Jurnal Scientia Vol.2 No.1 Februri 2012

S C  N  I  CI E  I   E N T  N T I A I A V O  OL   . 1 N O  O.  1 , 2 0 1 1 I S  I S S  N  : 2 0  2 0 8  0 8 7  8 7 -  7 - 5  - 5 0  5 0 4  0 4 5  4 5  SN :   N : 2 

ISS IS SN : 2087 -504 5

V o l um u m e 2 , N o m o r 1 , Fe Fe b r u a r i 2 0 1 2

Sci e n t i a, V ol . 1 , N o. 1 , 2 0 1 1 ; h a l am a n 1  –– 5 8 ISSN : 2 0 8 7 - 5 0 4 5 Se ko l a h T i n ggi F ar m a si I n d o n e si a ( ST I F I) Pe r i n t i s Pa d a n g

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBR FEBRUARI UARI 2 01 2

SC I EN TI A J U R N A L F A R M A SI D AN K E SE H A TA N T E  T E R  E R B  I  T  H U N  BI T  I  T  D U  UA   K ALI  S E  ET A  T AH U  N  S E  ET   T I AP  B U  U LAN  F E B R  RU  U    AR I  I  D AN  AG U  US   ST  T    U S  S 

D E W A N R E D A K SI Penanggung enanggung J awab : Pr of . H. Syahr Syahr iar Har Har un, Apt Pemimpin Umum : DR.H.M. DR.H.M. Husn Husnii M ukht ar ,MS, DEA, A pt Redakt ur Pelaksana : Ver awat wat i, M.Far M.Far m, Apt Eka Fit r ianda, ianda, M.Fa M.Farr m, Apt Sekretariat : Af dhil Ar el, S.F S.Fa ar m, Apt Khair Khair ul

Dewan De wan Penyu enyunt ing : Pr of .H. Syahr Syahr iar Har Har un,Apt n,Apt Pr of .DR.H. .DR.H. Amr i B Bakht akht iar ,MS,DESS,Apt Pr of .DR.H. .DR.H. Almahdy, Almahdy, MS, A pt DR.H.M. DR.H.M. Husn Husnii M ukht ar, MS, M S, DEA, Apt Drs. Yu Yuf r i Aldi , MSi, Apt Dr s. B.A. B.A. Mar Mar t inus inus , MSi Hj . Fif Fif i Harmely, Harmely, M.Fa M.Far m ,Apt Farid Far ida a Rahi Rahim m, M.Farm M.Far m, Apt A pt Revi Yent Yent i, M.Si, M.Si , Apt Ver awat wat i, M.Far M.Far m, Apt Ria Af r iant iant i, M.Far M.Far m ,Apt Eka Fit r ianda, ianda, M.Farm, M.Farm, Apt

Penerbit : Sekolah Sekolah Tin T ing ggi Far masi asi I ndon donesia esia (ST ( STII FI ) Perint is Padan Padang g I SSN SSN : 20872087- 5045 5045 Alamat Alamat Red Redaksi/ aksi/ Tat a Usaha Usaha : STI FI Perint erint is J l. Adinegor Adinegor o Km Km. 1 7 Sim Si mp. Kalu al umpang Lu Lubuk buk Buaya Buaya Padang Telp. (0751)482171, Fax. (0751)484522 e- mail : stif padang adang@gm @gmail. com com websit ebsit e : www. st if i- padang adang. ac. ac. id

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBR FEBRUARI UARI 2 01 2

SC I EN TI A J U R N A L F A R M A SI D AN K E SE H A TA N T E  T E R  E R B  I  T  H U N  BI T  I  T  D U  UA   K ALI  S E  ET A  T AH U  N  S E  ET   T I AP  B U  U LAN  F E B R  RU  U    AR I  I  D AN  AG U  US   ST  T    U S  S 

D E W A N R E D A K SI Penanggung enanggung J awab : Pr of . H. Syahr Syahr iar Har Har un, Apt Pemimpin Umum : DR.H.M. DR.H.M. Husn Husnii M ukht ar ,MS, DEA, A pt Redakt ur Pelaksana : Ver awat wat i, M.Far M.Far m, Apt Eka Fit r ianda, ianda, M.Fa M.Farr m, Apt Sekretariat : Af dhil Ar el, S.F S.Fa ar m, Apt Khair Khair ul

Dewan De wan Penyu enyunt ing : Pr of .H. Syahr Syahr iar Har Har un,Apt n,Apt Pr of .DR.H. .DR.H. Amr i B Bakht akht iar ,MS,DESS,Apt Pr of .DR.H. .DR.H. Almahdy, Almahdy, MS, A pt DR.H.M. DR.H.M. Husn Husnii M ukht ar, MS, M S, DEA, Apt Drs. Yu Yuf r i Aldi , MSi, Apt Dr s. B.A. B.A. Mar Mar t inus inus , MSi Hj . Fif Fif i Harmely, Harmely, M.Fa M.Far m ,Apt Farid Far ida a Rahi Rahim m, M.Farm M.Far m, Apt A pt Revi Yent Yent i, M.Si, M.Si , Apt Ver awat wat i, M.Far M.Far m, Apt Ria Af r iant iant i, M.Far M.Far m ,Apt Eka Fit r ianda, ianda, M.Farm, M.Farm, Apt

Penerbit : Sekolah Sekolah Tin T ing ggi Far masi asi I ndon donesia esia (ST ( STII FI ) Perint is Padan Padang g I SSN SSN : 20872087- 5045 5045 Alamat Alamat Red Redaksi/ aksi/ Tat a Usaha Usaha : STI FI Perint erint is J l. Adinegor Adinegor o Km Km. 1 7 Sim Si mp. Kalu al umpang Lu Lubuk buk Buaya Buaya Padang Telp. (0751)482171, Fax. (0751)484522 e- mail : stif padang adang@gm @gmail. com com websit ebsit e : www. st if i- padang adang. ac. ac. id

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBR FEBRUARI UARI 20 1 2

SALAM REDAKSI

Segala Segala puj puj i dan syukur syukur kit ki t a pa panj at kan kehadir at Al lah SWT at as sega segala limpahan limpahan r ahm hmat at dan kar kar uniaNya. uniaNya. Di awal awal t ahu ahun n 2012 2012 i ni penge pengelola lola J ur nal nal Scient ia kembali kembali dap dapat at meng enghadir hadir kan j urnal il miah Scient ia Vol. Vol. 2 No. 1 kehadapa kehadapan n par par a rekan r ekan-r -r ekan ekan sej awat wat di bid ang f armasi armasi dan kesehat kesehat an. Ka Kami b er t er ima kasih kasih kepada kepada rekan r ekan-r -r ekan yang yang t elah ber par par t isipasi unt unt uk mem mempu publi bli kasik kasikan an hasil hasil pene enelili t iannya iannya pada pada j urnal kami. kami. I ndo ndon nesia mem memilil iki ket er gant gant unga ungan n yang yang t inggi inggi akan bahan bahan baku obat obat dan per per alat an kesehat an asal asal impor impor yang yang ber dam dampa pak k pada maha mahall nya har har ga obat dan biaya kesehat an. Sement Sement ar a it u pot pot ensi ensi alam alam I ndo ndones nesia ia yang yang kaya akan akan t um umbuha buhan n ber khasiat khasiat oba obatt belum lagi dim di manf anf aat aat kan secar secar a opt opt imal unt uk mem memecahkan ecahkan per ma masa sall ahan kesehat an ini. Dengan Dengan adan danya ya pasa pasarr bebas, bebas, obat obat t r adisional adisional I ndo ndones nesia ia dap dapat at t er desak desak olah olah obat obat t r adisional adisional dar dar i negara neg ara lain. Oleh kar kar ena it u perl u dit ingkat ingkat kan dukun dukungan gan t er hadap hadap o obat bat t r adisional adisional I ndo ndon nesia, salah salah sat unya unya melalui melalui pembukt pembukt i an khasiat khasiat t um umbuha buhan n obat obat secar secar a ilmiah. Set iap kit a pa par a pen penelit elit i/ akadem kademisi isi dapa dapatt

ber per per an sert a dalam dalam mem ember ber ikan

dukung dukungan an.. Lebih lagi saat saat ini pem pemer er int ah mem memilil iki progr am Saint Saint if ikasi J am amu u, sehingga sehingga sang sangat at t epa epatt r asa asanya bila bi la kit a p pa ar a sej sej awat wat bid ang kesehat kesehat an dapa dapatt ber sam sama-sama -sama mewuj me wuj udkan dk an agar agar obat t r adisiona di sionall mendapa mendapatt kan posisi posisi yang sama sama den denga gan n obat obat - obat kimia kimi a sint et is dalam pelayana pelayanan n kesehat an ma masyar syarakat akat .

Padang, adang, Febr uar uar i 201 20 12 Salam Sehat

a/ n Reda Redaksi ksi Scient ia

ISS ISSN : 20 87 -5 04 5

DAFTAR ISI

PENENTUAN AKTIVITAS AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI BEBERAPA EKSTRAK SAYUR-SAYURAN SEGAR DAN DIKUKUS DENGAN METODE DPPH  Elka Yuslinda, Husni Mukhtar Mukhtar dan Khairunnis Khairunnis ISOLASI KOFEIN DARI DAUN KOPI ( Coffea arabica , L) DENGAN METODA SUBLIMASI  Dira

1-5

6-10

PENGARUH SUPLEMENTASI VITAMIN C T ERHADAP KAPASITAS VITAL PARU PADA PEROKOK Pudia M. Indika dan Arif Fadli Muchlis

11-14

STUDI PREFORMULASI SENYAWA SINTESIS TURUNAN KALKON 3-(3-NITROPHENIL)-1-PHENILPROP-2-EN-1-ON 3-(3-NITROPHENIL)-1-PHEN ILPROP-2-EN-1-ON : KELARUTAN INTRINSIK DAN KONSTANTA KONSTANT A IONISASI Gressy Novita, Kamal Rullah dan Anwar Syahadat 

15-23

PENGARUH PEMBERIAN MINYAK IKAN GELODOK RAKSASA (Periophthalmodon schlosseri ) TERHADAP AKTIVITAS SEKSUAL MENCIT PUTIH JANTAN  Husni Mukhtar, Farida Farida Rahim dan M. Adam Faridh Mufas Mufas

24-28

TOKSISITAS SUB KRONIS EKSTRAK ETANOL DAUN BERINGIN (Ficus benjamina L) TERHADAP FUNGSI GINJAL MENCIT PUTIH BETINA Syilfia Hasti, Gressy Novita dan Gusti Gusti Wahyu Ramadhani Ramadhani

29-35

FORMULASI PASTA GIGI MINYAK CENGKEH(Oleum caryophylli ) DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI TERHADAP Streptococcus mutans Fifi Harmely,Vinny Hosiana dan Rina Reskika

36-40

SKRINING AKTIVITAS ANTIMIKROBA DARI DAUN T UMBUHAN SIDAGURI  Ema Ratna Sari

41-44

odoratum L. UJI TOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN  Eupatorium odoratum TERHADAP LARVA ( Artemia salina Leach) DENGAN METODE  BRINE SHRIMP LETHALITY TEST (BST)  Revi Yenti

45-48

UJI AKTIFITAS HEPATO-PROTEKTIF EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) TERHADAP TOKSISITAS ALKOHOL PADA MENCIT PUTIH JANTAN  Eka Fitrianda, Ria Afrianti Afrianti dan Resta Novie Yunasti Yunasti

49-52

ISS ISSN : 20 87 -50 45

Halaman 1 -52

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBR FEBRUARI UARI 2 01 2

PENENTUAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI BEBERAPA EKSTRAK SAYUR-SAYURAN SEGAR DAN DIKUKUS DENGAN METODE DPPH 1)

2)

Elka Yuslinda , Husni Mukhtar , Khairunnisa 1) Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau Pekanbaru 2) Fakultas Farmasi Universitas Andalas Padang

1)

ABSTRACT

Antioxidant activities of five vegetetables were determined by DPPH method. The vegetables  Ipomoeae aquatic Forsk), singkong ( Manihot  were bayam ( Amaranthus hybridus L.), kangkung ( Ipomoeae utilissima Pohl.), katu (Sauropus androgynus L., Merr.) and kacang panjang ( Vigna unguiculata (L.) Walp.). Leaves of those vegetables were prepared as fresh and steamed samples and extracted by maceration using ethanol, n-hexane and methanol. As result, methanolic extract of steamed  Manihot  utilissima had the highest antioxidant activity (IC 50 = 0,287 mg/ml).  Key words : antioxidant, antioxi dant, DPPH, vegetables vegetable s

PENDAHULUAN

Sayuran hijau seperti daun bayam, daun kangkung, daun singkong, daun katu, dan daun kacang panjang memiliki beragam manfaat bagi kesehatan. Kandungan zat gizi alami dalam sayuran hijau sangat banyak, diantaranya karotenoid yang dapat melawan radikal bebas. Klorofil pada sayuran hijau merupakan pigmen tanaman yang warnanya hijau dan terdapat dalam kloroplas sel tanaman (Smith, 2002). Secara umum sayuran mengandung berbagai macam vitamin, mineral dan pigmen yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan dan dapat menetralkan radikal bebas sebelum menimbulkan kerusakan sel-sel tubuh (Aqil et al, 2006). Proses penuaan dan penyakit degeneratif  seperti kanker, ateroklerosis, stroke, tekanan darah tinggi, katarak serta terganggunya sistem imun tubuh, merupakan beberapa penyakit yang berkaitan dengan aktivitas radikal bebas (Cadenas, et al, 2002 ) Radikal bebas adalah atom atau molekul yang sifatnya tidak stabil. Radikal bebas mempunyai 1 elektron atau lebih yang tanpa pasangan sehingga untuk menjadi stabil cenderung mengambil elektron dari molekul lain yang kemudian menimbulkan senyawa yang tidak normal dan memulai reaksi berantai yang dapat merusak jaringan. Reaksi berantai akan berhenti bila radikal bebas itu diredam. Untuk 

ISSN : 2087-5045

meredam efek negatif dari radikal bebas ini diperlukan senyawa yang disebut antioksidan (Elfita et al, 2006). Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menghambat oksigen reaktif atau nitrogen reaktif (ROS/RNS) dan juga radikal bebas sehingga antioksidan dapat mencegah penyakitpenyakit yang dihubungkan dengan radikal bebas seperti karsinogenesis, kardiovaskuler dan penuaan (Anshory et al, 2006). Berdasarkan hasil penelitian diketahui diketahui bahwa sayuran segar mengandung zat antioksidan yang berfungsi melindungi sel-sel tubuh dari proses oksidasi yang mempercepat proses penuaan dan mencegah adanya radikal bebas yang merusak sel atau program genetik (Smith, 2002). Berdasarkan hal di atas dilakukan pengujian pengujian aktivitas antioksidan dari 5 jenis sayursayuran yaitu daun bayam ( Amaranthus hybridus  Ipomoea aquatica Forsk), L), daun kangkung ( Ipomoea daun singkong ( Manihot utilissima Pohl), daun katu (Sauropus androgynus L. Merr), daun kacang panjang ( Vigna unguiculata (L.) Walp). Sayur-sayuran ini diekstraksi secara maserasi dengan berbagai pelarut yang berbeda kepolarannya dalam keadaan segar dan setelah dikukus. dikukus. Aktivitas antioksidan ditentukan dengan menggunakan metode pengukuran serapan radikal DPPH.

1

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 METODA PENELITIAN Alat dan bahan

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah rotary evaporator (BUCHI ®), ® spektrofotometer UV-Vis (Simadzu ), ultrasonic ® (BRANSON ), timbangan analitik (AND ®), botol gelap, penangas air, dandang, pipet mikro (SGE®), alat-alat gelas, spatel, kertas saring dan corong. Bahan yang digunakan adalah daun bayam ( Amaranthus hybridus L), daun kangkung ( Ipomoea aquatica Forsk), daun singkong ( Manihot utilissima Pohl), daun katu ( Sauropus androgynus L. Merr), dan daun kacang panjang (Vigna unguiculata (L.) Walp yang diambil dari Pasar Dupa Pekan Baru. Bahan penyari adalah etanol 96 %, n-heksan, metanol. Bahan kimia lainnya : DPPH dan vitamin C. Ekstraksi

Sebelum proses ekstraksi dilakukan, sampel diberikan 2 perlakuan yang berbeda yaitu : A. Sampel segar Masing-masing sampel sebanyak 200 g dicuci bersih dengan air mengalir dan dirajang halus. B. Sampel yang dikukus Masing-masing sampel sebanyak 200 g dicuci dengan air mengalir kemudian dikukus selama 3 menit pada suhu 100 oC kemudian dirajang halus. Terhadap kelima jenis tanaman baik dalam keadaan segar dan dikukus diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut yang berbeda yaitu : 1. Ekstrak etanol Sampel dimaserasi dengan etanol 96 % selama 5 hari sambil diaduk. Maserat yang diperoleh disaring dan ampasnya dimaserasi ulang dengan pelarut yang sama sebanyak 2 kali. Filtrat yang diperoleh digabungkan dan dipekatkan dengan rotary evaporator  sehingga diperoleh ekstrak kental etanol 2. Ekstrak n-heksan Sampel dimaserasi dengan n-heksan selama 5 hari sambil diaduk. Maserat yang diperoleh disaring dan ampasnya dimaserasi ulang dengan pelarut yang sama sebanyak 2 kali. Filtrat yang diperoleh digabungkan dan

ISSN : 20 87 -5 04 5

rotary evaporator  dipekatkan dengan sehingga diperoleh ekstrak kental n-heksan yng bersifat lipofil. 3. Ekstrak metanol Ampas dari hasil ekstraksi dengan n-heksan diekstraksi lagi dengan metanol selama 3x5 hari. Kemudian maserat disaring dan filtrat dikentalkan dengan methanol yang bersifat hidrofil. Penentuan aktivitas antioksidan

Aktivitas antioksidan ditentukan dengan metode DPPH. Masing-masing larutan sampel (konsentrasi 0,25, 0,5 dan 1 mg/ml dalam metanol) dipipet 0,2 ml dengan pipet mikro ke dalam vial, kemudian tambahkan 3,8 ml larutan DPPH 50 µM dalam metanol. Campuran larutan ini dihomogenkan dengan bantuan ultrasonik dan serapan diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimum DPPH yaitu 517 nm (Molyneux, 2004). Pengujian dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan untuk masing – masing konsentrasi larutan sampel. Larutan standar yang digunakan adalah Vitamin C dengan konsentrasi 1, 3, 7 µg/ml dan diperlakukan sama seperti sampel. Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh besarnya hambatan serapan radikal DPPH melalui perhitungan persentase inhibisi serapan DPPH dengan menggunakan rumus: % Inhibisi = Absorban kontrol – Absorban sampel x 100% Absorban Kontrol

Selanjutnya IC50 dihitung berdasarkan konsentrasi dan persentase inhibisi menggunakan persamaan regresi linier. HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada penelitian ini dilakukan pengujian aktivitas antioksidan dari beberapa jenis sayursayuran yang segar dan dikukus. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode pengikatan radikal bebas DPPH (2,2-difenil-1pikrilhidrazil). Senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan akan bereaksi dengan DPPH melalui pemberian elektron dari senyawa antioksidan kepada DPPH yang mempunyai elektron sunyi, sehingga elektron tersebut menjadi berpasangan. Reaksi ini menyebabkan perubahan warna larutan DPPH dari ungu

2

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 menjadi kuning. Perubahan warna inilah yang akan diukur serapannya menggunakan spektrofotometer UV-Visible, semakin rendah serapan semakin tinggi daya antioksidan dari larutan (Ozcelik, et al, 2002 ; Simpson , 2006).

beracun alami tidak aktif, menguraikan residu pestisida agar tidak berbahaya bagi tubuh, dan mengubah senyawa komplek menjadi lebih sederhana, sehingga mudah untuk dicerna dan diserap tubuh.

Pengukusan sayuran bertujuan untuk  menguraikan pektin yang terkandung pada dinding sel agar teksturnya menjadi lunak, membunuh kuman penyakit, agar senyawa

Hasil pengujian aktivitas antioksidan diperoleh nilai persentase inhibisi seperti pada tabel I berikut;

Tabel I: Persentase inhibisi ekstrak etanol, heksan dan metanol pada konsentrasi 1 mg/ml terhadap radikal bebas DPPH 50 µM (serapan DPPH 0,528) Persentase Inhibisi (%) Sampel Ekstrak etanol Ekstrak heksan Ekstrak metanol (daun) Segar Dikukus Segar Dikukus Segar Dikukus Bayam 67,80 60,13 47,92 47,35 50,66 57,39 Kangkung 82,20 59,75 45,55 46,31 85,23 71,69 Singkong 63,26 87,97 58,24 44,41 87,88 94,70 Katu 59,19 67,33 48,20 46,31 56,44 57,01 Kacang panjang 53,22 54,73 55,87 50,28 50,19 55,30 Hasil pengujian aktivitas antioksidan lebih lanjut terhadap ekstrak yang memiliki nilai persentase inhibisi ≥ 80% pada konsentrasi 0,25 dan 0,5 mg/ml terdapat pada tabel 2. . Tabel 2. Persentase inhibisi ekstrak kental etanol, metanol pada konsentrasi 0,25 dan 0,5 mg/ml (serapan DPPH 0,546) Persentase inhibisi (%) Ekstrak

Ekstrak Metanol Singkong dikukus Ekstrak Metanol Singkong segar Ekstrak Etanol Singkong dikukus Ekstrak Metanol Kangkung segar Ekstrak Etanol Kangkung segar

ISSN : 2087-5045

Konsentrasi 0,25 mg/ml

Konsentrasi 0,5 mg/ml

42,49

71,43

37,64

60,16

34,43

56,68

33,70

54,95

28,39

47,53

3

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 Setelah dihitung menggunakan persamaan regresi linier diperoleh nilai IC 50 dari masing-masing ekstrak seperti tabel 3 berikut. Tabel 3. Nilai IC50 dari sampel No

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Sampel (daun)

Vitamin C Ekstrak etanol daun kangkung segar Ekstrak metanol daun kangkung segar Ekstrak etanol daun singkong yang dikukus Ekstrak methanol daun singkong segar Ekstrak methanol daun singkong yang dikukus

IC50 ( Inhibition Concentration) adalah konsentrasi ekstrak yang memberikan persen aktivasi antioksidan senilai 50% dibanding kontrol melalui suatu persamaan garis regresi linier. Semakin kecil nilai IC50 , maka senyawa tersebut semakin aktif sebagai antioksidan (Kikuzaki et al, 2002; Anshory, 2006). Dari hasil pengujian didapatkan ekstrak metanol  Manihot  utilissima Pohl (Singkong) yang dikukus memiliki aktivitas antioksidan tertinggi, dengan nilai IC50 0,287 mg/ml. Kandungan rutin dari daun singkong merupakan salah satu senyawa yang mempunyai aktivitas sebagai antioksidan (Zielinska et al, 2010), disebabkan karena kemampuannya menangkap radikal bebas dan oksigen aktif (Hanasaki et al, 1994). Sebagai pembanding digunakan vitamin C karena vitamin ini merupakan antioksidan sekunder alami yang memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat (Cholisoh, 2007), dari hasil pengujian diperoleh IC50 Vitamin C sebesar 4,016 µg/ml. KESIMPULAN

Hasil pengujian aktivitas antioksidan dari beberapa sayur-sayuran yang ada di Pasar Dupa Pekanbaru diperoleh ekstrak metanol daun singkong ( Manihot utilissima Pohl) yang dikukus memiliki aktivitas antioksidan yang pali ng tinggi, dengan IC 50 sebesar 0,287 mg/ml sedangkan standar vitamin C memiliki IC 50 sebesar 4,016 µg/ml. DAFTAR PUSTAKA

Anshory, H., Suparini, dan Setiadi, A., 2006, “Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Buah Rambutan (Nephelium lappaceum L.) terhadap penangkapan

ISSN : 20 87 -5 04 5

IC50

4,016 µg/ml 0,542 mg/ml 0,463 mg/ml 0,443 mg/ml 0,399 mg/ml 0,287 mg/ml

radikal bebas DPPH”,  Majalah Farmasi  Indonesia. 3(1), 9-13. Aqil, F., Ahmad, I. and Mehmood, Z., 2006. Antioxidant and Free Radical Scavenging Properties of Twelve Traditionally Used Indian Medicinal Plants. Turk J Biol. 30:177-183. Cadenas, E. and Packer, L.,2002,  Handbooks of   Antioxidants. Edisi II, Marcel Decker Inc., New York. Cholisoh, Z dan Hanwar, D., 2006 “Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol Daun, Bunga, dan Biji Selasih (Ocimum sanctum) Serta Hubungannya Dengan Karateristik  Kandungan Polifenol”, Pharmacon . 7(1), 16-20. Elfita, Supriyatna., Bahti, H.H., Dachriyanus, 2006, ”Kandungan Kimia Fraksi Aktif  Antioksidan Dari Daun Kandis Gajah griffithii (Garcinia T. Anders)”. Pharmacy. 4(3), 138-143 Hanasaki, Y., Ogawa,S., and Fukui, S., 1994, The Correlation Between Active Oxygen, Scavenging and Antioxidative Effect of  Flavonoid , J. Free Radical Biol Med., 16, 845-850. Kikuzaki H, Hisamoto M, Hirose K, Akiyama K, Toniguchi H., 2002 Antioxidants properties of ferulic acid and its related compounds.  J Agric Food Chem, 50;21- 61 Molyneux, P., 2004, The Use of Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating Antioxidant Activity, J. Sci. Technol , 26 (2), 211-219. Ozcelik, B., Lee, J., Min, D.B., 2002, “Effects of  Light, Oxygen, and pH on the Absorbance

4

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 of 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl”,  Journal of Food Science, 68(2), 487-490. Simpson, J.A. 2006. Antioxidant Properties of  Peanut Plant Leaves and Roots and Contribution of Specific Phenolic Compounds To Antioxidant Capacity. Tesis, Raleigh, North California State University. Smith,Y.E, 2002, Terapi sayuran, Prestasi Pustaka, Jakarta. Zielinska D, Dorota S.W and Henryk Z., 2010, Determination of The Antioxidant Activity of Rutin and Its Contribution To The Antioxidant Capacity of Diversifed Buckwheat Origin Material By Updated Analytical Strategies, Journal Of Food and   Nutrition Sciences, 60 (4), 315-321.

ISSN : 2087-5045

5

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2

ISOLASI KOFEIN DARI DAUN KOPI ( Coffea arabica , L) DENGAN METODA SUBLIMASI Dira STIFI Perintis Padang

ABSTRACT

A research was carried out to is olate caffein from the fresh leaves of coffee plant ( Coffea arabica, L) collected in the area of Lubuk Minturun Padang. The fresh leaves were extracted by water, followed by fractionation with chloroform. The chloroform fraction was then evaporated and the result was purificated by sublimation to obtain pure caffeine. The characteristics of caffeine obtained were determined, the characteristics include: organoleptic, melting point, murexide reaction, thin layer chromatography, ultraviolet spectrum and infrared spectrum. Organoleptic performance of isolated caffeine was slightly yellowish white, bitter, and odorless. The melting point was 223-225 oC, and reacted positively with the mureksid reagent. Chromatogram of isolated caffeine gave the same Rf with the standard caffeine (0,26). Examination by UV spectrophotometric gave the maximum wavelength at 272.6 nm. Infrared spectra of coffeine showed significant peaks at 3100 cm-1 (C – H stretch), 1700 cm-1 (C = O stretch), 1658 cm-1 (C = C stretch), 1550 cm-1 (C = N stretch). Overall, isolated coffeine in this study possed same organoleptics, physics and chemistry characteristics as the standard coffein. Key words : Caffein, sublimation, Coffea arabica, L.

PENDAHULUAN

Kofein merupakan alkaloida turunan Xantin, yaitu 1, 3, 7 – trimetilxantin, bersifat basa lemah dan berkhasiat menstimulasi susunan saraf  pusat, diuretik, stimulasi otot jantung yang telah lama dimanfaatkan orang. Dalam dosis rendah dapat meningkatkan kewaspadaan, menghilangkan rasa kantuk atau kelelahan dan meningkatkan kemampuan psikis. Kofein adalah stimulan paling populer di dunia. Pemakaian dalam bidang farmasi sangat luas biasanya dikombinasi dengan analgetik (Evans, 2000; Claus et al. 1976; Gan, 1995 & Mutschler, 1995). Tanaman kopi pertama kali diolah, ditanam di Ethiopia dan kemudian menyebar melalui perdagangan ke Arab sekitar tahun 800 dan akhirnya ke Eropa sekitar abad ke –13. Kofein yang diekstrak dari tumbuh-tumbuhan digunakan sebagai minuman. Melalui pengolahan biji kopi dengan cara yang baik, akan diperoleh minuman kopi yang mempunyai aroma khas dan rasanya yang nikmat (Burkill, 1966 & Anonim, 2006). Kofein adalah substansi alamiah yang terkandung dalam berbagai bagian tanaman

ISSN : 20 87 -5 04 5

seperti pada daun teh, daun mate, biji kopi, biji coklat, biji kola dan biji guarana. Pada tanaman kopi, bagian yang banyak menghasilkan kofein adalah bijinya. Biji kopi yang disangrai mengandung kofein sekitar 0.7 – 1.7 %. (Stahl, 1985). Di Sumatera Barat air rebusan dari daundaun kopi merupakan minuman tradisional bagi masyarakat. Air rebusan atau air godogan ini dinamakan “kawah”. Kawah sebagai suatu minuman yang dapat menyegarkan badan dan merupakan minuman yang sangat digemari. Dahulunya kawah juga disajikan pada pelancongpelancong yang kelelahan. (Heyne, 1987). Diduga senyawa yang memberikan rasa segar dan nikmat ini adalah kofein, karena mungkin saja kofein juga dijumpai pada daun. Sublimasi merupakan salah satu metode untuk memurnikan senyawa. Banyak zat padat akan langsung menjadi fase uap ketika dipanaskan dan akan terkondensasi kembali menjadi fase padat ketika uap didinginkan. Relatif sedikit senyawa organik yang bisa disublimasi pada tekanan atmosfer (Pasto, 1992; Pavia et al. 1995; Mohrig & Neckers, 1979 & 6

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Gennaro, 1990). Dilihat dari sifat fisikanya, kofein apabila dipanaskan akan dapat menyublim 0 yaitu pada suhu 178 – 180 C dan pada tekanan 1 atm (Evans, 2000; Clarke, 1971; Budavari, 1996 & Meyer, 1973) Berdasarkan hal diatas maka dilakukan penelitian yang bertujuan untuk mengetahui secara pasti ada atau tidaknya kofein di dalam bagian daun tanaman kopi dan mengisolasinya. Isolasi dilakukan dengan metoda ekstraksi dan sublimasi

METODE PENELITIAN Alat dan Bahan Alat

Alat pemanas (Thermolyne), alat sublimasi, kertas saring, timbangan analitik  (Precisa), timbangan teknis (Daema), pipet, gelas ukur, corong, corong pisah, batang pengaduk, beker gelas, chamber, erlenmeyer, alat destilasi, pompa vakum, erlenmeyer vakum, Spektrofotometer Inframerah, Melting Point Apparatus (Fisher-Johns), cawan penguap, termometer, spatel, cover glass, lampu UV 254 nm. Bahan

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun dari tanaman kopi yang diambil di daerah Lubuk Minturun Padang, Aquadest, kalsium karbonat (CaCO3), etanol, plat KLT Silika Gel PF 254, kalium klorat, kloroform p.a , kofein pembanding / standar (PT. Bayer Indonesia), HCl pekat, ammonium hidroksida.

ISSN : 2087-5045

Pengolahan Sampel

Sampel dari daun kopi yang masih segar dikumpulkan kemudian dirajang, timbang sebanyak 1000 gram. Masukkan dalam beker gelas. Tambahkan aquadest 5 liter. Masukkan kalsium karbonat (CaCO3) 250 gram. Panaskan hingga mendidih. Setelah mendidih panaskan selama lebih kurang 30 menit sambil diadukaduk. Biarkan dingin, pisahkan ampas, saring dengan kertas saring. Filtrat yang diperoleh dipekatkan dengan alat destilasi vakum. Filtrat yang telah dipekatkan tadi difraksinasi dengan kloroform sebanyak 5 kali dalam corong pisah. Untuk 50 ml filtrat digunakan 150 ml kloroform (1 kali fraksinasi). Hasil fraksi kloroform diuapkan secara in vacuo dengan rotary evaporator, diuapkan sampai kering sehingga didapatkan serbuk. Serbuk ini dihaluskan dalam lumpang. Serbuk yang didapatkan ditimbang. Pemisahan Kofein secara Sublimasi

Serbuk yang telah halus, dilakukan sublimasi dengan menggunakan alat sublimasi yang terbuat dari erlenmeyer vakum yang diberi pendingin yang dialirkan dengan air mengalir (Gambar 1). Serbuk yang dihasilkan ditimbang. Penentuan Perolehan Kembali Kofein dengan Metoda Sublimasi

Ditimbang kofein standar 150 mg. Lakukan sublimasi dengan alat sublimasi. Hasil sublimasi ditimbang.

7

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2

Gambar 1. Alat sublimasi Analisa Kualitatif Kofein a. Organoleptik  Meliputi warna, rasa, bau dan bentuk  b. Pemeriksaan Jarak Leleh Ambil sedikit serbuk, letakkan diantara dua cover glass dan ditempatkan pada alat Melting Point Apparatus ( Fisher- Johns ) lalu amati suhu melelehnya serbuk dan dibandingkan dengan kofein standar. c. Pemeriksaan Spektrum dengan Spektrofotommeter Ultraviolet. Dibuat larutan kofein hasil sublimasi dengan konsentrasi 1 mg / 100 ml lalu dibuat kurva serapan dan diamati panjang gelombang serapan maksimumnya, dibandingkan dengan panjang gelombang serapan maksimum kofein standar. d. Pemeriksaan Spektrum dengan Spektrofotometer Inframerah Diambil sedikit serbuk kofein hasil sublimasi ditambahkan dengan KBr dalam lumpang, gerus sampai homogen kemudian dibuat pellet yang tipis dengan bantuan alat penekan. Spektrumnya diamati dan dibandingkan dengan kofein standar. e. Reaksi Kimia Dengan pereaksi Murexid, larutkan kurang lebih 5 mg kofein hasil sublimasi dalam 1 ml HCl pekat dalam cawan porselen, tambahkan 50 mg kalium klorat, uapkan di atas tangas uap hingga kering. Balikkan cawan di atas bejana berisi beberapa tetes ammonium hidroksida 6 N hingga berwarna lembayung yang hilang dengan penambahan larutan alkali

ISSN : 20 87 -5 04 5

kuat ( NaOH). Dibandingkan dengan kofein standar.  f. Kromatografi Lapis Tipis Ambil kurang lebih 5 mg serbuk hasil sublimasi dan kofein pembanding. Masingmasingnya dilarutkan dalam kloroform. Totolkan pada plat KLT, masukkan dalam chamber yang telah dijenuhkan dengan fase gerak kloroform : etanol (19 : 1). Kromatogram ini dilihat dibawah lampu ultraviolet pada panjang gelombang 254 nm. HASIL DAN PEMBAHASAN

Isolasi kofein dari daun kopi ini menggunakan metoda sublimasi. Metoda ini dipilih karena pengerjaannya lebih mudah dan lebih murah. Sebelum disublimasi, terlebih dahulu kofein diekstraksi dari daun. Sebagai larutan untuk pengekstraksi digunakan aquadest. Penggunaan aquadest sebagai pelarut memberikan banyak keuntungan yaitu kelarutan kofein yang baik dalam air panas, harga murah dan mudah didapat. Penambahan kalsium karbonat bertujuan untuk mengikat senyawa tanin sehingga membentuk komplek tanat yang mengendap sehingga memudahkan dalam pemisahannya. Selain itu juga aktif melepaskan kofein dari bentuk garamnya dengan asam-asam organik  sehingga lebih mudah terekstraksi. Selain kalsium karbonat dapat juga digunakan CaO ataupun MgO.

8

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Setelah mendidih larutan dipanaskan selama 30 menit, tujuannya agar kofein dapat keluar dengan sempurna dari dinding partikel daun dan terlarut dalam larutan pengekstrak. Filtrat yang dihasilkan dipekatkan, tujuannya supaya memudahkan dalam pengocokan sewaktu fraksinasi dalam corong pisah. Kofein yang berada atau terlarut dalam air difraksinasi dengan kloroform sehingga dapat memisahkan kofein dari senyawa-senyawa lainnya yang tidak larut dalam kloroform. Hasil fraksinasi dari kloroform ini diuapkan dengan rotary evaporator  sehingga akan didapatkan serbuk kering yang mengandung kofein. Untuk  pemurnianya dilakukan sublimasi. Alat sublimasi dibuat dari erlenmeyer vakum yang diberi pendingin yang dialirkan dengan air mengalir yang berfungsi sebagai kondensor. Bila kofein dipanaskan akan berubah menjadi gas dengan adanya pendingin akan terkondensasi sehingga membentuk kristal atau serbuk yang menempel pada permukaan pendingin dan dinding-dinding Erlenmeyer tersebut. Melalui cara sublimasi ini diperoleh kofein sebanyak 1,0831 g yang berasal dari 1,8818 g fraksi kloroform kering atau 1000 g sampel segar daun kopi. Pemeriksaan terhadap kofein hasil sublimasi meliputi organoleptis, fisika dan kimia dan hasilnya sesuai dengan kofein standar. Jarak  lebur kofein hasil sublimasi adalah 223-225 oC. Analisa kofein secara kualitatif digunakan reaksi mureksid. Reaksi ini spesifik untuk alkaloida turunan xantin yang berwarna ungu atau lembayung dengan penambahan uap amonia dan warna hilang dengan penambahan larutan alkali kuat ( NaOH ). Timbulnya warna ini karena adanya pemecahan oksidatif struktur purin. Pemeriksaan ini dilakukan terhadap kofein hasil sublimasi dan standar. Hasil reaksi mureksid terhadap kofein hasil sublimasi adalah positif. Tabel 1. Pemeriksaan kofein hasil sublimasi No 1

2

Pemeriksaan Organoleptis a. Warna b. Rasa c. Bau d. Bentuk Jarak lebur

ISSN : 2087-5045

Hasil

3

Reaksi Mureksid

Positif 

Untuk melihat kemurnian hasil isolasi kofein dapat dilakukan dengan kromatografi lapis tipis pada plat silika gel PF 254 dengan fase gerak kloroform : etanol ( 19 : 1 ), kemudian dibandingkan dengan kofein standar yang hasilnya memberikan harga Rf yang sama yaitu 0.26. Kromatogram ini dilihat di bawah sinar ultraviolet 254 nm.

A B C Gambar 2. Hasil Kromatografi Kofein A = kofein standar + kofein hasil sublimasi, B = kofein hasil sublimasi C = kofein standar Hasil pemeriksaan spektrofotometri ultraviolet kofein hasil sublimasi memberikan panjang gelombang serapan maksimum yaitu 272.6 nm. Spektrum dapat dilihat pada gambar 3.

Gambar 3. Spektrum ultraviolet kofein hasil sublimasi

Putih agak kekuningan Pahit Tidak berbau Serbuk halus 223-225 0C 9

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 Pada penentuan panjang gelombang serapan maksimum kofein dalam HCl 0.1 N dengan spektrofotometer ultraviolet pada panjang gelombang antara 200-300 nm di dapat panjang gelombang serapan maksimum 272.6 nm. Hasil penentuan panjang gelombang serapan maksimun ini tidak sama dengan literatur dimana menurut literatur adalah 270 nm, tetapi jika dibandingkan dengan hasil pengukuran kofein standar, panjang gelombang serapan maksimumnya hampir sama yaitu 272.6 nm. Perbedaan ini terjadi dimungkinkan karena alat dan kondisi pengukuran yang berbeda. Pemeriksaan kualitatif digunakan spektrofotometer inframerah untuk identifikasi. Dengan membandingkan spektrum inframerah kofein hasil sublimasi dengan kofein standar. Hasil spektrumnya sama. Spektrum Inframerah dari kofein menunjukkan puncak-puncak yang penting pada bilangan gelombang 3100 cm -1 (Regang C – H) , 1700 cm -1 (Regang C = O) , 1658 cm-1 ( Regang C = C ) , 1550 cm-1 (Regang C = N). 33.5 32 30 28 3414

26

3112 2955 481

24 973

759

610

1026 1286

22 1359

20 %T

1239 1484

18

1550 745

16 14 12 10 1700 1658

8 6.0 4000.

3600

3200

2800

2400

2000

1800 cm-

1600

1400

1200

1000

800

600

450.0

Gambar 4. Spektrum inframerah kofein hasil sublimasi dalam pellet KBr Hasil penentuan rata-rata perolehan kembali kofein dengan metoda sublimasi adalah 88.2 %. KESIMPULAN

Budavari, S., 1996, The Merck Index, 12th Ed., Merck & Co., Inc, New York. Burkill, I. H., 1966,  A Dictionary of Economic Product of Malay Peninsula, Vol 1, Government of Malaysia and Singapore, Kuala Lumpur. Clarke, E. C. G., 1971,  Isolation and  The  Identification of Drugs, Pharmaceuticals Press, London. Claus, E.P., T.E. Varro, and B.L. Lynn.,1976, th Pharmacognosy , 6 Ed., Published in Great Britain by Henry Kimpton, London. Evans, W. C., 2000, Pharmacognosy , 16th Ed., Saunders Edinburgh London New York  Oxford Philadelphia st Louis Sydney Toronto. Gan, S., 1995, Farmakologi dan Terapi , Edisi 4, Bagian Kedokteran Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Jakarta.  Remington’s Gennaro, A. R., 1990, th Pharmaceutical Science, 18 Ed., Mack  Publishing Company, Easton Pensylvania. Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia , Jilid III, diterjemahkan oleh Badan Litbang Kehutanan, cetakan ke-1, Jakarta. Meyer, L. H., 1973, Food Chemistry, Reynhold Publishing Corporation, New York.  Laboratory Mohrig., Neckers., 1979,  Experiments in Organic Chemistry, Third Edition, D. Van Nostrand Company New York. Mutschler, E., 1995,  Dinamika Obat , Edisi kelima, diterjemahkan oleh Mathilda, B.W, Penerbit ITB Bandung, 1995. Pasto, D., Experiments and Tecniques in Organic Chemistry, Prentice Hall, New Jersey. Pavia., Lampman., Kriz., Engel., 1995,  Introduction to Organic Laboratory Tecniques a Microscale Approach , Second Edition, Saunders Collage Publish. Stahl, E., 1985,  Analisis Obat Secara Kromatografi dan Spektroskopi, Penerbit ITB, Bandung.

Dari penelitian ini telah berhasil diisolasi dan didapatkan kofein murni dari daun kopi (Coffea arabica, L) dengan menggunakan metoda sublimasi.

DAFTAR PUSTAKA

ISSN : 20 87 -5 04 5

10

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2

PENGARUH SUPLEMENTASI VITAMIN C TERHADAP KAPASITAS VITAL PARU PADA PEROKOK Pudia M. Indika, Arif Fadli Muchlis Program Studi Ilmu Keolahragaan Fakultas Ilmu Keolahragaan Universitas Negeri Padang

 ABSTRACT  This research was carried out to investigate the influent of vitamin C supplement to vital capacity of lung at smoker. The method used was case–control study with pre test and post test design. Smoker  sample were divided in to two group: control and treatment which was given vitamin C for 30 days. The result showed that vital capacity of smoker which was given vitamin C for 30 days was significantly lower  than control (p +2,101 dan signifikansi 0,018 < 0,05. Dari analisis  Independent samples t-test  terlihat ada perbedaan antara kapasitas vital

ISSN : 2087-5045

paru kelompok kontrol dan kapasitas vital paru kelompok perlakuan. Berdasarkan tabel V responden yang mendapat perlakuan suplementasi vitamin C 250 mg dilakukan analisis menggunakan Paired  Samples T Tes dengan tingkat signifikansi 5% atau 0,05, dengan t hitung adalah -3,254, t tabel adalah 20-1 =19 sebesar 2,093. Ho ditolak  dengan -3,254 < -2,093 dan signifikansi 0,010 < 0,05. Dari uji statistik terlihat bahwa ada perbedaan antara rata–rata kapasitas vital paru sebelum perlakuan dengan kapasitas vital paru sesudah perlakuan. Pada tabel Paired Samples T  Tes terlihat rata–rata (mean) sebelum perlakuan 3090 dan untuk sesudah perlakuan adalah 3290 artinya rata–rata sebelum perlakuan lebih rendah dari pada rata – rata sesudah perlakuan. Antioksidan adalah substansi yang diperlukan tubuh untuk menetralisir radikal bebas dan mencegah kerusakan yang ditimbulkan oleh radikal bebas terhadap sel normal, protein, dan lemak dengan cara menyumbangkan elektron hidrogen kepada radikal bebas untuk menjadi radikal bebas stabil yang sifatnya tidak merusak. Antioksidan yang digunakan dalam penelitian ini adalah vitamin C. Kelompok yang diberi vitamin C menunjukkan adanya peningkatan kapasitas vital paru. Hal ini sesuai dengan Pavlovic et al (2005) yang menyatakan bahwa vitamin C mempunyai kemampuan mengubah vitamin C yang bersifat reaktif menjadi vitamin C yang stabil dan mampu meregenerasi vitamin E yang reaktif menjadi vitamin E yang stabil kembali (Christyaningsih, 2003). Untuk melawan bahaya radikal bebas, tubuh telah mempersiapkan penangkal yaitu antioksidan endogen. Antioksidan endogen ini akan menetralisir radikal bebas yang berlebihan sehingga tidak merusak tubuh. Antioksidan endogen misalnya Superoksida Dismutase (SOD), Gluthation Peroksidase dan Katalase. Sedangkan antioksidan yang berasal dari luar melalui makanan atau melalui suplemen dikenal sebagai antioksidan eksogen seperti carotenoid, curcumin, flavonoids, garlic, gingko biloba, glutathione, green t ea, selenium, seng, vitamin A, vitamin C dan vitamin E (Gordon, 1990).

13

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 KESIMPULAN

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat diambil kesimpulan bahwa pemberian suplementasi vitamin C 250 mg selama 30 hari dapat meningkatkan kapasitas vital paru pada perokok. DAFTAR PUSTAKA

Adnil, B., 2000. Sekilas Rokok dan Merokok . Diakses dari http://  www.waspada.co.id /2000/7/7 Amalia, 2002,  Rokok dan Kesehatan Rongga  Mulut , Waspada Online Hiperlink. Diakses dari http:// www.waspada.co.id /2002/3/15 Christyaningsih, J. 2003. Pengaruh Suplementasi Vitamin E dan C Terhadap Aktivitas Enzim Super Oxide Dismutase (SOD) dalam  Eritrosit Tikus yang Terpapar Asap Rokok  Malang Kretek .  JIPTU . http://adln.lib.unair.ac.id  Corwin, E. J., 2001, Patofisiologi, Terjemahan Brahm Untuk Pendidikan, Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Gordon MH, 1990. The Mechanism of   Antioxidants action in vitro. Food Antioxidants. Elsivier Applied Science, London Pavlovic V, C., S, Rankovic G and Stoiljkovic N. 2005. Antioxidant and Pro-oxidant Effect of Ascocbic Acid. Acta Medica  Medianae. 44 (1): 65-69. Putranto B. E., 1997, Patologi Saluran Nafas, Semarang: Badan Penerbit UNDIP Tuminah S. 2000.  Radikal Bebas dan  Antioksidan-kaitannya dengan nutrisi dan  penyakit kronis. Cermin dunia Kedokteran Vol.128 hal 49-51. Jakarta.

ISSN : 20 87 -5 04 5

14

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2

STUDI PREFORMULASI SENYAWA SINTESIS TURUNAN KALKON 3-(3-NITROPHENIL)-1-PHENILPROP-2-EN-1-ON : KELARUTAN INTRINSIK DAN KONSTANTA IONISASI Gressy Novita, Kamal Rullah, Anwar Syahadat Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau ABSTRACT

The preformulation study of 3-(3-nitrophenil)-1-phenilprop-2-en-1-on compound has been carried out. The study includes determination of ionization constant and intrinsic solubilit y. Determinati on of  intrinsic solubility was done using various intrinsic phase comparison of drugs and solvents using ionization constants potensiometry method. The results showed that the intrinsic solubility of the compound was 0.001 μg/mL in NaOH, whereas the ionization constant (pKa) was 6.25, these value showed that the compound was a weak acid.  Key words : ionization constant, intrinsic solubility, preformulation. PENDAHULUAN

Kalkon merupakan senyawa intermediet untuk sintesis senyawa flavonoid lain seperti flavanon, flavon, flavanol dan lain-lain yang dikenal mempunyai aktifitas biologi menarik  antara lain antibakteri, antifungi, antivirus, antioksidan, antiinflamasi, antidiabetes, antimutagenik, dan antialergi (Vender et al, 1993). Beberapa metode telah dikembangkan untuk mensintesis turunan kalkon. Metode yang paling umum adalah dengan katalis basa reaksi Claisen-Schmidt, pada kondensasi keton dan aldehid menggunakan larutan NaOH, KOH dan  juga reaksi kondensasi dalam kloroform menggunakan larutan piperidine serta menggunakan katalis BF3 pada suhu ruang. Salah satu derivat kalkon yang telah dihasilkan dengan metode kondensasi ClaisenSchmidt menggunakan KOH sebagai katalis yaitu 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dengan rendemen 82%. Derivat kalkon ini aktif sebagai antidiabetes serta dari uji toksisitas menunjukkan senyawa ini tidak toksik (Rahmi, 2009). Berdasarkan hal tersebut senyawa ini dapat dijadikan sebagai kandidat obat. Preformulasi dimulai bila suatu kandidat obat menunjukkan jaminan farmakologis yang cukup dalam model-model hewan untuk  menjamin penilaian pada manusia. Pengkajian ini harus berpusat pada sifat fisika-kimia dari senyawa baru yang dapat mempengaruhi

ISSN : 2087-5045

penampilan obat dan perkembangan suatu bentuk  sediaan yang menunjukkan efikasi (Lachman et  al, 1989). Menurut Wells (1988) ada dua sifat dasar zat yang perlu sekali diketahui dalam studi preformulasi yaitu berupa data kelarutan intrinsik  dan konstanta ionisasinya. Data ini dengan segera menunjukkan kebutuhan dan kemungkinan membuat garam yang lebih larut dari obat untuk  mengeliminir kelarutan yang berhubungan dengan masalah bioavaibilitas yang jelek, terutama bentuk sediaan padat. Kelarutan intrinsik merupakan kelarutan dari suatu senyawa dalam bentuk molekulnya (tidak terion) di dalam larutan. Dalam melihat kelarutan intrinsik suatu obat pertama dilihat kelarutan obat di dalam 0,1 N HCl, 0,1 N NaOH dan air (Wells, 1989; Lachman et al, 1989). Peningkatan kelarutan obat pada asam menyatakan obat tersebut basa lemah dan peningkatan kelarutan obat pada basa menyatakan obat tersebut asam lemah. Derajat terionnya suatu senyawa asam lemah ditentukan oleh suatu parameter yang disebut konstanta ionisasi yang dikenal dengan pKa. Nilai  pKa merupakan suatu cara yang paling mudah untuk membandingkan kekuatan keasaman atau kebasaan senyawa-senyawa obat. Dalam formulasi sediaan obat berdasarkan nilai

15

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2  pKanya, pH larutan dapat diatur untuk menjamin kelarutan maksimum senyawa obat dalam air dengan tetap mempertimbangkan kestabilan optimum dari senyawa obat.

Penelitian ini dilakukan untuk menetapkan kelarutan intrinsik dan konstanta ionisasi dari senyawa sintesis turunan kalkon 3-(3-nitrofenil)1-fenilprop-2-en-1-on. Penentuan harga  pKa secara potensiometri dilakukan dimana protolit dititrasi dengan asam atau basa yang sesuai, kemudian hubungan pH dengan volume pentiter yang ditambahkan ditentukan secara potensiometri dengan bantuan elektroda gelas dan elektroda pembanding. Tetapan protolisisnya ditentukan dari data pH dan volume tersebut. Untuk perhitungan  pKa dapat dilakukan dengan cara paro-penetralan. Cara ini didasarkan pada persamaan Henderson-Haselbach. METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan adalah: Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu ), timbangan digital, pH meter, lumpang, alu, sudip, spatel, botol semprot, corong, pipet tetes, pipet mikro, pipet ukur, erlemeyer, gelas ukur, labu ukur, shaker , kaca arloji, pipet gondok, vial, kertas perkamen, kertas saring milipore (Whatman ®), alumunium foil dan corong Buchner . Bahan-bahan yang digunakan adalah: 3nitrobenzaldehid, asetofenon, etil asetat, nhexana, asam oksalat, natrium hidroksida, kalium hidroksida, asam klorida P, etanol absolut, asam asetat, fenolftalein dan aquadest. PROSEDUR KERJA Sintesis turunan kalkon

Turunan benzaldehida yaitu 3nitrobenzaldehid (1,5112 gram) dan asetofenon (1,2015 gram), natrium hidroksida (0,784 gram) digerus cepat sampai terbentuk larutan. Larutan yang terbentuk disaring dalam corong  Buchner  dan dicuci dengan air dingin, kemudian dicuci dengan n-hexana, dikeringkan hingga didapatkan serbuk kuning. Selanjutnya produk yang diperoleh dilakukan beberapa pengujian diantaranya jumlah rendemen, spektrum IR, kemurniannya dengan KLT.

ISSN : 20 87 -5 04 5

Uji kelarutan intrinsik ( Wells, 1989) Penentuan kelarutan intrinsik 3-(3nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dengan metoda  perbandingan fasa obat- pelarut.

Dibuat larutan 0,1 N HCL; 0,1 N NaOH dan air. Masing-masing larutan diambil 90 mL, masukkan ke dalam labu ukur 100 mL. Ditambahkan sedikit demi sedikit 3-(3nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dengan jumlah tertentu (40 mg, 50 mg, 60 mg) ke dalam erlemeyer 100 ml tersebut sambil diaduk sampai terlihat bagian 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en1-on yang tidak terlarut (sampai jenuh). Kocok  dengan Shaker  selama 24 jam untuk  mendapatkan kesetimbangan. Kemudian dicukupkan volume larutan sampai 100 mL dengan masing-masing pelarut diatas. Selanjutnya larutan disaring dan diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on. Penentuan konstanta ionisasi (pKa) 3-(3nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on secara potensiometri. (Albert and Searjeant, 1971) Uji coba metoda dengan menentukan pKa asam asetat 0,01 N. Pengukuran dengan potensiometri. Alat potensiometer dipasang dan elektroda dicelupkan ke dalam larutan 3-(3-nitrofenil)-1fenilprop-2-en-1-on 0,01 N. pH meter dikalibrasi dengan larutan dapar standar pH 7 dan pH 10. Shaker  diletakkan sesuai skema, hidupkan dan atur kecepatannya pada posisi sedang. Biarkan sampai didapatkan pembacaan pH yang stabil. Penunjuk nilai pH dicatat pada posisi awal. Penambahan pentiter KOH 0,01 N dilakukan tiap 0,1 mL, biarkan selama interval tertentu (20 atau 30 detik), lalu baca nilai pH larutan. Perbedaan pH yang terjadi pada tiap langkah percobaan ini dicatat. Jika beda potensial mencapai nilai 20 unit, maka tingkat penambahan pentiter KOH 0,01 N diturunkan menjadi tiap 0,02 mL. Pada suatu keadaan akan didapat perbedaan nilai yang sangat mencolok, lanjutkan titrasi untuk 5 kali penambahan lagi sebelum titrasi dihentikan. Data titrasi diolah dengan membuat kurva titrasi

16

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 turunan pertama antara data pH vs volume pentiter. Percobaan dilakukan sebanyak tiga kali. HASIL DAN PEMBAHASAN Sintesis senyawa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2en-1-on

Senyawa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en1-on disintesa dengan metoda green chemistry. Larutan yang terbentuk disaring dalam corong  Buchner  dan dicuci dengan air dingin, kemudian dicuci dengan n-hexana, dikeringkan hingga didapatkan kristal berwarna kuning muda dengan berat sebanyak 2,1453 g. Rendemen yang dihasilkan sebesar 84,7 %. O

O

O

CH3

NaOH

H

gerus

NO2

NO2

Gambar 2. Reaksi sintesis 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on (Agrawal, 1989) Uji KLT dengan dua sistem pelarut menunjukkan satu noda dengan eluen; heksan : etil asetat (4:1) hal ini menunjukkan bahwa produk yang dihasilkan relatif murni. Spektrum IR menunjukan adanya serapan pada bilangan gelombang 3070 cm-1 yang merupakan vibrasi C-1 H aromatik, 1662 cm menunjukkan adanya -1 gugus C=O, 1528 cm menunjukkan adanya ikatan C=C aromatik serta C=N, dan 1352 cm-1 menunjukkan adanya ikatan C-H.

Selanjutnya produk yang telah dihasilkan dibandingkan dengan 3-(3-nitrofenil)-1fenilprop-2-en-1-on yang diperoleh dari hasil sintesa sebelumnya. Perbandingan dengan KLT menunjukkan satu noda dengan nilai Rf yang sama yaitu 0,48 begitu juga dengan Spektrum IR yang didapat tidak memperlihatkan perbedaan yang berarti.

Gambar 3. Spektrum IR Uji Kelarutan Intrinsik 3-(3-nitrofenil)-1 fenilprop-2-en-1-on Pada penentuan panjang gelombang serapan maksimum 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop2-en-1-on dalam etanol absolut dengan spektrofotometer UV didapat 268,8 nm dengan

ISSN : 2087-5045

serapan 0,733. Persamaan regresi yang didapatkan dari kurva kalibrasi adalah y = 90,05x-0,013 dan nilai koefisien korelasi adalah 0,998.

17

SCIENTI A VO L. 2 N O. 1 , FEBRUARI 2 0 12 Pemeriksaan kelarutan yang dilakukan disini menggunakan metode perbandingan fasa obat (Wells, 1988). Dengan metoda ini, zat ditambahkan dalam jumlah perbandingan yang berbeda pada volume pelarut yang sama. Dari persamaan yang diperoleh, diekstrapolasi ke garis

ordinat sehingga dapat diperoleh nilai kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam keadaan murni. Pemeriksaan menggunakan tiga  jenis pelarut yaitu air, HCL 0,1 N dan NaOH 0,1N.

Tabel 1. Kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam HCl 0,1 N Faktor No Serapan Konsentrasi (μg/mL) Pengenceran 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 40 mg 1 0,249 1 0,0029 2 0,258 1 0,0030 3 0,256 1 0,0030 Rata-rata 0,254 1 0,0030 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 2,4 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 50 mg 1 0,324 1 0,0037 2 0,325 1 0,0038 3 0,326 1 0,0038 Rata-rata 0,325 1 0,0038 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 1,9 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 60 mg 1 0,330 1 0,0038 2 0,320 1 0,0037 3 0,327 1 0,0038 Rata-rata 0,326 1 0,0038 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 1,9 %

Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2en-1-on dalam HCl 0,1 N 0.005 0.004    n    a    )     t     L    u    r    m    a    /     l    g    e      μ     K    (

0.003 y = 0.04x + 0.001 R² = 0.75

0.002 0.001 0 0

0.01

0.02

0 .0 3

0.04

0 .0 5

0.06

0.0 7

Rasio fasa obat: pelaru t Gambar 4. Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam HCl 0,1 N

ISSN : 208 7-50 45

18

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Tabel 2. Kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam NaOH 0,1 N Faktor No Serapan Konsentrasi (μg/mL) Pengenceran 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 40 mg 1 0,674 1 0,0076 2 0,672 1 0,0076 3 0,679 1 0,0076 Rata-rata 0,675 1 0,0076 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 0,93 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 50 mg 1 0,734 1 0,0083 2 0,736 1 0,0082 3 0,730 1 0,0083 Rata-rata 0,730 1 0,0083 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 0,85 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 60 mg 1 0,918 1 0,0103 2 0,925 1 0,0104 3 0,932 1 0,0105 Rata-rata 0,925 1 0,0104 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 0,68 %

Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2en-1-ondalam NaOH 0, 1 N 0.012 0.01    n    a    )     t     L    u    r    m    a    /     l    g    e      μ     K    (

0.008 0.006 0.004

y = 0.14x + 0.001 R² = 0.923

0.002 0 0

0 .0 1 0 .0 2 0 .0 3 0 .0 4 0.0 5 0 .0 6 0.0 7

Rasio fasa obat: pelaru t Gambar 5. Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam NaOH 0,1 N

ISSN : 2087-5045

19

SCIENTI A VO L. 2 N O. 1 , FEBRUARI 2 0 12 Tabel 3. Kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam Air Faktor Konsentrasi No Serapan Pengenceran (μg/mL) 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 40 mg 1 0,235 1 0,0028 2 0,247 1 0,0029 3 0,248 1 0,0029 Rata-rata 0,243 1 0,0029 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 2,4 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 50 mg 1 0,251 1 0,0029 2 0,253 1 0,0030 3 0,254 1 0,0030 Rata-rata 0,253 1 0,0030 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 2,4 % 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 60 mg 1 0,330 1 0,0038 2 0,330 1 0,0038 3 0,340 1 0,0039 Rata-rata 0,333 1 0,0038 Standar Deviasi (SD) 0,000071 Koefisien Variasi (KV) 1,87 %

Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dal am ai r

   n    a    )     t     L    u    r    m    a    /     l    g    e      μ     K    (

0.004 0.0035 0.003 0.0025 0.002 0.0015 0.001 0.0005 0

y = 0.045x + 0.001 R² = 0.832

0

0.01

0.02

0.03

0.04

0 .0 5

0.06

0.07

Rasio fasa obat : pelaru t Gambar 6. Kurva kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on dalam Air Kelarutan 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2en-1-on dengan pelarut air adalah 0,001 μg/mL (y = 0,045x + 0,001; r 2 = 0,832); dengan HCl 0,1  N adalah 0,001 μg/mL (y = 0,04x + 0,001; r 2 = 0,75) dan dengan NaOH adalah 0,001 μg/mL (y = 0,14x + 0,001; r 2 = 0,923). Dari grafik terlihat kelarutan dari 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1on sangat kecil yaitu 0,001 μg/mL di dalam ketiga larutan namun nilai regresi (r2) NaOH

ISSN : 208 7-50 45

lebih besar yaitu 0,923 dibandingkan dalam HCl (0,832) dan dalam Air (0,75). Dapat dikatakan bahwa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on adalah senyawa asam lemah karena kelarutannya pada pH basa (NaOH) lebih besar dibandingkan pada pH asam (HCl). Sedangkan kelarutannya pada pH netral (air), merupakan kelarutan

20

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Selanjutnya untuk penentuan  pKa asam asetat digunakan cara paro-penetralan. Cara ini didasarkan pada persamaan HendersonHaselbach. Nilai  pKa asam asetat yang diperoleh adalah 4,2. Hal ini menunjukkan bahwa alat yang cukup akurat karena nilai kisaran pH asam asetat adalah 3,76 sampai 5,76. Selanjutnya hasil uji penentuan titik akhir titrasi 3-(3-nitrofenil)-1fenilprop-2-en-1-on secara differensial yaitu 2,4 mL dan nilai  pKa 3-(3-nitrofen il)-1-fenilprop-2en-1-on yang diperoleh adalah 6,25.

intrinsik 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on yang sebagian besar berada dalam bentuk  molekulnya (tidak terion). Penentuan konstanta ionisasi (pKa) 3-(3nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on secara potensiometri.

Pada uji coba metode menggunakan asam asetat 0,01 N diperoleh hasil titik akhir titrasi asam asetat secara diferensial yaitu 0,4 mL.

Tabel 5. Penentuan titik akhir titrasi 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop -2-en-1-on dengan metoda diferensial

ISSN : 2087-5045

V

pH

0

4.51

0,1

∆V

∆pH

∆pH/∆V

4.55

0,1

0,04

0.40

0,2

4.60

0,1

0,05

0.50

0,3

4.70

0,1

0,1

1.00

0,4

4.84

0,1

0,137

1.37

0,5

5.00

0,1

0,157

1.57

0,6

5.18

0,1

0,177

1.77

0,7

5.38

0,1

0,2

2.10

0,8

5.62

0,1

0,24

2.40

0,9

5.81

0,1

0,19

1.90

1,0

5.97

0,1

0,163

1.63

1,1

6.11

0,1

0,14

1.40

1,2

6.23

0,1

0,12

1.20

1,3

6.33

0,1

0,103

1.03

1,4

6.41

0,1

0,077

0.77

1,5

6.46

0,1

0,047

0.47

1,6

6.49

0,1

0,03

0.30

1,7

6.51

0,1

0,02

0.20

1,8

6.52

0,1

0,01

0.10

1,9

6.52

0,1

0,003

0.03

2,0

6.52

0,1

0.00

0.00

21

SCIENTI A VO L. 2 N O. 1 , FEBRUARI 2 0 12

kurva Diferensial 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 0,01 N Ve

2.75 2.50 2.25 2.00 1.75 1.50 1.25 1.00 0.75 0.50 0.25 0.00

      V       ∆        /       H      p       ∆

0

0.2

0.4

0 .6

0.8

1

1 .2

1.4

1.6

1.8

2

2 .2

Volume Pentit er (m l) Gambar 9. Kurva diferensial 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on

kurva p K a 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on 0,01 N

    H    p

6.757 6 .5 6.25 6 5.75 5 .5 5.25 4.755 4 .5 4.25 4 3.75 3 .5 3.25 2.753 2 .5 2.25 2 1.75 1 .5 1.25 1 0.75 0 .5 0.250 0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1 .4

1.6

1.8

2

2.2

Volum e Pent iter (m l) Gambar 10. Kurva  pKa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on

KESIMPULAN

1.

2.

Senyawa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1on bersifat asam lemah, ditunjukkan dengan nilai regresi (r2) kurva kelarutan pada pelarut basa (NaOH) lebih besar dibandingkan pada pelarut HCl dan air. Senyawa 3-(3-nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1on lebih mudah terion pada suasana basa karena mempunyai nilai pKa 6,25.

ISSN : 208 7-50 45

 \  Saran Disarankan pada peneliti selanjutnya untuk  memperbaiki sifat fisikokimia senyawa 3-(3nitrofenil)-1-fenilprop-2-en-1-on tersebut dengan

22

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 cara menaikkan kelarutan serta menjaga kestabilan pH agar dapat diformulasi dan lebih berguna dalam pengobatan. DAFTAR PUSTAKA

Albert, A. and E. P. Serjeant. 1971. The  Determination of Ionization Constant ,  A  Laboratory manual. Second edition. Chapman and Hall Ltd, London. 115 p. Agrawal, P.K. 1989. Carbon-13 NMR of  Flavonoids. Elsevier Science Publishing Company Inc : New York. Lachman, L., Lieberman, H. A, dan Kanig, J. L., 1989 , Teori dan Praktek Farmasi Industri, Edisi ketiga, Jilid 1, diterjemahkan oleh Siti Suyatmi, Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press), hal. 371. Rahmi, D., 2009, Sintesis dan Uji Aktivitas Skripsi, Antidiabetes 3-nitrocalkon, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Rateb, N. M., dan Zohdi, H. F., 2009, “AtomEfficient, Solvent-Free, Green Synthesis of  Chalcones by Grinding”,  Jurnal Synthetic Communications, 39: 2789-2794. Rivai, H., 2006,  Asas Pemeriksaan Kimia, Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press), Jakarta, hal. 388-394. Vender, B., Haemers, A.,Vlieunek, A. J., 1993,  In bioactive natural products; detection and structural determination, Ed.Collegate, S.M and Molyneux. CRC  Press. 17, 186. 343-355. Wells, J. I., 1988, Pharmaceutical Preformulation, The Physicochemical Properties of Drug Substance , Ellis Horwood Limited, New York. p. 21-32.

ISSN : 2087-5045

23

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2

PENGARUH PEMBERIAN MINYAK IKAN GELODOK RAKSASA ( Periophthalmodon schlosseri) TERHADAP AKTIVITAS SEKSUAL MENCIT PUTIH JANTAN Husni Mukhtar1), Farida Rahim2), M. Adam Faridh Mufas 2) 1) Fakultas Farmasi Universitas Andalas Padang 2) STIFI Perintis Padang ABSTRACT

Research about the effect of giant mudskipper ( Periophthalmodon schlosseri ) oil to sexual activity of the male white mice has been done. Mices were allocated into 4 groups: group I was the control animals without administration of test substances, groups II, III and IV were given various doses of giant mudskippers oil: 0.025; 0.05; and 0.1 ml/20g mice.The oil was given per-oral at night, on 1st , 4th , and 7th day. Observations was done after 30 minutes of administration for 1 hour. The parameters observed were the activity of male mice getting close to female mice ( moving), circling around the female mice or investigation arogenital of female mice (crawling under ), riding the female mice (mounting) and sexual contact (coitus). Results were calculated based on scores that have been determined by Sexual Activity Index (IAS). The results showed that administration of giant mudskipper oil could increase sexual activity of male mice. All three doses showed significant difference effect on increasing sexual activity (p< 0.05).  Key words : fish oil, Periophtalmodon schlosseri, sexual activity, giant mudskipper 

PENDAHULUAN

Ikan memiliki kandungan unsur-unsur penting yang berperan sangat menonjol bagi kesehatan dan sangat jarang terdapat pada bahan makanan lain, yaitu vitamin A dan D serta unsur iodium. Lemak ikan sebagian besar terdiri dari asam lemak tak jenuh (Suprapti, 2008). Asamasam lemak membentuk asetil ko.A yang kemudian membentuk kolesterol. Kolesterol adalah prekursor hormon kelamin yang menunjang sistem reproduksi manusia. Asetil ko.A dengan adanya enzim Mg2+ ATP-ase akan membentuk asetilkolin, yang akan menimbulkan efek pada otot polos (Guyton, 1990; Katzung, 1990). Pada pemakaian yang berlebihan dari asam-asam lemak dapat menyebabkan penyakit seperti kanker, kerusakan hati dan menurunkan daya pertahanan tubuh, jika digunakan sesuai dengan dosis terapi akan memberikan efek positif  (Ubaidillah M, 2004).

Sebagian masyarakat melayu Riau Indonesia dan Malaysia, serta masyarakat Cina, Korea dan Jepang mengkonsumsi ikan gelodok  raksasa (Periophthalmodon schlosseri ) sebagai

ISSN : 20 87 -5 04 5

makanan kesehatan. Mereka percaya ikan gelodok raksasa dapat meningkatkan gairah seksual, melancarkan peredaran darah pada organ genital pria dan wanita, sehingga secara tidak  langsung dapat mengobati problem impotensi pada pria. Impotensi (disfungsi ereksi) adalah salah satu penyakit yang banyak diderita terutama oleh kaum laki-laki, dimana tidak  adanya kemampuan untuk melakukan hubungan seksual yang memuaskan (Arsyad, 1997). Menurut Yatim (1990), sekitar 10–15% pria yang menikah mengalami impotensi, dan sekitar 20– 30% mengalami ejakulasi dini. Berdasarkan dari penjelasan di atas, maka dilakukan penelitian untuk mengetahui pengaruh pemberian minyak ikan Gelodok Raksasa (Periophthalmodon schlosseri) terhadap aktivitas seksual mencit putih jantan. Minyak ikan diberikan secara oral kepada mencit putih jantan dan kemudian aktivitas seksualnya diukur melalui frekuensi munculnya kelakuan seksual setelah mencit tersebut diperkenalkan (dirangsang) dengan mencit putih betina estrus dalam ruang pengamatan. Kelakuan seksual itu antara lain mendekati mencit putih betina 24

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 (moving), berputar disekitar mencit putih betina atau menyelidiki daerah arogenitalianya (crawling under ), menunggangi mencit putih betina (mounting), dan melakukan kontak seksual (coitus) (Mayerson, 1981).

minyak yang bersih. Minyak yang diperoleh disimpan dalam wadah yang tertutup rapat serta terhindar dari kontaminasi langsung dengan sinar matahari dan udara (Rasyid, 2001). Parameter dan Uji Aktivitas Seksual

METODE PENELITIAN Alat dan Bahan

Alat yang digunakan adalah jarum oral, vial, spatel, gelas ukur, beaker glass, timbangan analitik, timbangan hewan, kandang mencit, panci stainless steel, pisau , penangas air, thermometer raksa, corong pisah, stamfer dan mortir, botol semprot, pipet tetes, kertas perkamen, kertas saring, erlenmeyer.

a. Parameter peningkatan (Vogel, 2002).

aktivitas

seksual

1. Mendekati mencit betina (moving) 2. Berputar disekitar mencit betina atau menyelidiki daerah arogenitalianya (crawling under ) 3. Menunggangi betina (mounting) 4. Melakukan kontak seksual ( coitus) b. Uji aktivitas seksual

Bahan yang digunakan antara lain Ikan gelodok raksasa (Periophthalmodon schlosseri ), gom arab, NaCl, bentonit dan aquadest. Hewan percobaan adalah Mencit putih ( Mus musculus)  jantan 20 ekor dan mencit putih ( Mus musculus) betina sebanyak 20 ekor. Ekstraksi Minyak Ikan Gelodok Raksasa

Bagian badan ikan gelodok raksasa yang telah dipotong-potong (1x1x1) cm dimasukkan ke dalam panci stainless stell. Kemudian ditambahkan aquadest sebanyak 10% dari berat ikan. Ikan direbus sampai mendidih, kemudian didiamkan selama 20 menit (sambil diaduk  perlahan-lahan). Rebusan ikan disaring untuk  memisahkan antara minyak kasar dengan padatan. Minyak kasar yang diperoleh dimurnikan dengan menambahkan larutan NaCl 2,5 % dan dipanaskan pada temperatur 50 0C. lapisan minyak dan air dipisahkan dengan corong pisah. Bentonit ditambahkan ke dalam lapisan minyak sambil diaduk. Setelah didiamkan beberapa saat, lalu disaring untuk memperoleh

Pada penelitian ini digunakan mencit putih  jantan sebanyak 20 ekor yang dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif atau kelompok I yang diberi larutan gom arab saja dan kelompok perlakuan yang diberi sediaan minyak  ikan gelodok raksasa dengan dosis 0,025 ml/20g BB (kelompok II), 0,05 ml/20g dan 0,1 ml/20g BB (kelompok IV). Pemberian secara per-oral pada pukul 19.00 WIB dan pengamatan pada pukul 19.30 – 20.30 WIB dilakukan tiga kali pengulangan yakni pada hari 1, 4, dan 7. Setiap kelompok diambil 5 ekor mencit jantan dan didekatkan dengan 5 mencit betina yang estrus dengan memisahkan setiap pasangannya kemudian diamati dan dihitung aktivitas seksual mencit jantan sesuai dengan parameter yang telah ditetapkan. Aktivitas dianalisa dengan menggunakan indeks aktivitas seksual yang dihitung berdasarkan frekuensi aktivitas dan skor. Pada keadaan normal dimana mencit tidak melakukan aktivitas seksual apapun maka diberi skor 1.

Tabel I. Penilaian Aktivitas Seksual dengan Perhitungan Menggunakan Skor Moving Crawling under Mounting Coitus Frekuensi Skor Frekuensi Skor Frekuensi Skor Frekuensi Skor 1–3 1,5 1–3 3,5 1–3 5,5 1–3 7,5 4–6 2 4–6 4 4–6 6 4–6 8 7–9 2,5 7–9 4,5 7–9 6,5 7–9 8,5 >9 3 >9 5 >9 7 >9 9

ISSN : 2087-5045

25

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 Perhitungan indeks aktivitas seksual diperoleh dengan menyatakan perbandingan antara skor aktivitas seksual hewan perlakuan dibagi dengan skor aktivitas hewan kontrol. IAS =

SASE  SASK 

IAS = Indeks aktivitas seksual SASE = Skor aktivitas seksual pemberian dosis minyak ikan gelodok raksasa (Periophthalmodon schlosseri) SASK = Skor aktivitas seksual tanpa pemberian minyak ikan gelodok raksasa schlosseri ) (Periophthalmodon (kontrol) Data yang diperoleh diolah dengan analisa statistik uji Anova 1 arah terhadap frekuensi ratarata aktivitas seksual mencit jantan selama hari perlakuan dan dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada penelitian ini digunakan sampel berupa minyak ikan gelodok raksasa (Periophthalmodon schlosseri ) yang diekstraksi dengan metoda rendering kering. Metoda ini dipilih karena memiliki beberapa keuntungan dibandingkan metoda lain, diantaranya: relatif  murah; cara kerja mudah dan dapat memperlama proses oksidasi pada minyak ikan. Minyak ikan yang diperoleh berwarna kuning dengan bau dan rasa khas ikan. Indeks bias minyak ikan adalah o 1,3728 pada suhu 28,4 C sedangkan bobot  jenisnya 1,0635. Pada penghitungan frekuensi aktivitas dari mencit percobaan terlihat perbedaan yang nyata dari tiap kelompok. Kelompok II dengan dosis 0,025 ml/20g BB memberikan frekuensi aktivitas seksual yang lebih tinggi daripada kelompok  dosis lainnya. Dari 4 parameter aktivitas yang diamati, aktivitas coitus memberikan frekuensi lebih rendah dibandingkan parameter lainnya. Kemungkinan minyak ikan gelodok raksasa ini lebih berefek untuk meningkatkan libido mencit  jantan. Frekuensi aktivitas seksual berbanding terbalik dengan peningkatan dosis.

Tabel I. Data Hasil Hasil Pengamatan Aktivitas Seksual Mencit Putih Jantan Setelah Pemberian Minyak Ikan Gelodok Raksasa Berdasarkan jumlah frekuensi rata-rata Pada Pengamatan Hari Ke-1, 4 dan 7 Aktivitas Frekuensi

Dosis Kontrol Dosis 0.025 ml/20 g BB Dosis 0.05 ml/20 g BB Dosis 0.1 ml/20 g BB

 Moving

Crawling Under

 Mounting

Coitus

2,8 12

1,46 32,33

0 12,13

0 5,66

7,06

6,46

2,93

0,73

8,06

6,2

1,4

0

Indeks kumulatif aktivitas seksual menunjukkan total aktivitas pada masing-masing dosis. Dosis 0,025 ml/20g BB memberikan aktivitas seksual tertinggi sedangkan dosis 0,1 ml/20g BB memberikan aktivitas terkecil dibandingkan dosis lainnya. ml/20g BB. Hal ini menunjukkan bahwa kenaikan dosis tidak  memberikan kenaikan aktivitas seksual. Aktivitas

ISSN : 20 87 -5 04 5

moving, crawling under, dan mounting menunjukkan keinginan seksual sedangkan aktivitas coitus menunjukkan potensi seksual dan kecepatan sampai terjadinya ejakulasi menunjukkan aksi seksual (Leavitt, 1982).

26

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Tabel II. Data Hasil Perhitungan Indeks Aktivitas Seksual Rata-rata Mencit Putih Jantan ( Moving, Crawling Under, Mounting, Coitus ) serta Indeks Kumulatif Rata-rata Pada Pengamatan Hari Ke-1, 4 dan 7 Aktivitas Rata-rata

Dosis Dosis 0.025 ml/20 g BB Dosis 0.05 ml/20 g BB Dosis 0.1 ml/20 g BB

Moving

Crawling Under

Mounting

Coitus

Indeks Kumulatif 

1.673

1.573

4.9

5.967

14.113

1.4

1.373

5.9

4.033

12.707

1.583

1.363

3.8

1

7.747

Pada saat perlakuan, mencit jantan kelompok dosis 0,1 ml/20g BB menunjukkan aktivitas yang berbeda dibandingkan kelompok  dosis lainnya. Pengamatan 30 – 40 menit pertama, mencit jantan berdiam diri dengan kepala tertunduk ke bawah seperti tertidur, kontraksi diafragma yang lebih besar dibandingkan keadaan normal. Terkadang mencit berdiri, berjalan dengan tubuh yang tidak  seimbang hingga mencit kembali berdiam diri. Prilaku yang berbeda ini kemungkinan terjadi karena munculnya efek lain yang ditimbulkan oleh minyak ikan ketika pemberian dosis yang lebih tinggi. Pada tiap kelompok mencit perlakuan sering terjadi perbedaan aktivitas, hal ini bias disebabkan oleh faktor lainnya yakni faktor internal dan eksternal. Faktor eksternal antara lain suasana gaduh saat pengamatan, kondisi ruangan yang tidak mendukung, waktu pengamatan yang bervariasi, bias cahaya juga mungkin mengganggu ritme biologis mencit. Sedangkan faktor internal berasal dari tubuh mencit itu sendiri, artinya walaupun semua kondisi sudah dibuat seseragam mungkin, namun sebagai makhluk biologis tetap akan menunjukkan nilai biologik yang berbeda. Berdasarkan perhitungan ANOVA 1 arah dengan menggunakan SPSS 19.0, untuk indeks aktivitas seksual mencit putih jantan pada analisa kelompok perlakuan yang dilanjutkan dengan uji berjarak Duncan, menunjukkan bahwa perlakuan dosis memberikan perbedaan yang nyata (p 0.05).  Key words : Ficus benjamina L., creatinin clearance, kidney

PENDAHULUAN

Daun beringin berkhasiat sebagai obat influenza, radang saluran napas (bronkitis), batuk  rejan (pertusis), malaria, radang usus akut, disentri, dan kejang panas pada anak- anak  (Dalimarta, 2000). Daun, akar dan kulit batang beringin mengandung beberapa senyawa kimia diantaranya saponin, flavonoid dan polifenol (Farihah, 2008). Berdasarkan hasil penelitian terdahulu diketahui bahwa ekstrak etanol akar gantung beringin memberikan efek antiinflamasi (Hasti, et al., 2009) dan antipiretik (Hasti, et  al.,2011). Penelitian lainnya tentang Ficus benjamina L. telah diketahui dari daun beringin mengandung c innamic acid, narigenin, lactosa, quercetin, dan cafffeic acid  yang juga mempunyai aktivitas sitotoksik terhadap cell line T-Limphoblastic Leucemic (CEM-SS) , sedangkan pada kulit batangnya mengandung stigmastrerol ( Almahy et al.,2003). Farihah (2008) dalam penelitiannya pun menyatakan adanya sifat toksik  daun beringin terhadap  Artemia salina Leach. Penelitian lainnya menyatakan bahwa ekstrak  etanol, fraksi heksan dan etil asetat akar gantung beringin memiliki efek analgetika (Hasti, et al., 2011). Sedangkan efek antipiretik daun beringin hanya terlihat pada fraksi heksan daun beringin (Hasti, et al., 2011).

ISSN : 20 87 -50 45

Agar obat tradisional dengan bahan baku ekstrak etanol daun beringin ini dapat menjadi obat herbal terstandar, maka perlu juga dilakukan uji praklinik berupa uji keamanan yang mencakup uji toksisitas akut, tertunda, toksisitas subkronis dan kronis dari ekstrak. Uji LD 50 24 Jam dan Toksisitas Tertunda (Hasti et al., 2011) menunjukkan bahwa nilai LD 50 24 jam ekstrak  etanol daun beringin adalah > 16000 mg/kgBB dan diklasifikasikan praktis tidak toksik. Ginjal merupakan organ yang memiliki fungsi yang sangat penting yaitu mengekskresikan hasil akhir metabolisme protein yang mengandung nitrogen seperti kreatinin. Gangguan fungsi ginjal merupakan salah satu masalah yang cukup serius, jika tidak  ditanggulangi akan menimbulkan bahaya yang lebih besar. Fungsi ini dapat terganggu karena faktor endogen dan eksogen, seperti penggunaan obat-obatan, infeksi, kanker atau pengaruh lainnya. Jika kedua ginjal gagal melakukan fungsinya, maka akan mengganggu fungsi organ vital tubuh dan akhirnya menimbulkan kematian (Price & Wilson, 1997). Untuk mengetahui fungsi ginjal ada beberapa metode yang dapat dilakukan antara lain tes klirens ginjal (Guyton, 1997). Penurunan

29

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2 klirens kreatinin dapat menjadi salah satu indikasi menurunnya fungsi ginjal (Price & Wilson, 1997). Dengan menggunakan parameter ini dapat diketahui pengaruh penggunaan tanaman Ficus benjamina L terhadap fungsi ginjal dan parameter yang diamati adalah kreatinin darah, kreatinin urin, rasio organ ginjal dan klirens kreatinin. METODE PENELITIAN Alat

Alat yang digunakan adalah, rotary evaporator, stopwatch, jarum suntik, timbangan mencit, mortir dan stamfer, spektrofotometer (Microlab 200), sentrifus, tabung reaksi, pipet mikro, erlemeyer, gelas ukur, beker gelas, kaca arloji, timbangan analitik, jarum oral, vial, kapas, pisau , pinset, sudip, pipet tetes, kandang metabolit dan alat bedah. Bahan

Bahan penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah: daun beringin segar yang diperoleh dari lingkungan kampus Bina Widya Universitas Riau, Pekanbaru, aquadest, etanol dan Na CMC, larutan pereaksi kreatinin (Diasys) yang terdiri dari Sodium Hydroksida 0,16 mol/L , Asam Pikrat 4,0 mmol/L, Standar kreatinin 2 mg/dL (177µmol/L).

Uji Toksisitas

Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit putih jantan berumur 2-3 bulan dengan berat badan antara 20-30 gram dan diaklimatisasi selama 1 minggu sebelum perlakuan. Mencit dinyatakan sehat bila selama pemeliharaan bobot badan tidak mengalami penurunan lebih dari 10% serta secara visual menunjukkan perilaku normal. Suspensi daun beringin yang telah disiapkan diberikan pada masing-masing keompok mencit dengan dosis 200, 400, dan 800 mg/kg BB. Pada hewan kontrol hanya di berikan larutan Na CMC 1%. Rute pemberian sediaan uji diberikan secara oral dengan volume penyuntikan 1% dari berat badan. Perlakuan ini diberikan setiap hari selama 60 hari dan pada hari ke-61 dilakukan pengukuran volume urin 24 jam, kadar kreatinin urin, kadar kreatinin darah dan rasio berat organ ginjal. Selanjutnya dilakukan penghitungan klirens kreatinin hewan. Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit putih betina sejumlah 25 ekor menggunakan rancangan acak kelompok . Pengukuran Volume Urin

Pengukuran volume urin dilakukan pada hari ke 61 dengan cara meletakkan mencit dalam kandang metabolit. Urin yang diekskresikan selama 24 jam ditampung dan diukur volumenya.

Hewan Percobaan Pengukuran Kadar Kreatinin Urin

Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit putih betina dengan berat 20-25 gram. Penyiapan Ekstrak

Daun beringin yang akan dijadikan sampel dibersihkan, dirajang dan diblender, kemudian ditimbang sebanyak 1 kg lalu diekstraksi secara maserasi yang dilakukan hingga sempurna dengan menggunakan etanol 96% dalam botol gelap ukuran 2,5 liter. Perendaman dilakukan selama 5 hari pada tempat yang terlindung dari cahaya sambil berulang-ulang diaduk. Kemudian disaring dan ampasnya kembali dimaserasi lagi dengan cara yang sama sampai maserat yang dihasilkan berwarna bening. Selanjutnya filtrat dikentalkan dengan rotary evaporator  sampai memperoleh ekstrak kental serta bobot yang konstan .

ISSN : 20 87 -5 04 5

Pengukuran kadar kreatinin urin dilakukan pada hari ke-61 pengamatan, setelah urin dikumpulkan pada 24 jam terakhir. Pengukuran dilakukan dengan cara : urin diencerkan dengan air suling (1:49) v/v dalam labu ukur, lalu dipipet sebanyak 50 µL, dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian dicampurkan dengan 1 mL larutan pereaksi DiaSys, yaitu campuran 4 bagian reagen 1 dan 1 bagian reagen 2 lalu dihomogenkan dengan vortex. Pengukuran absorban sampel dilakukan pada panjang gelombang 501 nm. Kemudian dihitung kadar kreatinin urinnya.

30

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Pengukuran Kadar Kreatinin Serum

Keterangan :

Darah mencit diambil dengan cara memotong bagian vena leher mencit. Kemudian ditampung pada tabung reaksi sebanyak 1 mL. Darah didiamkan selama 15 menit dan disentrifus selama 10 menit pada kecepatan 3000 rpm pada panjang gelombang 501 nm hingga didapatkan serum (bagian yang jernih) dari darah. Serum dipipet sebanyak 50 µL, dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian dicampurkan dengan 1 ml larutan pereaksi DiaSys yaitu campuran 4 bagian reagen 1, dan 1 bagian reagen 2 lalu homogenkan dengan vortex. Pengukuran absorban sampel dilakukan setelah 1 menit dan 2 menit. Kemudian dihitung kadar kreatinin serumnya.

t Vu Ucr Clcr Scr Clcr

= waktu (1440 menit/24 jam) = volume urin yang diekskresikan selama 24 jam (mL) = kadar kreatinin dalam urin (mg/dL) = klirens kreatinin (mL/menit) = kadar kreatinin dalam serum (mg/dL) = klirens kontrol (mL/menit)

Analisa Data

Hasil menggunakan arah dengan SPSS 17,0 for

penelitian dianalisa dengan Analisa Variansi (ANOVA) satu menggunakan software statistik  Windows Evaluation Version.

HASIL DAN PEMBAHASAN Penentuan Ratio Berat Organ Ginjal

Setelah hewan dikorbankan maka organ ginjal diambil lalu dibersihkan dan ditimbang, selanjutnya rasio bobot organ tehadap berat badan masing-masing hewan percobaan. Penentuan Klirens kreatinin

Untuk menentukan Klirens kreatinin dihitung dengan menggunakan rumus (Kaplan et  al, 1979):

Clcr =

Volume urin 24 jam rata-rata mencit putih betina kontrol, dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB setelah pemberian ekstrak etanol daun beringin selama 60 hari dapat dilihat pada Gambar 1. berikut ini.

Ucr x Vu Scr x t

   )    L   m    (   n    i   r   u   e   m   u    l   o    V

Pemberian sediaan uji dilakukan selama 60 hari karena untuk uji toksisitas subkronis dilakukan dengan memberikan zat kimia yang diuji secara berulang sekurang-kurangnya 1-3 bulan (Anonim, 2000). Setelah dilakukan penelitian tentang pengaruh ekstrak etanol daun beringin terhadap fungsi ginjal mencit putih betina, maka didapat data volume urin, kreatinin urin, kreatinin serum, rasio berat organ dan klirens kreatinin.

1 .3

kontrol do sis 200m g/ kgBB

1 .2

do sis 400m g/ kgBB 1 .1

do sis 800m g/ kgBB

1

Perlakuan

Gambar 1. Diagram batang volume urin rata-rata mencit putih betina

ISSN : 2087-5045

31

SCIENTI A VO L. 2 N O. 1 , FEBRUARI 2 0 12 Pada penelitian ini pemberian ekstrak  etanol daun beringin dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB tidak mempengaruhi volume urin 24  jam secara signifikan jika dibandingkan dengan kontrol (p > 0,05). Hal ini menunjukkan tidak  terjadi kelainan dari fungi ginjal setelah pemberian ekstrak etanol daun beringin tersebut.

  n   )    i   n    i    t    L   a   d    /   e   r   g    k   (   m   r   a   i   n    d   r   a   u    K

32

kontrol dosis 200mg/kgBB dosis 400mg/kgBB dosis 800mg/kgBB

30 28 26

Kadar kreatinin urin rata-rata mencit putih betina kontrol, dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB setelah pemberian ekstrak etanol daun beringin selama 60 hari dapat dilihat pada Gambar 2. berikut ini.

Perlakuan

Gambar 2. Diagram batang kreatinin urin rata-rata mencit putih betina Nilai kreatinin urin pada mencit yang diberi suspensi ekstrak etanol daun beringin dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB memberikan hasil yang tidak signifikan (p 0,05). Kreatinin merupakan suatu metabolit kreatin dan diekskresikan seluruhnya dalam urin melalui filtrasi glomerulus. Dengan demikian meningkatnya kadar kreatinin dalam darah merupakan indikasi rusaknya fungsi ginjal (Lu, 1995). Kreatinin difiltrasi oleh ginjal secara keseluruhan dan diekskresikan melalui urin

ISSN : 208 7-50 45

dalam bentuk tidak berubah. Metoda pengukuran kreatinin ini dipilih selain merupakan cara yang paling lazim digunakan di laboratorium klinik   juga merupakan cara yang paling sensitif  walaupun biaya relatif mahal dan juga karena kreatinin produksinya konstan dan eksresinya ditentukan oleh proses filtrasi glomerulus (Ganiswara et al, 1996) karena sifat inilah penulis mengggunakan metode klirens kreatinin untuk mengetahui fungsi ginjal.

32

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Rasio berat organ ginjal rata-rata mencit putih betina kontrol, dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB setelah pemberian ekstrak etanol daun

   l   a    j   n    i   g   n   a   g   r   o    t   a   r   e    b   o    i   s   a    R

beringin selama 60 hari, dapat dilihat pada Gambar 4 berikut ini.

0.012 kontrol

0.0115

dosis 200mg/kgBB dosis 400mg/kgBB

0.011

dosis 800mg/kgBB 0.0105 Perlakuan Gambar 4. Diagram batang rasio berat organ ginjal mencit putih betina

Pemberian ekstrak etanol daun beringin dosis 200, 400 dan 800 mg/kgBB tidak  mempengaruhi rasio berat organ ginjal dari mencit putih betina secara signifikan (p0,05) dibandingkan dengan kontrol. Hal ini menunjukkan tidak terjadi penumpukan kreatinin

ISSN : 2087-5045

dalam darah karena gangguan fungsi ginjal akan menurunkan nilai klirens kreatinin. Klirens kreatinin adalah volume plasma yang dibersihkan dari senyawa atau racun oleh mekanisme ekskresi ginjal setiap satuan waktu (Loomis,1978). Klirens kreatinin adalah volume plasma yang

33

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 dibersihkan dari senyawa atau racun oleh mekanisme ekskresi ginjal setiap satuan waktu (Loomis, 1978). Klirens kreatinin merupakan pengujian untuk mengevaluasi efisiensi ginjal. Kreatinin serum adalah uji saring tunggal yang lebih baik untuk menguji fungsi ginjal. Kreatinin serum dan kreatinin urin dapat digunakan untuk  menghitung bersihan kreatinin dan merupakan metoda yang paling praktis untuk menentukan kecepatan filtrasi glomerulus (Speicher dan S mith, 1993). Dari hasil penelitian ini diketahui bahwa penggunaan ekstrak etanol daun beringin dosis 200, 400 dan 800mg/kgBB pada mencit putih betina tidak menimbulkan efek toksik terhadap organ ginjal. KESIMPULAN

Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun beringin, pada dosis 200, 400 dan 800mg/kgBB selama 60 hari tidak mempengaruhi fungsi ginjal yang terlihat dari volume urin 24 jam, kadar kreatinin serum, kadar kreatinin urin, klirens kreatinin dan rasio berat organ ginjal pada mencit putih betina. DAFTAR PUSTAKA

Almahy, H.A., Mawardi,M., Mohd,A.S., & Abdul, M.A., 2003. The Chemical Constituents of  Ficus benjamina Linn. and Their Biological Activities. Pertanika J.Sci & Technol .11(1): 73-81 Candra, M., 2008, Uji Efek Diuretik Ekstrak   Etanol Akar Gantung Beringin (Ficus benjamina L) pada Tikus Putih Betina (Rattus norvegicus), KTI, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau. Dalimartha, S, 2000,  Atlas Tumbuhan Indonesia,  jilid II, Trubus Agriwidya, Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Pedoman Pelaksanaan Uji Klinik Obat  tradisional, Edisi 1, Direktorat Pengawasan Obat Tradisional, Jakarta. Dipiro, J.Y., R.L. Talbet, M. Dyce, G.R Matzke. B.G. Wells and Posey., 1997, Pharmacotherapy a Phatophysiologic  Approach, Fifth Edition, Book One, Appleton and Large. Farihah, 2008, Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Ficus benjamina L. terhadap Artemia salina  Leach dan Profil Kromatograpi Lapis Tipis, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.

ISSN : 208 7-504 5

Ganiswara, G.G, 1995, Farmakologi Dan Terapi, Edisi 4, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Ganong, W.F., 1983,  Review of Medical Physiology, Lange Medical Publiction, California. Guyton, A.C. dan J.E. Hall., 1997,  Buku Ajar  Fisiologi Kedokteran, edisi 9, terjemahan Setiawan, I., Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Guyton, A.C., 1987, Fisiologi Manusia dan  Mekanisme Penyakit, Terjemahan P. Andrianto, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Guyton, A.C., 1997, Fisiologi Kedokteran, edisi 17, Terjemahan Setiawan, I., L.M. Ariati, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Hasti, S., Sandi, N.H. dan Firdaus,M., 2009, Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Akar Gantung Beringin ( Ficus benjamina L) pada Tikus Putih Betina ( Rattus norvegicus),  Laporan Penelitian Dosen Sekolah Tinggi  Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru. Hasti, S., Sandi, N.H., Sari, E.N. dan Sinaga,S., 2011, Uji Efek Analgetika Ekstrak Etanol, Fraksi Etil Asetat Dan Fraksi Heksan Akar Gantung Beringin ( Ficus benjamina L.) Pada Mencit Putih Jantan ( Mus musculus). Seminar Farmasi Up Date ke 3, Medan. Hasti, S., Sandi, N.H.,dan Srianti,T., 2011, Uji Efek Antipiretika Ekstrak Etanol, Fraksi Etil Asetat Dan Fraksi Heksan Daun Beringin (Ficus benjamina L.) Pada Tikus Putih Betina ( Rattus norvegicus) , Seminar   Nasional Farmasi, Padang Hasti, S., Yuslinda, E., Sandi, N.H.,dan Liawati, W., 2011, Uji Efek Analgetika, Toksisitas Akut dan Tertunda Ekstrak Etanol Daun Beringin (Ficus benjamina L.) Pada Mencit Putih Betina , Seminar Nasional Farmasi , Semarang. Kaplan, A. dan L.L. Szabo. 1979, Clinical Chemistri: Interpretation and Techniques. Lea and Febiger, Philadelphia. rd Loomis, A.T., 1978,  Essential of Toxycologi, 3 edition, Lea and Febinger, Philadelphia. Lu, F.C., 1994, Toksikologi Dasar , edisi II, diterjemahkan oleh E. Nugroho. Z. S. Bustami dan Z. Firmansyah, Universitas Indonesia.

34

SCIENTIA VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 2 01 2 Lu, F.C., 1995, Toksikologi Dasar , Asas, Organ Sasaran dan Penelititan Resiko , edisi II, diterjemahkan oleh E. Nugroho, Universitas Indonesia. Price, S.A., and L.M. Wilson., 1997, Patofisiologi Konsep Klinis Proses-proses Penyakit , edisi 4, diterjemahkan oleh P. Anugerah. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Speicher, C., dan Smith J., 1993, Pemilihan Uji  Laboratorium yang Efektif , diterjemahkan oleh Joko Suyono, EGC, Jakarta.

ISSN : 2087-5045

35

SCIENTI A VO L. 2 NO. 1 , FEBRUARI 20 1 2

FORMULASI PASTA GIGI MINYAK CENGKEH (Oleum caryophylli) DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI TERHADAP Streptococcus mutans Fifi Harmely,Vinny Hosiana, Rina Reskika Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia Yayasan Perintis Padang ABSTRACT

A research to formulate toothpastes from clove oil (Oleum caryophylli) and determination of their inhibition against Streptococcus mutans were done. The toothpaste were varying in concentration of clove oil: 0.6%, 0.9% and 1.2%. Toothpaste base was used as negative control wheares positive control was used as comparison. Evaluations of preparations include toothpaste organoleptic, homogenity, pH, particle size, spread ability, and the foam test. Antibacterial activity test was carried out by the diffusion method (Cup-plate technique). The data obtained were processed by one-way ANOVA using SPSS 17 program. The evaluation of preparation showed that clove oil toothpaste gi ves good results and qualify as a toothpaste. The best antibacterial activity was showed by F3 formula (toothpaste containing 1.2% clove oil ) with inhibition diameter was 30.625 mm. Based on the results of statistical analysis by one-way ANOVA, these inhibition diameter was significantly different from F0 and comparison toothpaste (p