Lab 2 Micro. Siembra en Profundidad

 

MICROBIOLOGÍA E INOCUIDAD DE LOS ALIMENTOS

RAM SIEMBRA EN PROFUNDIDAD

NUTRICIÓN Y DIETÉTICA – 2020

Adriana Quintero - 2182006 Rodolfo Marnez-2181998 Angie Hernández-2181390

INTRODUCCIÓN

Recuento microbiano de bacterias mesófilas aerobias Recuento Salas Mendoza, G  1 ; Sánchez Rivera, K 2 ; Segovia Huarcaya, J  3 ; Simón Ríos, J 4 ; Surita Cuba, K  5 ; Torres Carrera, G La venta ambulatoria de alimentos se ha convertido en un factor de riesgo trascendental para la salud de todos sus consumidores, debido a las deficientes y limitadas condiciones de higiene y aseo en la mayoría de los puestos de venta. La mayoría si no la totalidad de vendedores ambulantes, no cuentan con un sistema adecuado de abastecimiento de agua y materias primas de buena calidad, además de no emplear las buenas prácticas de manipulación e higiene de alimentos. El RAM es el indicador amplio yaerobios general ydefacultativos contaminación de los alimentos, incluye todosmás los géneros capaces de desarrollar en presencia de oxígeno a una temperatura comprendida entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30ºC y 40ºC. El recuento de microo mic roorg rgani anismo smos s aer aerobi obios os mes mesófi ófilos los,, en con condic dicion iones es est establ ableci ecidas das,, estima est ima la mi micr crofl oflora ora tot total al sin esp especi ecific ficar ar tip tipos os de micr microor oorgani ganismo smos; s; refleja la calidad sanitaria de los productos analizados. Un recuento elevado puede significar: - Excesiva contaminación de la materia prima. - Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración. - La inmediata alteración del producto. Un recuento bajo nos permite asumir que el alimento tiene poca o nula contam con tamina inació ción, n, aso asocia ciado do a bue buenas nas prá prácti cticas cas de man manipu ipulac lación ión lo cua cuall indica que el alimento sería adecuado para el consumo. En esta ocasión se realiza RAM por siembra en profundidad, una técnica que implica el crecimiento de colonias inmersas en una placa de Agar, mediante un meticuloso proceso permite de micr mi croo oorg rgan anis ismo mos s co cont nten enid idos os en que de dete ter rmi mina nada dadeterminar mues muestr tra, a, laelcantidad cu cual al se será rá descrito a continuación. RAM: Recuento de aerobios mesófilos UFC: Unidades formadoras de colonias Agar SPC: Estándar Plate Count (Agar de recuento)

Ilustración 1

 

MICROBIOLOGÍA E INOCUIDAD DE LOS ALIMENTOS

RAM SIEMBRA EN PROFUNDIDAD

Adriana Quintero - 2182006 Rodolfo Marnez-2181998 Angie Hernández-2181390

NUTRICIÓN Y DIETÉTICA – 2020

METODOLOGIA 1. Recol ecole ecció cción: n:

 La masa de maíz se compró en una tienda del barrio

Palermo 2 en Piedecuesta. Venía en un empaque manual producido por los mismos vendedores (vinipel), el alimento está organizado sobre un estante.

Procedimiento: 1. Pesar 10g de masa 2. Agregar la masa a un mortero de porcelana y macerar.   3. Añadir 90mL de solución pectonada y revolver. Esta se llamará disolución 4. Tomar 3 tubos de ensato y marcarlos de la siquiente forma:

-2

10

10

-3

-1

10

.

-4

10

  -1

-2

5. Con micropipeta tomar 1mL de. 10 y añadir al tubo de ensayo 10 el cual una contendrá 9mL de(1000u) solución pectonada. 6. De la disolución 10-2. tomar 1mL y añadir al segundo tubo de ensayo ( 10-3) que también contendrá contendrá 9mL de solución pectonada. 7. Reperemos los mismo con la disolución 10-3 , tomamos 1mL y añadimos al tercer tubo de ensayo (10-4) que también contendrá 9mL de solución pectonada. 8. Marcamos 3 cajas Petri con cinta de enmascarar, de la siguiente forma: Nutrición Microbiología de alimentos Mesón: 3 Grupo: H2 Muestra: masa de arepa de maíz amarillo Dilución: Fecha:

9. Revisamos el agar que se encontrará en baño maría, dejamos enfriar pero no demasiado ya que ende a cuagularse y así no funciona. 10. En la caj aja a de cad ada a un una a ide dent ntif ifiica cada da por por el valor alor de la disolución agregamos: 3 gotas de TTC, 1mL de la disolución correspondiente (10-3 en 10-3) y el agar. Estos procedi mientos deben realizarse uno por uno.

 

 

RESULTADOS:

Ilustración 2 Disolución 10 -³ . Harina de maíz , arepa artesanal  En la ilustración 2 podemos observar la caja de Petri donde se realizó la siembra de harina de arepa artesanal a una disolución de 10-³. Las manchas rojas que se alcanzan a notar son las colonias formadas.

  10-³: 340 UFC 10-³: Ilustración 3 Disolución 10-⁴ Harina de

maíz ,

arepa artesanal

En la ilustración 3 podemos observar la caja de Petri donde se realizó la siembra de harina de arepa artesanal a una disolución de 10-⁴. Las manchas rojas que se alcanzan a notar son las colonias formadas.

10-⁴: 48 x 4 = 192 UFC Solamente hicimos 2 conteos: (10-³ y 10-⁴) en donde se obtuvo 340 y 192 19 2 UFC resp respect ectiv ivame amente nte.. En la 1010-³³ se reali realizó zó el con conteo teo de la caj caja a

 

completa, y el 10-⁴ se realizó conteo de ¼ de la caja y se multiplico por el resto de cuadrantes para determinar las UFC. Se obvio el conteo de las otras cajas dado el tiempo requerido para realizar el conteo. Conclusión

El TTC es un indicador de crecimiento, toma un color rosado o rojizo, en profundidad las UFC son s on como transparentes, con el TT TTC C se pueden teñir teñir.. Per ero o apa aparte rte,, ind indica ica tam tambié bién n el pot potenc encial ial redo redox x (o (oxid xido-r o-redu educci cción) ón) el potencial redox se lo da la bacteria (todas las aerobias mesófilas emiten un potencial redox) y permite teñirse. Par ara a la co comp mpar arac ació ión n co con n la no norrma ut util iliz izam amos os un una a mu mues estr tra a de la di diso solluc ució ión n 10-⁴ (ilu (ilustra stración ción 3)  ya que fue la de mayor número de colonias, con un valor de 192. Recuento= Promedio x dilución Vol.

R= 192 x 100 = 19x10³ 1 mL La Ilustración 1 muestra que el valor mínimo para un producto de buena calidad es de 1000 UFC/g y uno máximo de 10.000 UFC/g para que el alimento sea aceptable, nuestra muestra dio un valor de 19x10³, lo cual habla hab la de que la mue muestr stra a ana analiz lizada ada par para a est este e re recue cuento nto de organ organism ismos os aerobios mesofilos en profundidad, no es apta para el consumo humano, excediendo excedi endo los límites establecidos por la norma. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS  

 

Anmat.gov.ar Anmat.gov .ar.. (201 (2014). 4). Análisis microbio microbiológico lógico de los alimento alimentos s. [online] Available at: http://www.anmat.gov http://www .anmat.gov.ar/renaloa/docs/Analisis_mic .ar/renaloa/docs/Analisis_microbiologico_de_los_  robiologico_de_los_  alimentos_Vol_III.pdf [Accessed 14 Feb. 2020]. Ins.gov.co. Ins.gov .co. (2018). RECU RECUENTO ENTO DE MES MESOFIL OFILOS OS AERO AEROBIOS BIOS,, HONG HONGOS OS FILAMENTOSOS Y LEVADURAS. [online] Available a t: https://www.ins.gov.co/conocenos/sig/SIG/MEN-R04.6022-015.pdf  [Accessed 14 Feb. 2020]. Técnica de ltración por membrana

Se basa en el crecimiento, la idencación y el recuento de las colonias de los microorganismos retenidos en la supercie de un ltro, a través del cual se ha ltrado un volumen conocido de muestra de agua. Incubada en un medio de culvo durante un empo y a una temperatura adecuadas. Se ha converdo en el método más común y preferido para evaluar las caracteríscas microbiológicas microbiológic as del agua. En esencia, el método consiste en: • Pasar una muestra de agua a través de un ltro de membrana (0,45 µ tamaño de poro y 47 mm de diámetro). • Transferir el ltro con las bacterias atrapadas a la supercie de un medio sólido (con agar) o a un soporte absorbente, conteniendo conteniendo el medio líquido deseado (sin agar). • El uso del medio apropiado permite la detección rápida de los CT, CF y EF. Chromocult Agar

 

Es un medio de culvo cromógeno diferencial para el análisis microbiológico de muestras de agua. En un plazo de 24 horas este medio permite la detección, la diferenciación y la enumeración simultáneas de E. coli y bacterias coliformes del agua potable. El recuento de coliformes se basa en la capacidad de la ß-D-galactosidasa, una enzima que es caracterísca de las bacterias coliformes, para escindir el sustrato Salmon-GAL. La reacción produce colonias de coliformes de color rojo asalmonado. El recuento de E. coli se basa en la escisión de los sustratos X-glucurónido por la ß-D-glucuronidasa y Salmon-GAL por la ß-D-galactosidasa, ß-D-galactosidasa, una combinación enzimáca que es caracterísca de E. coli. Cuando hay E. coli presente se escinden los dos sustratos, lo que da lugar a colonias que adquieren un color entre azul oscuro y violeta en oposición al rojo asalmonado de otras colonias de bacterias coliformes. coliforme s. Las bacterias no coliformes aparecen como colonias incoloras o, con baja frecuencia, de color turquesa. La formulación del CCA conene, como inhibidor de las bacterias gramposivas, heptadecilsulfato sódico (por ejemplo, Tergitol 7®), que no ene efectos negavos sobre el crecimiento de E. coli ni de las bacterias coliformes que se desean culvar. Método de recolección recolección de agua para ríos / lagos / quebradas. En ríos o cursos de agua será preciso considerar diversos factore factores, s, tales como: profundidad, caudal, distancia a la orilla, etc. La muestra se tomará lo más lejos posible de la orilla, procurando no remover el fondo y evitando los remansos o zonas de estancamiento. Para tomar una muestra del agua de un lago o de un río se sujetará el frasco por el fondo en posición inverda, sumergiéndolo completamente y dándole la vuelta en sendo contrario a la corriente (río) o desplazándolo horizontalmente en la dirección de la boca del frasco (lago).