informe de laboratorio n°3.docx

MICROBIOLOGÍA I LAB.N°3 “Determinación de la calidad del agua pr !u cntenid "acterial# 1°- DETERMINACION DE LA CALIDAD DEL AGUA POR SU CONTENIDO BACTERIAL. OBJETIVO  Objetivo gee!"#  •

Evaluar la calidad sanitaria de 3 tipos de muestras de agua.

Objetivo e$%e&i'i&o •

 Aprender la correcta correcta manera de obtener muestras muestras de agua.

MARCO TE(RICO La calidad del agua se define como: el conjunto de caracteres físicos químicos y biológicos que deben satisfacerse con el fin de que el agua que se suministra sea segura para el fin destinado (!"#$% &')*. +ara que el agua sea de calidad potable debe de reunir ciertos factores: a) Físicos. Físicos. "olor% olor% sabor% temperatura% conductividad específica% sólidos% p$. b) Químicos. Químicos. Alcalinidad% Alcalinidad% metales% nutrimentos% sulfatos% # (#,ígeno isuelto*% -# (emanda -ioquímica de #,ígeno*. c) Biológicos. El mto mtod do mic microb robioló ológico gico para ara detec tectar tar la prese resen ncia cia de microorga microorganism nismos os coliforme coliformes s en el agua contempla contempla tres fases: fases: +rueba +rueba +resunti +resuntiva% va% +rueba "onfirmativa% +rueba "ompleta. Los par/me par/metro tros s físico físico0qu 0quími ímicos cos dan infor informac mació ión n e,ten e,tensa sa de la natur natural ale1a e1a de las sustancias químicas del agua y sus propiedades físicas% sin aportar información de su influencia en la vida acu/tica2 los mtodos biológicos aportan esta información pero no sealan algo acerca del contaminante o contaminantes responsables. responsables. ENFERMEDAD

AGENTE

 

ORIGEN BACATERIANO Fiebres ti tifoi foideas y paratifoi foideas Disenter#a ba$ilar C&lera Gastroenteritis a% a%(das y di diarreas

Salmonella ty typhi Sa Salmonella ! !aratyp typhi A y B" B" Shi%ella 'ibrio $holerae Es$heri$hia $o $oliCampyloba$ter  )ersiniae ntero$oliti$a Salmonella spShi%ellas"

E# ite!)$ $e &et!" e #o$ *i&!oo!g"i$*o$ %"t+geo$, e $o #o$ /i'e!ete$ ti%o$ /e b"&te!i"$, vi!$, %!oto0oo$  ot!o$ o!g"i$*o$, e t!"$*ite e'e!*e/"/e$.

Ba$terias del %r(po $oliforme

MICROBIOLOGÍA I LAB.N°3 “Determinación de la calidad del agua pr !u cntenid "acterial# "onceptos: •

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Coliformes totales (bacterias del grupo coliforme* : -acilos gram0negativos% aerobios o anaerobios facultativos% no formadores de esporos% o,idase0negativos% capaces de desarrollarse en presencia de sales biliares o agentes pensativos que fermentan la lactosa con producción de /cido% gas y alde4ído a 35%6 7 6%58 " en )909 4oras% e que pueden presentar actividad de la en1ima  ; galactosa. La mayoría de las bacterias del grupo coliforme pertenece a los gneros Esc4eric4ia% "itrobacter% .".* a los efectos de los c/lculos. =e admite% por lo tanto% que en los mtodos de recuento de microorganismos vivos% son inevitables los errores. Especialmente cuando se e,aminan muestras pequeas% es posible cometer  grandes errores.  -A"FEBGA= "#LG>#BCE= 0 Ctodo de los tubos mltiples (HC+ nmero m/s probable*. Este mtodo podr/ utili1arse para cualquier tipo de agua y ser/ el procedimiento oficial obligatorio en casos de litigio. eterminación del nmero de coliformes mediante siembra de distintos volmenes del agua a anali1ar en series de tubos conteniendo medio de cultivo liquido lactosado y resiembra en medios de cultivo selectivos con incubación a temperaturas adecuadas. El procedimiento comprende las pruebas: presuntiva% de confirmación de coliformes totales y de confirmación de coliformes fecales. 0 Ctodo del filtro de membrana (mtodo alternativa*. eterminación del nmero de coliformes mediante filtración de volmenes determinados del agua a anali1ar por filtros de membrana e incubación sobre medios de cultivo a temperaturas adecuadas. El procedimiento comprende las determinaciones de coliformes totales y de coliformes fecales. E=FBE+F#"#"#= >E"ALE= 0 Ctodo de las tubos mltiples (HC+ nmero m/s probable*. Este mtodo podr/ utili1arse para cualquier tipo de agua y ser/ el procedimiento oficial obligatorio en casos de litigio. >undamento. eterminación del nmero de estreptococos mediante siembra de distintos volmenes del agua a anali1ar en series de tubos conteniendo medio de cultivo liquido glucosado con agentes in4ibidores selectivos e incubación a temperatura adecuada. El procedimiento comprende las pruebas: presuntiva y de confirmación de estreptococos fecales. 0 Ctodo del turro de membrana (mtodo alternativo*

MICROBIOLOGÍA I LAB.N°3 “Determinación de la calidad del agua pr !u cntenid "acterial# eterminación del nmero de estreptococos fecales mediante filtración de volmenes determinados del agua a anali1ar por filtros de membrana e incubación sobre medio de cultivo selectivo a temperatura adecuada.

To*" /e *e$t!"$ %"!" "2#i$i$ *i&!obio#+gi&o Las muestras que se tomar/n para el an/lisis deben ser representativas para poder  determinar así su calidad microbiológica. $ay normas para la toma de muestras de aguas segn sus distintas procedencias (grifos% po1os% depósitos% lagos% ríos% manantiales% etc.*. +ara su recogida debe utili1arse frascos estriles y debe recolectarse cantidades comprendidas entre 566 y &666 ml. •

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 Agua de los grifos: =e tiene que dejar correr el agua durante un periodo de & a ) minutos. estape el frasco esterili1ado con los cuidados necesarios a modo de no contaminar el medio y luego cirrelo. =i el agua estuviera clorada (piscinas* el frasco con el que se tomara la muestra de &66 ml deber/ contener 6.& ml de solución de tiosulfato de sodio al 3I para neutrali1ar el cloro residual. +o1os: "uando no 4ay grifos u otro tipo de conducción% amarre una cuerda esterili1ada al frasco de toma de muestras y recolecte la muestra. El frasco debe estar lleno 4asta sus 95 de su volumen.  Agua de superficie: Becolecte la muestra contra la corriente% lo m/s distante de la orilla y siempre bajo la superficie (m/s o menos a 36 cm de profundidad*.

=u an/lisis debe comen1ar antes de que 4ayan transcurrido J 4 desde el momento de la toma de muestras. En circunstancias e,cepcionales% las muestras pueden conservarse a una temperatura de 98" durante un periodo m/,imo de )9 4 antes de su an/lisis.

Le&t!" e ite!%!et"&i+ /e #o$ !e$#t"/o$ Franscurrido el tiempo de incubación pertinente se cuentan todas las colonias crecidas en las placas. =e elige aquella dilución en la que el nmero de colonias por placa se encuentre entre 36 y 366 descartando las otras diluciones para el recuento. =olo se contaran las colonias de aquellas placas que posean menos de 36 en el caso de que sea una muestra sin diluir. El resultado se e,presara en unidades formadoras de colonias (D>"* por ml A la 4ora de obtener este resultado 4ay que tener en cuenta que se 4an sembrado 6.& ml y el factor de dilución.

Keamos un caso pr/ctico: =e 4an contado las tres placas sembradas de la dilución &6 09 y se 4a obtenido un recuento de 93% 95 y 9@ colonias respectivamente en las tres placas. +ara e,presar el resultado del recuento% primeramente se 4ace la media de las tres placas (93959@:3M95* que sería de 95 colonias. +uesto que se 4a sembrado 6.& ml. para saber el nmero de colonias por mililitro ser/ necesario multiplicar por &6% por tanto ser/ 95,&6M9.5N&6) en el mililitro de la dilución &6 0). Así% en la muestra original el nmero de unidades formadoras de colonias por mililitro (D>" ml* ser/ de 9.5,&6) ,&69 es decir% 9.5,&6J D>"ml

PROCEDIMIENTO 

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Becoger en 3 frascos esterili1ados muestras de agua de distintos lugares.



"oger cierto volumen de agua de cada muestra y diluirlo con agua destilada 4asta tener las siguientes concentraciones: & ml2 6%&ml% 6%6&ml



+reparar el agar nutritivo y vertirlo en 3 placas +etri esterili1adas.



Kerter & ml de cada una de las nuevas concentraciones en las placas.



Gncubar las placas con muestra de agua durante 56 4oras variando la temperatura de )) 0 )O" segn sea el lugar del muestreo.



espus de 4aber transcurrido las 9 4oras reali1ar el respectivo conteo de colonias. =i el recuento debe ser postergado temporalmente% guardar las placas a 5 ; &6O" por un período no mayor de )9 4oras% pero evitar que sea sta una pr/ctica de rutina

RESULTADOS  Me$t!"$ /e "g" M(estra

E$t"e /e  A!ite&t!" E$t"e /e %"be##+ &et!"#  G!i'o 3IA

Fe$ha -./01/-2

,ora 3450 pm

Temperat(ra 667C  

-./01/-2

3451 am

667C  

-./01/-3

-6408 pm

667C  

C"!"&te!4$ti&"$ /e #"$ &o#oi"$ M(estra

Dil($i&n

1*L

15-1 *L

15-6  *L

E$t"e /e  A!ite&t!"

669

19

-6

E$t"e /e  %"be##+ &et!"# 

-99

G!i'o B"7o$ V"!oe$ 3IA

-80

U.3.C   :

9

2

  -99 

1.

:

Ob$e!v"&ioe$ Tama;o de la $olonia4-:3 mm Color4 Cremas T"OBS496 horas Tiempo de in$(ba$i&n4 Tama;o de la $olonia46:3 mm Color4 Cremas T"OBS496 horas Tiempo de in$(ba$i&n4 Tama;o de la $olonia4-:3 mm Color4 Cremas T"OBS496 horas Tiempo de in$(ba$i&n4

+ara reali1ar el contaje se escogen las placas que muestren entre 36 y 366 colonias. +ara visuali1ar mejor es conveniente ubicar la placa sobre una caja con tapa de vidrio y lu1. ar el resultado en ufcml (no en bacterias por gramo*:

CONCLUSIONES

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 

Ho se puede determinar las unidades formadoras de colonias (D>"* por  mililitro de muestra% pues los datos obtenidos est/n muy dispersos y si se calcula así los resultados obtenidos no son viables. =e puede precisar que el agua del estanque de arquitectura est/ muc4o m/s contaminada que el agua de la >GA2 pero no se puede precisar qu nivel de contaminación que tiene cada muestra. Los resultados obtenidos no son fiables2 y se debe reali1ar nuevamente el laboratorio. E,iste una inconsistencia entre los datos obtenidos a partir del agua del grifo >GA y los estanques de arquitectura y pabellón central2 ya que este presenta en varias de las muestras valores que no guardan relación con cantidad de colonias en agua potable que por norma de ser 6 D.>.".

RECOMENDACIONES    

=e recomienda 4acer una limpie1a constante del estanque del pabellón central. =e debe reali1ar un monitorio constante del grifo de >GA a fin de eliminar las colonias de bacterias. =e sugiere reali1ar adicional a la prueba reali1ada la prueba de coliformes totales a fin de obtener una base referencial de la calidad bacteriológica. =e recomienda mantenimiento de reservorios de agua de la >GA a fin de evitar  posibles infecciones gastrointestinales2 ya que las muestras presentaron presencia de colonias en registro.

 ANE8OS  1. Límites máximos permisibles de parámetros

microbiológicos.

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BIBLIOGRA39A •

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