Informe N°3 - Lípidos

Informe N°3: Reconocimiento de Lípidos Muestra: Aceite de Oliva marca Banquete

Alumnas:

Silvana Abarza Lucila Vargas Daniela Zeballos

Curso:

382

Asignatura: Laboratorio de Bioquímica Grupo:

N°3

Índice Página

1.- Resumen_________________________ Resumen__________ ________________________________ ___________________________ __________

3

2.- Introducción________________ Introducció n_______________________________ _______________________________ ___________________ ___

4

3.- Parte experimental_________________ experimental_ _______________________________ ____________________________ _____________

7

4.- Resultados_____________________ Resultados_____ ______________________________ ______________________________ ________________

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5.- Discusión______________________ Discusión________ ______________________________ ______________________________ ______________

10

6.- Conclusiones y recomendaciones_______________ recomendaciones ______________________________ __________________ ___

11

7.- Tablas_________________________ Tablas__________ ________________________________ ______________________________ _____________

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8.- Figuras________________________ Figuras________ ______________________________ ______________________________ ________________

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9.- Cromatogramas_________________ Cromatogramas _________________________________ ______________________________ ______________

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10 Bibliografía______________ Bibliografí a______________________________ ________________________________ _____________________ _____

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11 Apéndice______________________ Apéndice________ _______________________________ ________________________________ _______________

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12 Anexos ________________________________ _________________ ______________________________ _______________________ ________

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Resumen

En el presente informe se da cuenta de lo realizado en el laboratorio de bioquímica, este consiste en analizar analizar una muestra muestra de aceite aceite de oliva marca Banquete con el fin de determinar las propiedades de los lípidos mediante análisis cualitativos y cuantitativos. Primero deter determin minam amos os lípid lípidos os sapon saponifi ificab cables les en la muestr muestra, a, lo cual cual nos dio un resultado positivo ya que se pudo observar una buena separación y distinción de las capas, glicerina más agua en la capa inferior (capa clara), jabón en la capa del medio y en la capa superior el aceite que no reaccionó (con NaOH) al procedimiento. Luego se tomo otra cantidad de aceite y se sometió a un largo proceso, por el método de esterificación de acidos grasos con metanol-ácido sulfúrico, para extraer así los ácidos grasos libres. De estos se recuperaron 30,13% Posteriormente se realizó la obtención de esteres metílicos mediante dos métodos: por  esterific esterificació ación n utilizan utilizando do metanol metanol-ácid -ácido o sulfúric sulfúrico o y por transteri transterificac ficación ión utilizan utilizando do metan metanolol-hid hidróx róxido ido de potasi potasio o 2N. 2N. En el primer primero o se recupe recuperó ró 92,38% de esteres metílicos dando dando un rendimiento de de la esterificación esterificación con respecto respecto al valor teórico teórico de 87,15 % Los acidos grasos recuperados anteriormente anteriormente se llevaron a un análisis por  cromatografía de gases gases para determinar la composición composición y los tipos de ácidos ácidos grasos que se encontraban en la muestra de aceite de oliva banquete. Encontrando los siguientes ácidos grasos: 1.- Ácido Linoleico 2.- Ácido Oleico 3.- Ácido Palmítico

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Introducción -Lípidos: Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y generalmente también oxígeno; pero en porcentajes mucho más bajos.  Además pueden pueden contener también también fósforo, nitrógeno nitrógeno y azufre. Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que sólo tienen en común estas dos características: 1. Son Son inso insolu lubl bles es en en agua agua 2. Son solubles solubles en disolven disolventes tes orgánicos orgánicos,, como éter, clorofor cloroformo, mo, benceno, benceno, etc. Una Una carac caracter teríst ística ica básic básica a de los los lípid lípidos, os, y de la que deriv derivan an sus princi principal pales es propiedades biológicas es la hidrofobicidad. La baja solubilidad de los lípidos se debe a que su estructura química es fundamentalmente fundamentalmente hidrocarbonada (alifática, alicíclica o aromática), con gran cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces es 100% covalente y su momento dipolar es mínimo. El agua, al ser una molécula muy pola polar, r, con con gran gran faci facililida dad d para para form formar ar puen puente tess de hidr hidróg ógen eno, o, no es capa capazz de interacci interaccionar onar con estas moléculas. moléculas. En presenci presencia a de molécula moléculass lipídica lipídicas, s, el agua agua adopta en torno a ellas una estructura muy ordenada que maximiza las interacciones entre las propias moléculas de agua, forzando a la molécula hidrofóbica al interior de una estructura en forma de jaula, que también reduce la movilidad del lípido. Todo ello supone una configuración de baja entropía, que resulta energéticamente desfavorable. desfavorable. Esta disminución de entropía es mínima si las moléculas lipídicas se agregan entre sí, e interaccionan mediante fuerzas de corto alcance, como las fuerzas de Van der  Waals. Este fenómeno recibe el nombre de efecto hidrofóbico. Los lípidos son constituyentes importantes de la alimentación (aceites, manteca, yema de huevo), representan una importante fuente de energía y de almacenamiento, funcio funcionan nan como como aisla aislante ntess térmic térmicos, os, compo componen nentes tes estruc estructur turale aless de membra membranas nas bioló biológic gicas, as, son precur precursor sores es de hormon hormonas as (sexua (sexuale les, s, cortic cortical ales) es),, ácidos ácidos bilia biliares res,, vitaminas etc. -Ácidos grasos: Los ácidos grasos son moléculas formadas por una larga cadena hidrocarbonada de tipo lineal, y con un número par de átomos de carbono. Tienen en un extremo de la cadena un grupo carboxilo (-COOH). Estos son los componentes orgánicos (pequeñas moléculas que se unen para formar largas cadenas) de los lípidos que proporcionan energía al cuerpo y permiten el desarrollo de tejidos. Se conocen unos 70 ácidos grasos que se pueden clasificar en dos grupos: •

•

Los ácidos grasos saturados sólo tienen enlaces simples entre los átomos de carbono. Son ejemplos de este tipo de ácidos el mirístico (14C);el palmítico (16C) y el esteárico (18C) . Los ácido ácidoss grasos grasos insat insatura urados dos tienen tienen uno uno o vario varioss enlac enlaces es doble dobless en su cadena y sus moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los lugares dónde aparece un doble enlace. Son ejemplos el oléico (18C, un doble enlace) y el linoleíco (18C y dos dobles enlaces).

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-Aceite de oliva: El aceite de oliva es un aceite vegetal de uso principalmente culinario que se extrae del fruto recién recolectado del olivo (Olea europaea) denominada oliva o aceituna. aceituna . *Composición de los aceites de oliva El rendi rendimie miento nto de aceite aceite de la aceitu aceituna na es muy alto, depend dependie iendo ndo de la variedad, el porcentaje puede oscilar entre un 25 y un 30% de aceite en cada aceituna. Las aceitunas poseen un glucósido que le proporciona un sabor amargo y que debe eliminarse mediante un macerado adecuado, en el caso del aceite de oliva este compuesto se elimina de forma natural durante el prensado en la almazara. De los componentes químicos que posee el aceite son en su mayoría ácidos grasos, grasos, como son el ácido oleico (casi un 75%), siendo el siguiente el ácido palmítico, ácido linoleico linoleico . El aceite aceite de oliva oliva posee una cantid cantidad ad modera moderada da de Vitamina Vitamina E (principalmente α-Tocoferol) y a pesar de poseer una baja cantidad de γ-Tocoferol el aceite de oliva es estable. [8] Los componentes menores del aceite no se eliminan debido a que rara vez es refinado: escualenos, escualenos , esteroles, alcoholes triterpenoides, clorofila, clorofila, carotenoides . No obstante se pueden resumir que existen en el aceite de oliva tres grandes grupos de sustancias, a saber: •

•

•

Fracción saponificable: saponificable: comprende el 98-99 % en el total de su peso. Está formada por los triglicéridos, ácidos grasos libres y fosfolípidos. fosfolípidos. Esta fracción está formada por un 75,5 % de ácido oleico (C18:1), un 11,5 % de ácido palmítico (C16:0) y por un 7,5 % de ácido linoléico (C18:2), además de otros ácidos grasos en concentración de trazas, como caféico, caféico, margárico, margárico, esteárico, etc. Fracción insaponificabl insaponificablee: const onstiituye tuye el 1,5 % en el tota totall de su peso. so. Compr Comprend ende e los hidroc hidrocarb arburo uross como como el hexenal, hexenal , resp respon onsa sabl ble e del del gusto herbáceo de un aceite de aroma frutado, alcoholes, alcoholes , esteroles y tocoferoles. tocoferoles. Otros componentes menores: menores: -Polifenoles: Polifenoles : relacionados con el sabor del aceite -Pigmentos clorofílicos y carotenoides : relacionados con el color que puede poseer el aceite. -Compuestos volátiles: responsables del aroma del aceite.

-Saponificación: Saponificación es una reacción química entre un ácido graso (o un lípido saponificable, saponificable, portador de residuos de ácidos grasos) y una base o álcali, álcali , en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho ácido y la base. Estos compuestos tienen la particularidad de ser antipáticos, es decir tienen una parte polar y polar  y otra apolar  (o no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los  jabones son sales de ácidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante saponificación. saponificación.

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-Esterificación: Esterificación, Esterificación, es la reacción entre un alcohol y un ácido, en presencia de ácido sulfúrico como catalizador , catalizador , y mediante la cual se obtienen un éster y agua. Es la reacción inversa de la saponificación . Un ácido ácido carboxíli carboxílico co y un alcohol forman forman un éster  en una una reac reacci ción ón de ester esterifi ificac cació ión n cuando cuando se calie calienta ntan n juntos juntos en presen presencia cia de un catali catalizad zador or ácido, ácido, genera generalm lment ente e el ácido ácido sulfúr sulfúrico ico.. La esteri esterific ficaci ación ón es una reacción reacción de sustituci sustitución ón nucleófila en la que el agente nucleofílico es el alcohol, de manera que la molécula de agua se origina por unión del grupo hidróxido, -OH, del ácido y el hidrógeno, H, del alcohol. La extensión de la esterificación es mayor para un alcohol primario que para un alcohol secundario y para éste mayor que para un alcohol terciario. Como se trata de una reacción reversible, la concentración de éster se puede aumentar incrementando las concentraciones concentraciones del ácido o el alcohol, o disminuyendo la concentración del agua formada mediante un agente deshidratante. -Transesterificación: La transesterificación permite transformar un éster en otro sin necesidad de pasar por el ácido carboxílico correspondiente. correspondiente. Hay dos tipos de reacciones: •

•

En medio ácido: se utiliza un alcohol en medio ácido. El grupo R–O - del alcohol actúa como nucleófilo y ataca al carbono del éster, desprendiéndose el grupo O–R, formando un nuevo éster y un nuevo alcohol. En medio básico: se utiliza un alcohol en medio básico. El -O-H ataca al carbono del ácido, formando una especie intermedia muy inestable. El grupo O–R se separa, y se forma un ácido carboxílico que es rápidamente atacado por el grupo Et–O - formando el nuevo éster.

Cabe destacar que el proceso análogo a la transesterificación es la hidrólisis.

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Parte experimental Materiales: Saponificación: -

Baño María- Mechero

-

Gradillas con tubos de ensayo (3)

-

Vaso de precipitado de 250 ml

-  Aceite vegetal (100 (100 ml) -

Solución de Sudan III en gotario

-

Solución de NaOH 20%

-

Éter de petróleo o cloroformo

Esterificación ácidos grasos: -

Metanol técnico

-

 Ácido clorhídrico clorhídrico 4 N

-

Solución saturada de cloruro de sodio

-

Naranja de metilo, indicador 

Esteres metílicos: •

Metanol anhidro.

sulfúrico. •  Ácido sulfúrico. •

Solución saturada de cloruro de sodio

•

Rojo de metilo, indicador 

•

Éter de petróleo

•

Sulfato de sodio anhidro.

•

Nitrógeno.

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Procedimiento Saponificación: Saponificación: 1. Colocar Colocar en un un tubo de de ensayo ensayo 2cc de aceit aceite e vegetal vegetal y 2cc de de una soluci solución ón de hidróxido sódico al 20%. 2. Agitar Agitar enérgica enérgicamente mente y coloca colocarr el tubo al baño baño María María de 20 a 30 minutos minutos.. 3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior  clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla superior  amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabón formado. Procedimiento Esterificación ácidos grasos: a) Se pesan pesan aproximadamente aproximadamente 2,5 grs. grs. De aceite vegetal, en en matraz matraz de reflujo. b) Se agregan agregan 20 ml de solució solución n agua: metanol metanol-hid -hidróxi róxido do de sodio sodio al 50% p/v y se agita. c) Se refluja refluja durante durante 60 minutos minutos.. Se debe tomar tomar las precaucio precauciones nes necesari necesarias as para tener la seguridad de que la reacción de saponificación es completa. d) Si fues fuese e nece necesa sari rio o dete determ rmin inar ar la mate materi ria a insa insapo poni nififica cabl ble, e, se tras trasva vasi sija ja a embudo de decantación, el contenido del matraz de reflujo, para extraer dicha materia, de acuerdo al método de extracción de la materia insaponificable. insaponificable. e) A los jabones, jabones, que contie contienen nen o se han extraído extraído la materia materia insaponi insaponificab ficable, le, se agregan 50 ml de agua destilada y gotas del indicador naranja de metilo. f) Se acidi acidififica ca con ácido ácido clorh clorhíd ídri rico co 4 N, poco poco a poco poco y con con agit agitac ació ión, n, hasta hasta permanencia del color rosado. g) Se deja deja decantar, decantar, hasta hasta separ separació ación n clara clara de dos dos fases. fases. h) Lueg Luego o se extr extrae aen n los los ácid ácidos os gras grasos os con con 2x10 2x10 ml. ml. de éter éter de petr petról óleo eo,, desechando la fase acuosa inferior. i) Se evapor evapora a el solven solvente te en atmósf atmósfera era de de nitrógen nitrógeno o y a baño baño maría. maría. Se Se verifican verifican los ácidos grasos con papel tornasol.  j) Se enfría a temperatura temperatura ambiente ambiente y se pesa.

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Procedimiento ésteres metílicos: a) Se pesan pesan aproxi aproxima madam damen ente te 0,5 grs. grs. de ácidos ácidos grasos grasos de aceite aceite vegeta vegetal,l, en matraz de reflujo. b) Se agrega agregan n 10 ml de metan metanol ol anhidro anhidro y 1 ml de ácido ácido sulfúri sulfúrico co concen concentra trado do,, gota a gota, con agitación. c) Se lleva lleva a ebullición ebullición y se refluja refluja durante durante 30 minutos, minutos, en placa placa eléctrica eléctrica a baño maría. d) Se enfría enfría a tempe temperat ratura ura ambie ambiente nte y se transfi transfiere ere a embu embudo do de decant decantaci ación, ón, agregando luego 30 ml de solución saturada de cloruro de sodio. e) Se extraen extraen los los esteres esteres metílicos metílicos con con 2 x 10 ml. de éter éter de petróleo. petróleo. f) Se lava lava el extrac extracto to de éter éter con porci porciones ones de de agua agua destilad destilada a hasta que el agua de lavado de la reacción de neutra, que se verifica con indicador indicador rojo de metilo. g) Se seca el extracto extracto etére etéreo o con sulfato sulfato de sodio sodio anhidro, anhidro, se filtra filtra y se evapora evapora el solvente sobre atmósfera de nitrógeno a baño maría. h) Se enfría enfría a temperatu temperatura ra ambien ambiente te y se se pesa. pesa. Cromatografía La muestra obtenida después del proceso de esterificacion esterificacion de acidos grasos y también la obten obtenida ida por por transt transteri erific ficac ación ión,, fueron fueron llevad llevadas as a cromat cromatog ograf rafía ía de gases gases para para identificar los compuestos grasos de esta. Condiciones Condiciones cromatograficas: cromatograficas: 

Se uso la columna BPX- 70: 70% de ciano y 30% de polidimetilsiloxano



Propano 150°C x 2 min



Paper: 10°C/min



T° final: 210°C

El cyano es susceptible a dañarse con oxígenos, humedad o HCl en comparación a otras fases de silicona. Rango de temperatura de funcionamiento: funcionamiento: subambient a 25 ° C. Los esteres metílicos sales de acuerdo a P.M en el caso de los ácidos grasos saturados, y en los insaturados influye la polaridad. polaridad. Los insaturados salen después que los saturados del mismo peso molecular.

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Resultados En el primer procedimiento realizado, se verifico que el aceite que se tiene de muestra es saponificable. Debido a que una vez que se agrego el alcáli (NaOH) y luego de esperar 30 minutos nos dio un resultado positivo, jabón Con respecto a los resultados resultados obtenidos en las demás demás experiencias experiencias realizadas, como lo son: la esterificacion de ácidos grasos con metanol-acido sulfúrico, la obtención de ester esteres es metíli metílicos cos por esteri esterific ficaci acion on usando usando metano metanol-á l-áci cido do y la transt transteri erific ficaci ación ón utilizando metanol-hidroxido de potasio 2N para la obtención de esteres metílicos se ven reflejados en la tabla N°1 presente en la sección tablas de este informe.

Discusión Con respecto a los rendimientos obtenidos experimentalmente se puede notar que el rendimiento del método basado en esterificación de los ácidos grasos es mejor que el rendimiento observado en la recuperación de los ácidos grasos, lo que nos lleva a decir que es recomendable usar la esterificación de los ácidos grasos para luego verificar cuantitativamente los esteres en cromatografía gaseosa, que seria un buen método y de exactitud mucho mayor que la de recuperación de ácidos grasos. De los componentes químicos que posee el aceite de oliva son en su mayoría ácidos grasos, como son el ácido oleico (casi un 75%), siendo el siguiente el ácido palmítico, ácido linoleico. Como se puede observar en el primer cromatograma aparecieron 3 peak, los cuales corresponden a los tres principales ácidos grasos que contiene el aceite de oliva. Luego, en el siguiente cromatograma de transterificacion, aparecieron 5 compuestos, pero solo se consideran tres de ellos que gráficamente son muy parecidos al anterior  cromatograma. Como Como no hubo hubo patrón patrón para para defin definir ir que que acido acido graso graso apare apareci ció ó primer primero, o, según según lo averiguado el orden sería: 1.- Ácido Linoleico 2.- Ácido Oleico 3.- Ácido Palmítico Este orden viene dado por el grado de saturación y la longitud de la cadena del resto acilo lo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto más corta e insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa. Los ácidos grasos insaturados tienen uno o varios enlaces dobles en su cadena y sus moléculas presentan codos, con cambios de dirección en los lugares dónde aparece un doble enlace, lo que le da el grado de instauración.

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El ácido linoleico posee una configuración (18:2Δ9,12 [donde el 18 es el número de átomos de carbono, el 2 número de dobles enlaces y las cifras sucesivas al Δ “delta” la posición de los dobles enlaces]) es el precursor de numerosos derivados, que se forman en reacciones de elongación, de saturación o ambas.  Así, el ácido oleico se designa 18:1(9); el número 18 nos indica el número de carbonos, el 1 tras los dos puntos, el número de dobles enlaces y el 9 entre paréntesis que este doble enlace comienza en el 9º carbono (está entre el 9º y el 10º), contando desde el extremo –COOH, El ácido palmítico es un ácido graso saturado de cadena larga, formado por dieciséis átomos de carbono (C16:0). Es un sólido blanco que se licúa a unos 63,1 °C. Su fórmula química es CH3(CH2)14COOH.

Conclusión

Columna BPX-70 longitud 25mm, diámetro interno entre 0,25mm, espesor de la fase entre 0,25 um, fase estacionaria-cianopro estacionaria-cianopropilsilicona pilsilicona.. Según los catálogos catálogos Supelco y Chormpack las columnas CP. Sil 88, BPX-70, BPX-70, SP-2340 (entre otras) son similares. similares. Por  otra parte entendemos que el orden de salida de los componentes en el cromatograma no debe debe influi influirr en su determ determin inaci ación ón cuanti cuantitat tativa iva,, siend siendo o lo fundam fundament ental al que que la separación de los componentes sea nítida, independientemente independientemente de la marca comercial de la columna utilizada. 70% de polidimetilsiloxano, 30% ciano, esta es una columna polar equivalente a SPB2330 Los esteres esteres metíl metílico icoss salen salen de acuerd acuerdo o al grado grado de satura saturació ción n y la longi longitud tud de la cadena del resto acilo determinan esencialmente las propiedades de la grasa: cuanto más corta e insaturada es la cadena del resto acilo, más fluida y volátil es la grasa. Los ácidos grasos insaturados son esenciales para el correcto funcionamiento de nuestro cuerpo y deben ser aportados en cantidades suficientes con los alimentos. Su falta se asocia con las enfermedades coronarias y un elevado nivel de colesterol.

Recomendaciones: - Contar con un equipo preparativo preparativo de técnicas modernas y de mayor capacidad capacidad - Aumentar la sección y/o la longitud de la columna - Utilizar trampas de condensación con flujo turbulento de gas portador con gradiente de temperatura o condensadores electroestáticos, para aumentar la eficiencia de la recuperación. - Optimizar, además de presión y temperatura otras condiciones condiciones cromatografías - Trabajar siempre con las mismas condiciones condiciones cromatograficas (patrón y muestras) 11

Tablas

Tabla N°1: Resultados de la experiencia. Proceso

Masa inicial

Masa recuperada

% Recuperación

Obtención de ácidos grasos

2,510 gr.

0,756 gr.

30,13%

Obtención de esteres metílicos

0,756 gr.

0,6986 gr.

92,38%

Esterificación

0,756 gr.

0,6986 gr.

87,15%

Tabla N°2: Ácidos N°2:  Ácidos grasos en la muestra usando usando tablas Lilia Lilia masson (% esteres esteres metílicos)

 Ácidos Grasos

Ac. Oliva

Ac. Maravilla

C16:0 Ac. Palmítico

12,8

6,8

C16:0 Ac. Esteárico

2,1

4,2

C16:1 Ac. Palmitoleico

1,7

----

C18:1 Ac. Oleico

68,7

19,7

C18:2 n-6 Ac. Linoleico

13,9

69,3

C18:3 n-3 Ac. Linolénico

0,8

----

Tabla N°3: Datos de la columna utilizada

12

Va r ia bl e L ar go (L) Fa se es ta ci on ar i a I . D. Es pe sor del f i l m Te mp er a tu ra in i ci al Tiempo inicial R at e Te mp er a tu ra f i nal Ti e mpo f i nal

V a l o r m ed i d o 25 m BP X- 70 0. 2 5m m 0. 2 5 nm 15 0 ° C 2,00 min 5, 0 d eg / min 210 ° C 5, 0 m i n

Tabla N°4: Datos de inyección de esteres metílicos obtenidos por esterificación Esterificación Inyección

1 ul

Temperatura inyector B

220ºC

Temperatura inyector A

250ºC

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Figuras

Figura N°1: Reacción de saponificación

Figura N°2: Reacción de esterificación

CH2-COO-R

R-COO-CH 3 CH2-OH





CH-COO-R

!

+ 3 CH3OH

OH −

←   →



R”-COO-CH3 metanol



CH-OH 

CH2-COO-R” Grasa

R -COO-CH3 !

mezcla de ésteres Metílicos



CH2-OH glicerol

Figura N°3: Reacción de transesterificación

Figura N°4: Aceite de oliva Banquete. Muestra.

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Cromatogramas

Cromatograma Cromatograma N°1: Esterificación

15

Cromatograma Cromatograma N°2: Transterificación Transterificación

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Bibliografía

1.- Retamales, J. (1980) Estudio comparativo de métodos de obtención de ácidos grasos y esteres metilicos de ácidos grasos a partir de aceites vegetales 2.- Lilia Masson (1985) materias grasas de consumo habitual y potencial en chile 3.- (2007) Reglamento Sanitario de los Alimentos 4.- Página web, www.wikipedia.org . LA última vez que esta pagina web se modifico fue el 8 de junio del año 2010

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Apéndice

•

Cálculo de recuperación de ácidos grasos.

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m 1): 2,510 gr. Masa de ácidos grasos obtenidos (m 2): 0,7562 gr.

% Ra = m2 x 100 m1

% Ra = 0,7562 x 100 2,510 % Ra = 30,13%

•

Cálculo de recuperación de esteres metilicos.

Masa inicial de aceite oliva y maravilla (m 1): 0,7562 gr. Masa de ácidos grasos obtenidos: 0,6986 gr.

% Em = m2 x 100 m1

% Em = 0,6986 x 100 0,7562 % Em = 92,38%

18

•

Cálculo de rendimiento de la esterificación con respecto al valor teórico.

% Rendimiento:

% Rendimiento: Rendimiento:

m

2

1,06 * m1

x 100

0,6986

x 100

1,06 x 0,7562

% Rendimiento:

87,15 %

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 Anexo

Según el RSA: RSA: Párrafo I. Disposiciones Generales Artículo Artículo 247 247..- Aceites y grasas son los triglicéridos de ácidos grasos comercialmente puros, obtenidos de materias primas sanas y limpias, libres de productos nocivos derivados de su cultivo o manejo, o de los procesos de elaboración. Artículo Artículo 248 248..- El contenido de humedad y materias volátiles, no deberá ser mayor a 0,2% en los aceites comestibles y no más de 0,5% en las mantecas o grasas. No deberán contener más de 0,25% de acidez libre, expresada como ácido oléico y no más de 100 ppm de jabón. A la fecha de elaboración, el límite máximo de peróxidos será de 2,5 meq de oxígeno peróxido/kg. de grasa y 10 meq de oxígeno peróxido/kg. de grasa en su período de vida útil y almacenados de acuerdo a lo indicado en la rotulación. rotulación. No deberán presentar sus características organolépticas alteradas. Se exceptúan de esta disposición, respecto a la acidez libre, el aceite de oliva y la manteca de cacao, cuya acidez máxima será de 1,5% expresada en ácido oléico y la manteca de cerdo y grasa bovina cuya acidez máxima será 0,8% expresado en ácido oléico.  Asimismo, se exceptúa de esta disposición, respecto del índice de peróxido, el aceite de oliva extra virgen, cuyo límite máximo será de 20 meq. de oxígeno/k de aceite. Artículo 249.249.- No se consideran aptos para el consumo los alimentos grasos que estén rancios, alterados química y/o microbiológicamente, que contengan materias extrañas, restos de tejidos vegetales o animales, restos de solventes, aceites de origen mineral y aditivos no autorizados por el presente reglamento. Artículo 250.250.- La distribución y comercialización de los aceites, mantecas y grasas come comest stib ible les, s, debe deberá rá real realiz izar arse se en sus sus enva envase sess orig origin inal ales es,, proh prohib ibié iénd ndos ose e su fraccionamiento en el punto de venta. Esta exigencia se hará efectiva 12 meses después de la entrada en vigencia del presente reglamento. reglamento. Párrafo II. De los Aceites y Mantecas o Grasas de Origen Vegetal Artícu Artículo lo 251 251..- Aceite Aceitess comes comestib tibles les de origen origen vegeta vegetall son los los obten obtenido idoss de los siguientes frutos o sus partes o de semillas oleaginosas: algodón, cártamo, girasol o maravilla, gérmen de maíz, maní o cacahuate, oliva, pepa de uva, raps o colza, sésamo o ajonjolí, soja o soya, avellana chilena, arroz, pepa de tomate, germen de trigo, linaza, mosqueta y otros autorizados por el Ministerio de Salud, los que deberán ser de consistencia fluida a la temperatura de 15°-C. Artículo 252.252.- Los aceites no deberán contener un porcentaje de ácido erúcico mayor  de 5%. Artículo 253.253.- Mantecas o grasas comestibles de origen vegetal, son los alimentos grasos vegetales de consistencia sólida o semisólida a la temperatura de 15°-C, obteni obtenidas das de los los siguie siguiente ntess frutos frutos,, sus partes partes o semill semillas: as: cacao cacao,, coco, coco, coco coco del del Paraguay, babassú, palma, palmiste y otros autorizados por el Ministerio de Salud.

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Artículo Artículo 254 254..- Las constantes físicas y químicas de los aceites y mantecas de origen vegetal deberán corresponder a las indicadas en la tabla I. La composición de ácidos grasos determinados por cromatografía gas - líquido, señaladas en la tabla III, se considerarán considerarán como de referencia.

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