Gino Genesis

GINOGENESIS

LAPORAN PRAKTIKUM GENETIKA PERIKANAN

Disusun Oleh: Perikanan A Kelompok 5 Susilawati

230110150011

Rina Lestari

230110150026

Annisa Heydi Oktaviani

230110150046

Fhaisal D.Jihad

230110150049

Wahyu Agus

230110150073

Shanty A.Hilman

230110150108

UNIVERSITAS PADJADJARAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN PROGRAM STUDI PERIKANAN JATINANGOR

2016

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur kita panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan laporan praktikum genetika perikanan dengan judul “Genogenesis”. Laporan praktikum yang telah terselesaikan ini merupakan salah satu syarat untuk memenuhi tugas mata kuliah Genetika Perikanan. Proses penyelesaian laporan ini tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih sebanyak-banyaknya kepada pihak yang telah terlibat dalam penyusunan makalah kali ini. Semoga bantuan, kebaikan dan dukungan yang telah diberikan kepada penulis selama penyelesaian laporan ini mendapat balasan yang tiada terkira dari Tuhan Yang Maha Esa. Penulis menyadari bahwa laporan ini masih banyak kekurangan dan sangat jauh dari kata sempurna. Akhir kata, kami penulis berharap semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.

Jatinangor, November 2016

Penulis

i

DAFTAR ISI

BAB

Halaman KATA PENGANTAR ...................................................................................................... i DAFTAR GAMBAR ...................................................................................................... iv DAFTAR TABEL ........................................................................................................... v DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................................. vi I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ...................................................................................................................... 1 1.3 Identifikasi Masalah ............................................................................................................. 2 1.4 Tujuan Praktikum ................................................................................................................. 2 1.5 Manfaat .................................................................................................................................. 2 II KAJIAN PUSTAKA 2.1 Biologi Ikan Mas.......................................................................................................... 3 2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas ............................................................................................ 3 2.1.2 Reproduksi Ikan Mas ........................................................................................... 4 2.2 Biologi Ikan Koi .......................................................................................................... 5 2.2.1 Kualitas Air Ikan Koi ........................................................................................... 6 2.2.2 Kelangsungan Hidup ............................................................................................ 6 2.2.3 Pertumbuhan ........................................................................................................ 7 2.3 Ginogenesis .................................................................................................................. 7 2.2.1 Perlakuan Ginogenesis ......................................................................................... 8

III BAHAN DAN METODE 3.1 Waktu dan Tempat.................................................................................................... 11 3.2 Alat dan Bahan Praktikum ........................................................................................ 11 3.2.1 Alat Praktikum ................................................................................................... 11 3.2.2 Bahan Praktikum ................................................................................................ 12 3.3 Tahapan Praktikum .................................................................................................... 12 3.3.1 Persiapan Praktikum .......................................................................................... 12 3.3.2 Pelaksanaan Praktikum ...................................................................................... 12 3.3.3 Ginogenesis ........................................................................................................ 13 3.4 Metode Praktikum ..................................................................................................... 13 3.5 Parameter Percobaan ................................................................................................. 13 3.5.1 FR .................................................................................................................... 13 3.5.2 HR .................................................................................................................... 14 3.5.3 SR .................................................................................................................... 14 3.6 Analisis Data .............................................................................................................. 15 IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Pengamatan Kelas ........................................................................................... 16 4.2 Hasil Pengamatan Kelompok ................................................................................... 16 4.2.1 FR .................................................................................................................... 17 4.2.2 Embriogenesis .................................................................................................... 18 4.2.3 HR .................................................................................................................... 22 4.2.4 4.3

SR .................................................................................................................... 22 Pembahasan Kelas ..................................................................................................... 22 ii

4.3.1 4.3.2 4.3.3 4.4 4.4.1 4.4.2 4.4.3

FR .................................................................................................................... 23 HR .................................................................................................................... 23 SR .................................................................................................................... 23 Pembahasan Kelompok ............................................................................................. 23 FR .................................................................................................................... 23 HR .................................................................................................................... 24 SR .................................................................................................................... 24

V PENUTUP 5.1 Kesimpulan ................................................................................................................. 25 5.2 Saran ............................................................................................................................ 25 DAFTAR PUSTAKA .................................................................................................... 26 LAMPIRAN................................................................................................................. 267

iii

DAFTAR GAMBAR

Nomor

Judul

Halaman

1

Ikan Mas………………………………………………………….

3

2

Ikan Koi…………………………………………………………..

5

iv

DAFTAR TABEL

Nomor

Judul

Halaman

1

Hasil Pengamatan Genogenesis Perikanan A…………………….

16

2

Hasil Pengamatan Kelompok 5…………………………………..

16

3

Hasil Proses Pengamatan Embrio………………………………..

18

v

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor

Judul

Halaman

1

Prosedur Kegiatan………………………………………………..

28

2

Kegiatan Pengamatan Telur Ikan………………………………...

29

3

Alat yang digunakan…………………………………………......

30

4

Bahan yang digunakan…………………………………………...

32

vi

BAB I PENDAHULUAN

1.1

Latar Belakang Budidaya adalah suatu metode yang dikembangkan untuk melestarikan dan

mempertahankan jumlah populasi mahluk hidup agar tidak hanya melakukan penangkapan ikan saja tetapi tahu bagaimana cara mengembang biakkannya. Dewasa ini rekayasa dalam bidang genetika semakin sering dilakukan untuk meperbanyak produksi. Hal ini terjadi karena permintaan akan ikan yang semakin tinggi dan untuk memperbaiki kualitas ikan agar didapatkan individu yang unggul dari biasanya yang berguna dalam proses budidaya. Rekayasa genetik yang umum dilakukan ada dua yaitu Ginogenesis. Ginogenesis adalah proses pemurnian dengan mengambil genetik murni yang berasal dari induk betina dengan cara merangsang terjadinya proses pembuahan tanpa adanya sumbangan bahan genetik jantan (sperma yang telah di non-aktifkan dan digunakan untuk memacu terjadinya perkembangan sel telur menjadi larva). Proses ginogenesis dapat dilakukan dengan dua cara yaitu proses mitosis dan miosis. Poliploidisasi adalah usaha, proses atau kejadian yang menyebabkan individu berkromosom lebih dari satu set. Poliploidisasi merupakan salah satu metode manipulasi kromosom untuk perbaikan dan peningkatan kualitas genetik ikan guna menghasilkan benihbenih ikan yang mempunyai keunggulan, antara lain pertumbuhan cepat, toleransi terhadap lingkungan dan resisten terhadap penyakit. Ginogenesis adalah proses terbentuknya zigot dari gamet betina tanpa kontribusi dari gamet jantan. Dalam ginogenesis gamet jantan hanya berfungsi untuk merangsang perkembangan telur dan sifat-sifat genetisnya tidak diturunkan. Jadi, gamet jantan hanya berfungsi secara fisik saja, sehingga prosesnya hanya merupakan perkembangan pathenogenetis betina (telur). Untuk itu sperma diradiasi. Radiasi pada ginogenesis bertujuan untuk merusak kromososm spermatozoa, supaya pada saat pembuahan tidak berfungsi secara genetik. Mengingat pentingnya mengetahui metode manipulasi kromosom dalam pemuliaan ikan, maka praktikum triploidisasi dan ginogenesis ini dilakukan. Dengan demikian diharapkan metode tersebut dapat diaplikasikan dalam budidaya perikanan.

1

2

1.2

Identifikasi Masalah Semakin berjalannya waktu, semakin banyak teknologi yang muncul dalam bidang

perikanan ini termasuk dalam bidang budidaya dan pada kesempatan kali ini kita akan melakukan suatu pengamatan dan perlakuan terhadap ginogenesis. 1.3

Identifikasi Masalah Dalam melakukan rekayasa genetika banyak juga faktor-faktor yang akan

mempengaruhi dari perkembangan ikan tersebut. Teknik rekayasa genetika yang umum dilakukan adalah hibridisasi,seleksi, inbreeding dan lain-lain. Dalam praktikum kali ini akan mempelajari tentang teknik rekayasa genetika menggunakan ginogenesis. 1.4

Tujuan Praktikum Tujuan dari dari praktikum kali ini adalah, : 1. Mahasiswa memahami teknik rekayasa genetik yaitu ginogenesis. 2. Mahasiswa melakukan teknik rekayasa genetik yaitu ginogenesis dengan benar dan sesuai prosedur

1.5

Manfaat Manfaat dari praktikum kali ini adalah : 1. Mahasiswa mampu memahami teknik triploidisasi dan ginogenesis. 2. Mahasiswa mampu melakukan teknik rekayasa genetik dengan baik dan sesusai prosedur.

BAB II KAJIAN PUSTAKA

2.1

Biologi Ikan Mas

2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas Ikan mas ini memiliki bentuk tubuh yang panjang dan pipih atau biasa di sebut dengan sebutan comprossed. Belahan mulut nya terdapat pada bagian depan kepalanya atau lebih tepatnya berada pada bagian ujung hidungnya. Gigi kerongkongannya terdapat pada ujung mulut bagian dalamnya. Kingdom Filum Kelas Ordo Famili Genus Spesies

: Animalia : Chordata : Osteichtyes : Cypriniformei : Cyprinidae : Cyprinus : Cyprinus carpio

Gambar 1. Ikan Mas (Sumber : http://www.pojokshare.com/2015/12/umpan-ikan-mas) Adanya dua pasang sungut pada wilayah anteriornya. Pada seluruh bagian tubuhnya di selimuti oleh sisik. Sisik ikan mas ini memiliki ukuran yang besar, jika di bandingkan dengan sisikikan yang lain akan sangat terlihat perbedaan nya. Bentuk ekor ikan mas ini memiliki bentuk yang berlekuk tunggal. Memiliki sirip punggung yang memanjang, Letak sirip punggungnya berseberangan dengan letak sirip perutnya. Letak sirip perutnya sangat dekat dengan sirip dadanya, Terdapat operculum dan properkulum pada sirip dada nya, Untuk menampung makanan, ikan mas menggunakan lambung palsu nya, Insang ikan mas terdiri dari beberapa bagian seperti tulang lengkung insang, tapis insang, dan lembaran daun insang. 3

4

2.1.2 Reproduksi Ikan Mas Ikan Mas merupakan kelompok hewan teleostei, ikan betina dan ikan jantan tidak memiliki alat kelamin luar. Ikan betina tidak mengeluarkan telur yang bercangkang, namun mengeluarkan ovum yang tidak akan berkembang lebih lanjut apabila tidak dibuahi oleh sperma. Ovum tersebut dikeluarkan dari ovarium melalui oviduk dan dikeluarkan melalui kloaka. Saat akan bertelur, ikan betina mencari tempat yang rimbun oleh tumbuhan air atau diantara bebatuan di dalam air. Bersamaan dengan itu, ikan jantan juga mengeluarkan sperma dar testis yang disalurkan melalui saluran urogenital (saluran kemih sekaligus saluran sperma) dan keluar melalui kloaka, sehingga terjadifertilisasi di dalam air (fertilisasi eksternal). Peristiwa ini terus berlangsung sampai ratusan ovum yang dibuahi melekat pada tumbuhan air atau pada celah-celah batu. Telur-telur yang telah dibuahi tampak seperti bulatan-bulatan kecil berwarna putih. Telur-telur ini akan menetas dalam waktu 24 –40 jam. Anak ikan yang baru menetas akan mendapat makanan pertamanya dari sisa kuning telurnya, yang tampak seperti gumpalan di dalam perutnya yang masih jernih. Dari sedemikian banyaknya anak ikan, hanya beberapa saja yang dapat bertahan hidup. I.

Sistem Genitalia Jantan:



Testis berjumlah sepasang, digantungkan pada dinding tengah rongga abdomen oleh mesorsium. Bentuknya oval dengan permukaan yang kasar. Kebanyakan testisnya panjang dan seringkali berlobus.



Saluran reproduksi, pada Elasmoranchi beberapa tubulus mesonefrus bagian anterior akan menjadi duktus aferen dan menghubungkan testis dengan mesonefrus, yang disebut dutus deferen. Baian posterior duktus aferen berdilatasi membentuk vesikula seminalis, lalu dari sini akan terbentuk kantung sperma. Dutus deferen akan bermuara di kloaka. Pada Teleostei saluran dari 9mbryo ekskresi dan 9mbryo reproduksi menuju kloaka secara terpisah.

II.

Sistem Genitalia Betina:



Ovarium pada Elasmoranchi padat, tapi kurang kompak, terletak pada anterior rongga abdomen. Pada saat dewasa yang berkembang hanya ovarium kanan. Pada Teleostei tipe ovariumnya sirkular dan berjumlah sepasang.



Saluran reproduksi Elasmoranchi berjumlah sepasang, bagian anteriornya berfusi yang memiliki satu ostium yang dikelilingi oleh fimbre-fimbre. Oviduk sempit pada bagian anterior dan posteriornya. Pelebaran selanjutnya pada uterus yang bermuara di kloaka. Pada Teleostei punya oviduk pendek dan berhubungan langsung dengan ovarium. Pada

5

bagian posterior bersatu dan bermuara pada satu lubang. Teleostei tidak memiliki kloaka. 2.2

Biologi Ikan Koi Ikan koi termasuk ke dalam golongan ikan carp (karper). Harga koi sangat ditentukan

berdasarkan bentuk badan dan kualitas tampilan warna. Ikan koi pertama kali dikenal pada dinasti Chin tahun 265 dan 361 Masehi. Koi dengan keindahan warna dan tingkah laku seperti yang kita ketahui saat ini, mulai dikembangkan di Jepang 200 tahun yang lalu di pegunungan Niigata oleh petani Yamakoshi (Twigg, 2008). Menurut Susanto (2000), tubuh ikan koi berbentuk seperti torpedo dengan alat gerak berupa sirip. Sirip-sirip yang melengkapi bentuk morfologi ikan koi adalah sirip punggung, sepasang sirip dada, sepasang sirip perut, sirip anus, dan sirip ekor. Menurut Effendi (1993) Ikan koi berasal dari keturunan ikan karper hitam dan menghasilkan keturunan yang berwarna-warni. Ikan koi memiliki klasifikasi yang sama dengan ikan mas sebagai berikut : Kingdom Filum Kelas Ordo Famili Genus Spesies

: Animalia : Chordata : Osteichtyes : Cypriniformei : Cyprinidae : Cyprinus : Cyprinus carpio

Gambar 2. Ikan Koi (Sumber: nextdaykoi.com) Ikan koi termasuk ke dalam golongan ikan carp (karper). Harga koi sangat ditentukan berdasarkan bentuk badan dan kualitas tampilan warna. Ikan koi pertama kali dikenal pada dinasti Chin tahun 265 dan 361 Masehi. Koi dengan keindahan warna dan tingkah laku seperti yang kita ketahui saat ini, mulai dikembangkan di Jepang 200 tahun yang lalu di pegunungan Niigata oleh petani Yamakoshi (Twigg, 2008). Menurut Susanto (2000), tubuh ikan koi berbentuk seperti torpedo dengan alat gerak berupa sirip. Sirip-sirip yang melengkapi bentuk

6

morfologi ikan koi adalah sirip punggung, sepasang sirip dada, sepasang sirip perut, sirip anus, dan sirip ekor. 2.2.1 Kualitas Air Ikan Koi Kualitas Air Untuk Ikan Koi Kualitas air merupakan salah satu faktor penting dalam pertumbuhan ikan koi. Meskipun ikan koi dapat hidup dan berkembang pada air yang berkualitas buruk tetapi akan rentan terhadap serangan penyakit dan warna akan menjadi 11 pudar dan tidak indah lagi. Untuk menjaga kualitas koi yang tinggi dan sehat faktor pertama yang harus diperhatikan adalah kualitas air (Lesmana 2001). Kualitas air merupakan hal penting yang diperhatikan dalam budidaya ikan. Air yang kurang baik akan menyebabkan ikan koi mudah terserang penyakit. Kualitas air memberikan pengaruh yang cukup besar terhadap kelulusan hidup dan pertumbuhan ikan. Rendahnya kualitas sifat fisik dan kimia air yang digunakan pada tempat–tempat pembenihan akan berkaitan dengan rendahnya produksi benih ikan. Sifat–sifat fisik dan kimia air tersebut antara lain kecerahan, oksigen terlarut, pH, CO2, suhu, kekeruhan, warna (Khairuman dan Sudenda 2002). Kualitas lingkungan perairan adalah suatu kelayakan lingkungan perairan untuk kisaran tertentu. Sementara itu, perairan ideal adalah perairan yang dapat mendukung kehidupan organisme dalam menyelesaikan daur hidupnya (Boyd 1982). Kualitas air adalah suatu keadaan dan sifat-sifat fisik, kimia dan biologi suatu perairan yang dibandingkan dengan persyaratan untuk keperluan tertentu, seperti kualitas air untuk air minum, pertanian dan perikanan, rumah sakit, industri dan lain sebagainya. Sehingga menjadikan persyaratan kualitas air berbeda-beda sesuai dengan peruntukannya (Ismoyo 1994). 2.2.2 Kelangsungan Hidup Kelangsungan Hidup Kelangsungan hidup adalah perbandingan jumlah ikan yang hidup pada akhir suatu periode dengan jumlah ikan yang hidup pada awal periode (Effendi 1979). Kelangsungan hidup dipengaruhi oleh dua faktor yaitu dari dalam ikan itu sendiri dan faktor dari lingkungan luar. Faktor dari dalam diantaranya umur ikan, ukuran, dan kemampuan ikan beradaptasi dengan lingkungan. Sedangkan faktor dari luar meliputi kondisi fisik-kimia dan media biologi, ketersedian makanan, kompetisi antar ikan dalam mendapatkan makanan apabila jumlah makanan dalam media pemeliharaan kurang mencukupi, serta proses penanganan ikan yang kurang baik (Royce 1972). Kualitas air berupa parameter fisik dan kimia yang tidak stabil akan mempengaruhi kelangsungan hidup organisme akuatik dalam melakukan aktivitas (Zonneveld et al. 1991). Kelangsungan hidup ikan koi sangat bergantung pada kondisi perairan tempat hidupnya. Mengingat besarnya potensi pencemaran perairan akibat racun yang

7

ditimbulkan dari sisa pakan dan kotoran sisa metabolisme yang mengendap di dasar perairan (Alex 2011). 2.2.3 Pertumbuhan Pertumbuhan adalah pertambahan ukuran panjang atau bobot tubuh dalam waktu tertentu. Pertumbuhan dalam suatu individu disebabkan oleh pertambahan jaringan akibat pembelahan sel secara mitosis. Hal ini terjadi apabila ada kelebihan input energi dan asam amino (protein) yang berasal dari makanan. Makanan tersebut akan digunakan oleh tubuh untuk metabolisme dasar, 16 pergerakan, produksi organ seksual dan perawatan bagian tubuh atau mengganti sel-sel yang rusak (Effendie 1997). Terdapat dua macam pertumbuhan yaitu petumbuhan mutlak dan pertumbuhan relatif. Pertumbuhan mutlak adalah pertambahan bobot atau panjang ikan pada saat umur tertentu, sedangkan pertumbuhan relatif adalah perbedaan antara ukuran pada akhir interval dengan ukuran pada awal interval dibagi dengan ukuran pada awal interval. Pertumbuhan merupakan proses biologis yang komplek dimana banyak faktor yang mempengaruhinya. Pertumbuhan dalam individu adalah pertambahan jaringan akibat dari pembelahan sel secara mitosis. Hal ini terjadi apabila ada kelebihan input energy dan asam amino (protein) berasal dari makanan (Effendie 1997). 2.3

Ginogenesis Ginogenesis adalah proses terbentuknya zigot dari gamet betina tanpa kontribusi dari

gamet jantan. Dalam ginogenesis gamet jantan hanya berfungsi untuk merangsang perkembangan telur dan sifat-sifat genetisnya tidak diturunkan. Ginogenesis dapat terjadi secara alami dan buatan (Nagy et al,. 1978), menyebutkan ginogenesis adalah terbentuknya zigot 2n (diploid) tanpa peranan genetik gamet jantan. Jadi gamet jantan hanya berfungsi secara fisik saja, sehingga prosesnya hanya merupakan perkembangan pathenogenetis betina (telur). Untuk itu sperma diradiasi. Radiasi pada ginogenesis bertujuan untuk merusak kromososm spermatozoa, supaya pada saat pembuahan tidak akan berfungsi secara genetik (Sumantadinata, 1981). Ginogenesis secara alami jarang terjadi pada pembuahan, karena nukleus sperma yang masuk ke dalam telur yang dalam keadaan tidak aktif jarang didapatkan, pada beberapa populasi ikan karper krusia (Carrasius auratus gibelio) dan beberapa spesies dari family Poecilidae di Meksiko terjadi ginogenesis secara alami. Ginogenesis buatan dilakukan melalui beberapa perlakuan pada tahapan pembuahan dan awal perkembangan embrio. Perlakuan ini bertujuan untuk membuat supaya bahan genetik jantan menjadi tidak aktif dan mengupayakan terjadinya diploisasi agar telur dapat menjadi

8

zigot. Bahan genetik dalam spermatozoa dibuat tidak aktif dengan radiasi sinar gama, sinar X dan sinar ultraviolet (Purdom, 1993). 2.2.1 Perlakuan Ginogenesis Untuk mendapatkan benih ikan yang monosex secara ginogenesis ada beberapa perlakuan yang dapat dilakukan yakni antara lain: 1. Penyinaran sperma dengan sinar ultraviolet Sebelum sperma dicampur dengan sel telur (pemijahan buatan) sperma tersebut diberi perlakuan penyinaran dengan sinar UV. Hal ini dilakukan untuk merusak bahan genetik sperma. Komposisi kimiawi sperma pada plasma inti (nukleoplasma) diantaranya adalah DNA, Protamine, Non Basik Protein. Sedangkan seminal plasma mengandung protein, potassium, sodium, calsium, magnesium, posfat, klarida. Sedangkan komposisi kimia ekor sperma adalah protein, lecithin dan cholesterol (Gusrina, 2008). Sinar ultraviolet dengan panjang gelombang di bawah 300 nm dapat diserap secara kuat oleh bahan biologi tertentu, terutama asam nukleat, protein, dan koenzim. Tetapi sinar ini tidak sampai mengionisasi atom-atom dan molekulnya disamping itu kemampuan sinar ultraviolet untuk menembus bahan sangat terbatas. Walaupun sinar ultraviolet yang dapat masuk ke bahan biologi tersebut sedikit, tetapi hampir semua diserap. Hal ini berarti efisiensi penyerapan sinar ultraviolet olleh bahan-bahan biologi sangat tinggi. Pada panjang gelombang hingga 260 nm sinar UV dapat merusak fungsi pirimidin AND yang merupakan bahan genetic sperma. Walapun sperma diradiasi namun tidak sampai merusak kemampuannya untuk bergerak dan membuahi telur. Dengan demikian sperma ini masih mampu untuk memicu untuk terjadinya pembuahan dan perkembangan telur. 2. Perlakuan kejut suhu Setelah sperma diberi perlakuan penyinaran kemudian dicampur dengan sel telur dan dilepaskan dalam air agar terjadi pembuahan. Setelah pembuahan terjadi kemudian telur yangterbuahi tersebut diberi kejutan lingkungan. Hal ini dapat berupa kejut suhu atau dengan tekanan hidrostatis. Perlakuan dengan tekanan hidrostatis memerlukan peralatan yang rumit, mahal sehingga suli untuk diterapkan telur dalam jumlah banyak namun metode ini efektif untuk memproduksi tingkat heterozigositas nol persen. Kejut suhu lebih praktis dalam penggunaannya sehingga bisa diterapkan pada jumlah yang banyak. Kejut suhu dimaksudkan untuk pencegahan keluarnya polar body II telur pada saat terjadi pembelahan miosis kedua atau pencegahan pembelahan sel setelah duplikasi kromosom pada saat terjadi pembelahan mitosis pertama sehingga jumlah kromosom telur mengganda lagi pada awal perkembangan

9

zigot (Nagy et al:, 1978). Kejut suhu disini berupa kejutan panas dan kejutan dingin. Pemberian kejutan panas lebih singkat periodenya dibandingkan dengan kejut dingin. Pada saat oogenesis (proses pembentukan sel telur hingga siap untuk ovulasi), sel telur belumlah dalam keadaan 2N melainkan 4N. Saat pembelahan sel miosis I terjadi,saat itu dikatakan sel telur telah matang. Saat itulah ada "loncatan" polar body I (2N), sehingga sel telur yang awalnya 4N menjadi 2N. Pembelahan sel secara miosis, ada pengurangan set kromosom menjadi setengah dari semula. Perbedaannya dengan pembelahan sel mitosis (pembelahan yang ditandai dengan penggandaan atau perbanyakan jumlah sel). Satu buah sel telur yang memiliki dua set kromosom (2N) dan satu buah sel sperma memiliki satu set kromosom (1N). Jika keduanya kita pasangkan, maka terjadilah pembuahan. Setelah sel telur dibuahi oleh sperma, maka satu set kromosom sperma memasangkan diri terhadap satu set kromosom pada sel telur. Dan sebagai akibatnya, ada satu set kromosom sel telur yang tidak mendapatkan pasangan. Itulah yang kemudian dipahami oleh beberapa peneliti, bahwa polar body II yang berisi satu set kromosom (1N) akan "ke luar" dari sistem. Satu set yang tidak memiliki pasangan kromosom itu akan ter denaturasi. Dengan terjadinya, maka sel telur yang sudah dibuahi tersebut, kembali pada kondisi normal (2N) dan menyiapkan diri untuk melakukan proses berikutnya; yakni pembelahan sel mitosis. Jika proses keluarnya polar body II kita ganggu dengan kejut suhu di atas hingga mengalami kegagalan, maka tentu saja sel telur yang sudah dibuahi itu akan tetap memiliki tiga set kromosom; dua set dari sel telur dan satu set dari sel sperma. Inilah yang kemudian kita kenal sebagai triploid atau individu yang memiliki tiga set kromosom (3N). Karena materi genetic sperma telah rusak maka yang akan berkembang dan mengalami pembelahan hanya pada set kromosom telur dari induk betina. Oleh karena itu ginogenesis hanya akan menghasilkan anakan yang sama dengan sifat induknya jika metode ini berhasil. Ginogenesis dapat digunakan untuk pemurnian ikan menggantikan teknik perkawinan sekerabat. Menurut Rohadi, D. S, (1996) dengan ginogenesis buatan dapat menghasilkan ikan bergalur murni dengan sifat homozigositas. Hasil pemurnian ikan dengan metode ginogenesis selama satu generasi sama dengan hasil tujuh sampai delapan generasi perkawinan sekerabat sedangkan homozogositassatu generasi ikan ginogenesis sama dengan homozigositas tiga generasi ikan hasil perkawinan sekerabat. Keberhasilan dari metode ini ditentukan oleh umur zigot, lama waktu kejutan dan suhu kejutan panas yang digunakan. Lamanya kejutan suhu, pemilihan waktu yang tepat serta suhu perlakuan yang tepat adalah spesifik atau khas untuk masing-masing jenis ikan.

10

Gambar 2. Skema prosedur ginogenesis (Sumber: Purdom 1993) Keberhasilan teknik ginogenesis tergantung pada rata-rata atau sumber spermatozoa yang dilemahkan secara genetik, ketepatan perlakuan kejutan suhu setelah fertilisasi, saat awal pemberian perlakuan kejutan suhu dan lamanya pemberian perlakuan tersebur serta pemilihan spesies yang respon terhadap perlakuan ginogenesis.

BAB III BAHAN DAN METODE

3.1

Waktu dan Tempat Praktikum genetika perikanan ini mengenai ginogenesis yang dilaksanakan pada hari

Kamis, Jum’at, dan Minggu 13 dan 15 November 2015. Praktikum ini dilakukan di Laboratorium Fisiologi Hewan Air Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran. 3.2

Alat dan Bahan Praktikum

3.2.1 Alat Praktikum Adapun alat yang digunakan untuk memenuhi kegiatan saat melakukan praktikum ginogenesis dalam proses pengerjaannya. Berikut adalah alat serta penjelasan fungsinya: 1. Alat suntik berfungsi untuk menyuntikkan hormon ovaprim ke dalam bagian tubuh ikan yang akan di uji. 2. Ember berfungsi sebagai tempat untuk menyimpan ikan. 3. Bak fiber berfungsi sebagai tempat menyimpan induk 4. Lap berfungsi untuk menutup kepala ikan saat akan disuntik agar ikan tidak mengalami stress. 5. Instalasi aerasi (blower, batu aerasi, dan selang) berfungsi sebagai penyedia oksigen bagi ikan di dalam akuarium. 6. Water bath berfungsi sebagai tempat untuk melakukan heat shock terhadap telur. 7. Kotak UV berfungsi sebagai tempat untuk melakukan radiasi terhadap telur. 8. Termometer berfungsi untuk mengatur suhu pada saat melakukan heat shock di dalam water bath. 9. Cawan petri berfungsi sebagai tempat menyimpan sel telur. 10. Akuarium berfungsi sebagai tempat untuk menyimpan telur yang sudah dibuahi dan tempat telur menetas. 11. Mikroskop berfungsi untuk melihat dan mengamati perkembangan sel telur . 12. Heater untuk menstabilkan suhu air saat peroses kejutan suhu. 13. Kotak styrofom dan saringan perendaman telur sebagai wadah penetasan telur. 14. Lampu Neon Germiada UV 15 Watt sumber radiasi.

11

12

3.2.2 Bahan Praktikum Untuk melakukan proses saat sedang memulai praktikum agar dapat berjalan dengan baik dibutuhkan bahan-bahannya. Berikut bahan yang akan digunakan yaitu: 1. Ikan yang telah matang gonad berfungsi sebagai sampel ikan yang akan diuji 2. Air panas untuk kejut suhu. 3. Air tawar bersih sebagai media untuk pertumbuhan telur. 4. NaCl fisiologis berfungsi sebagai cairan untuk mengencerkan sperma. 5. Hormon ovaprim berfungsi untuk merangsang terjadinya ovulasi telur oleh indukan yang dipijahkan dan untuk indukan jantan berfungsi untuk meningkatkan produksi sperma yang akan dikeluarkan. 3.3

Tahapan Praktikum

3.3.1 Persiapan Praktikum Proses melakukan tahap praktikum harus dilakukan beberapa persiapan untuk mempermudah proses kegiatan berlangsung. Berikut persiapan yang harus dilakukan yaitu( Lampiran 1) : 1. Dicuci aquarium hingga bersih. 2. Dipasangkan instalasi aerasi agar berfungsi dengan baik. 3.3.2 Pelaksanaan Praktikum Perlakuan dalam proses pemijahan buatan dibutuhkan dengan tahapan yang tepat agar menghindari faktor kegagalan dalam melakukannya. Adapun cara yang harus dilakukan yaitu: 1. Diseleksi indukan yang akan digunakan dalam praktikum. 2. Dipisahkan indukan jantan dan indukan betina. 3. Disuntikan ovaprim pada indukan betina. 4. Dilakukan stripping sperma pada indukan jantan. 5. Dilakukan stripping sel telur pada indukan betina.

13

3.3.3 Ginogenesis Teknik untuk melakukan rekayasa genetik salah satunya dengan cara ginogenesis, maka diperlukan persiapan dan berbagai tahapan untuk melakukannya dan menjauhi dari faktor-faktor yang mungkin akan mempengaruhi proses rekayasa genetik. Adapun tahapan untuk melakukannya yaitu: 1. Diencerkan sperma yang telah dihasilkan oleh indukan jantan menggunakan larutan NaCl 2. Diletakkan sperma di cawan petri 3. Sperma yang telah diencerkan diradiasi selama 1.5 menit 4. Dilakukan fertilisasi sel telur dan sperma ikan mas 5. Hasil fertilisasi didiamkan selama 2 menit 6. Sel telur dan sperma yang telah difertilisasi kemudian di heat shock pada syrofoam berisi air yang suhunya 40oC selama 2 menit 7. Ditebarkan sel telur di aquarium yang telah disediakan 8. Dilakukan pengamatan 3.4

Metode Praktikum Metode yang digunakan dalam praktikum ini berupa eksperimental dengan

menggunakan beberapa perlakuan. Perlakuan yang diberikan diantaranya adalah striping, pengenceran, radiasi dan kejut suhu (heat shock). 3.5

Parameter Percobaan

3.5.1 FR FR atau fertilization rate adalah derajat pembuahan telur. Pengamatan derajat pembuahan telur (FR) yang dilakukan setelah pembuahan telur pada proses ginogenesis selesai dilakukan.

14

Effendie (1979) menyebutkan bahwa untuk mengetahui derajat fertilisasi telur ikan dapat menggunakan rumus sebagai berikut : FR (%) =

x 100 %

Keterangan : FR

: Derajat fertilisasi telur (%)

P

: Jumlah telur sampel

Po : jumlah telur yang dibuahi 3.5.2 HR HR atau hatching rate adalah derajat penetasan telur. Pengamatan derajat penetasan telur dilakukan ketika embrio berumur 17-20 jam dari proses pembuahan telur. HR (%) =

x 100 %

Effendie (1979) menyebutkan bahwa untuk mengetahui derajat penetasan telur ikan dapat menggunakan rumus sebagai berikut : Keterangan : HR

: Derajat penetasan telur

Pt

: Jumlah telur yang menetas

Po

: Jumlah telur yang dibuahi

3.5.3 SR SR atau survival rate adalah derajat kelangsungan hidup ikan. Pengamatan derjat kelangsungan hidup ikan dilakukan hanya untuk proses ginogenesis setelah larva ikan berumur tujuh hari. Effendie (1979) menyebutkan bahwa untuk mengetahui derajat kelangsungan hidup ikan dapat menggunakan rumus sebagai berikut : SR (%) =

x 100 %

Keterangan : SR

: Kelangsungan hidup ikan selama praktikum

15

3.6

Nt

: Jumlah ikan pada akhir praktikum

No

: Jumlah ikan pada awal praktikum

Analisis Data Data yang diperoleh disajikan dalam bentuk perhitungan serta dianalisi secara

deskriptif, yaitu dengan membandingkan hasil percobaan dengan literature yang berkaitan dengan ginogenesis.

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1

Hasil Pengamatan Kelas Tabel hasil pengamatan ginogenesis pada ikan mas kelas Perikanan A, seperti pada

tabel 1 yang ada di bawah ini : Tabel 1. Hasil Pengamatan Genogenesis Perikanan A Kelompok 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 4.2

Perlakuan UV Heatsock 1 menit 2 menit 1,5 menit 2 menit 2 menit 2 menit 1 Menit 2 Menit 1.5 Menit 2 menit 2 menit 2 menit 1 menit 2 menit 1,5 Menit 2 Menit 2 Menit 2 Menit

FR

HR

SR

99,08% 55.9% 99,1 % 0,58 % 84,8 % 78,29% 97% 45,94% 56,66 % 89,62 % 76,1% 48,94%

5,74% 53.6% 6,25 % 0,89% 49,7 % 24,39% 51% 23,53% 65,46 % 52,27% 29,% 53,68%

57% 0.015% 35,71 % 0% 60 % 25% 0% 66,6 % 43.1% 0% 0% 0%

Hasil Pengamatan Kelompok Tabel hasil pengamatan ginogenesis pada ikan mas kelompok 5, seperti pada tabel 2

yang ada di bawah ini : Tabel 2. Hasil Pengamatan Kelompok 5 Kelompok 5

Perlakuan UV Heatsock -

16

FR

HR

SR

84,8 %

49,7 %

60 %

17

4.2.1 FR FR atau fertilization rate adalah derajat pembuahan telur. Pengamatan derajat pembuahan telur (FR) yang dilakukan setelah pembuahan telur pada proses ginogenesis selesai dilakukan. Berikut hasil FR dari kelompok 5 : FR (%) =

FR =

Jumlah telur yang dibuahi Jumlah telur yang ada

x 100 %

x 100% =

503 593

x 100% = 84.8 %

18

4.2.2 Embriogenesis Tabel hasil pengamatan pertumbuhan ikan ketika proses ginogenesis pada ikan mas kelompok 5 kelas Perikanan A, seperti pada tabel 3 yang ada di bawah ini : No

1

2

3

Tabel 3. Hasil Proses Pengamatan Embrio Waktu Fase Gambar Pengamatan

07.47

08.18

08.25

Pembelahan

Keterangan Fase ini merupakan tahapan awal proses pembelahan sel

Sel

Pembelahan Sel

Pembelahan 2 Sel

Pada ujung kutub terjadi pembelahan yang menonjol dan bertahap pada proses pembelahan 2 sel.

Pada ujung kutub terjadi pembelahan 2 sel yang menonjol dan akan bertahap ke proses pembelahan 4 sel.

19

4

5

6

7

08.35

09.35

10.32

11.27

Pembelahan 4

Terjadi pembelahan 4 sel pada bagian ujung kutubnya.

Sel

Pembelahan 4 Sel

Pembelahan 8 Sel

Fase Morula

Terjadi pembelahan 4 sel yang menandakan tahapan selanjutnya pada pembelahan 8 sel. Terjadi proses pembelahan 8 sel dibagian ujung sehingga memperoleh cukup singkat waktunya dalam proses sebelumnya. Terjadi ditandai dengan adanya sel yang terdapat dibagian tengahnya . Fase ini mengalami kelipatan sel lainnya sampai 64 sel.

20

8

9

14.33

17.58

Fase Blastula

Fase Gastrula

10

19.32

Fase Neurula

11

00.35

Embrio

Pada tahapan ini diperkirakan akan mencapai 128 sel bahkan lebih. Pada tahap ini terbentuk rongga yang disebut blastocoels. Proses pembelahan organ yang sudah terbentuk saat blastulasi. Bagian – bagian yang terbentuk akan menjadi suatu organ. Dalam proses sebelumnya sampai diproses neurula ini akan mengalami proses system saraf yang akan berkembang nantinya. Pada fase ini sudah terlihat bentuk dan organ pada embrio seperti mata. Didalam sel telur larva sudah menunjukkan pergerakannya.

21

12

08.35

Larva

Pada fase ini semua organ sudah terlihat jelas seperti bintik mata,kepala,sal uran respirasi, dan calon sirip serta yolk sebagai cadangan makanan

22

4.2.3 HR HR atau hatching rate adalah derajat penetasan telur. Pengamatan derajat penetasan telur dilakukan ketika embrio berumur 17-20 jam dari proses pembuahan telur. Dari pengamatan ini dilakukan selama 3 hari atau 36 jam. Berikut HR yang didapat kelompok 5: HR (%) =

Telur yang menetas

HR =

x 100% =

Telur yang dibuahi

x 100 %

250

x 100% = 49.7 %

503

4.2.4 SR SR atau survival rate adalah derajat kelangsungan hidup ikan. Pengamatan derjat kelangsungan hidup ikan dilakukan hanya untuk proses ginogenesis setelah larva ikan berumur tujuh hari. Setelah tujuh hari atau pun lebih didapat SR dari kelompok 5: SR (%) =

SR

=

Larva yang hidup Telur yang menetas

4.3

x 100% =

x 100 %

150

x 100% = 60%

250

Pembahasan Kelas Hasil dari Tabel 1 terlihat bahwa lama penyinaran dan lama kejutan suhu berbeda-beda

dan setelah pembuahan 2 menit memiliki pengaruh terhadap keberhasilan ginogenesis, hal ini terlihat dari perkembangan telur, kelangsungan hidup embrio, derajat penetasan telur dan keberhasilan hidup larvanya. Menurut Bidwel (1985) menyatakan bahwa keberhasilan ginogenesis dipengaruhi oleh waktu awal kejutan, tinggi rendahnya suhu dan lama kejutan yang diberikan. Perlakuan ginogenesis sperma yang disinari menggunakan sinar UV mampu membuahi telur hingga berkembang menjadi embrio. Hal tersebut dikarenakan badan kutub II yang akan lepas pada saat pembelahan sel (meiosis II) ditahan oleh kejutan suhu dingin 5°C sehingga individu menjadi diploid ginogenetik dan mampu berkembang menjadi embrio. Menurut Musa (1988) tingginya jumlah embrio diploid ginogenetik diduga karena di dalam telur tersebut telah tercapai kondisi yang peka, pelepasan badan kutub II dapat dicegah dan menghasilkan embrio

23

diploid (diploid ginogenetik). Menurut Risnawati (1995) keberhasilan suatu pembuahan tergantung pada kemampuan sperma melewati mikrofil telur. 4.3.1 FR FR atau fertilization rate pada kelas A berbeda pada tiap kelompok lainnya. Seperti yang terlihat di Tabel 1 bahwa persentase tertinggi terdapat pada kelompok 3 yaitu 99,1%. Hal ini menunjukkan bahwa telur ikan yang digunakan berkualitas baik, sehingga terjadi pembuahan. Menurut Mashithoh dan Alamsyah dalam Mukti et al., (2009) menyatakan bahwa daya fertilisasi sangat ditentukan oleh kualitas telur, sperma, media dan penanganan manusia. 4.3.2 HR HR atau hatching rate dari seluruh kelompok kelas A yaitu kelompok 9 dengan metode kontroling sehingga memperoleh data 65,46 %. Hal ini mungkin disebabkan karena perlakuan yang dilakukannya saat proses dimulainya pengamatan awal terjadi dengan penanganan yang baik sehingga berbanding lurus dengan derajat penetasan telur ikan tersebut. 4.3.3 SR SR atau survival rate pada kelas A yang tertinggi diperoleh pada kelompok 8 dengan persentase yaitu 66,6 %. Hal yang dapat menyebabkan proses terjadi yang sedemikian tingkat kelangsungan hidup yang tinggi karena disebabkan larva yang diperoleh pada perlakuan ini diploid (2N kromsom) sehingga banyak larva normal dan berhasill hidup. 4.4

Pembahasan Kelompok Perlakuan kontrol pada kelompok 5 diperoleh derajat pembuahan 84,8% , derajat

penetasan 49,7% dan kelangsungan hidupnya 60%. Hal ini menandakan bahwa lebar kepala sperma mas sesuai dengan ukuran diameter telur dan panjang ekor sperma mas lebih panjang dibandingkan dengan sperma ikan mas yang keduanya menentukan keaktifan sperma sehingga terjadi perkembangan telur (Bidwel 1985). 4.4.1 FR FR atau fertilization rate yang didapatkan yaitu 84,8% dengan jumlah telur yang terbuahi 503. Dari persentase ini dapat dilihat bahwa pada telur ikan saat akan terbuahi dipengaruhi oleh perlakuan saat sperma dan telur dicampurkan harus diperlakukan dengan ketepatan yang baik serta dipengaruhi oleh perlakuan sinar ultra violet, jika menggunakan proses ini kemungkinan besar akan mempengaruhi dari persentase telur yang terbuahi, telur yang akan menetas dan kelangsungan hidup larva tersebut. Pada telur larva untuk ikan perkawinan antara ikan mas jantan dengan ikan koi betina untuk yang terbuahi telur dengan

24

warna putih terang ditandai bahwa telur sudah terbuahi sementara warna putih sedikit kuning ditandainya dengan larva tidak mengalami pembuahan. Sementara pada kelompok ini diperlakukan pengamatan kontroling dan sangat mempengaruhi dari segi telur yang terbuahi sampai kelangsungan hidup pada larva. Menurut Mashithoh dan Alamsyah dalam Mukti et al., (2009) menyatakan bahwa daya fertilisasi sangat ditentukan oleh kualitas telur, sperma, media dan penanganan manusia. 4.4.2 HR HR atau hatching rate pada kelompok 5 didapatkan persenntase 49,7%. Hal ini dapat dilihat oleh perlakuan yang dilakukan sesudah pencampuran sperma dengan telur harus diperlakukan dengan penanganan yang baik, karena tingkat sensitifitas pada telur sangat tinggi dengan lingkungannya. Proses pengamatan ini dilakukan selama 36 jam, karena embrio dapat dilihat antara 18-20 jam. Dari kejadian ini dapat diketahui perbedaan telur yang akan menetas atau tidak menetas dilihat dari warna telur ikannya. 4.4.3 SR SR atau survival rate yang diperoleh yaitu 60% kelangsungan hidupnya. Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi keberlangsunga hidup pada telur seperti suhu, kualitas air, sperma, kualitas telur dan penanganan manusia. Hal ini dikarenakan berhubungan dengan proses perlakuan saat pengerjaan yang berlangsung sehingga terjadi beberapa kemungkinan akan terjadi faktor kegagalan serta pada kualitas telur sangat besar mempengaruhi faktor kegagalan karena jika telur terkena air maka lubang mikrofil akan menutup sehingga tidak terjadi proses penetasan bahkan kehidupan pada telur tersebut. Menurut Risnawati (1995) keberhasilan suatu pembuahan tergantung pada kemampuan sperma melewati mikrofil telur. Pada perlakuan kelompok ini dilakukan dengan proses kontroling dan tidak melakukan tahapan ultra violet dengan head shock. Proses dari hasil telur ini menghasilkan sekitar 150 larva yang berlangsung hidup selama 36 jam pengamatan. Larva ini setelah lebih dari 7 hari diberikan perlakuan pakan yaitu dengan kuning telur dikarenakan cadangan makanan yang terdapat pada tubuhnya sudah habis. Kemudian dalam beberapa hari berikutnya banyak larva yang mati. Hal ini disebabkan dari pemberian pakan yang terlalu banyak dan kurangnya perawatan untuk kualitas air.

BAB V PENUTUP

5.1

Kesimpulan Praktikum mengenai ginogenesis ini dapat disimpulkan bawa proses rekayasa genetika

memiliki fungsi untuk menghasilkan rekayasa tergantung sumber spermatozoa yang dilemahkan secara genetic atau ketepatan saat perlakuan fertilisasi dan pemberian perlakuan pemilihan spesies yang merespon terhadap perlakuan ginogenesis Ginogenesis ini dapat dipahami jika suatu perlakuan terhadap populasi ikan dilakukan dengan tingkat ketelitian yang baik, sehingga ikan yang berkelamin betina memperolah telur yang banyak dari derajat pembuahan, penetasan serta kelangsungan hidupnya akan normal. Teknik yang baik pada ginonesis yaitu dengan pengamatan kontroling sehingga tidak mempengaruhi keberlangsungan hidup larva dan sebaliknya jika menggunakan penyinaran sinar ultra violet dapat mengakibatkan telur menjadi rusak dan sulit masa pertumbuhannya karena radiasi penyinaran merusak fungsi pirimidin. 5.2

Saran Pada praktikum ini mungkin sebaiknya dapat dilakukan dengan tingkat ketelitian yang

tinggi untuk meminimalisir faktor kesalahan yang dapat terjadi sehingga akan menjadi memperkcil faktor kemungkinan terjadinya kegagalan.

25

DAFTAR PUSTAKA

Bidwell, C.A., C.L. Chrisman and K.S.Libey. 1985. Polyploidi induced by heat shock in channel catfish. Aquacultur, 51 : 25 – 32. Cherfas, N.B. 1981. Gynogenesis in Fishes. Dalam : Kirpichnikov (Ed.). Genetics Bases of Fish Selection. Springer-Verlag. Berlin. Hlm, 225-273. Cherfas, N.B., G. H.Utala and O. Kozinsky. 1993. Induced diploid gynogenesis and polyploidy in ornamental (koi) carp, Cyprinus carpio L.2. tumung of heat shock during the fist cleavage. Aquaculture, 33 : 281 – 290. Ginzburg, S.A. 1972. Fertilization in Fishes and The Problem of Polyspermy. Wienwr Bindery. Jerusale. Musa, A. 1988. Pengaruh waktu awal kejutan panas terhadap keberhasilan ginogenesis Meiotik ikan mas (Cyprinus carpio L) Karya ilmiah, Fakultas Perikanan, IPB, Bogor. Nagy, A., K. Rajki. L. Horvart dan V. Csanyi. 1978. Investigation on carp (Cyprinus carpio L) ginogenesis. Jour. Fish. Biol. 13 : 215 – 224. Purdom. E.C. 1993. Genetics and Fish Breeding. Chapman and Hall. Fish and Fisheries Series. 277p. Rohadi, D.S, 1996. Pengaruh Berbagai Waktu Awal Kejutan Panas Terhadap Persentase Larva Diploid Mitoandrogenetik Ikan Mas (Cyprinus carpio). Universitas Padjadjaran, Fakultas Perikanan, Jurusan Perikanan, Jatinangor, Bandung. Tomy. 2011. Proses Ginogenesis. http://tomyperikanan.wordpress.com/2011/06/28/prosesginogenesis/. (Diakses, 3 november 2016 pukul 15.52) Sumantadinata, K., 1981. Pengembangbiakan Ikan-Ikan Peliharaan di Indonesia. Sastra Hudaya, Jakarta. 105 hal.

26

LAMPIRAN

28

Lampiran 1. Prosedur Kegiatan a. Persiapan Alat Dicuci aquarium hingga bersih Dipasangkan instalasi aerasi agar berfungsi dengan baik b. Pemijahan Buatan

Diseleksi indukan yang akan digunakan dalam praktikum Dipisahkan indukan jantan dan indukan betina

Disuntikan ovaprim pada indukan betina Dilakukan stripping sperma pada indukan jantan Dilakukan stripping sel telur pada indukan betina c. Prosedur Proses Ginogenesis Diencerkan sperma yang telah dihasilkan oleh indukan jantan menggunakan larutan NaCl Diletakkan sperma di cawan petri

Sperma yang telah diencerkan diradiasi selama 1.5 menit

Dilakukan fertilisasi sel telur dan sperma ikan mas

Hasil fertilisasi didiamkan selama 2 menit Sel telur dan sperma yang telah difertilisasi kemudian di heat shock pada syrofoam berisi air yang suhunya 40oC selama 2 menit Ditebarkan sel telur di aquarium yang telah disediakan

Dilakukan pengamatan

29

Lampiran 2. Kegiatan Pengamatan Telur Ikan

Sperma jantan dengan NaCl

Telur ikan koi

Pembelahan sel (menit ke-20)

Pembelahan 2 sel (menit ke-50)

Pembelahan 2 sel (menit ke-55)

Pembelahan 4 sel (menit ke-65)

Pembelahan 8 sel (menit ke-180)

Pembelahan 8 sel (menit ke-210)

30

Fase morula (menit ke-240)

Fase Blastula (menit ke-420)

Fase gastrula (menit ke-660)

Fase neurula (menit ke-780)

Embrio (menit ke-1260)

Larva (menit ke-3180)

Lampiran 3. Alat yang digunakan

Suntikan

Wadah ikan

31

Cawa petri

Aquarium

Bak fiber

Hand counter

Mikroskop

Termometer

Lemari UV

Kotak tyrofoam

32

Timbangan

Beaker glass

Lampiran 4. Bahan yang digunakan

Induk Ikan Mas Jantan

Induk Ikan Koi Betina

NaCl Fisiologis

Hormon Ovaprim

Aquades

Air bersih