Informe Aminoacidos Por TLC

Análisis de aminoácidos por TLC Amino acid análisis by TLC Autores: Osorio L.J, Arias T. Corporación tecnológica de Bogotá. Tecnología en regencia de farmacia  Bogotá, Colombia  Fecha 16/03/01! Taria"#$%ctb.ed&.co

RESUMEN

ABSTRACT

Una clase de cromatografía de gran utilidad es en capa capa fina fina y este este sirve sirve para para separa separarr pequeñ pequeñas as

+ne class of c(romatograp(y of utility is in fine

cantid cantidade adess de una mezcl mezclaa por la difere diferenci nciaa de

layer and t(is serves for separate small quantities

solubili solubilidad dad entre dos sistemas sistemas disolvent disolventes. es. El

of a mi$t mi$tur uree for for t(e t(e diff differ eren ence ce of solu solubi bili lity ty

sistema cromatografico tiene dos elementos:

 bet,een t,o solvents solvents systems.

El primero es el soporte es decir el disolvente A.

-ey ords: Amp(oteric species& p/& isoelecetric

El segu segund ndo o es la fase fase móvi móvill en este este caso caso el

 point& linear regression& points buffer. 0(e

disolvente B. Es una tcnica simple primero por 

c(romatograp(y system (ave t,o elements:

el material que se necesita !una placa absorbente

0(e first is t(e support t(is mean solvent A.

de síli sílice ce y una una c"ma c"mara ra croma cromato togr graf afic ica# a# y el

0(e 0(e seco second nd mobi mobile le p(as p(asee is in t(is t(is case case t(e t(e

segund segundo o porqu porquee el proced procedim imien iento to es f"cil f"cil de

solven solventt B. 0(is 0(is is a simple simple tec(niqu tec(niquee for t(e

llevarse a cabo. Esta tcnica utiliza un par"metro

material ,(at ,e need !one absorbent plaque of 

e$pe e$peri rime ment ntal al cono conoci cido do como como %f !fac !facto torr de

sílice and one c(romatograp(ic camera# and for 

retraso#& este relaciona la solubilidad relativa de

t(e t(e easy easy proc proces ess. s. 0(is 0(is tec( tec(ni niqu quee use use one one

un compuesto entre la fase estacionaria y la fase

e$pe e$peri rime ment ntal al para parame mete terr 1no, 1no, as %f !del !delay ay

móvil. 'a nin(idrina es importante porque con

factor#& t(is relates t(e relativity solubility of one

ella la sustancia se revela y se identifica entre la

compou compound nd bet,ee bet,een n statio stationary nary fase fase and movil movil

separación de una mezcla de amino"cidos.

fase. 0(e nin(idrin nin(idrinaa is very important important because because ,it( (er t(e substance is revealed bet,een t(e

)ala )alabr bras as sist istemas emas nin(idrina.

*lav *lave: e:

*rom *romat atog ogra rafí fía& a&

diso isolven lvente tess&

fact facto or

capa capa de

fina fina&&

separation of one amino acid mi$ture&

ret retraso raso&& -ey ords: c(romatograp(y& fine layer& disolvent sistems& delay factor& nin(idrina.

INTRODUCCIÓN

desarrollo de color es indicativo de que no est"

En bioquími bioquímica ca se utiliza utiliza muc(os muc(os mtodos mtodos para

 presente.

separar diversas sustancias& medir peso molculas de los polímeros& polímeros& distingu distinguir ir diferente diferentess aspectos aspectos en la estructura de las sustancias y poder evaluar  la pure pureza za de los los comp compue uest stos os aisl aislad ados os.. Esto Estoss mtodos de cromatografía se basan en el mismo

MATERIALES  M!TODOS 6 6

)laca de silica )lan )lanc( c(aa de cale calent ntam amie ient nto o

6 6

*apilar vas vaso de de pre preci cipi pittado ado 78m 78mll

 procedimiento general: las sustancias de la muestra son disueltas en una fase móvil y luego

Cromatografía en capa fina de aminoácidos

se (ace pasar pasar

por un medio medio estaci estaciona onario rio que que

El mtodo general consiste en colocar 9ml de la

inte intera ract ct2a 2a con con cada cada uno uno de los los comp compue uest stos os

fase móvil !Butanol: "cido "cido actico: agua# en un

individuales y el resultado de esto nos muestra

vaso de precipitado de 788 ml se procede a tapar 

varios grados por la obstaculización del flu3o en

con un vidrio de relo3 y se de3a saturar la c"mara

diferentes medidas. El resultado final es que cada

 por 79 mn.

una de las sustancias (an migrado en diferentes

'uego sobre la placa de silica con un l"piz se

velocidades.

trazó trazó una línea línea de 7 cm desde desde la base y sobre sobre

El tipo de interacción entre la fase estacionaria y

esta esta con un capila capilarr se proced procedió ió a sembra sembrarr las

los compone componente ntess de la muest muestra ra es lo que nos

muest uestra rass de amin amino" o"ci cido doss y m"s la bebi bebida da

ayud ayudaa a dist distin ingu guir ir n tipo de cromatog cromatografía rafía de

comercial.

otro. 4ic(a interacción se basa en uno de los

'a plac placaa de sili silica ca se colo colocó có en un vaso vaso de

sigu siguie ient ntes es

ióni iónico co

 precipitado previamente preparado con la fase

solubilidad& absorción y cribado. Una estrategia

móvil y se esperó que la fase móvil recorriera la

com2n

 placa (asta que esta llegara a 7 cm del límite

en

prin princi cipi pios os::

empacar

inte interc rcam ambi bio o

el

material

de

fase

estacionaria en una columna y luego permitir que

superior de la placa.

la fase móvil fluya a travs de esta& en ocasiones

5e procedió a retirar la placa del vaso y esta se

con ayuda de algo depresión. )or razones obvias&

de3ó de3ó seca secarr por por 9mn 9mn en estu estufa fa para para desp despu uss

estos mtodos se les llaman com2nmente como

colocarle colocarle el agente agente revelador revelador en este este caso fue fue

cromatografía en columna.

nin(idrina al 8& ; lo cual se llevó a estufa de

5e deb debe tene tenerr muy muy en cuen cuenta ta los los mto mtodo doss

calentamiento.

colorimtricos de determinación de amino"cidos& que se basan basan en la reacción reacción específi específica ca de estos con determinados compuestos& dando derivados coloreados. 'a formación de color se toma como resultado  positivo e indica su presencia& mientas que el no

RESULTADOS RESULTADOS"



ANALISIS

DE

Al realizar el ensayo de cromatografia en capa fina fina para para aminoa aminoacid cidos& os& se obtuvo obtuvo el siguie siguiente nte resultado: !