Informe de Laboratorio Bioquimica

 

1 Bioquímica: Informe N°1.

Trabajo

Informe de laboratorio

Ensayos para proteínas

Presentado por: Ronald Fabricio Hernández Marroquín 2019182556 Ing. Agroindustrial Jorge Luis Olaya Mora 20172161312 Ing. Electrónica Jesus Alberto Gonzalez 20152143370

Presentado a: Leandro Argote Ibarra

Facultad de Ingeniería, Universidad Surcolombiana Surcolombiana Bioquímica 07/09/2021

 

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Marco teórico Algunos de los modos mas usados para expresar la concentración de las soluciones: Porcentaje masa-masa (

m/m): Se define como la masa de soluto (sustancia que se

disuelve) por cada 100 unidades de masa de la solución:

Porcentaje volumen-volumen (

v/v):  v/v):  Expresa el volumen de soluto por cada cien

unidades de volumen de la disolución. Se suele usar para mezclas líquidas o gaseosas, en las que el volumen es un parámetro importante a tener en cuenta. Es decir, el porcentaje que representa el soluto en el volumen total de la disolución. Suele expresarse simplificadamente como:

Porcentaje en masa-volumen (

m/v):  m/v):  Se pueden usar también las mismas unidades

que para medir la densidad, aunque no conviene combinar ambos conceptos. La densidad de la mezcla es la masa de la disolución dividida por el volumen de ésta, mientras que la concentración en dichas unidades es la masa de soluto dividida por el volumen de la disolución por 100. Se suelen usar gramos por mililitro (g/ml) y a veces se expresa como:

La molaridad (M):  (M):  o concentración molar, es la cantidad de sustancia (n) de soluto por cada litro de disolución:

La molalidad (m):  (m):  es el número de moles de soluto que contiene un kilogramo de disolvente:

La formalidad (F): (F): es el número de peso-fórmula-gramo o Masa Molecular Relativa por litro de disolución:

 

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La normalidad (N): Es el número de equivalentes (eq-g) de soluto (sto) entre el volumen

de la disolución en litros (L): 

Objetivos Generales

 

•

Reconocer los diferentes aminoácidos y proteínas que se encuentran en

el huevo (mas exactamente en la clara ya que no tuvimos el tiempo para experimentar con la yema)

 

•

Analizar las reacciones de la solución de aminoácidos al cambiar los

factores físicos o al interactuar con diferentes sustancias

Objetivos Específicos

  Mediante la practica comprender como funcionan algunas de las respuestas que

•

se dan mediante los reactivos usados en la misma.

  Manipular el ph de las sustancias.

•

  Entender como es la preparación preparación de soluciones. soluciones.

•

 

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Procedimiento

Reacción de ninhidrina 1.  Agregamos las claras en un recipiente

2.  Ajustamos el pH de la clara que se encontraba en (9 básica) para acercarlo a lo más neutral posible ya que eso pedía el ejercicio, se utilizó un buffer y el pH quedo en (6.69) Este procedimiento se realizo aplicando acido clorhídrico en la solución.

 

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3.  Se toman 10 mL de la mezcla de aminoácidos y se agregan en un tubo de ensayo. 4.  Se agregaron 5 gotas de ninhidrina y se revuelve.

5.  Se lleva a hervir por 2 min en baño maría

 

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6.  Analizar Se observo que paso a un color mas blanco, se deduce que es por la cocción de la clara de huevo, pero, al mismo tiempo aparece una coloración morada en el tubo de ensayo

Reacción Xantoproteica 1.  Se toman volúmenes iguales de ácido nítrico (1mL) y solución de aminoácidos (1mL de clara), como es acido lo trabajo el profesor

2.  Se pone la mezcla en un tubo de ensayo y se comienza a observar una coloración amarilla

 

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3.  Después agregamos una solución de hidróxido de sodio, aproximadamente 7 “lentejitas” para alcanzar alcalinidad, la mezcla comienza a tomar un color

naranja, es decir que el ejercicio salió positivo

Reacción de Millon 1.  Tomamos 5ml de solución y 1ml de solución de millón

2.  Después lo dejamos a baño maría por 10 min

 

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3.  Lo dejamos enfriar y le agregamos 5 gotas de nitrito de sodio Según la hipótesis la mezcla se tenia que poner de un color ladrillo, pero fue rechazada, entonces la hipótesis fue nula. Pareciera que la clara de huevo se coció. Prueba del Nitroprusiato

 

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4.  Reacción de Biuret para enlaces Peptídicos: A 2 mL de muestra que ya estamos trabajando con la clara de huevos. agregar 5 gotas de la solución de sulfato de cobre al 10% m/v para esto primero nos

vimos en la tarea de pesarlos con una gramera especializada que se encuentra en el laboratorio.

luego agregamos 2 mL de hidróxido de sodio 10 M; con ayuda de un embudo logramos introducir el hidróxido de sodio en su totalidad y al mezclar vigorosamente logramos observar los siguiente.

 

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Conclusiones Reacción ninhidrina: La ninhidrina es un identificador de sustancias que tengan al menos un grupo amino y uno carboxilo libre y debido a que trabajamos con una solución de aminoácido (Claras de huevo con Ph ajustado) el ajuste de Ph de la mezcla se hizo por que la ninhidrina tiene un rango de operación que está dentro 4  –  8 para manifestar su coloración purpura. La cual se evidencio, aunque mínimo debido a que no mezclo bien la ninhidrina con la solución. Reacción Xantoproteica La solución de aminoácido (Claras de huevo) reacciona con el ácido nítrico al calentarse y se forman nitroderivados un compuesto coloreado amarillo con pH ácido. Esta coloración reconoce la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptófano. Luego se agregó el hidróxido de sodio y se manifestó su alcalinidad en el color que tomo que paso de ser amarillo a ser un naranja. Reacción de Millón Esta parte de la practica nos dio una hipótesis nula ya que no se manifestó como se esperaba la práctica. Tal vez no se la clara se coció, el tiempo fue de más o algún error cometido en el proceso. Reacción de Nitroprusiato: Nitroprusiato: En esta parte de la practica la coloración de la muestra trabajada se torno un poco mas diluida es decir al parecer el nitroprusiato ayudo a que las sustancias trataras mermaran su densidad y de este modo nuestro resultado fue una muestra de una tonalidad más clara. Reacción de Biuret para enlaces Peptídicos: Para finalizar con las practicas ya mencionadas en el laboratorio nos encontramos con esta reacción de biuret que consistía básicamente en la misma base de muestra que las anteriores con el adictivo en esta ocasión que sería el sulfato de cobre al 10%, al realizar la mezcla con el hidróxido de sodio, nos encontramos con el resultado de que el sulfato cambio su tonalidad y se precipito al fondo del recipiente de prueba dándonos un punto de vista muy conceptual de la práctica. Ya que dio un color claro lo que indica un resultado positivo, por que se pudo apreciar que el sulfato cúprico reaccionó con la

 

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proteína presente en la solución de albúmina de huevo, y esta se torna de color azul claro lo que nos indica que la reacción fue positiva.