INFORME MICROBIOLOGIA 4

Elaboración del Patrón de McFarland y Medición de Concentración Bacteriana por Turbidimetria I. 

2.

3.

RESULTADOS

Complete la tabla con los valores de ABS experimental (ver Anexos) Grafique las absorbancias teóricas y experimentales frente a las UFC respectivas. (ver anexos)

IV.

III.

Bioingeniería (2013). Unidad 2: Biorreactores y su Aplicación Online] Disponible en: https://sites.google.com/site/bioingenieriauv15/unidad-2biorreactores-y-su-aplicacion

[2]

Microbiología de Alimentos. Tema 12. Métodos Generales de Análisis Microbiológico de Alimentos II. Análisis de los Microorganismos Totales. [Online]. Disponible en: http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia %20general/12-metodos%20de%20recuento.htm

[3]

D. Elizabeth Turcott Cervantes, Blanca E. Rivera Chavira, Norma Herrera Díaz, G. Virginia Nevárez Moorillon, Maribel Díaz García, Luis A. Lozoya Márquez, Germán Cuevas Rodríguez. “Desinfección Química para los Residuos Peligrosos Biológicos-Infecciosos” Centro de Investigación en Materiales Avanzados S.C.; Universidad Autónoma de Chihuahua 2004.

V. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

CONCLUSIONES

En la gráfica elaborada se puede observar que presenta escalones ya que los valores no representan una función lineal o línea recta esto se debe a la obtención de valores muy diferentes en obtención de soluto; la grafica se tiene como referencia el nivel de absorbancia que posee la solución para identificar la cantidad de bacterias en una solución.



La cuantificación de los microorganismos de la muestra problema se realiza determinando su densidad óptica y graficándolo con su respectivo UFC para así determinar la cantidad de microorganismos en la muestra problema.



Se pudo observar que dependiendo de la concentración y la longitud a la cual se le

BIBLIOGRAFIA

[1]

Determine la concentración de bacteria (UFC) presentes en la muestra completa.

y=mx+b x=y-b/m x= 0.3978-0.03/0.3411313 x= 1.078 RTA: 1 UFC presente en la muestra completa.



aplique el rayo, puede alcanzar un punto máximo de absorción según esto la longitud y la absorbancia son proporcionales hasta alcanzar el punto máximo y de allí empieza a descender. Según la concentración varia la absorbancia del compuesto.

Establecer la cantidad de microorganismos de una muestra mediante el método turbidimetrico. II.

1.

OBJETIVOS

1.

¿En qué consiste la Ley de Beer Lambert?

RTA: También conocida como ley de Beer o ley de Beer-Lambert-Bouguer es una relación empírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material atravesado. La ley de Beer fue descubierta independientemente (y de distintas maneras) por Pierre Bouguer en 1729, Johann Heinrich Lambert en 1760 y August Beer en 1852. En forma independiente, Wilhel Beer y Johann Lambert propusieron que la absorbancia de una muestra a determinada longitud de onda depende de la cantidad de especie absorbente con la que se encuentra la luz al pasar por la muestra. La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad saliente después de que en dicho medio se produzca

absorción. La relación entre ambas intensidades puede expresarse a través de las siguientes relaciones: Para líquidos:

experimentalmente. La ley tiende a no ser válida para concentraciones muy elevadas, especialmente si el material dispersa mucho la luz. La relación de la ley entre concentración y absorción de luz está basada en el uso de espectroscopia para identificar sustancias. 2.

Para gases:

Donde: , son las intensidades saliente y entrante respectivamente. , es la absorbancia, que puede calcularse también como: Es la longitud atravesada por la luz en el medio, Es la concentración del absorbente en el medio. Es el coeficiente de absorción,

Es el coeficiente de absorción: Es la longitud de onda de la luz absorbida. Es el coeficiente de extinción. La ley explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia, así como también entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos y α, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz transmitida. Las unidades de c y α dependen del modo en que se exprese la concentración de la sustancia absorbente. Si la sustancia es líquida, se suele expresar como una fracción molar. Las unidades de α son la inversa de la longitud (por ejemplo, cm-1). En el caso de los gases, c puede ser expresada como densidad (la longitud al cubo, por ejemplo, cm-3), en cuyo caso α es una sección representativa de la absorción y tiene las unidades en longitud al cuadrado (cm2, por ejemplo). Si la concentración de c está expresada enmoles por volumen, α es la absorbencia molar normalmente dada en mol cm-2. El valor del coeficiente de absorción α varía según los materiales absorbentes y con la longitud de onda para cada material en particular. Se suele determinar

Escriba dos usos o utilidades del Patrón o Curva de Mc Farland en investigación con objetivos ambientales.

RTA: Este método además de ayudar a la cuantificación de bacterias en una muestra de agua, lo cual en ingeniería ambiental se usa mucho para conocer la calidad de agua, también se puede utilizar para el recuentro de poblaciones bacterianas presentes en un biorreactor que son los medios de cultivo optimizados empleados para la producción de sustancias a gran escala. Por otro lado, la curva de Mc Farland también se emplea para el control de residuos sólidos peligrosos, de tal manera que al preparar una muestra de inoculo bacteriano a partir de la cepa original obtenida como referencia, el inoculo se incuba 24 horas a 37ºC y se ajusta a un tubo de Nefelómetro de Mc Farland. 3.

¿Qué es un espectrofotómetro? ¿Cuál es su principio de funcionamiento y qué utilidad tiene en un laboratorio de análisis?

RTA: Es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz de radiación electromagnética (REM), comúnmente denominado luz, separándolo en facilitar la identificación, calificación y cuantificación de su energía. Su eficiencia, resolución, sensibilidad y rango espectral, dependerán de las variables de diseño y de la selección de los componentes ópticos que lo conforman. El funcionamiento de un espectrofotómetro consiste básicamente en iluminar la muestra con luz blanca y calcular la cantidad de luz que refleja dicha muestra en una serie de intervalos de longitudes de onda. Es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas.

Fig. 1 Espectrofotómetro y sus partes