KIMIA FARMASI ANALISIS 2

BAB I PENDAHULUAN

A. Pendahuluan Sulfonamid biasanya digunakan dalam sediaan berbentuk tablet, suspensi, injeksi, tetes mata, dan salep mata. Sulfonamid mempunyai spektrum antibakteri yang luas meskipun kurang kuat disbanding dengan antibiotika. Golongan sulfonamid umumnya hanya bersifat bakteriostatik (menghambat pertumbuhan bakteri) namun pada kadar yang tinggi dalam urin, sulfonamid dapat bersifat bakterisid (membunuh bakteri). Rumus molekul sulfonamid adalah sebagai berikut :

R1NH

SO2NR2R3

Pada umumnya gugus amin dan gugus sulfonamid terletak pada kedudukan para satu sama lain, dan R1 maupun R2 merupakan atom hidrogen, sedangkan R3 merupakan gugus yang berbeda. Metode analisis untuk sulfonamid berdasarkan pada gugus amin aromatis primer atau hidrogen asam dalam molekulnya. Gugus amin aromatis primer dapat dilakukan reaksi diazotasi. Adanya inti benzen pada sulfonilamid dapat dilakukan brominasi atau iodasi. Hidrogen asam pada sulfonamid dapat dititrasi dengan basa dan akan lebih baik dalam pelarut bukan air. Beberapa sulfonilamid berbentuk garam perak yang tidak larut sehingga dapat ditetapkan secara argentometri. Metode kolorimetri pada sulfonamid berdasarkan bahwa pada gugus amin aromatis primer dapat didiazotasi dan dikopling dengan naftil etilen diamin sehingga akan menghasilkan senyawa berwarna.

BAB II PEMBAHASAN

1. Analisis Turunan Sulfonilamida 

Sulfadiazin

Penetapan kadar : lakukan penetapan menurut cara Nitrimetri , jika perlu hangatkan hingga sulfadiazine larut. 1 ml natrium nitrit 0,1 M setara dengan 25,027 mg C10H10N4O2S. Identifikasi : a) menunjukkan reaksi amina aromatik primer yang tertera pada reaksi identikasi. b) Panaskan perlahan-lahan 1 g hingga terbentuk sublimasi. Campur beberapa mg sublimat dengan 1 ml larutan resorsinol P; 5 % b/v, tambahkan 1 ml asam sulfat P; terjadi warna merah tua, encerkan hati-hati dengan 25 ml air es, tambahkan ammonia encer P; terjadi warna biru kemerahan sampai biru. c) spectrum serapan infra merah menunjukkan maksimum hanya pada panjang gelombang yang sama dan mempunyai intensitas relative yang sama seperti sulfodiazina PK. Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 64; sistem TD-Rf 22; sistem TE-Rf 04; sistem TF-Rf 39; sistem TT-Rf 24; sistem TU-Rf 22; sistem TV-Rf 03; sistem TAD- Rf 38; sistem TAE-Rf 81; sistem TAJ-Rf 40; sistem TAK-Rf 11; sistem TAL-Rf 70.

Chromatography.System GA-sulfadiazin RI 2502 Gas Bumi; sulfadiazinMe RI 2625; M RI (asetil-)-ME2 3710; Sistem GJ-sulfadiazin-Me RRT 0,66, N4-acetylsulfadiazine-Me RRT 1,69 (keduanya relatif terhadap griseofulvin). Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System HU-k 8,7; sistem HY-RI 234; sistem Haa-waktu retensi 8,4 menit. Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-242 (A11 = 587a); alkali berair-240 (A11 = 867a), 254 nm (A11 = 868a). Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1580,, 1159 1494, 682, 940, 797 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 186, 185, 92, 65, 108,, 39 93, 187. Hitungan Chromatography.In gas plasma atau urin: sulfadiazin dan derivatif asetil, batas deteksi 1 ng, ECD-A. Bye dan Tanah G., J. Chromatogr, 1977., 139, 181-185. Cair kinerja tinggi chromatography.In plasma atau urin: batas deteksi 400 mg / L untuk sulfadiazin dalam plasma, 5 dan 7 mg / L untuk sulfadiazin dan derivatif asetil, masing-masing, dalam urin, deteksi UV-D. Westerlund dan Wijkström A., J. Pharm. Sci, 1982., 71, 1142-1145. Dalam serum atau urin: deteksi UV-V. Springolo dan G. Coppi, J. Pharm. Biomed. Anal, 1989, 7, 57-65;.. HN Alkaysi et al, Biomed. Chromatogr, 1991., 5, 265268. Dalam plasma atau urin:-R. Metz et al., J. Chromatogr, 1996., 729, 243-249. Pada urin: sulfadiazin dan sulfonamid lainnya, batas deteksi 0.1 sampai 0.3 mg / L-E. Simo-Alfonso F. et al., J. Chromatogr. B Biomed. Appl, 1995., 670, 183-187. Disposisi di Body.Readily diserap setelah pemberian oral. Hal ini asetat dalam tubuh dan sampai 15% dari sulfadiazin dalam darah dalam bentuk derivatif N4-asetil tidak aktif. Sekitar 50% dari dosis diekskresikan dalam urin dalam 24 jam, sampai sekitar 40% dari bahan diekskresikan adalah obat berubah asetil derivatif dan sampai sekitar 50%. Ekskresi dipengaruhi

oleh pH urin, tingkat yang sedang meningkat ketika urin bersifat basa.



Sulfadoksin

Penetapan kadar : lakukan penetapan kadar yang tertera pada titrasi nitrimetri. 1 ml natrium nitrit 0,1 M setara dengan 31,03 mg C12H14N4O4S Identifikasi : a) spectrum serapan infra merah zat yang telah dikeringkann dan didispersikan dalam kalium bromide P, menunjukkan maksimum hanya pada panjang gelombang yang sama seperti pada sulfadoksin BPFI. b) Spektrum serapan larutan (1 dalam 167000) dalam natrium hidroksida 0,1 N menunjukkan maksimum dan minimum pada panjang gelombang yang sama. Seperti pada sulfadoksin BPFI. Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 67; sistem TB-Rf 63; sistem TD-Rf 37; sistem TE-Rf 79; sistem TF-Rf 51; sistem TAD-Rf 55; sistem TAE-Rf 78; sistem TAJ- Rf 53; sistem TAK-Rf 28; sistem TAL-Rf 90. Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System HU-k 4,4; sistem HX-RI 364; sistem Haa-Waktu retensi 13,3 menit. Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-264; berair alkali-272 nm (A11 = 762a). Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1583,, 1161 1596, 1315, 1091, 1305 cm-1 (KBr disk).

Hitungan Performa tinggi chromatography.In plasma cair, sel-sel darah merah atau darah keseluruhan: sulfonamid sulfadoksin dan lainnya, batas deteksi 50 mg / L, deteksi UV-V. Dua K. et al., J. Pharm. Biomed. Anal, 1994., 12, 1317-1323. Dalam plasma: sulfadoksin dan antimalarial lainnya, batas deteksi 25 mg / L untuk sulfadoksin, deteksi UV-J. Eljaschewitsch et al, Ada.. Obat monit, 1996., 18, 592-597. Dalam plasma: sulfadoksin dan pirimetamin, batas deteksi 22 mg / L (sulfadoksin) dan 10 mg / L (pirimetamin), deteksi UV-H. Astier et al., J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl, 1997., 698, 217-223. Dalam darah: sulfadoksin dan pirimetamin-M. D. Green et al., J. Chromatogr. B analit. Technol. Biomed. Sci Life., 2002, 767, 159-162. Metode dimaksud dalam sulfametoksazol juga dapat digunakan. Disposisi di Body.Sulfadoxine adalah sulfonamide long-acting yang mudah diserap setelah pemberian oral. Reaksi metabolik utama adalah N4asetilasi bersama-sama dengan glucuronidation. Konsentrasi tinggi dari sulfadoksin tercapai dalam darah dalam waktu sekitar 4 jam dengan sekitar 5% sebagai derivatif asetil dan 2% sebagai glukuronat tersebut. Hal ini sangat lambat diekskresikan dalam urin, sekitar 8% dari dosis yang dikeluarkan dalam 24 jam dan 30% dalam 7 hari. Bahan diekskresikan terdiri dari 30 sampai 60% derivatif asetil dan 30 sampai 60% sulfadoksin berubah dari yang sampai 40% mungkin terkonjugasi dengan asam glukuronat dan hingga 10% dengan sulfat.



Sulfametoksazol

Penetapan kadar : Timbang saksama 500 mg, larutkan dalam campuran 20 ml asam asetat glasial P, 40 ml air dan 15 ml asam klorida P, dinginkan hingga suhu 15o. segera titrasi dengan natrium nitrit 0,1 M secara potensiometrik menggunakan elektroda kalomel dan platina. 1 ml natrium nitrit 0,1 M setara dengan 25,33 mg C10H11N3O3S Identifikasi : a)

spektrum serapan infra merah menunjukkan maksimum hanya pada panjang gelombang yang sama dan mempunyai intensitas yang sama seperti pada sulfametoksazol PK.

b) Menunjukkan reaksi amino aromatic primer yang tertera pada reaksi identifikasi terbentuk endapan jingga merah. c)

larutkan 5 mg dalam natrium hidroksida 2 M tambahkan 5 ml air. Tambahkan fenol P, didihkan, dinginkan, tambahkan 1 ml larutan natrium hipoklorit encer P segera terjadi warna kuning emas.

Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 65; sistem TD-Rf 26; sistem TE-Rf 05; sistem TF-Rf 54; sistem TT-Rf 88; sistem TU-Rf 33; sistem TV-Rf 02; sistem TAD- Rf 41; sistem TAE-Rf 79; sistem TAJ-Rf 45; sistem TAK-Rf 26; sistem TAL-Rf 81. (Biru Merkuri klorida-diphenylcarbazone reagen,; kalium permanganate larutan diasamkan, positif; Van Urk reagen, kuning.) Gas

Chromatography.System

GA-sulfametoksazol-Me

RI

2500,

sulfametoksazol-ME2 RI 2460, M (N4-asetil-)-Me RI 3255; sistem GJsulfametoksazol-Me RRT 0,40, M (N4-asetil-)-Me RRT 0,91 (keduanya relatif terhadap griseofulvin). Cair Kinerja Tinggi HU-sulfametoksazol Chromatography.system k 4,8, (N4asetil-) k 4,9; sistem HY-RI 320; sistem HZ-retensi waktu, 2,9 menit; sistem Haa-retensi waktu, 13,4 menit; sistem HAM-Waktu retensi 2.7 min. Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-265 nm (A11 = 175A); berair alkali-256 nm (A11 = 673a).

Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1145, 1160 1599, 1621, 685, 1306 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 156, 92, 108, 65, 140,, 253 157, 43. Hitungan Cair kinerja tinggi chromatography.In serum atau urin: batas deteksi 0,5 mg / L, deteksi UV-T. B. Vree et al., J. Chromatogr, 1978, 146;. Biomed. Appl, 3., 103-112. Dalam plasma atau urin: sulfamethoxazole dan metabolitnya, batas kuantisasi sulfametoksazol 0,1 mg / L, deteksi UV-T. B. Vree et al., J. Chromatogr,

1994.658.,

Biomed.

Appl,

327-340..

Dalam

darah:

sulfametoksazol dan trimetoprim, batas kuantifikasi 1 mg / L dan 0,1 mg / L, masing-A. M. Ronn et al, Ada.. Obat monit, 1999., 21, 609-614. Disposisi di Body.Readily diserap setelah pemberian oral dan didistribusikan secara luas, melainkan ditemukan dalam air liur, keringat, empedu, CSF, peritoneal, mata dan cairan sinovial, melainkan ditemukan pada efusi pleura dan lainnya. Melintasi plasenta dan diekskresikan dalam ASI. Hal ini dicerna terutama oleh asetilasi dengan pembentukan derivatif N1 dan N4-asetil-asetil, sekitar 15% dari sulfametoksazol dalam darah hadir sebagai metabolit asetilasi. Diekskresikan dalam urin sebagian besar sebagai sulfamethoxazole derivatif dan tidak berubah N4-asetil bersama-sama dengan beberapa konjugat glukuronat. ekskresi urin adalah variabel dan tergantung pada pH urin, proporsi obat berubah diekskresikan ditingkatkan ketika urin bersifat basa. Sampai dengan sekitar 25% dari dosis diekskresikan berubah ketika urin adalah asam, meningkat hingga 40% atau lebih dalam urin basa. Besarnya N4-asetil derivatif mungkin dikeluarkan 30 sampai 70% dari dosis. Sulfametoksazol dioksidasi untuk membentuk hidroksilamin yang mungkin terlibat dalam reaksi negatif terhadap sulfonamid. Sulfametoksazol sering diberikan bersama dengan trimetoprim

namun

hal

ini

tidak

mempengaruhi

metabolisme.



Sulfasalazin

Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 66; sistem TD-Rf 00; sistem TE-Rf 00; sistem TF-Rf 00; sistem TAD-Rf 02; sistem TAE-Rf 85; sistem TAJ-Rf 00; TAK sistem Rf 30; sistem TAL-Rf 39. (Spot oranye Terlihat.) Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System RI HX-433; sistem HZ-waktu retensi 1,9 menit. Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1078,, 1123 772, 1634, 1175, 1672 cm-1 (Nujol memperkusut). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 169, 92, 289, 65, 290,, 333 39,184. Hitungan : Performa tinggi chromatography.In plasma cair: sulfapyridine, acetylsulfapyridine, asam 5-Aminosalisilat dan asam 5-acetamidosalicylic, batas deteksi 500 mg / L, UV dan fluoresensi deteksi-P. N. Shaw et al, J. Chromatogr, 1983, 274;.. Biomed. Appl, 25., 393-397. Dalam plasma atau urin: asam 5-Aminosalisilat dan asam 5-acetamidosalicylic, batas deteksi 20 mg / L, fluoresensi deteksi-C. Fischer et al, J. Chromatogr, 1981, 225;.. Biomed. Appl, 14., 498-503. Dalam empedu: asam 5-Aminosalisilat dan asam 5-acetamidosalicylic, fluoresensi deteksi-C. Fischer et al, Br.. J. Clin. Pharmacol, 1983., 15, 273-274. Dalam plasma, urin atau kotoran: metabolit sulfasalazine dan konjugasi, batas deteksi 1 mg / L atau kurang, UV, fluoresensi atau elektrokimia deteksi-S. H. Hansen, J. Chromatogr., 1989, 491, 175-185. Dalam serum: sulfasalazine, sulfapyridine dan N-

acetylsulfapyridine, batas deteksi 0,1-0,25 mg / L, deteksi UV-C. Bugge J. et al., J. Pharm. Sci, 1990., 79, 1095-1098. Disposisi di Body.Partially dan tidak teratur diserap setelah pemberian oral. Bahan diserap tidak dimetabolisme namun diekskresikan tidak berubah dalam urin dan mencakup hingga sekitar 10% dari dosis. Sebagian besar dosis melewati tidak berubah ke dalam usus besar di mana ia dicerna oleh bakteri untuk sulfapyridine dan asam 5-Aminosalisilat, yang dianggap sebagai bagian aktif. sulfapyridine tersebut sehingga terbentuk diserap, dan dicerna oleh N4-asetilasi, hidroksilasi cincin dan glucuronidation. Tingkat asetilasi tergantung pada status acetylator subjek. Sekitar 60% dari dosis diekskresikan dalam urin sebagai sulfapyridine bebas dan asetilasi dan glucuronides mereka, dan sekitar 25% dari dosis tersebut tereliminasi sebagai sulfapyridine dalam tinja. Asam 5Aminosalisilat sebagian diserap dan dimetabolisme oleh N-asetilasi, sekitar 30% diekskresikan dalam urin sebagai obat tidak berubah dan asam 5-acetamidosalicylic, dan sebagian besar sisanya dieliminasi tidak berubah dalam tinja.



Tolbutamid

Penetapan kadar : Timbang saksama 500 mg, larutkan dalam 30 ml etanol (95%) P netral tambahkan 20 ml air. Titrasi dengan natrium hidroksida 0,1 N menggunakan indikator larutan fenolftalein P. 1 ml natrium hidroksida 0,1 N setara dengan 27,04 mg C12H18N2O3S

Identifikasi : a) spectrum serapan infra merah disperse zat dalam paraffin cair P menunjukkan maksimum hanya pada panjang gelombang yang sama seperti pada tolbutamida PK. b) pada 200 mg tambahkan 16 ml asam sulfat (50% v/v) P redluks selama 30 menit. Tambahkan larutan natrium hidroksida P hingga bereaksi basa kuat, selama 30 menit. Tampung sulingan dalam 20 ml asam klorida P (1% v/v). pada 1 ml larutan ditambahkan 100 mg nnatrium asetat P dan 10 ml alkali borat pH 9,4 P. dinginkan larutan dalam tangas es selama 10 menit, tambahkan 1 ml larutan P – nitroanilin P segar, biarkan selama 20 menit. Tambahkan 20 ml larutan hidroksida P 10 % b/v tetes demi tetes; terjadi warna merah jingga. Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 76; sistem TD-Rf 51; sistem TE-Rf 12; sistem TF-Rf 55; sistem TT-Rf 98; sistem TU-Rf 35; sistem TV-Rf 04; sistem TAD- Rf 62; sistem TAE-Rf 88; sistem TAF-Rf 88; sistem TAJ-Rf 69; sistem TAK-Rf 74; sistem TAL-Rf 93. Gas GA-RI 1683 Chromatography.System. Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System RI HX-477; sistem HY-RI 424; sistem HZ-Waktu retensi (s) 5.9 min. Ultraviolet Spectrum.Methanol-257, 263 (A11 = 22a), 268, 275 nm. Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1658,, 1157 1552, 668, 1090, 905 cm-1 (KBr disk). Polimorfisme mungkin terjadi. Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 91, 30, 155, 108, 65,, 197 39, 107. Quantification.See juga di bawah klorpropamid. Chromatography.In gas plasma atau urin: tolbutamid dan dua metabolit, batas deteksi 1 mg / L, ECD-S. B. Matin dan M. Rowland, Anal. Lett. (Bagian B), 1973, 6, 865-876. Cair

kinerja

tinggi

chromatography.In

plasma:

tolbutamid

dan

carboxytolbutamide, batas deteksi 2 mg / L untuk tolbutamid dan 100 mg / L untuk metabolit karboksi, deteksi UV-G. Raghow dan M. Meyer C., J. Pharm. Sci, 1981., 70, 1166-1168. Dalam plasma: batas deteksi 200 mg / L, deteksi

UV-H. M. Hill dan Chamberlain J., J. Chromatogr, 1978., 149, 349-358. Dalam plasma atau urin: tolbutamid dan metabolit, fotodioda-array deteksi-K. Csillag et al., J. Chromatogr, 1989., 490, 353-363. Dalam plasma atau urin: tolbutamid dan metabolit, batas deteksi 0,1-1,5 pM dalam plasma dan 0,5 hingga 2 pM dalam urin, deteksi UV-L. L. Hansen dan K. Brosen, Ada. Obat monit, 1999., 21, 664-671. Massa spectrometry.In serum: sulfonilurea tolbutamid dan lainnya, batas deteksi dan kuantifikasi 2 dan 10 mg / L, masing-F. Magni et al, Anal.. Biochem, 2000., 282, 136-141. Disposisi di Body.Tolbutamide siap diserap setelah pemberian oral. Sekitar 85% dari dosis oral diekskresikan dalam urin dalam 48 jam, dimana sekitar dua-pertiga adalah metabolit 4-karboksi dan sekitar satu-ketiga adalah metabolit 4-hidroksimetil; kurang dari 5% diekskresikan sebagai obat tidak berubah. Sekitar 9% dari dosis adalah dieliminasi dalam feses dalam 48 jam 

Klorpamid

Cl

SO2NH-CONHCH2CH2CH3

TLC : TA-Rf 72; sistem TB-Rf 00; sistem TD-Rf 38; sistem TE-Rf 10; sistem TF-Rf 43; sistem TT-Rf 84; sistem TU-Rf 43; TV sistem- Rf 03; sistem TADRf 49; sistem TAE-Rf 87; sistem TAF-Rf 88; sistem TAJ-Rf 65; sistem TAKRf 78; sistem TAL-Rf 06. System Chromatography : KLT dilakukan menggunakan silikal gel-G p sebagai zat jerap dan campuran 15 bagian volume isopropanol p, 3 bagian volume sikloheksana p, 1 bagian volume ammonia p dan 1 bagian volume air sebagai fase gerak. Pada lempeng kromatografi totlkan terpisah 5 ul masingmasing 3 larutan dalam aseton p yang mengandung 6,0 % b/v zat uji 0,02% b/v p-klorobenzenesulfonamida PK dan 0,02% b/v N-N diploplurea PK.

Angkat lempeng, keringkan dengan mengalirkan udara hangat, panaska pada suhu 110o, selama 10 menit. Semprot lempeng panas dengan larutan natrium hipoklorit p yang diencerkan dengan air secukupnya hingga mengan dung klor 0,5% b/v. keringkan dengan mengalirkan udara dingin hingga daerah lempeng yang disemprot dibawah garis penetesan memberikan warna biru sangat pucat dengan satu tetes larutan, KI 0,5% b/v dalam larutan kanji p. bercak yang diperoleh dari larutan dan lebih intensif dari bercak yang diperoleh dari larutan.(FI III : 583) GA-klorpropamid Gas RI 1791, klorpropamid-Me RI 2165, RI-ME2 klorpropamid 2250. HPLC : System RI HX-450; sistem HY-RI 411 dan 413; sistem HZ-waktu retensi 5,0 menit; sistem Haa-retensi waktu, 17,7 menit. Ultraviolet Spectrum.Methanolic asam-232 nm (A11 = 598a). Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1661,, 1159 1553, 757, 1086, 909 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 111, 175, 75, 85, 30, 276, 127, 113. 

Dapson

Penetapan kadar : larutkan 250 mg dalam campuran 15 ml air dan 15 ml asam klorida encer P. lanjutkan penetapan menurut cara nitrimetri. 1 ml natrium nitrit 0,1 m setara dengan 12,42 mg C12H12N2O2S Identifikasi :

a) spektro serapan ultraviolet 0,05 % b/v dalam methanol P setebal 2 cm pada daerah 230 nm – 350 nm, menunjukkan dua maksimum pada 260 nm dan pada 295 nm : serapan pada 260 nm lebih kurang 0,73 dan pada 295 nm lebih kurang 1 %. b) lakukan pengujian menurut cara yang tertera pada zat asing dengan menotolkan pada lempeng kromatografi. Masing-masing 1 µl larutan dalam methanol P yang mengandung (1) 0,1 % b/v zat uji, (2) 0,1 % dapson PK. Bercak utama yang diperoleh dari larutan (1) sesuai dengan bercak utama yang diperoleh dari larutan (2) c) menunukkan reaksi amina aromatic primer yang tertera pada reaksi identifikasi. Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System HY-RI 298; sistem HZ-waktu retensi 2,6 menit; sistem Haa-waktu retensi 12,6 menit. Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-288 (A11 = 350b); berair alkali-256, 292 nm. Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1150,, 1276 1592, 1107, 685, 1633 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 108, 248, 140, 65, 92,, 141 109, 80. Hitungan Gas plasma chromatography.In: dapson dan monoacetyldapsone, ECD-H. P. Burchfield et al, Anal.. Kimia, 1973., 45, 916-920. Cair kinerja tinggi chromatography.In bahan baku, dosis bentuk atau cairan biologis: batas deteksi 10 pg menggunakan fluorescence deteksi dan 250 pg menggunakan deteksi UV-C. A. Mannan et al., J. Pharm. Sci, 1977., 66, 16181623. Dalam plasma: dapson dan monoacetyldapsone, batas deteksi 5 mg / L, deteksi UV-C. R. Jones dan S. M. Ovenell, J. Chromatogr. 1979, 163 B Biomed. Appl, 5., 179-185. Dalam serum: dapson dan monoacetyldapsone, batas deteksi 200 mg / L, deteksi UV-J. Zuidema et al., J. Chromatogr. 1980, 182 B Biomed. Appl, 8., 130-135. Dalam darah: batas kuantisasi 20 mg / L untuk dapson dan 15 mg / L untuk monoacetyldapsone-A. M. Ronn et al, Ada.. Obat. Monit, 1995., 171, 79-83. Dalam plasma: batas deteksi 0,002 mg / L

untuk dapson dan 0,047 mg / L untuk hydroxylaminodapsone, deteksi UV (λ = 295 nm)-S. Kwadijk dan J. S. Torano, Biomed. Chromatogr, 2002., 163, 203208. Dalam serum dan air liur: batas deteksi 25 mg / L, deteksi UV (λ = 295 nm) dan 0,2 mg / L, ECD-J. Moncrieff, J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl, 1994., 6541, 103-110. Lapisan tipis chromatography.In plasma atau air liur: batas deteksi 20 mg / LR. A. Ahmad dan H. J. Rogers, Eur. J. Clin. Pharmacol, 1980., 17, 129-133.

Disposisi di Body.Slowly dan hampir sepenuhnya diserap setelah pemberian oral dan secara luas didistribusikan ke seluruh tubuh. Hal ini asetat untuk monoacetyldapsone, sejauh yang secara genetik ditentukan. Hal ini juga dimetabolisme oleh N-oksidasi untuk mono-N-hydroxydapsone, bersama dengan asam glukuronat dan konjugasi sulfat dari dapson dan metabolit. enterohepatic daur ulang terjadi. Sekitar 70 sampai 90% dari dosis diekskresikan dalam urin, sekitar 10 sampai 20% sebagai obat tidak berubah, sekitar 50% sebagai konjugat dapson, dan sekitar 30% sebagai produk Noksidasi (kebanyakan terkonjugasi). Jumlah kecil dieliminasi dalam tinja. Sekitar 30 sampai 50% dari dosis tunggal diekskresikan dalam urin dalam waktu 24 jam dan lebih dari 70% dalam 3 hari, tetapi ada variasi individu lebar. 

Sulfaguanida

Penetapan kadar : Lakukan penetapan menurut cara nitrimetri menggunakan larutan yang dibuat se bagai berikut : Timbang saksama 500 mg, larutkan dalam campuran 75 ml air dan 10 ml asam klorida P, dinginkan. 1 ml natrium nitrit 0,1 M setara dengan 21,424 mg C7H10N4O2S.

Identifikasi : a) pada 200 mg tambahkan 5 ml larutan natrium hidroksi P, tidak larut, didihkan, larut dan terjadi bau amoniak. b) larutkan asam klorida (10 %) v/v P hangat, dinginkan dengan es. Tambahkan dengan 2 ml larutan natrium nitrit P campur. Tambahkan 2 ml air dan 1 ml larutan 2 naftol, terbentuk endapan seperti gel merah cerah. c) Spektrum serapan infra merah menunjukkan maksimum hanaya pada gelombang yang sama dan mempunyai intensitas relative yang sama seperti pada sulfaguanida. Kromatografi lapisan tipis. Sistem TA-Rf 65; sistem TD-Rf 01; sistem TE-Rf 25; sistem TF-Rf 06; sistem TT-Rf 21; sistem TU-Rf 90; sistem TV-Rf 48; sistem TAD-Rf 07; TAE sistem -Rf 75. Kromatografi Gas. Sistem GA-tidak dielusi. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Sistem HY-RI 92; sistem Haa-waktu retensi 3,8 menit.Ultraviolet Spectrum. asam berair-264 (A11 = 115a), 271 (A11 = 107c); berair alkali-259 nm (A11 = 758a). Spektrum infra-merah. Pokok puncak di wavenumbers 1620,, 1129 1230, 1537, 1075, 1176 cm-1 (KBr disk). Spektrum massa. Pokok ion pada m / z 92, 65, 108, 214, 156,, 39 109, 43. Hitungan Kromatografi cair kinerja tinggi. Dalam plasma: batas deteksi 10 mg / L, deteksi UV-R. L. Suber dan G. T. Edds, J. Liq. Chromatogr, 1980., 3, 257-268. Pada urin: sulfaguanidine dan sulfonamid lainnya, batas deteksi 0.1 sampai 0.3 mg / L-E. Simo-Alfonso F. et al., J. Chromatogr. B Biomed. Appl, 1995., 670, 183-187.

Disposisi dalam Tubuh. Penyerapan adalah variabel setelah pemberian oral. Hal ini cepat diekskresikan dalam urin, sekitar 30% dari bahan yang diekskresikan dalam bentuk derivatif N4-asetil tidak aktif. Sejumlah besar juga dieliminasi dalam tinja. Terapi konsentrasi. Dalam plasma, biasanya di kisaran 15 sampai 40 mg / L. Protein mengikat. Dalam plasma, sekitar 8%. 

Sulfanilamid

Penetapan kadar : Lakukan penetapan menurut cara Nitrimetri menggunakan larutan yang dibuat sebagai berikut : Timbang saksama 500 mg, larutkan dalam campuran 10 ml asam klorida P dan 75 ml air, dinginkan. 1 ml natrium nitrit 0,1 M setara dengan 17,22 mg C6H8N2O2S Identifikasi : a) memenuhi identifikasi a yang tertera pada sulfadiazinum. b) Panaskan lebih kurang 10 mg dalam tabung kering ; terjadi warna biru violet intensif yang dengan pemanasan selanjutnya terjadi bau aniline dan amoniak. c) Larutkan lebih kurang 200 mg dalam 5 ml asam asetat glacial P dengan pemanasan diatas tangas air. Tambahkan 0,5 ml anhidrida asetat P dan 10 ml air panas. Dinginkan, kocok perlahan-lahan untuk membantu penghabluran, saring, cuci hablur dengan air. Dinginkan pada suhu 105o ; suhu lebur hablur lebih kurang 213o

Lapis tipis Chromatography.System TA-Rf 67; sistem TD-Rf 13; sistem TE-Rf 51; sistem TF-Rf 46; sistem TT-Rf 61; sistem TU-Rf 96; sistem TV-Rf 66; sistem TAD- Rf 22; sistem TAE-Rf 83; sistem TAJ-Rf 22; sistem TAK-Rf 05; sistem TAL-Rf 50. (Biru Merkuri klorida-diphenylcarbazone reagen,; kalium permanganate larutan diasamkan, positif; Van Urk reagen, kuning.) Chromatography.System GA-sulfanilamide RI 2185 Gas Bumi; sulfanilamideMe RI 2135; sulfanilamide-Me4 RI 2095; M (asetil-) RI 2690; M (asetil-)-Me RI 2600. Cair Kinerja Tinggi HU-sulfanilamide Chromatography.System k 8,9, k 9,6 N4-acetylsulfanilamide; sistem HY-RI 86. Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-262 nm (A11 = 106a), 269 nm (A11 = 85a); berair alkali-250 nm (A11 = 932b). Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1149, 1603 1316, 1637, 1099, 1294 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 172, 92, 156, 65, 108,, 173 39, 174. 

Hidroklorotiazid

Penetapan kadar : larutan uji timbang dan serbukkan 20 tablet. Sejumlah serbuk yang ditimbang seksama setara dengan 24 mg hidroklortiazida, kocok dengan 75 ml aseton P, encerkan dengan asetop P secukupnya hingga 100,0 ml, biarkan. Pipet dengan 5,0 ml beningan. Biarkan aseton menguap, refluks dengan 10 ml larutan natrium hidroklorida P selama 1 jam. Dinginkan, tambahkan 90 ml air, 20 ml asam klorida P dan air secukupnya hingga 200,0 ml. pada 10,0 ml tambahkan 1 ml larutan natrium nitrit P 0,5 % b/v, campur dan biarkan selama 3 menit. Tambahkan 1 ml larutan asam sulfamat P 1 % b/v

kocok, biarkan selama 3 menit. Tambahkan 2,5 ml larutan nafetilendiamine P 0,2 % b/v dalam asam klorida 0,1 N, campur, biarkan selama 2 menit. Larutan pembanding, Buat menurut cara yang tertera pada larutan uji, menggunakan 5 ml larutan hidrolortiazida PK 0,024 % b/v dalam aseton P, Cara ukur serapan-1 cm larutan uji dan larutan pembanding pada panjang gelombang serapan maksimum lebih kurang 518 nm. Hitung jumlah dalam mg. C7H8ClN3O4S2. Dalam serbuk tablet yang digunakan, dengan rumus :

Lapis tipis Chromatography.System TD-Rf 04; sistem TE-Rf 34; sistem TF-Rf 34; sistem TAD-Rf 11; sistem TAE-Rf 78; sistem TAJ-Rf 09; sistem TAK-Rf 00; TAL sistem Rf 40. (Reagen Merkuri klorida-diphenylcarbazone, positif.) Gas

Chromatography.System

GA-hidroklorotiazida,

tidak

dielusi;

hidroklorotiazida-Me4 RI 2966; seni (-SO2NH)-Me RI 2170; sistem GXhidroklorotiazida-Me4 waktu retensi 9,0 menit; sistem GY-hidroklorotiazidaMe4 waktu retensi 5,0 menit. Cair Kinerja Tinggi Chromatography.System HN-k 0,70; sistem HX-RI 294; sistem HY-RI 255; sistem HZ-waktu retensi 2,2 menit; sistem Hax-waktu retensi

5,1

menit;

sistem

HAY-waktu

retensi

4,0

menit.

Ultraviolet Spectrum.Aqueous asam-272 (A11 = 644a), 318; berair alkali-274 (A11 = 520a), 324 nm. Infra-merah Spectrum.Principal puncak di wavenumbers 1318, 1180 1150, 1168, 1602, 1060 cm-1 (KBr disk). Misa Spectrum.Principal ion pada m / z 269, 205, 221, 297, 271,, 285 62, 124. Hitungan Gas chromatography.In darah atau plasma: batas deteksi 5 mg / L, ECD-E. Redalieu et al., J. Pharm. Sci, 1978., 67, 726-728. Dalam plasma, eritrosit, atau urin: batas deteksi 10 mg / L dalam plasma, ECD dan FID-B. Lindstrom et al., J. Chromatogr, 1975., 114, 459-462. Kromatografi gas-massa spectrometry.In urin: hidroklorotiazida dan lainnya diuretik-D. Carreras et al., J. Chromatogr. A, 1994, 683, 195-202.

Cair kinerja tinggi chromatography.In plasma atau urin: hidroklorotiazida dan chlorothiazide, batas deteksi 10 mg / L dalam plasma dan 2 mg / L dalam urin, deteksi UV-R. H. Barbhaiya et al., J. Pharm. Sci, 1981., 70, 291-295. Dalam plasma-B. S. Kuo et al, Pharm.. Res, 1990., 7, 1257-1261. Dalam plasma atau urin: batas deteksi 10 mg / L dan 200 mg / L masing-J. X. de Vries dan Voss A., Biomed. Chromatogr, 1993., 7, 12-14. Dalam serum: limit deteksi