Informe VI Cromatografía en Columna

Universidad Nacional de Colombia

Laboratorio de Principios de Química Orgánica Orgánica

Cromatografía en Columna INFORME PRÁCTICA N° 5- GRUPO 2  Andrés Felipe Contreras, Yeferson Yeferson Andrés Andrés Mayorga. [email protected], [email protected] Universidad Nacional de Colomia  !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 

! O"#ETI ETI$O% •

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INICIO

 Ad"uirir el conocimiento te#rico de algunos aspectos relacionados con la cromatograf$a %aer %aer las difere diferenci ncias as entre entre alguna algunass técnic técnicas as utili&adas en el an'lisis cromatogr'fico (ograr separar una me&cla de colorantes por  cromatograf$a en capa fina.

2! PROCE& PROCE&IMI IMIENT ENTO O OPERA OPERAT TI$O )( monta*e monta*e consta de una ureta en la cual se encu encuent entra ra la fase fase esta estaci cion onar aria ia,, la mues muestr tra a se encuentra en contacto con la fase estacionaria y separada por algod#n con la fase m#vil. (a fase estacionaria esta conformada por silica y la fase m#vil principalmente por tolueno.  +. Figura +. Monta*e usado para la pr'ctica.

+

Limpiar el material a utilizar

Esperar a que la fase estacionaria este bien compactada.

Preparar la fase estacionaria en la columna

Agregar la solución problema encima de la fase estacionaria

Agregar un trozo de algodon por encima de la muestra.

Esperar a que se separen los componentes de la muestra

Agregar la fase movil encima del algodon ubicado previamente.

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ecoger los diferentes componentes que pueda tener la muestra

Evaporar el elu!ente de los componentes recogidos mediante evaporación.

Comparar con los componentes patrón para determinar que compuestos contenia la muestra

realizar cromatograf"a de capa #na para cada componente separado

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*! ANA)I%I% &E RE%U)TA&O% 5! CONC)U%IONE% $IN

+! CUE%TIONARIO i. Un colorante desconocido se piensa "ue puede ser a&ul de metileno ;c#mo se puede comproar esta suposici#n utili&ando técnicas de cromatograf$a< -or medio de la separaci#n de las diferentes fases adem's de utili&ar los disolventes "ue sean los m's adecuados para disolver este colorante, posteriormente por medio de cromatograf$a en capa fina identificando el n=mero de fases correspondiente al a&ul de metileno y, si se oserva "ue éstas fases corren igual al ser comparadas con un patr#n de a&ul de metileno, podr$a tratarse de la misma sustancia.

Figura 2. Procedimiento usado en la práctica.

'! &ATO% ( RE%U)TA&O%

3.1.

&E%ARRO))O &E )A PRÁCTICA

 Al final de la cromatograf$a en columna se pudieron separar  componentes, los cuales fueron calentados para retirar el solvente. -osteriormente se reali&o una cromatograf$a en capa fina para determinar "ue componentes conten$a la muestra. %e otuvieron los siguientes resultados -laca + Muestra o6nitrofenol

/istancia 0cm1 3,4 3,7

2f 4,5 4,53

h2f   34 37

-laca 7 Muestra p6nitrofenol

/istancia 0cm1 3,4 3,

2f 4,5 4,58

h2f   34 3

-laca + Muestra  A&oenceno m6nitroanilina

/istancia 0cm1 +,9 3,5 7,3

2f 4, 4,:8 4,35

ii.

h2f   +9 35 73 7

;>ué dee hacerse para encontrar el eluyente adecuado para una sustancia en una cromatograf$a de columna< -rimero se dee encontrar los eluyentes en los cuales la sustancia prolema se disuelva, posteriormente se dee reali&ar prueas de eluci#n en cromatoplacas para verificar con "ue eluyente o me&cla de los mismos se presenta la separaci#n de todos los componentes de la me&cla o de la mayor$a en su defecto, as$ como tamién la mayor separaci#n entre componentes.

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iii.

iv.

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(a recuperaci#n cuantitativa del producto principal de la pr'ctica, seria mas completa si se recogieran fracciones mayores o menores a 5 ml, ;por "ué< (a recuperaci#n cuantitativa del producto principal de la pr'ctica ser$a m's completa si se recogieran fracciones inferiores a 5 m(. )sto permite dos cosas la primera de ellas es "ue al reali&ar el seguimiento de la separaci#n por cromatograf$a en columna por cromatograf$as sucesivas en capa fina sepamos con mayor precisi#n en "ué fracciones se encuentran las partes mayoritarias de sustancia y as$ recuperar la mayor parte posile. (a segunda es "ue al  *untar las fracciones para reali&ar la destilaci#n y otener la sustancia como s#lido puro tengamos menor cantidad de eluyente, lo "ue permite la reali&aci#n m's r'pida y m's eficiente del producto.

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?ndi"ue algunas de las aplicaciones de la cromatograf$a de adsorci#n en columna y capa fina. (a cromatograf$a de adsorci#n, es una técnica "ue est' particularmente ien adaptada para la separaci#n de polaridad a*a y media. (a cromatograf$a de gases constituye el me*or método anal$tico ideado para la separaci#n de gases, l$"uido o s#lidos "ue pueden pasar f'cilmente al estado de vapor o transform'ndolos previamente en otros estados vol'tiles )*. Metilaci#n de 'cidos grasos en el an'lisis de aceite y a resuelto prolemas de muy dif$cil soluci#n para la "u$mica anal$tica empleada hace una década. -or eso su utili&aci#n es indispensale en %eparaciones de componentes de plantas medicinales. %eparaci#n de componentes de una s$ntesis org'nica. %eparaci#n de colorantes. %eparaci#n e identificaci#n de hioscina y de morfina. •

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

%eparaci#n de acido acético, alcohol et$lico y metil6etil cetona. %eparaci#n e identificaci#n de los compuestos intermedios de una s$ntesis org'nica )n la producci#n sintética de acetaminofén, identificaci#n de la amina de la N6acetil en&o"uinona. ?dentificaci#n de levo6alfa6acido aminoad$pico, durante la ios$ntesis de penicilina. ?dentificacion de 56nitroiso"uinolina, durante la s$ntesis de Ciprofloacina, un antii#tico.

v.

)scria una lista de eluyentes utili&ados en cromatograf$a en columna en orden de polaridad decreciente. a1 Agua. 1 Metanol. c1 Acetonitrilo. d1 Acetona. e1 )tanol. f1 M) g1 ?sopropanol. h1 Acetato de etilo. i1 BF  *1 /iclorometano. D1 Eter. l1 Bolueno. m1 eano. iliograf$a )duardo -rimo Y=fera. >u$mica Grg'nica 'sica y aplicada /e la molécula a la industria. Holumen 7. -ag +775.

vi.

Cual es la diferencia entre la cromatograf$a en capa fina y la de papel. (a cromatograf$a de capa fina se diferencia con la de columna en "ue la fase estacionaria, en la de capa fina esta constituida por una cromatoplaca de vidrio generalmente, con una capa de silicagel o al=mina. (a fase estacionaria est' constituida por un s#lido "ue se empa"ueta en una columna, normalmente de vidrio. Gtra diferencia es "ue en la cromatograf$a en columna el eluyente y la me&cla por anali&ar descienden por la columna gracias a la gravedad, y en la de capa fina el

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vii.

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eluyente recorre la cromatoplaca por capilaridad.

,! "I")IOGRAFA

?ndi"ue la toicidad de las sustancias "ue utili&# y como podr$a desecharlas.

httpsIIJJJ.cluensayos.comICienciaICromato grafia6)n6ColumnaI++:3+5.html httpsIIJJJ.cluensayos.comICienciaIC2GMAB GK2AF?A6)N6CG(UMNAILL5++.html httpsIIes.scrid.comIdocI4+5+LIC2GMABG K2AF?A6)N6CG(UMNA httpIIJJJ."uimica.unam.mI?MKIpdfI+Ltolueno .pdf  httpsIIes.JiDipedia.orgIJiDiI%erie!eluotr  Cpica

(a principal sustancia toica usada fue el tolueno, este es medianamente toico y ante su eposiciones se generan irritaciones severas y alteraci#n en el sistema nervioso. Mientras se degrada es nocivo en los ecosistemas, por lo cual para su disposici#n final el tolueno dee incinerarse.

viii.

>ue fen#menos f$sico6"u$micos intervienen en una cromatograf$a. )n primer lugar la cromatograf$a constituye un método f$sico de separaci#n en el cual los componentes a separar se distriuyen entre dos fases, una fase estacionaria de gran 'rea superficial y una fase m#vil "ue pasa a través de la primera. Un principio fundamental de la cromatograf$a se asa en las soluilidades o adsortividades diferentes de las sustancias a separar en relaci#n a las dos fases entre las cuales se deen particionar. -or esta ra&#n, se distinguen dos fen#menos muy importantes y "ue son pr'cticamente los rectores del proceso de separaci#n adsorci#n y partici#n.

i.

>ue es una serie eluotr#pica.

.

2ealice un cuadro comparativo entre la cromatograf$a de columna y capa fina. -resentada en aneos

Una serie elutropica es una lista de compuestos ordenados seg=n su poder de eluci#n 0desde el menos polar hasta el m's polar1 para un adsorente dado. )stas series son de gran importancia ya "ue estas son el criterio de selecci#n del compuesto a utili&ar en la separaci#n cromatogr'fica.

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ANE.O%

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Fase estacion aria Fase móvil Fuerza impulsor a

Cromatografía en columna Part"culas #namente divididas de s"lice o al%mina L"quido

Cromatografía en capa na &el de s"lice o al%mina

&ravedad' polaridad' adsorción desorción.

Polaridad' adsorción' desorción.

L"quido