Identificacion de Taninos

 

Informe de Laboratorio N° 3  “

IDENTIFICACIÓN DE TANINOS

”

Acosta María Belén*, Huera Leonela*, León Jenny*, Jara Paola*, Pulgar Daniela*, Solís Eliana* *Estudiantes de la Catedra de Bioquímica del metabolismo, Escuela de Bioquímica y Farmacia Facultad de Ciencias –  Escuela  Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Fecha de realización: 10/01/2020 Fecha de entrega: 17/01/2020

RESUMEN

 

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INTRODUCCIÓN Compuesto fenólico que abunda en muchas  muchas plantas y frutos.  Son hidrosolubles, de sabor áspero y amargo. Su composición química es variable pero poseen una característica común, la de ser astringentes y coagular los  los alcaloides, albúminas y metales pesados.(1)  pesados.(1)   CLASIFICACIÓN:

La fórmula C14H14O11. Hay dos categorías de taninos, clasificados basándose

en su vía de  biosíntesis y sus propiedades químicas: los taninos condensados y los taninos hidrolizables.  

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Los taninos condensados (a veces también llamados proantocianidinas) son polímeros de un flavonoide llamado antocianidina. Los taninos hidrolizables son ppolímeros olímeros heterogéneos heter ogéneos formados por  ácidos fenólicos,  fenólicos,  en  particular   ácido ácido gálico, gálico, y  y azúcares simples. (9) (9)  

Los taninos se encuentran en gran cantidad de árboles, de árboles,   siendo las agallas de roble de roble y la corteza de zumaque las mejores materias para su obtención. Para la extracción de los taninos se utiliza una mezcla de agua de  agua y alcohol,  alcohol,   o simplemente agua; posteriormente se decanta y evapora a baja temperatura para obtener el producto final.  CARACTERÍSTICAS:

Son polvos amorfos de color amarillento, aspecto grasiento, poco denso, solubles en agua y alcohol, e insolubles en éter, benceno y cloroformo; cuando se calientan a 210º C. se descomponen  produciendo dióxido de carbono y pirogalol. Los taninos son fáciles de identificar por la l a ssensación ensación de aspereza (10) (10)   En medicina se prescriben por su acción astringente, hemostática, antiséptica y tonificante. En medicina La propiedad ya comentada de coagular las albúminas de las mucosas y de los tejidos, crean una capa seca, aislante y protectora que reduce la irritación y el dolor sobre la piel. (10)  USOS:

Los taninos también son útiles como contraveneno en caso de intoxicación por alcaloides vegetales.  No es aconsejable acons ejable consumir pplantas lantas con contenido de en determinadas vitaminas taninos durante un periodo prolongado prolon gado de tiempo, ya que inhiben la absorción poralto el organismo determinadas  vitaminas y minerales, tales como el calcio el calcio y el el hierro.  hierro.  (9) (9)   El objetivo general de la práctica fue identificar cualitativamente la presencia de taninos en muestras vegetales de té. Los objetivos específicos fueron: a) Extraer taninos de la droga pulverizada de té mediante la utilización de un refrigerante para obtener nuestra infusión de trabajo , b) Realizar reacciones de coloración de cloruro férrico y precipitación con gelatina salada, quinina y acetato de zinc amoniacal para identificar la presencia de taninos en nuestra infusión , c) Efectuar reacciones de coloración con FeCl3 y precipitación con el reactivo de Stansy para diferenciar entre taninos hidrolizables y condensados , d) Ejecutar la reacción de oxidación y formación de fiobágenos, también la investigación de catequinas libres para caracterizar las mismas en la infusión.  

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METODOLOGIA Para la práctica correspondiente a la identificación de taninos se procedió a tomar 2 g de la droga  pulverizada, en este caso del té, se añade 50 ml de agua con la ayuda de un refrigerante y la muestra se calienta durante 10 minutos con la ayuda de un reverbero, enfriamos y filtramos, el extracto caliente se filtró y con el mismo se realizaron los diversos tipos de pruebas correspondientes para taninos en tubos de ensayo. El primer ensayo se basó en tomar una alícuota de 5 ml de la muestra filtrada añadiendo unas gotas de solución acuosa de FeCl3 al 2 %. Para el segundo ensayo, de la misma forma, una alícuota de 5 ml se trató con solución de gelatina al 1 % en NaCl al 10 % formando un precipitado floculoso, se prosiguió a filtrar por papel y conservamos el filtrado  para investigar posteriormente po steriormente las catequinas libres. El tercer ensayo consistió en tomar una alícuota de 1 ml añadiendo unas gotas de sulfato de quinina que sea ácida. Con respecto al cuarto ensayo la alícuota de 1 ml se añade gotas de acetato de zinc amoniacal. Procediendo a la Diferenciación entre Taninos hidrolizables y condensados, añadimos 1.5 ml de infusión infusión en un tubo de ensayo  preparado anteriormente sobre 5ml de reactivo de Stiansy, tapamos el tubo con algodón y lo  ponemos a ebullición por treinta minutos. Filtramos y con otro tubo de ensayo saturamos el filtrado con acetato sódico en polvo, se añade unas gotas de solución acuosa de FeCl3. Por último último  para la caracterización de catequinas en una alícuota de 2 ml se añade gotas de HCl concentrado llevando a ebullición; en el filtrado del ensayo de taninos con gelatina salada añadir 10 ml de reactivo de Stiansy y proceder a observar si se forma precipitado.

RESULTADOS

Tabla 1. Identificación cualitativa de taninos REACCIÓN

RESULTADO

COLORACIÓN

Con cloruro férrico

 

Al adicionar unas gotas de solución acuosa de FeCl3 al 2 % se produjo un cambio de coloración en nuestro extracto; debido a que “cuando los taninos se mezclan con sales de hierro se  produce una coloración azulverdosa, misma que es la base  para la producción producción de tintas.” (1)

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PRECIPTACION Con gelatina

Los taninos de té verde son determinados por la diferencia del contenido total de fenoles luego del secuestro por gelatina que precipita(2) precipita(2)   La quinina o chinchona, es un alcaloide C H  N O   natural, blanco y cristalino, que  precipita los taninos de té verde en solución acuosa (2). (2).   ₂₀

Con quinina

₂₄

₂

El acetato de cinc es el compuesto químico con fórmula Zn(O CCH ) , precipita los taninos de té verde con una ₂

Con acetato de zinc amoniacal CARACTERIZACIÓN DE CATEQUINAS

₂

₃ ₂

coloración marrón (3). (3).   Se observó coloración que qu e indica  presencia de taninos catéquicos que se oxidan y condensan para dar formación al flobáfeno. (6)

Reacción de oxidación y formación de fiobáfenos

Investigación de catequinas libres

 

Se observó una reacción positiva ustificada por precipitación de color blanquecina indicativo de que hay presencia de catequinas libres en la muestra. (6)

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DIFERENCIACIÓN ENTRE TANINOS HIDROLIZABLES Y CONDENSADOS

Con FeCl3

Se evidencia la presencia de taninos condensados al visualizar la aparición de una tonalidad azul una formación de precipitado al realizarse la reacción con FeCl3 y el reactivo de Stiansy (4). (4).   Al realizar la técnica operativa con el reactivo de stiansy, observamos que se forma al  ponerlo a ebullición luego de colocar el reactivo, la formación de un precipitado floculoso. Existen taninos condensados (4). (4).  

Con reactivode Stansy

Como podemos observar después la tonalidad al colocar FeCl3 no  produce reacción sobre el filtrado, no contiene taninos hidrolizables (4).   (4). La cantidad de poliflavonoides o taninos condensados que reaccionan con formaldehído en medio ácido y, por definición, “los poliflavonoides o taninos

condensados

son

polímeros

multihidroxilados, basados en unidades flavonoides de 15 carbonos” (5). (5).  

 

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CONCLUSIONES   Se concluyó concluyó con la pre presencia sencia general de tan taninos inos en en nue nuestra stra muestra muestra de de té que

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se obtuvo obtuvo dé dé la droga pulverizada, dicha mue muestra stra nos nos sirvió para la caracterización caracterizac ión cualitativa de nuestro metabolito secun secundario dario de interés.   Se identificó la ausencia o presencia de taninos en la infusión de trabajo de

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donde se tomó una alícuota la cual al adicionar unas gotas gotas de Fecl3 al 2 %  produjo un cambio de color a azul verdosa, otras tres alícuotas del extracto se sometieron a reacciones de precipitación con; ge gelatina latina salada salada donde donde los taninos taninos son determinados por la diferencia del contenido total de fenoles luego del secuestro por gelatina que precipita, quinina precipitó los taninos en la solución acuosa y aceta acetato to de zinc amoniacal precipito taninos en una coloración marrón.   Se diferenció diferenció entre tan taninos inos hidrolizab hidrolizables les y condensad condensados; os; al colocar colocar FeCl3 no  produce reacción sobre el filtrado esto quiere decir que no contenía taninos hidrolizables, en cambio con el reactivo de Stansy observamos la formación de un precipitado precipitado floculoso al ponerlo en ebullición concluyendo concluyendo que existen existen taninos condensad condensados. os. oxidación y formación de fiobágeno fiobágenoss se observó una reacción reacción   En la reacción de oxidación  positiva justificada por precipitación de color blanquecina indicativo de la  presencia de catequinas libres eenn la muestra.

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RECOMENDACIONES   Realizar de manera adecuada la extracción de taninos mediante la droga

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 pulverizada, asegurándonos asegurándonos de obtener el eextracto xtracto puro.   Añadir la cantidad correcta de reactivos a los diferentes ensayos para que no altere los resultados y así poder poder identificar la presencia o ause ausencia ncia de taninos.   Conocer los resultados e investigar con ayuda de bibliografía si estos

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corresponden al grupo amplio de taninos. corresponden BIBLIOGRAFÍA 1.  AGUIRRE M. Aislamiento e identificación de los principios activos antiinflamatorios y antioxidantes de las hojas de Ugni molinae Turcz (murtilla) myrtaceae. Obtención de un extracto estandarizado. Tesis para optar al grado de doctor en ciencias farmacéuticas. Santiago, Chile. Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas, 2007. 26-27 pp. 2.  DOLL U., Rodríguez I., Soto C., Razmilic I. Propagación de estacas y concentración de taninos y flavonoides en hojas de dos procedencias de Ugni molinae de la región del Maule (Chile). BOSQUE, 33(2): 203-209, 2012. 3.  Pizzy, A. y K.L. Mittal. 1994. Handbook of adhesive technology. Marcel Dekker Inc. Nueva York, Basel, Hong Kong. 680 p. 4.  Yazaki, Y.; R. Gu; Y. Lin; W. Chen y K. Nguyen N. 1993. Analysis of black wattle (Acacia mearnsii) tanninsRelationships among the hidepowder, the Stiasny and the ultra violet (UV) methods. Holzforschung 47(1):57-61.

 

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5.  Muñoz O, Montes M, Wilkomirsky T. Plantas Medicinales de Uso en Chile. Química y Farmacología. Chile. Editorial Universal. 2001. p.15 –16. 6.  Alfaro W, Choque D, Paredes M, Uzategui M. Identificación de taninos. Programa profesional: Farmacia y Bioquímica, Arequipa-Perú; 2017. 7.  Avello C. Determinación del contenido de taninos. Universidad de Chile. SOFARCHI. 2016. 4-87. 8.  Fernández K. Caracterización de taninos. Universidad de Concepción. Octubre 2007. Recuperado de:  de: http://www.politecnica.pucrs.br/laboratorios/taninos/caracterizaciontaninos.pdf  

9.  Pérez J. Porto, Merino M. Definición.de. “TANINO” [Internet]. 2016. [Citado 2020 Enero 13]. Disponible en:  en: https://definicion.de/tanino/  10. Ecured. Natureduca. “Taninos” [Internet].2018. [Citado 2020 Enero 13].Disponible en:  en: https://www.ecured.cu/Tanino 

 

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3.Reacciones de  precipitación 4.  Diferenciación entre Taninos Hidrolizables y

ada

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

Condensados.

de 5. Caracterización de cloruro Catequinas. 

LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA

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TEMA DE LA PRACT   IDENTIFICACION DE TA   LAMINA ESCALA