a 60 – 80 °C. El material de vidrio que luego de este tratamiento aún quedase manchado será sumergido en una solución sulfocrómica durante 24 hs (Este procedimiento lo realiza personal especializado del Droguero). 191. C. Preparación del material de vidrio: este acondicionamiento debe realizarse de manera tal de asegurar la perfecta esterilización del mismo en todos sus puntos y evitar la posterior contaminación. 192. a Placas de Petri: se envuelven en papel madera según la técnica indicada por el instructor (se esterilizan en estufa a 160- 180ºC durante dos o una hora respectivamente). b Tubos de ensayos, tubos de hemólisis y tubos de Khan: se confecciona en tapón de algodón y se cubre con un capuchón de papel aluminio. (se esterilizan en estufa). 193. Pipetas: se obtura el extremo superior con un filtro de algodón y luego se envuelven con tiras de 4 a 5 cm. de ancho de papel madera comenzando por la punta de la misma. Debe rotularse cada una con la capacidad y graduación correspondiente (se esterilizan en estufa 194. 195. 196. 197. 198. 199. 200. 201. 202. 203. 204. 205. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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206. VII.BIBLIOGRAFÍA      

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M %C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf Leer más: http://www.monografias.com/trabajos10/meste/meste.shtml#ixzz4MZF8qq1u https://es.wikipedia.org/wiki/Esterilizaci%C3%B3n_(microbiolog%C3%ADa) https://esterilizacionmf.wikispaces.com/Métodos+de+Esterilización http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminarioesterilizacion.htm http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf

207. 208. 209. 210. 211. 212. 213. 214. 215. 216. 217. 218. 219. 220. 221. 222. 223. 224. 225. 226. DOCENTE ENCARGADO: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

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227. 228. 229.

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