Informe Efecto de La Concentracion Del Sustracto Calcular Km (2)

"Año del Diálogo y Reconciliación Nacional"

TRA B AJ O E NCAR GA DO:

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FE CHA DE ENTR EG A:12/ A:12/08/2018 2018

INFORME INFORME DE E FEC TO DE LA CONCENTRACION DEL SUSTRATO CA LCULO K M

DOCENTE: 

HENRY ROBLES CUEVA

FAC ULTAD: ULTAD: ING  – MINAS  MINAS 

ING. QUIMICA QUIMICA VII CIC LO  – FILIAL ( TALAR TALAR A)

 A L UMNA UMN A :   A P ON TE G A R C IA LI S S E T PA P A OL A

 2018

C OD IG O: 3632015006

INTRODUCIÓN

En el presente experimento de la practica investigamos el efecto de la concentración del sustrato calcular km.

Es estudiar la influencia de la concentración del sustrato sobre una reacción y la velocidad de una enzima en cual en las reacciones no catalizadas, velocidad de reacción es proporcional a la concentración de cada uno de los reactantes.

Las reacciones catalizadas por enzimas son algo diferente, cuando se mide el efecto de la concentración del sustrato de la velocidad de reacción, se encuentran que hay muy bajas concentraciones de sustrato.

Mediciones cuantitativas de la actividad enzimática, son necesarias para comprender su función biológica y para determinar la cantidad presente en muestras biológicas.

Unas de la más efectivas es asumir que los sustratos y no los productos están presente, de modo que la reacción transcurre solo en una dirección se puede hacer estimaciones de la velocidad máxima.

Km es el efecto que es una constante de Michaelis es útil que significa la afinidad que tiene la enzima por un sustrato este es uno de los parámetros que frecuentemente se determinan en las enzimas.

METODOLOGIA

MATERIAL:

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Reactivo de Trabajo

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Glucosa Oxidasa

I

II

III

IV

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

10

20

30

40

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Homogenizar  Incubar a 37 C por un tiempo de 10 minuto

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(G) = F X Absorbancia

200 mg/ dl

Landa = 505 Pipeteamos con una bombilla y una pipeta 5 ml extraer el RT con 1 ml cada uno de los tubos de ensayo lo depositamos

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Luego utilizamos la glucosa oxidasa con una micropipeta en 1 tubo colocamos (10 ul) en el 2 tubo (20 ul) 3 tubo ( 30 ul) 4 Tubo ( 40 ul)

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Llevar al equipo de fotocolorímetro usando filtro de 505 nm determinar la actividad enzimática en cada uno de los tubo con las lecturas de la curva de calibración que será proporcionada.

RESULTADOS

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Mayor KM menor afinidad ( invertasa)

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Menor Km mayor afinidad ( Sacarosa)

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En el orden 1 la etapa exponencial se forma producto aumenta el sustrato y la velocidad de la concentración.

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En el orden 2 mayor sustrato la velocidad aumente la mitad de la exponencial no hay proporcionalidad.

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En el orden 3 punto de saturación es independiente del sustrato y no hay producto.

DISCUSION 1. Obtención de la absorbancia  Absorbancia 10 = 0.29  Absorbancia 20 = 0.50  Absorbancia 30 = 0.59  Absorbancia 40 = 0.56

 Aplicando la Formula  Abs 10 = 200 mg x 0.29 = 0.58 mg / dl  Abs 20 = 200 mg x 0.50 = 100 mg / dl  Abs 30 = 200 mg x 0.59 = 118 mg / dl  Abs 40 = 200 mg x 0.56 = 112 mg / dl

Nota : Con respeto a la gráfica utilizaremos tres absorbancia

CONCLUSIONES

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Estudiar la influencia de la concentración del sustrato sobre la velocidad de una reacción enzimática, para la cual se utilizará la enzima glucosa oxidasa. Verificar los resultado de la absorbancia aplicando la ecuación mediante la gráfica en la cual hallaremos en Km.

 Anexos

Muestras de 4 tubos con reactivos

Incubar a 37 C - 10 Minuto

 

Km = 0.30 mg/ dl

GRAFICA