Inmunologia Porcina

 

INMUNOLOGÍA VETERINARIA

GUIÓN DE CLASES FUENTE: http://www.revista-anaporc.com/curso/inicio.htm ELABORADO POR: Dra. María Estela Encalada Paredes de Vásquez, Mg. Sc. UNIVERSIDAD DE CUENCA-ECUADOR

 

INSTITUTO PASTEUR, PARÍS

LABORATORIOS DE MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA

 

Sanidad Animal Microbiología

Agentes

Parasitología

Inmunología    í   a   g   o    l   o    i   m   e    d    i   p    E

Salud

Inmunología

Enfermedad

Manejo M. Ambiente Bienestar Bioseguridad

Medicina preventiva

  s   s   i   a   a   s  r   a   o    i    t   c   i   c  s   e  a   r    f   n  a    I   P  .  .    E    E

 

1901

Behring

1996

Doherty

Zinkernagel

La inmunología es la parte de la Ciencia que estudia los mecanismos por los cuales los animales pueden diferenciar su propia estructura de la

 

Diferenciación

 

Bcl 2

      Y

      Y

 

IgA

 

ALTERACIONES DEL SISTEMA INMUNE

 

PR IME R CAP CAPÍÍT UL O

 

INMUNIDAD NATURAL NO ESPECÍFICA

 

INMUNIDAD ADQUIRIDA ESPECÍFICA

 

ESQUEMA DE LA OBTENCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

 

BIOLOGÍA MOLECULAR

 

CERDOS MINIATURA

 

PRO ROD DUC UCCI CI N D DE EA AN NTICUE CUERPOS POS MONOCLONALES 

 

ESQUEMA DE LINFOCITO B Y SU TRANSFORMACIÓN EN CÉLULA PLASMÁTICA

 

ESQUEMA DE LINFOCITO B Y SU TRANSFORMACIÓN EN CÉLULA PLASMÁTICA

 

¿CÓMO ES LA ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS

 

MOLÉCULA DE INMUNOGLOBULINA

 

DOMINIO DE INMUNOGLOBULINAS

 

AMINOÁCIDO

 

LOCALIZACIÓN DE LOS SITIOS DE UNIÓN CON EL ANTÍGENO

 

Esquema de la reacción de citotoxicidad c itotoxicidad mediada por anticuerpos. La especificidad la proporciona el anticuerpo y la acción citotóxica la célula

 

En el timo se seleccionan los linfocitos para que sólo puedan reaccionar  frente a las moléculas extrañas al organismo (selección positiva). Solamente estos linfocitos pasarán al torrente circulatorio. Por el contrario, se produce una destrucción celular (apoptosis) de los linfocitos que pudieran reaccionar contra la propia estructura.

 

Reconocimiento específico de un solo determinante antigénico (un determinante = una célula). Tras el reconocimiento hay una proliferación, por la cual unos linfocitos pasan a formar parte de los

 

Corte histológico a nivel del estroma de la médula ósea porcina (200X) en el que se puede observar las diferentes poblaciones de células hematopoyéticas

 

Corte histológico de timo de cerdo (25X) en el que se puede observar un lóbulo con los diferentes lobulillos separados por  diferentes septos (a), la zona cortical o corteza (b) con gran presencia de linfocitos, la zona medular o médula (c) formada por  células epiteliales y menor número de linfocitos

 

Esquema del ganglio linfático de cerdo en el que se puede observar que su distribución celular y circulación linfática es inversa al resto de los mamíferos. La zona cortical con sus folículos linfoides y su tejido linfoide difuso se encuentra en la zona central del ganglio, estando la zona medular en la periferia.

 

Corte histológico de un ganglio linfático de cerdo (25 x) en el que se puede observar su distribución diferencial con otras especies animales; así, la zona cortical (a), se localiza en el centro del ganglio con gran presencia de folículos linfoides (b) (linfocitos B y T CD4+) y tejido linfoide difuso (c) y la zona medular en la l a periferia (d).

 

ESQUEMA DEL BAZO

 

Corte histológico del bazo de cerdo (100X) en el que se pueden observar la cápsula (a), la pulpa roja (b), la pulpa blanca (c ) y las trabéculas (d)

 

Esquema de las tonsilas de cerdo. Se observa, la distribución interna formada por las criptas, con su diferente apariencia según el corte, y los folículos linfoides, con sus centros germinativos y el tejido interfolicular o tejido difuso.

 

Corte histológico de tonsila de cerdo (25x) en el que se observan: El epitelio estratificado (a), criptas (b), folículos linfoides ( C ) (fundamentalmente formados linfocitos B) rodeados por tejido linfoide

 

Corte histológico de la placa de Peyer (25X). Se puede observar los folículos linfoides con su centro germinativo (a) la corona (b) la región interfolicular C

 

SE GUN DO C APÍ APÍT TU LO

 

CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNE

 

LINFOCITOS B y LINFOCITOS T LOS LINFOCITOS B, SE PRODUCEN EN LA MÉDULA ÓSEA (INMUNIDAD HUMORAL) Y LOS DISTINTOS TIPOS DE LINFOCITOS T DERIVAN DEL TIMO (INMUNIDAD CELULAR)

 

CÉLULAS PRESENTADORAS DE ANTÍGENO •

FUNCIONES: Fagocitosis Presentación antígenos Producción dedelinfocinas

 

LINFOCITOS T y B OBTENIDA MEDIANTE MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE BARRIDO

 

OBSERVACIÓN Linfocito teñido con Giemsa, observado mediante microscopia ordinaria

 

LINFOCITO T DE CERDO FORMANDO ROSETAS CON ERITROCITOS DE CARNERO

 

ESQUEMA DE UN LINFOCITO B

 

DETALLE DEL COMPLEJO BcR DE LOS LINFOCI LINFOCITOS TOS B

 

ESQUEMA DE LA ESTIMULACIÓN DE UN LINFOCITO B, TRANSFORMACIÓN EN CÉLULA PLASMÁTICA Y LA PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS

 

ESQUEMA DE DE LA FORMACIÓN DE ROSETAS EN LINFOCITOS T DE CERDO CON ERITROCITOS DE CARNERO

 

ESQUEMA DEL COMPLEJO TcR DE LOS LINFOCITOS T PORCINOS, FORMADO POR SUS CADENAS PESADAS Y LIGERAS, COMPUESTAS POR UNA PARTE VARIABLE, QUE REACCIONA CON EL ANTÍGENO, Y UNA PARTE CONSTANTE.

 

ESQUEMA DE UNA CÉLULA NK EXPRESANDO EL RECEPTOR PARA LA FRACCIÓN Fc DE LAS INMUNOGLOBULINAS

 

OBSERVACIÓN, POR MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA, DE LAS INMUNOGLOBULINAS INMUNOGLOBULINAS DE SUPERFICIE DE UN LINFOCITO B

 

ESQUEMA DE LA TÉCNICA PARA LA OBSERVACIÓN DE LAS INMUNOGLOBULINAS DE SUPERFICIE DE UN LINFOCITO B. UN SUERO POLICLONAL O MONOCLONAL (a) MARCADO CON ISOCIANATO DE FLUORESCEÍNA (b) REACCIONA CON LAS INMUNOGLOBULINAS PORCINAS DE LA MEMBRANA

 

En la foto (b), se puede observar la formación de rosetas con eritrocitos porcinos en macrófagos infectados con el virus de la Peste Porcina Africana, este fenómeno conocido como hemoadsorción no puede ser  confundido con la formación de rosetas con eritrocitos de carnero de los linfocitos T porcinos ( a ).

 

CITÓMETRO DE FLUJO PARA EL ESTUDIO DE POBLACIONES DE LINFOCITOS PORCINOS. UNIDAD BÁSICA DE LECTURA Y EL SISTEMA DE PROCESAMIENTO DE DATOS

 

Estudio de doble marcaje (marrón-azul) para la localización de infección con el VPPA (marrón) en células marcadas con un antígeno monoclonal anti macrófago porcino (azul). Se puede observar como no todas las células que reaccionan con el AcM anti macrófago (azul) están infectadas, aunque sí la gran mayoría.

 

ESQUEMA DE LA ESTIMULACIÓN BLÁSTICA O BLASTOGÉNESIS

 

FOTOGR FOTO GRAF AF A DE UN UN EQUI EQUIPO PO PAR PARA A LA REC RECOG OGIDA IDA DE C LULA LULAS S CULTIVADAS EN PLACA (“HARVESTER”). LAS CÉLULAS QUEDAN EN EL PAPEL DE FILTRO. ESTOS FILTROS SE PASARÁN AL CONTADOR DE CENTELLEO LÍQUIDO O DE PARTÍCULAS BETA.

 

REACCIONES CITOTÓXICAS

 

ANTÍGENOS DE CLASE I y II

 

ANTÍGENOS

 

TERC TER C ER CAPÍ CAPÍT UL O

 

CÉLULAS

 

FOTOGR FOTO GRAF AF A D DE EL LA AS SUP UPER ERFI FICI CIE E DE DE UN UN MAC MACR R FA FAGO GO,, OBTENIDA POR MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE BARRIDO.

 

ESQUEMA DE LA ESTRUCTURA DE UN MACRÓFAGO

 

LAS CÉLULAS EN SUSPENSIÓN A LOS QUE SE LES HAN AÑADIDO LOS DIFERENTES AcM PASAN A TRAVÉS DE UN TUBO MUY FINO EN UNA SÓLA FILA DE CÉLULAS, Y SON LEÍDAS POR EL LÁSER Y EL HAZ DE LUZ; EL PRIMERO IDENTIFICA LOS ANTICU ANTICUERPOS ERPOS MARCA MARCADOS DOS Y EL SEGUNDO, EL TAMAÑO DE LAS CÉLULAS.

 

CÉLULAS

 

ESQUEMA DEL NEUTRÓFILO O POLIMORFONUCLEAR

 

ETAPAS DEL PROCESO DE LA FAGOCITOSIS Ø Quimiotaxis o atracción Ø Adherencia y opsonización Ø Ingestión y vacuolización Ø Digestión o destrucción

 

EOSINÓFILOS

 

ESQUEMA DE LA PRESENTACIÓN DE Ags POR LINFOCITOS B.

 

Un linfocito B  estimulado por un antígeno cambia su estructura y función. El linfocito B se divide produciendo varios clones, posteriormente se transforma, desarrollando retículo endoplásmico rugoso, formándose finalmente una célula plasmática.

 

INMUNOGLOBULINAS

 

Esquema de la cooperación celular para la presentación de antígenos mediante células presentadoras (macrófagos o células dendríticas) de ndríticas)

 

INMUNOGLOBULINAS

 

INMUNOGLOBULINAS

 

PAPEL DE LAS MUCOSAS

 

ESTIMULACIÓN DEL T TEJIDO EJIDO LINFOIDE LINFOIDE DE LAS MUCOSAS BALT o GALT. ESTE MECANISMO PERMITE QUE, AUNQUE LA ESTIMULACIÓN ANTIGÉNICA HAYA SIDO LOCAL, LA RESPUESTA INMUNE SEA GENERALIZADA.

 

ESQUEMA DE LA ESTRUCTURA ESTRUCTURA DE UNA INMUNOGLOBULINA IgA

 

PRESENTACIÓN ANTIGÉNICA EN LA ZONA INDUCTORA DE LAS MUCOSAS

 

EL ANTÍGENO EN LA ZONA EFECTORA, ENTRA POR ENDOCITOSIS O A TRAVÉS DE LAS UNIONES ESTRECHAS

 

LA IgA ESQUEMA DE ACTUACIÓN DE LA

 

CUARTO CAPÍTULO

 

ESQUEMA DE LINFOCITO CÉLULA PLASMÁTICA

B

y SU TRANSFORMACIÓN EN

 

¿CÓMO ES LA ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS?

 

ESTRUCTURA BÁSICA DE LAS INMUNOGLOBULINAS FORMADA POR DOS CADENAS PESADAS (ROJO) Y DOS CADENAS LIGERAS (AMARILLO)

 

ESTRUCTURA DE LOS DOMINIOS DE LAS INMUNOGLOBULINAS. EN LAS CADENAS LIGERAS EXISTEN DOS DOMINIOS, UNO VARIABLE (VL) Y OTRO CONSTANTE (CL). LAS CADENAS PESADAS PRESENTAN UN DOMINIO VARIABLE (VH) Y TRES A CUATRO CONSTANTES (CH).

 

AMINOÁCIDO

 

LOCALIZACIÓN DE LOS SITIOS DE UNIÓN CON EL ANTÍGENO

 

ESQUEMA DE LA REACCIÓN DE CITOTOXICIDAD MEDIADA POR ANTICUERPOS. LA ESPECIFICIDAD LA PROPORCIONA EL ANTICUERPO Y LA ACCIÓN CITOTÓXICA LA CÉLULA

 

CADENAS PESADAS DE LAS INMUNOGLOBULINAS ¿CÓMO SE REGULA LA FORMACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS?

 

CADENA LIGERA DE LAS INMUNOGLOBULINAS ¿CÓMO SE REGULA LA FORMACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS?

 

ESQUEMA DE LA PRODUCCIÓN DE LA CADENA LIGERA DE LAS INMUNOGLOBULINAS PORCINAS

 

ESQUEMA DEL CAMBIO DE ISOTIPO DE LAS INMUNOGLOBULINAS

 

¿CÓMO SE REGULA LA FORMACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS?

 

¿CÓMO SE REGULA LA FORMACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS?

 

¿CÓMO SE REGULA LA FORMACIÓN DE INMUNOGLOBULINAS?

 

¿CUÁNTOS TIPOS DE INMUNOGLOBULINAS SE CONOCEN?

 

ESQUEMA DE LA ESTRUCTURA DE LA IgM. EN VERDE LA CADENA J

 

ESQUEMA DE LA ESTRUCTURA DE LA IgG

 

ESQUEMA DE LA IgA MONOMERICA

 

ESQUEMA DE LA IgA EN FORMA DE DÍMERO UNIDOS POR LA CADENA J

 

ESQUEMA DE LOS DIFERENTES NIVELES DE ACTUACIÓN DE LA IgA (1) EN EL LUMEN, (2) ENTEROCITOS ENTEROCIT OS Y (3) LÍQUIDO HÍSTICO

 

ESQUEMA DE UNIÓN UNIÓN DE DOS MOLÉCULAS MOLÉCULAS DE IgE CON EL BASÓFILO

 

¿QUÉ PAPEL TIENEN LAS INMUNOGLOBULINAS EN LA RESPUESTA INMUNE?

 

¿QUÉ PAPEL TIENEN LAS INMUNOGLOBULINAS EN LA RESPUESTA INMUNE

 

¿QUÉ PAPEL TIENEN LAS INMUNOGLOBULINAS EN LA RESPUESTA INMUNE?

 

ESQUEMA DE ACTUACIÓN DE LA IgA La IgA puede actuar a nivel nivel de la luz intestinal (lumen), (lumen), evitando evitando la la adherencia al epitelio de virus y/o bacterias (1), dentro de los enterocitos virus (2) y por último, último, en el líquido hístico (3). incluso neutralizando virus

 

QU INT INTO O CA PÍ TU LO

 

ESQUEMA DE FUNCIONAMIENTO DEL CITÓMETRO DE FLUJO PARA LA DETECCIÓN DE INMUNOGLOBULINA INMUNOGLOBULINAS S DE SUPERFICIE SUPERFICIE EN LINFOCITOS B. Las células en suspensión suspensión a los que se les han añadido añadido los diferentes AcM (anti IgA e IgG) pasan a través de un tubo muy fino en una sola fila de células y son leídas por el láser y el haz de luz; el  primero identifica los anticuerpos marcados y el segundo, el tamaño de las células.

 

IMAGEN DE UNA AGLUTINACIÓN EN TUBO

 

KITS COMERCIALES PARA ESTUDIOS SEROLÓGICOS

 

MÉTODO ELISA LOS SUEROS POSITIVOS SON DE COLOR AZUL Y LOS SUEROS NEGATIVOS SIN COLOR

 

¿CÓMO S E E ¿CÓMO ES STU DIA DIAN N LA S INMUNOGLOBULINAS?

FAS FA SE S D E L A T ÉC NICA ELI ELIS SA SANDWICH

 

¿CÓMO S E E ¿CÓMO ES STU DIA DIAN N LA S INMUNOGLOBULINAS? FA SE S D DE E LA T ÉC NI CA E LIS A IND INDII RE REC C TO

 

¿CÓMO S E ES ¿CÓMO ESTU DIA DIAN N LA S INMUNOGLOBULINAS?

FASES DE LA TÉCNICA ELISA DE COMPETICIÓN

 

Material necesario para la realización de la inmunotransferencia: Tiras de nitrocelulosa antigenadas. Tampón PBS. Sueros de referencia positivo y negativo. Conjugado. Solución Sustrato y soporte plástico para realizar todos los procesos.

 

Fase final de la técnica. Se puede observar la aparición de las diferentes bandas, con las que ha reaccionado el suero problema y los sueros control.

 

Técnica de inmunofluorescencia indirecta. Células MS infectadas con el virus de la Peste Porcina Africana. Se puede observar como los anticuerpos se han unido a las células infectadas, destacándose en el citoplasma unas zonas con una intensidad mayor, que corresponden a zonas de mayor replicación viral, y por tanto mayor fijación de anticuerpos.

 

TAPIZ CELULAR INFECTADO

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES?

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES? SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD BAJA

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES? SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD MEDIA

 

¿QUÉ SON LOS SEROPERFILES? SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD ALTA

 

¿QUÉ APLICACIONES PRÁCTICAS PRÁCTICAS PRESENTAN LOS SEROPERFILES?

El tiempo de cuarentena idóneo depende del agente infeccioso, su general, periodo de y su capacidad de expresión. En de incubación 4 a 8 semanas es el tiempo recomendado para las enfermedades porcinas.

 

En el momento ideal de vacunación (zona amarilla) los anticuerpos maternales no interfieren con la vacunación, pero todavía son protectivos (línea azul). Esta situación permite el desarrollo de los anticuerpos vacunales (línea verde), evitando la infección y la posterior aparición de los anticuerpos de infección.

 

GRÁFICA MODELO DE LA EVOLUCIÓN DE LOS ANTICUERPOS MATERNALES Y APARICIÓN DE LOS ANTICUERPOS DE INFECCIÓN (A PARTIR DE LOS 60 DÍAS) EN LA E. A. SE SE PUEDE OBSERVAR LA ZONA CRÍTICA DE INFECCIÓN, GENERALMENTE, ENTRE LOS 35 A 40 DÍAS.

 

SEROPERFILES

 

SEROPERFILES

 

SEROPERFILES

 

GRACIAS A LA UTILIZACIÓN DE VACUNAS gE NEGATIVAS Y MÉTODOS DE ELISA INDIRECTO DE COMPETICIÓN PARA LA VALORACIÓN DE ANTICUERPOS ANTI gE y gB, SE PUEDE DETERMINAR, EN LA ENFERMEDAD DE AUJESKY, MEDIANTE UNA SOLA DETERMINACIÓN, SI UN SUERO CORRESPONDE A UN ANIMAL (1) VACUNADO (SÓLO TIENE gB), (2) INFECTADO (TIENE ANTICUERPOS ANTI gB Y ANTI gE), (3)ANTICUERPOS NEGATIVO A ANTI ENFERMEDAD Y NO VACUNADO (NO TIENE ANTICUERPOS NI FRENTE A gE, NI gB).

 

SERONEGATIVIZACIÓN

 

SEROCONVERSIÓN

 

ESTADO BASAL

 

EN LA TÉCNICA DE SERONEUTRALIZACIÓN, SE VALORA LA CAPACIDAD DEL SUERO PROBLEMA (A DIFERENTES DILUCIONES) PARA NEUTRALIZAR LA INFECTIVIDAD DE UN VIRUS, SOBRE UNA LÍNEA CELULAR SENSIBLE. SI EL ANTICUERPO PROBLEMA NEUTRALIZA EL VIRUS, NO HABRÁ REPLICACIÓN VIRAL (AUSENCIA DE EFECTO CITOPÁTICO), SI NOVIRUS LO NEUTRALIZA, HABRÁ REPLICACIÓN VIRAL (EFECTO CITOPÁTICO). EN LOS QUE NO PRODUCEN EFECTO CITOPÁTICO, LA POSIBLE REPLICACIÓN VIRAL SE OBSERVA MEDIANTE TÉCNICAS DE INMUNOFLUORESCENCIA O PEROXIDASA.

 

SEXTO CAPÍTULO

 

LAS CITOCINAS UNIÓN DE LA CITOCINA AL RECEPTOR

 

DIMERIZACIÓN DEL RECEPTOR Y ACTIVACIÓN DE LAS QUINASAS RECEPTOR. JAK,

PRODUCIÉNDOSE

LA

FOSFORILACIÓN

DEL

 

FOSFORILACIÓN Y DIMERIZACIÓN DE LOS SATS, ACTIVACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN DE LOS GENES-DIANA.

 

ACTUACIÓN DE LAS CITOCINAS A: Autocrina; E: Endocrina; P: Paracrina La acción de las citocinas es predominantemente de carácter local (autocrina y paracrina) y en menor proporción Endocrina

 

¿CÓMO INTERVIENEN LAS CITOCINAS EN LA RESPUESTA NATURAL O INNATA? Las citoquinas juegan un papel fundamental en la respuesta natural mediante mecanismos de acción directa frente al agente invasor (evitando la infección de las células por diferentes virus) o mediante mecanismos de activación celular (NK y macrófagos) que a su vez liberan más citocinas

 

RESISTENCIA TRANSITORIA

 

DEGRADACIÓN DEL ARN MENSAJERO. INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS

 

ACTIVACIÓN DE GENES QUE EXPRESAN PROTEÍNAS ANTIVIRALES

 

INCREMENTO DE LA EXPRESIÓN DEL SLA

 

Cooperación celular para la presentación de antígenos y producción de anticuerpos. Las citocinas juegan un u n papel fundamental en estos procesos

 

MEDIANTE LAS TÉCNICAS DE CITOTOXICIDAD POR LIBERACIÓN DE CROMO 51 SE PUEDEN VALORAR LOS MECANISMOS CITOTÓXICOS “IN VITRO”

 

¿CÓMO ACTIVAN LA HEMATOPOYESIS Y LA ATRACCIÓN DE LOS LINFOCITOS? Principales citocinas que estimulan la hematopoyesis

 

CITOCINAS DEL GRUPO ALFA

 

CITOCINAS DEL GRUPO BETA

 

CITOCINAS DEL GRUPO GAMA

 

¿CÓMO SE ACTIVAN LOS LINFOCITOS? Esquema de la cooperación celular en la respuesta inmune adquirida. procesos Las citocinas juegan un papel muy importante en estos

 

ACTIVACIÓN DE LOS LINFOCITOS B

 

MÉTODOS PARA ESTUDIAR LAS CITOCINAS 1. MÉTODO INMUNOLÓGICO

 

MÉTODOS PARA ESTUDIAR LAS CITOCINAS

2. MÉTODO MOLECULAR

 

SÉPTIMO CAPÍTULO

 

MECANISMO DE ACTIVACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE. RESPUESTA

FAGOCITOSIS

La activación de la fagocitosis se realiza en cuatro fases: 2. Qu Quim imio iottax axis is

2. Adherencia 3. Ingestión 4. Destrucción  

LISIS CELULAR POR LA ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO POR LA VÍA CLÁSICA

 

LAS CITOQUINAS JUEGAN UN PAPEL FUNDAMENTAL EN LA RESPUESTA NATURAL MEDIANTE MECANISMOS DE ACCIÓN DIRECTA FRENTE AL AGENTE INVASOR (EVITANDO LA INFECCIÓN DE LAS CÉLULAS POR DIFERENTES VIRUS) O MEDIANTE MECANISMOS DE ACTIVACIÓN CELULAR (NK Y MACRÓFAGOS) QUE A SU VEZ LIBERAN MÁS CITOCINAS

 

Mecanismos de presentación de antígenos. Cooperación celular  entre las células presentadoras de antígeno y los linfocitos T CD4 y los B. La actuación de diferentes citocinas es ffundamental undamental en el proceso.

 

RESPUESTA INMUNE

 

En la técnica de seroneutralización, se valora la capacidad del suero problema (a diferentes diluciones) para neutralizar la infectividad de un virus, sobre una línea celular  sensible. Si el anticuerpo problema neutraliza el virus, no habrá replicación viral (ausencia de efecto citopático) si no lo neutraliza, habrá replicación viral (efecto citopático). En los virus que no producen efecto citopático, la posible replicación viral se observa mediante técnicas de inmunofluorescencia o peroxidasa.

 

ESQUEMA DE LA ESTRUCTURA DE LAS INMUNOGLOBULINAS

 

Estimulación del tejido linfoide linfoide de de las mucosas. BALT o GALT. GALT. Este mecanismo permite que aunque la estimulación antigénica haya sido local, la respuesta inmune sea generalizada.

 

El interferón interviene en la respuesta natural, induciendo una resistencia transitoria en las células

 

VIRUS DE LA PPC

 

Replicación viral

 

CÉLULA NK

 

REACCIÓN CITOTÓXICA

 

Mecanismos inmunitarios frente a bacterias y parásitos

 

Aspecto de colonias de bacterias GRAM positivo

 

OCT OC T AVO CAP ÍT UL ULO O

 

VACUNACIÓN Y SUEROTERAPIA

 

Un agente infeccioso (completo o fragmentado, vivo o muerto) capaz de inducir una respuesta inmune, más o menos duradera, sin producir ningún tipo de lesiones se considera como una vacuna.

 

FOTOS DEL LABORATORIO-MUSEO DE LOUIS PASTEUR, PARÍS

 

VACU VAC U NAS NAS A AT TEN UAD UADA A S E INA INA CT CTII VA VAD D AS VACUNAS ATENUADAS Estimulación CD4+ y CD 8+

VACUNAS INACTIVADAS Fundamentalmente CD4+

CITOCINAS (Interferón)

Menos CITOCINAS

MENOR ANTÍGENO

MAYOR ANTÍGENO

MENOR ESTABILIDAD

MAYOR ESTABILIDAD

ALMACENAMIENTO MENOS SEGURAS

ALMACENAMIENTO MÁS SEGURAS

ADYUVANTES NO CRÍTICOS

ADYUVANTES SON CRÍTICOS

El principal problema de este tipo de vacunas, es que la atenuación no sea estable y pueda revertir a las formas virulentas. La estabilidad de la atenuación es el factor más crítico en estas vacunas.  

La mayoría de los virus se cultivan en líneas celulares estables. Estas células generalmente se adhieren a la superficie de los frascos de cultivo (algunas líneas celulares están en suspensión) donde posteriormente serán infectadas con el inóculo viral para la producción de gran número de partículas virales.

 

Cultivo de virus en huevos embrionados. Algunos virus no se pueden cultivar en líneas celulares y se replican en huevos de ave.

 

La superficie para cultivar células se puede incrementar mucho más utilizando los microcarries, los cuales son unas partículas que permiten que millones de células puedan adherirse y crecer sobre ellas. De esta manera se multiplica por “n” veces la superficie para cultivar células

 

Vista parcial de una unidad de centrifugación industrial de bacterias para la producción de vacunas bacterianas.

 

SEGURIDAD EN LAS VACUNAS

 

VIRUS DE LA PESTE PESTE PORCINA AFRICANA (PPA)

Fotografías del vir virus us de la Peste Peste Porcina Africana (PPA) por  microscopía electrónica y lesiones que provoca.  

¿QUÉ INCONVENIENTES PUEDEN PRESENTAR LAS VACUNAS CONVENCIONALES? La estructura molecular y antigénica es idéntica tanto para el agente infeccioso como en el vacunal por lo que los anticuerpos inducidos por  ambos son idénticos.

 

VIRUS DE LA PESTE PESTE PORCINA PORCINA CLÁSICA (PPC)

 

NO VE VEN N O C AP APÍÍ TUL O

 

VACUNAS DE NUEVA GENERACIÓN

 

Una vez conocido el fragmento de ADN y su secuencia, la proteína de interés inmunológico, se aísla el fragmento ADNde(1), y se inserta en un plásmido (2), este plásmido se introduce en unde vector expresión ( E. coli, Baculovirus) (3). Algunos aceptarán el gen y producirán el recombinante (4). Otros, la mayoría, no (5).  

Microscopía electrónica de la estructura de un VLP (“virus like particles”) de varias proteínas del virus de la “lengua azul”. Cortesía de P. Roy.

 

LESIONES OCASIONADAS POR EL VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA EN EL CERDO

 

VACUNAS DE NUEVA GENERACIÓN

 

VACUNAS VIVAS DELECCIONADAS

 

Esquema de la estructura del virión, sus diferentes proteínas (con su nueva nomenclatura) y del ADN del virus de la E. A.

 

Esquema de la estructura del ADN del virus de la Enfermedad de Aujeszky. En el fragmento Us se localizan los genes de las gE y gl.

 

Esquema de la estructura del virión del virus de la EA con la localización de las diferentes proteínas

 

RECOMBINANTES VIVOS

 

Esquema de la construcción del recombinante entre el virus de la Mixomatosis y la proteína vp 60 del virus de la Enfermedad vírica hemorrágica del conejo.

 

Microscopía electrónica de partículas virales de Mixoma y Enfermedad vírica hemorrágica del conejo

 

VACUNAS DE ADN

 

El antígeno (1) induce unos anticuerpos (2) cuyos sitios de unión son complementarios a la estructura (1). Cuando los sitios de unión de (2) se inoculan a otro animal, inducirán otros anticuerpos (3) cuyos sitios de unión serán complementarios de unión (2) e idénticos a (1) ya que como presentan la misma estructura. Estos sitios de podrían ser utilizados vacuna frente al antígeno (1).

 

Esquema del método ELISA de Competición para el diagnóstico de la Enfermedad de Aujeszky. Los animales vacunados presentarán anticuerpos sólo frente a gB, mientras que los infectados tendrán ELISA DE COMPETICIÓN

 

Imagen de la última parte del desarrollo de la técnica ELISA

 

Proceso de clonación de la proteína E2 y expresión en baculovirus para la producción de la vacuna de subunidades frente al virus de la PPC

 

Los animales enfermos de PPC, presentan anticuerpos frente a las diferentes proteínas del virus, mientras que los animales vacunados con la vacuna de subunidades E2, sólo presentarán anticuerpos frente a E2.

 

El método ELISA diferencia para animales vacunados con la vacuna de subunidades (E2). Los animales vacunados sólo presentan anticuerpos frente a E2, los portadores y/o enfermos, presentan anticuerpos contra E2 y Erns.

 

DÉCIMO CAPÍTULO

 

Esquema de la cooperación celular en la respuesta inmune adquirida

 

El antígeno que penetra en los enterocitosis se destruye rápidamente por los lisosomas. Sin embargo, el antígeno que es capturado por las células M, es transportado sin degradación y presentado a los linfocitos intraepiteliales. A partir de ahí va a los ganglios linfáticos.

 

Las citocinas juegan un papel fundamental en la respuesta natural mediante mecanismos de acción directa frente al agente invasor  (evitando la infección de las células por diferentes virus) o mediante mecanismos de activación celular (NK y macrófagos) que a su vez liberan más citocinas.

 

Una de las acciones de las citocinas en su capacidad para la atracción de las diferentes células del sistema inmune.

 

Esquema de los diferentes tipos de vacunas de nueva generación

 

Esquema de la producción de anticuerpos monoclonales

 

Imagen de microscopía electrónica de retrovirus

 

En la actualidad, los cerdos transgénicos y especialmente los politransgénicos del futuro parecen ser la especie animal candidata